Криоконсервирование единичных сперматозоидов человека в составе альгинатных микросфер
Saved in:
| Published in: | Проблемы криобиологии |
|---|---|
| Date: | 2012 |
| Main Authors: | , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2012
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68644 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Криоконсервирование единичных сперматозоидов человека в составе альгинатных микросфер / А.И. Правдюк, Н.Г. Грищенко, Ю.А. Петренко, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 354. — рос., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1860227831561191424 |
|---|---|
| author | Правдюк, А.И. Грищенко, Н.Г. Петренко, Ю.А. Петренко, А.Ю. |
| author_facet | Правдюк, А.И. Грищенко, Н.Г. Петренко, Ю.А. Петренко, А.Ю. |
| citation_txt | Криоконсервирование единичных сперматозоидов человека в составе альгинатных микросфер / А.И. Правдюк, Н.Г. Грищенко, Ю.А. Петренко, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 354. — рос., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии |
| first_indexed | 2025-12-07T18:20:44Z |
| format | Article |
| fulltext |
Криоконсервирование единичных сперматозоидов
человека в составе альгинатных микросфер
А.И. ПРАВДЮК1,2, Н.Г. ГРИЩЕНКО2, Ю.А. ПЕТРЕНКО1, А.Ю. ПЕТРЕНКО1
1Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
2Клиника репродуктивной медицины им. академика В.И. Грищенко
Cryopreservation of Single Human Spermatozoa Within Alginate Microbeads
A.I. PRAVDYUK1,2, N.G. GRISHCHENKO2, YU.A. PETRENKO1, A.YU.PETRENKO1
1Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
2Academician V.I.Grischenko Clinic for Reproductive Medicine, Kharkov, Ukraine
На данный момент разработаны эффективные техно-
логии криоконсервирования сперматозоидов человека,
позволяющие сохранять их жизнеспособность и функ-
циональную активность в течение длительного времени.
Традиционные подходы ориентированы на криокон-
сервирование суспензий с относительно большим содер-
жанием сперматозоидов (103–108), при этом умеренные
потери клеток допустимы. Вместе с тем существует необ-
ходимость криоконсервировать единичные спермато-
зоиды, отобранные в ходе морфологической селекции
сперматозоидов, сохранения спермиев, полученных при
тестикулярной биопсии, тяжелых формах олигоспермии
и др. В таких случаях потери сперматозоидов в процессе
криоконсервирования крайне нежелательны, поскольку
могут отрицательно влиять на результаты циклов ВРТ.
Поэтому для криоконсервирования единичных сперма-
тозоидов целесообразно использовать специальные мик-
роносители. Это облегчает обнаружение единичных
сперматозоидов после отогрева и практически исклю-
чает их количественные потери. Одним из перспективных
контейнеров для сперматозоидов являются альгинатные
микросферы, которые активно применяются в биотехно-
логии и тканевой инженерии. Клетки в альгинатных мик-
росферах могут быть криоконсервированы под защитой
проникающих криопротекторов. Кроме того, спермато-
зоиды могут быть легко извлечены из альгинатных
микросфер путем их деполимеризации в присутствии
хелатирующих агентов, что является преимуществом
данного типа носителей и упрощает проведение проце-
дуры ICSI (интрацитоплазматическая инъекция сперма-
тозоида). В данной работе изучалась возможность крио-
консервирования сперматозоидов человека в составе
альгинатных микросфер путем замораживания в парах
азота.
Подвижные сперматозоиды от 5 доноров помещали
с помощью микроманипулятора в альгинатные микро-
сферы, которые криоконсервировали под защитой гли-
церола в парах азота. Для высвобождения сперматозои-
дов альгинатные микросферы подвергали деполимери-
зации. Жизнеспособность сперматозоидов после замо-
раживания в составе альгинатных микросфер оценивали
с помощью комбинированного флуоресцентного окра-
шивания и гипоосмотического теста.
Показано, что после отогрева альгинатные микро-
сферы сохраняли структурную целостность, а инкапсу-
лированные в них сперматозоиды были жизнеспо-
собными. Таким образом, криоконсервирование еди-
ничных сперматозоидов в альгинатных микросферах
является перспективным методом ВРТ, требующим
дальнейшей разработки и оптимизации.
354
For today there have been developed effective cryopre-
servation technologies for human spermatozoa allowing the
preservation of their viability and functional activity for a
long time. Traditional approaches are focused to cryopre-
servation of suspensions with relatively high content of
sperm cells (103–108), when moderate losses in cell amount
are admissible. However, there is a need in cryopreserving
single morphologically selected spermatozoa, preservation
of sperm obtained by testicular biopsy, severe oligospermia,
etc. In such cases, the loss of sperm cells during cryopre-
servation is not admissible and can dramatically affect the
outcome of ART cycles. Therefore, for single spermatozoa
cryopreservation a special microcarriers should be used.
This facilitates the detection of single spermatozoa after
thawing and virtually eliminates their quantitative losses.
One of the promising containers for spermatozoa are alginate
microbeads. Alginate microbeads are widely used in bio-
technology and tissue engineering. The cells in alginate
microbeads could be cryopreserved under the protection
of penetrating cryoprotectants. In addition, the spermatozoa
can be easily derived from alginate microspheres by depoly-
merization in the presence of chelating agents, that is an
advantage comparing to others carriers, this would simplify
the ICSI (intracyto-plasmic sperm injection) performance.
We studied the possibility of cryopreservation of human
spermatozoa in the alginate microbeads by freezing in liquid
nitrogen vapors.
Motile spermatozoa from 5 donors were placed into algi-
nate microbeads using a micromanipulator. Microbeads with
spermatozoa were cryopreserved under glycerol protection
in liquid nitrogen vapors. To release spermatozoa the algi-
nate microbeads were subjected to depolymerization. Viabi-
lity of spermatozoa after freezing in alginate microbeads
and thawing was evaluated using a combination of fluo-
rescent staining and hypoosmotic test.
It has been shown that after thawing the alginate micro-
beads kept structural integrity, and encapsulated sperma-
tozoa were viable. Thus, the cryopreservation of single sper-
matozoa in alginate microbeads is a promising tool for ART,
demanding further development and optimization.
problems
of cryobiology
Vol. 22, 2012, №3
проблемы
криобиологии
Т. 22, 2012, №3
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-68644 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T18:20:44Z |
| publishDate | 2012 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Правдюк, А.И. Грищенко, Н.Г. Петренко, Ю.А. Петренко, А.Ю. 2014-09-26T18:28:40Z 2014-09-26T18:28:40Z 2012 Криоконсервирование единичных сперматозоидов человека в составе альгинатных микросфер / А.И. Правдюк, Н.Г. Грищенко, Ю.А. Петренко, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии. — 2012. — Т. 22, № 3. — С. 354. — рос., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68644 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии Стендовые доклады Криоконсервирование единичных сперматозоидов человека в составе альгинатных микросфер Cryopreservation of Single Human Spermatozoa Within Alginate Microbeads Article published earlier |
| spellingShingle | Криоконсервирование единичных сперматозоидов человека в составе альгинатных микросфер Правдюк, А.И. Грищенко, Н.Г. Петренко, Ю.А. Петренко, А.Ю. Стендовые доклады |
| title | Криоконсервирование единичных сперматозоидов человека в составе альгинатных микросфер |
| title_alt | Cryopreservation of Single Human Spermatozoa Within Alginate Microbeads |
| title_full | Криоконсервирование единичных сперматозоидов человека в составе альгинатных микросфер |
| title_fullStr | Криоконсервирование единичных сперматозоидов человека в составе альгинатных микросфер |
| title_full_unstemmed | Криоконсервирование единичных сперматозоидов человека в составе альгинатных микросфер |
| title_short | Криоконсервирование единичных сперматозоидов человека в составе альгинатных микросфер |
| title_sort | криоконсервирование единичных сперматозоидов человека в составе альгинатных микросфер |
| topic | Стендовые доклады |
| topic_facet | Стендовые доклады |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68644 |
| work_keys_str_mv | AT pravdûkai kriokonservirovanieediničnyhspermatozoidovčelovekavsostavealʹginatnyhmikrosfer AT griŝenkong kriokonservirovanieediničnyhspermatozoidovčelovekavsostavealʹginatnyhmikrosfer AT petrenkoûa kriokonservirovanieediničnyhspermatozoidovčelovekavsostavealʹginatnyhmikrosfer AT petrenkoaû kriokonservirovanieediničnyhspermatozoidovčelovekavsostavealʹginatnyhmikrosfer AT pravdûkai cryopreservationofsinglehumanspermatozoawithinalginatemicrobeads AT griŝenkong cryopreservationofsinglehumanspermatozoawithinalginatemicrobeads AT petrenkoûa cryopreservationofsinglehumanspermatozoawithinalginatemicrobeads AT petrenkoaû cryopreservationofsinglehumanspermatozoawithinalginatemicrobeads |