Криоконсервирование и трансплантация овариальной ткани как метод восстановления эндокринной и репродуктивной функций
В обзоре представлен анализ современной литературы существующих методов криоконсервирования и трансплантации овариальной ткани для восстановления репродуктивной и эндокринной функции. Приведены успешные результаты их применения как на различных экспериментальных моделях животных, так и в клинической...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Дата: | 2013 |
| Автор: | |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2013
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68699 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Криоконсервирование и трансплантация овариальной ткани как метод восстановления эндокринной и репродуктивной функций / В.В. Кирошка // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2013. — Т. 23, № 1. — С. 4-14. — Бібліогр.: 54 назв. — рос., англ. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-68699 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Кирошка, В.В. 2014-09-27T09:52:26Z 2014-09-27T09:52:26Z 2013 Криоконсервирование и трансплантация овариальной ткани как метод восстановления эндокринной и репродуктивной функций / В.В. Кирошка // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2013. — Т. 23, № 1. — С. 4-14. — Бібліогр.: 54 назв. — рос., англ. 2307-6143 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68699 611.651.1.018:57.043:616.089 В обзоре представлен анализ современной литературы существующих методов криоконсервирования и трансплантации овариальной ткани для восстановления репродуктивной и эндокринной функции. Приведены успешные результаты их применения как на различных экспериментальных моделях животных, так и в клинической практике. В статье отмечены основные технические трудности, которые необходимо преодолеть для широкого внедрения в клиническую практику методов криоконсервирования и трансплантации овариальной ткани. В огляді подано аналіз сучасної літератури існуючих методів кріоконсервування і трансплантації оваріальної тканини для відновлення репродуктивної та ендокринної функції. Наведено успішні результати їх застосування як на різних експериментальних моделях тварин, так і в клінічній практиці. У статті зазначено основні технічні труднощі, які необхідно подолати для широкого впровадження в клінічну практику методів кріоконсервування і трансплантації оваріальної тканини. The review represents the state of art in existing methods for cryopreservation and transplantation of ovarian tissue used for restoration of reproductive and endorcine function. The successful outcomes of their application are shown both in experimental animal models and in clinical practice. The paper describes the main technical obstacles, which should be overcome to introduce into clinic the methods of cryopreservation and transplantation of ovarian tissue. ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Обзоры Криоконсервирование и трансплантация овариальной ткани как метод восстановления эндокринной и репродуктивной функций Cryopreservation and Transplantation of Ovarian Tissue as Method of Endocrine and Reproductive Functions Recovery Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Криоконсервирование и трансплантация овариальной ткани как метод восстановления эндокринной и репродуктивной функций |
| spellingShingle |
Криоконсервирование и трансплантация овариальной ткани как метод восстановления эндокринной и репродуктивной функций Кирошка, В.В. Обзоры |
| title_short |
Криоконсервирование и трансплантация овариальной ткани как метод восстановления эндокринной и репродуктивной функций |
| title_full |
Криоконсервирование и трансплантация овариальной ткани как метод восстановления эндокринной и репродуктивной функций |
| title_fullStr |
Криоконсервирование и трансплантация овариальной ткани как метод восстановления эндокринной и репродуктивной функций |
| title_full_unstemmed |
Криоконсервирование и трансплантация овариальной ткани как метод восстановления эндокринной и репродуктивной функций |
| title_sort |
криоконсервирование и трансплантация овариальной ткани как метод восстановления эндокринной и репродуктивной функций |
| author |
Кирошка, В.В. |
| author_facet |
Кирошка, В.В. |
| topic |
Обзоры |
| topic_facet |
Обзоры |
| publishDate |
2013 |
| language |
Russian |
| container_title |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Cryopreservation and Transplantation of Ovarian Tissue as Method of Endocrine and Reproductive Functions Recovery |
| description |
В обзоре представлен анализ современной литературы существующих методов криоконсервирования и трансплантации овариальной ткани для восстановления репродуктивной и эндокринной функции. Приведены успешные результаты их применения как на различных экспериментальных моделях животных, так и в клинической практике. В статье отмечены основные технические трудности, которые необходимо преодолеть для широкого внедрения в клиническую практику методов криоконсервирования и трансплантации овариальной ткани.
В огляді подано аналіз сучасної літератури існуючих методів кріоконсервування і трансплантації оваріальної тканини для відновлення репродуктивної та ендокринної функції. Наведено успішні результати їх застосування як на різних експериментальних моделях тварин, так і в клінічній практиці. У статті зазначено основні технічні труднощі, які необхідно подолати для широкого впровадження в клінічну практику методів кріоконсервування і трансплантації оваріальної тканини.
The review represents the state of art in existing methods for cryopreservation and transplantation of ovarian tissue used for restoration of reproductive and endorcine function. The successful outcomes of their application are shown both in experimental animal models and in clinical practice. The paper describes the main technical obstacles, which should be overcome to introduce into clinic the methods of cryopreservation and transplantation of ovarian tissue.
|
| issn |
2307-6143 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68699 |
| citation_txt |
Криоконсервирование и трансплантация овариальной ткани как метод восстановления эндокринной и репродуктивной функций / В.В. Кирошка // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2013. — Т. 23, № 1. — С. 4-14. — Бібліогр.: 54 назв. — рос., англ. |
| work_keys_str_mv |
AT kiroškavv kriokonservirovanieitransplantaciâovarialʹnoitkanikakmetodvosstanovleniâéndokrinnoiireproduktivnoifunkcii AT kiroškavv cryopreservationandtransplantationofovariantissueasmethodofendocrineandreproductivefunctionsrecovery |
| first_indexed |
2025-11-26T12:41:47Z |
| last_indexed |
2025-11-26T12:41:47Z |
| _version_ |
1850624131227189248 |
| fulltext |
УДК 611.651.1.018:57.043:616.089
В.В. Кирошка
Криоконсервирование и трансплантация овариальной ткани
как метод восстановления эндокринной
и репродуктивной функций
UDC 611.651.1.018:57.043:616.089
V.V. Kiroshka
Cryopreservation and Transplantation of Ovarian Tissue
as Method of Endocrine and Reproductive
Functions Restoration
Реферат. В обзоре представлен анализ современной литературы существующих методов криоконсервирования и
трансплантации овариальной ткани для восстановления репродуктивной и эндокринной функции. Приведены успешные
результаты их применения как на различных экспериментальных моделях животных, так и в клинической практике. В статье
отмечены основные технические трудности, которые необходимо преодолеть для широкого внедрения в клиническую
практику методов криоконсервирования и трансплантации овариальной ткани.
Ключевые слова: овариальная ткань, режимы замораживания-отогрева, трансплантация, репродуктивная функция.
Реферат. В огляді подано аналіз сучасної літератури існуючих методів кріоконсервування і трансплантації оваріальної
тканини для відновлення репродуктивної та ендокринної функції. Наведено успішні результати їх застосування як на різних
експериментальних моделях тварин, так і в клінічній практиці. У статті зазначено основні технічні труднощі, які необхідно
подолати для широкого впровадження в клінічну практику методів кріоконсервування і трансплантації оваріальної тканини.
Ключові слова: оваріальна тканина, режими заморожування-відігріву, трансплантація, репродуктивна функція.
Abstract. The review represents the state of art in existing methods for cryopreservation and transplantation of ovarian tissue
used for restoration of reproductive and endorcine function. The successful outcomes of their application are shown both in
experimental animal models and in clinical practice. The paper describes the main technical obstacles, which should be overcome to
introduce into clinic the methods of cryopreservation and transplantation of ovarian tissue.
Key words: ovarian tissue, freeze-thawing regimens, transplantation, reproductive function.
According to the data of the World Health Organi-
zation the infertility in Ukraine is observed in 15% mar-
ried couples that leads to the degradation of demogra-
phic indices in the country. There are known various
reasons of decreasing the reproductive functions of
adult population: gynecological, genetic, endocrine, im-
munological as well as the ones associated with the
diseases in childhood and having an idiopathic cha-
racter. Moreover, the application of high-dose chemo-
and radiotherapy in contemporary oncology used to
increase the efficiency of the treatment has a negative
side effect on reproductive organs [1, 5]. Women have
it manifested in decrease of ovarian reserve and pool
of oocytes or atrophia of ovarian tissue, premature me-
nopause or decreased reproductive function [1, 34, 36].
обзорная статья review article
Адрес для корреспонденции:
ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015;
тел.: (+38 057) 373-30-07, факс: (+38 057) 373-30-84,
электронная почта: vvkiroshka@mail.ru
sAddress for correspondence:
23, Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015;
tel.:+380 57 373 3007, fax: +380 57 373 3084,
e-mail: vvkiroshka@mail.ru
Department of Cryobiochemistry and Pharmacology of Neurohu-
moral Systems, Institute for Problems of Cryobiology and
Cryomedicine of the National Academy of Sciences of Ukraine,
Kharkov, Ukraine
Отдел криобиохимии и фармакологии нейрогуморальных систем,
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины,
г. Харьков
Поступила 23.01.2013
Принята в печать 15.02.2013
Проблемы криобиологии и криомедицины. – 2013. – Т. 23, №1. – С. 4–14.
© 2013, Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины
Received January, 23, 2013
Accepted February, 15, 2013
Problems of Cryobiology and Cryomedicine. – 2013. – Vol. 23, Nr. 1. – P. 4–14.
© 2013 Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
По данным Всемирной организации здравоохра-
нения бесплодие в Украине установлено у 15% су-
пружеских пар, что ведет к ухудшению демографи-
ческих показателей в стране. Известны разные при-
чины снижения репродуктивной функции взрослого
населения: гинекологические, генетические, эндо-
кринные, иммунологические, а также связанные с
заболеваниями, перенесенными в детстве, и имею-
щие идиопатический характер. Кроме того, примене-
ние высокодозовой химио- и радиотерапии в сов-
ременной онкологии для достижения эффективнос-
ти лечения оказывает отрицательное побочное
действие на репродуктивные органы [1, 5]. У жен-
щин это проявляется в снижении овариального ре-
зерва, пула ооцитов или в атрофии ткани яичника,
преждевременной менопаузе или сниженной репро-
дуктивной функции [1, 34, 36]. В настоящее время
стандарт сохранения репродуктивного потенциала
женщин – стимуляция функции яичников для забора
ооцитов и их криоконсервирование или оплодотво-
рение зрелых ооцитов и криоконсервирование по-
лученных эмбрионов [47]. Основная сложность
применения этих методов – необходимость прове-
дения процедуры суперовуляции для получения
большого количества зрелых ооцитов. Также су-
ществуют трудности, связанные с криоконсервирова-
нием зрелых ооцитов, имеющих большой объем
цитоплазмы клеток, высокий уровень метаболизма
и хромосомы в стадии метафазы мейоза II [6].
Важно отметить, что стимуляция функции яичников
невозможна в детском возрасте [47].
В современной репродуктивной медицине крио-
консервирование и трансплантация овариальной
ткани являются наиболее перспективными мето-
дами сохранения репродуктивного потенциала и
восстановления эндокринной функции у пациентов
как после курсов химио- и радиотерапии, так и при
патологиях яичников различного генеза [15]. Пре-
имущества данного метода – отсутствие предва-
рительной гормональной стимуляции, возможность
забора различных слоев ткани в любое время, до-
статочный фолликулярный запас в кортикальном
слое яичника (от 15 до 100 примордиальных фолли-
кулов на 1 мм3), который необходим для криокон-
сервирования [13, 14].
На сегодняшний день получены результаты ус-
пешного криоконсервирования и трансплантации
овариальной ткани как на разных эксперименталь-
ных моделях у животных, так и в клинической
практике. Была восстановлена фертильность у мы-
шей после ортотопической трансплантации крио-
консервированной овариальной ткани [29, 46, 52].
Gosden R.G. и соавт. показали возможность восста-
новления детородной функции у овец после ауто-
трансплантации овариальной ткани, хранившейся
при –196 °C [25]. При ксенотрансплантации крио-
консервированной овариальной ткани обезьян им-
мунодефицитным мышам была восстановлена
морфологическая структура ткани яичника доно-
ров, причем количество нормальных фолликулов
было сравнимо с таковыми после трансплантации
свежевыделенной ткани [10]. В современной ми-
ровой практике зарегистрировано несколько слу-
чаев рождения здоровых детей после криоконсер-
вирования овариальной ткани и последующей ее
ортотопической аутотрансплантации [3, 14].
Метод трансплантации овариальной ткани ис-
пользуется достаточно давно, однако его сочета-
ние с современными репродуктивными технология-
ми в клинической практике можно рассматривать
как инновационное.
Nowadays the standard for preservation of women
reproductive potential is either the stimulation of ovary
function for sampling of oocytes and their cryopreser-
vation or fertilization of mature oocytes and cryopre-
servation of the derived embryos [47]. The main diffi-
culty in application of these methods is the necessity
of performing the superovulation to obtain a great
number of mature oocytes. There also appear the dif-
ficulties associated with the cryopreservation of mature
oocytes with a large volume of cell cytoplasm, high
level of metabolism and chromosomes at the stage of
meiosis metaphase II [6]. It should be noted, that the
stimulation of ovary function is impossible in infancy
[47].
In contemporary reproductive medicine, the cryo-
preservation and transplantation of ovarian tissue are
the most perspective methods for preservation of repro-
ductive potential and recovery of endocrine function
in patients after courses of chemo- and radiotherapy
as well as during pathologies of ovaries of different
genesis [15]. The advantage of this method is the abse-
nce of preliminary hormonal stimulation, possibility of
sampling of different tissue layers at any time, sufficient
follicular reservoir in ovarian cortical layer (from 15
to 100 primordial follicles per 1 mm3) necessary for
cryopreservation [13, 14].
Nowadays, successful cryopreservation and trans-
plantation of ovarian tissue were achieved both in
various experimental animal models and in clinical
practice. The fertility in mice was restored after ortho-
topic transplantation of cryopreserved ovarian tissue
[29, 46, 52]. Gosden R.G. et al. showed the possibility
to recover reproductive function in sheep after auto-
transplantation of ovarian tissue stored at –196°C
[25]. Xenotransplantation of cryopreserved ovarian tis-
sue of monkeys to immunodeficient mice restored the
morphological structure of mice ovarian tissue, more-
over, the number of normal follicles was comparable
with that after transplantation of freshly isolated tissue
[10]. Several cases of birth of healthy children after
cryopreservation of ovarian tissue and its following or-
thotopic autotransplantation have been reported in con-
temporary world practice [3, 14].
Method of ovarian tissue transplantation has been
used for a long time, however its combination with
current reproductive technologies in clinical practice
may be considered as innovative one.
Basic approaches in cryopreservating ovarian
tissue
The difficulty of ovarian tissue cryopreservation is
comparable with case of the whole organs as it requires
the preservation of heterogenic functional unit of the
ovary, the follicle, which consists of several types of
somatic cells (granulose, cumulus, theca) and germ
cell (oocyte) differing in size, volume and membrane
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue1, 2013
5
Основные подходы к криоконсервиро-
ванию овариальной ткани
Сложность криоконсервирования овариальной
ткани соизмерима с консервированием целых орга-
нов, поскольку требует сохранения гетерогенной
функциональной единицы яичника – фолликула, со-
стоящего из нескольких типов соматических кле-
ток (гранулезы, кумулюса, теки) и половой клетки
(ооцита), которые отличаются размером, объемом
и проницаемостью мембраны. Метод низкотемпе-
ратурного консервирования овариальной ткани сос-
тоит из нескольких этапов: забор ткани, инкубация
с криопротектором, замораживание и отогрев. От
подбора оптимальных условий на всех перечислен-
ных выше этапах зависит сохранение жизнеспособ-
ности овариальной ткани.
Первые попытки, сделанные в 50-х годах прош-
лого столетия, по замораживанию овариальной тка-
ни грызунов под защитой глицерина, успеха не
имели [27, 46]. На протяжении последующих 20
лет результаты работ, связанные с криоконсерви-
рованием ткани яичника, практического приме-
нения не получили. Разработка и внедрение в 70-х
годах новых криозащитных веществ (пропандиол,
этиленгликоль и диметилсульфоксид) в криобиоло-
гическую практику послужили началом нового эта-
па исследований в данном направлении. Одна из
пионерских работ была выполнена В.И. Грищенко и
соавт. в ИПКиК НАН Украины, в которой пока-
зано, что подкожная аллотранслантация овариаль-
ной ткани, криоконсервированной под защитой по-
лиэтиленгликоля с молекулярной массой 400, при-
водила к восстановлению эстрального цикла у
пациенток [2, 28]. В 90-х годах было проведено
несколько успешных экспериментов по низкотемпе-
ратурному консервированию овариальной ткани в
присутствии ДМСО [12, 25, 29]. У 86% овариоэкто-
мированных животных удалось восстановить эст-
ральный цикл после трансплантации под капсулу
почки криоконсервированной овариальной ткани,
если использовался быстрый отогрев образца и у
25% – медленный [12]. Аналогичные результаты
были получены Gosden R.G. и соавт. после орто-
топической трансплантации фрагментов коркового
слоя яичника овцы, которые были заморожены до
–196°С в присутствии ДМСО [25]. Исследования,
проведенные Hovatta О. и соавт. в 1996 г. [30], дока-
зали устойчивость овариальной ткани человека к
низкотемпературному консервированию под защи-
той ДМСО или в сочетании 1,2-пропандиола (1,2-
ПД) и сахарозы. Сохранение структурной целост-
ности фолликулов, компонентов стромы, а также
архитектоники ткани после замораживания-отогре-
ва было основанием для предположения о сохра-
нении жизнеспособности овариальной ткани
permeability. Method of low-temperature preservation
of ovarian tissue involves several stages: sampling of
tissue, incubation with cryoprotectant, freezing and
thawing. The selection of optimal conditions at all the
mentioned stages affects the preservation of ovarian
tissue viability.
The first attempts performed in the 1950s to freeze
rodent ovarian tissue under protection of glycerol failed
[27, 46]. During the following 20 years the results of
researches on cryopreservation of ovarian tissue were
not used in practice. In the 1970s the development
and implementation of new cryoprotective substances
(propane diol, ethylene glycol and dimethyl sulfoxide)
into cryobiological practice pre-conditioned the begin-
ning of new stage of investigations in this direction.
One of the pioneer works performed by the laboratory
of V.I. Grischenko at the Institute for Problems of
Cryobiology and Cryomedicine of the National Aca-
demy of Sciences of Ukraine showed that subcuta-
neous allotransplantation of ovarian tissue cryopreser-
ved under protection of polyethylene glycol with mole-
cular weight of 400 resulted in the restoration of estrous
cycle in the patients [2, 28]. In the 90s several success-
ful experiments on low-temperature preservation of
ovarian tissue with DMSO were carried-out [12, 25,
29]. Estrous cycle was restored in 86% of ovariecto-
mized animals after transplantation under renal capsule
of cryopreserved ovarian tissue if the biospecimen was
rapidly thawed and only in 25% – if slow regimen was
applied [12]. Similar results were obtained by Gos-
den R.G. et al. after orthotopic transplantation of sheep
ovarian cortex fragments cooled down to –196°C in
the presence of DMSO [25]. The studies performed
by Hovatta O. et al. in 1996 [30] revealed the resistance
of human ovarian tissue to low-temperature preserva-
tion under protection of DMSO or of combined 1,2-pro-
panediol (1,2-PD) with sucrose. Preservation of struc-
tural integrity of follicles, stromal components as well
as tissue architectonics after freeze-thawing allowed
to suggest the preservation of human ovarian tissue
viability and possibility of its use for transplantation.
Resistance of ovarian tissue to cryoinjury and a high
degree of survival of primordial follicles were eviden-
ced also by other researchers [7, 39].
Presently the cryopreservation of ovarian tissue
mainly involves two cryoprotectants, DMSO and 1,2-
PD. Basic protocol of low-temperature preservation
of sheep ovarian tissue under DMSO protection was
developed by Gosden R.G. et al. in 1994, which
involved the laparoscopical sampling of an entire ovary
or its cortical layer, further cutting of the tissue into
1×1 mm fragments on ice. The equilibration of ovarian
tissue fragments was carried out for 15 min at 4°C in
the physiological saline with 1.5 M DMSO and supple-
mented with 10% fetal bovine serum (FBS). Controlled
6 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue1, 2013
человека и возможности ее использования для
трансплантации. Устойчивость овариальной ткани
к криоповреждениям и высокий уровень сохраннос-
ти фолликулов примордиальной стадии были под-
тверждены и другими исследователями [7, 39].
В настоящее время для криоконсервирования
овариальной ткани преимущественно используют
два криопротектора – ДМСО и 1,2-ПД. Основопо-
лагающий протокол низкотемпературного консер-
вирования под защитой ДМСО для овариальной
ткани овцы был разработан Gosden R.G и соавт. в
1994 г., согласно которому забор целого яичника
или его кортикального слоя проводили лапароскопи-
чески, после чего ткань измельчали на фрагменты
размером 1×1 мм на льду. Эквилибрацию фрагмен-
тов овариальной ткани в физиологическом растворе
в присутствии 1,5 М ДМСО и 10% эмбриональной
телячьей сыворотки (ЭТС) проводили в течение
15 мин при 4°С. Программное замораживание тка-
ни яичника осуществляли в специальных контейне-
рах со следующими скоростями охлаждения: до
–9°C со скоростью 2 град/мин, затем до –40°C со
скоростью 0,3 град/мин и со скоростью 10 град/мин
до –140°C, затем образцы погружали в жидкий
азот. Для отогрева образцы выдерживали в течение
2 мин на воздухе, затем помещали на водяную
баню (22°С). В результате последующей аутотрансп-
лантации данной криоконсервированной овариаль-
ной ткани появилось потомство [25]. В дальнейшем
этот протокол был модифицирован Oktay K. и со-
авт.: для криоконсервирования овариальной ткани
человека в криозащитный раствор, содержащий
1,5 М ДМСО, добавляли 0,1 М сахарозы и увеличи-
вали время эквилибрации ткани яичника с раство-
ром криопротектора до 30 мин при 4°С [42]. В ре-
зультате использования данного протокола на гис-
тологических срезах овариальной ткани человека
после криоконсервирования было выявлено незна-
чительное количество первичных фолликулов [42].
Многочисленные экспериментальные данные,
полученные Gook D.A. и соавт. [19–22], показали
успешное замораживание фрагментов овариальной
ткани под защитой 1,2-ПД. Была проведена оценка
морфологической целостности всех структурных
элементов овариальной ткани в зависимости от
температуры (4 и 22°С) и времени инкубации (15–
90 мин) ткани с 1,2-ПД в концентрациях от 1,5 до
4,5 М 1,2-ПД в присутствии 0,1–0,2 М сахарозы
или с 10%-й ЭТС [23]. В результате Gook D.A. и
соавт. был разработан протокол замораживания
овариальной ткани под защитой 1,2-ПД, согласно
которому ткань измельчали на фрагменты разме-
ром 2×4×1 мм3 и инкубировали в криозащитном
растворе (150 мМ NaCl; 1,5 М 1,2-ПД; 0,1 М саха-
розы и 10 мг/мл альбумина) в течение 90 мин при
22°С. Программное замораживание ткани яичника
осуществлялось в специальных контейнерах объе-
cooling of ovary tissue was performed in the special
containers using the following cooling rates: down to
–9°C it was done with 2 deg/min rate, then down to
–40°C it was performed with the rate of 0.3 deg/min
and 10 deg/min rate down to –140°C, thereafter the
samples were plunged into liquid nitrogen. For thaw-
ing the samples were kept in air for 2 min, then placed
in water bath (22°C). The following transplantation of
this cryopreserved ovarian tissue resulted in the appea-
rance of the offspring [25]. Further this protocol was
modified by Oktay K. et al. as follows: to cryopreserve
the human ovarian tissue the cryoprotective solution
containing 1.5 M DMSO was supplemented with 0.1 M
sucrose and the equilibration time of ovary tissue with
cryoprotectant solution at 4°C was increased up to 30
min [42]. Application of this protocol resulted in pre-
servation of few primary follicles revealed in histolo-
gical sections of human ovarian tissue [42].
A number of experiments performed by Gook D.A.
et al. [19–22] achieved a successful freezing of ova-
rian tissue fragments under protection of 1,2-PD. There
was assessed morphological integrity of all ovarian tis-
sue structural elements depending on the temperature
(4 and 22°C) and duration(15–90 min) of tissue incu-
bation in solution of 1,2-PD in concentration from 1.5
to 4.5 M supplemented with 0.1–0.2 M sucrose or 10%
FBS [23]. As a result Gook D.A. et al. have developed
the protocol for ovarian tissue freezing under 1,2-PD
protection according to which the tissue was reduced
to 2×4×1 mm3 fragments and incubated in cryoprotec-
tive solution (150 mM NaCl; 1.5 M 1,2-PD; 0.1 M
sucrose and 10 mg/ml albumin) during 90 min at 22°C.
Programmed freezing of ovary tissue was done in spe-
cial containers of 1 ml volume with the following cooling
rates: down to –7°C it was performed with 2 deg/min
rate, then down to –30°C it was done with 0.3 deg/min
rate and 50 deg/min down to –150°C and thereafter
the specimens were plunged into liquid nitrogen. For
thawing the samples were exposed for 2–3 min in
water bath at 37°C until the appearance of liquid phase.
The following morphological assessment of structural
elements in ovarian tissue showed that more than 50%
of follicles consisted of undamaged cells of granulose
and oocytes [24].
In spite of considerable success in development of
the methods for low-temperature storage of ovarian
tissue Sztein J. et al. noted the decrease of follicular
pool and increase of fibrosis area in transplants of cryo-
preserved ovarian tissue comparing to the transplants
of freshly isolated tissue [52]. Other authors reported
DNA fragmentation observed after cryopreservation
in primordial and primary follicles [16] as well as the
impaired integrity of granulose cell structure [38]. The
application of more novel tests allowed to reveal the
expression of abnormal genes in granulose cells and
their apoptosis in transplants of cryopreserved ovarian
tissue [35]. In addition, there were some suggestions
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue1, 2013
7
мом 1 мл со следующими скоростями охлаждения:
до –7°C со скоростью 2 град/мин, затем до –30 °C
со скоростью 0,3 град/мин и со скоростью 50 град/
мин до –150°C с последующим погружением в
жидкий азот. Для отогрева образцы выдерживали
в течение 2–3 мин на водяной бане при 37°С до
появления жидкой фазы. Последующая морфоло-
гическая оценка структурных элементов овариаль-
ной ткани показала, что более 50% фолликулов сос-
тояло из неповрежденных клеток гранулезы и ооци-
тов [24].
Несмотря на значительный успех в разработке
методов низкотемпературного хранения овариаль-
ной ткани, Sztein J. и соавт. отмечали уменьшение
фолликулярного пула и увеличение площади фибро-
за в трансплантатах криоконсервированной ова-
риальной ткани по сравнению с трансплантатами
из свежевыделенной ткани [52]. В работах других
авторов показано, что после криоконсервирования
в примордиальных и первичных фолликулах отме-
чались фрагментация ДНК [16], а также наруше-
ние целостности структуры клеток гранулезы [38].
Использование более современных методов иссле-
дования позволило выявить экспрессию аномаль-
ных генов в клетках гранулезы и их апоптоз в транс-
плантатах криоконсервированной овариальной
ткани [35]. Кроме того, были высказаны предполо-
жения, что криоконсервирование способствует сти-
муляции апоптоза структурных компонентов ткани
яичника, поэтому уменьшается количество расту-
щих фолликулов в культуре криоконсервированной
овариальной ткани [11].
Применение витрификационной технологии для
криоконсервирования овариальной ткани позволило
улучшить сохранность ее стромальных элементов
[51]. Электронно-микроскопические исследования
структуры внутриклеточных органелл овариальной
ткани, проведенные Keros V. и соавт., также пока-
зали преимущество использования метода витри-
фикации по сравнению с программным заморажи-
ванием [33] для криоконсервирования овариальной
ткани крыс и овец с последующей аутотопической
трансплантацией [8, 51], однако при криоконсерви-
ровании овариальной ткани человека были получе-
ны противоречивые результаты [32].
Таким образом, показано, что метод низкотем-
пературного хранения овариальной ткани не яв-
ляется оптимальным для широкого внедрения в
клиническую практику, поскольку в процессе замо-
раживания-отогрева возникают существенные пов-
реждения, приводящие к нарушению структуры
внутриклеточных органелл, снижению количества
жизнеспособных фолликулов, увеличению скорости
апоптоза клеток гранулезы, а также развитию зна-
чительного фиброза ткани после трансплантации.
В связи с этим важны оптимизация размеров фраг-
made, that cryopreservation could contribute to the
stimulation of apoptosis of ovary tissue structural com-
ponents, which resulted in the decrease of number of
growing follicles in culture of cryopreserved ovarian
tissue [11].
The application of vitrification technology for ova-
rian tissue cryopreservation enabled to improve the
preservation of its stromal elements [51]. Electrone-
microscopic analysis of ovarian tissue intracellular orga-
nelles performed by Keros V. et al. also showed the
advantage in using the vitrification method if compared
to the controlled rate freezing [33] for cryopreservation
of rat and sheep ovarian tissue with the following auto-
topic transplantation [8, 51]. However, the attempts to
cryopreserve human ovarian tissue gave the contra-
dictory results [32].
Thus, the method of low-temperature storage of
ovarian tissue has been shown not to be an optimal for
being implemented widely in clinical practice, since
freeze-thawing is accompanied with appearance of
significant injuries which induce the disorders in
structure of intracellular organelles, decrease in num-
ber of viable follicles, arised rate of granulose cells
apoptosis as well as development of significant tissue
fibrosis after transplantation. In this connection, the
issues of optimization of ovary tissue fragments dimen-
sions, selection of cryoprotectant and choosing its con-
centration, duration and temperature of exposure with
tissue as well as development of new freeze-thawing
regimens and improvement of existing methods of ova-
rian tissue cryopreservation for a wide application in
clinical practice have remained vitally important.
Orthotopic and heterotopic transplantation of
ovarian tissue
The possibility of ovarian tissue transplantation has
been studied by scientists and clinicians for a long time.
The first researches on the transplantation of repro-
ductive organs including ovarian tissue were performed
by Robert Morris at the end of 18th century [40].
However, only at the beginning of the 20th century after
implementation of vascular anastomosis technique the
transplantation of reproductive organs acquired a wide
application in clinical practice for recovery of endocrine
and reproductive function and experimental transplan-
tology as well. Nowadays, one of the approaches of
endocrine and reproductive functions restoration in
women with ovary pathologies of different genesis can
be the complex application of the methods of trans-
plantation of cryopreserved ovarian tissue (ortho- and
heterotopic ones) combined with assisted reproductive
technologies (in vitro fertilization, in vitro maturation
of follicles). After orthotopic transplantation (onto the
ovary surface) the restoration of fertility and develop-
ment of follicles in favorable environmental conditions
are possible, but the transplantation procedure in this
8 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue1, 2013
ментов ткани, выбор и определение концентрации
криопротектора, времени и температуры экспози-
ции с тканью, а также разработка новых режимов
замораживания-отогрева и совершенствование су-
ществующих методов криоконсервирования ова-
риальной ткани для широкого применения в клини-
ческой практике.
Ортотопическая и гетеротопическая
трансплантация овариальной ткани
Возможность трансплантации овариальной тка-
ни исследуется учеными и врачами на протяжении
многих лет. Первые работы по трансплантации ре-
продуктивных органов, в том числе и овариальной
ткани, были сделаны Робертом Моррисом в конце
18-го столетия. Однако только в начале 20-го столе-
тия после внедрения техники сосудистых анасто-
мозов трансплантация репродуктивных органов
получила широкое распространение как в клиничес-
кой практике для восстановления эндокринной и
репродуктивной функции, так и экспериментальной
трансплантологии. В настоящее время одним из под-
ходов восстановления эндокринной и репродуктив-
ной функций у женщин при патологиях яичников
различного генеза может быть комплексное приме-
нение методов трансплантации криоконсервиро-
ванной овариальной ткани (орто- или гетеротопи-
ческой) в сочетании со вспомогательными репро-
дуктивными технологиями (экстракорпоральное
оплодотворение, созревание фолликулов in vitro).
После ортотопической трансплантации (на поверх-
ность яичника) возможны восстановление фертиль-
ности и развитие фолликулов в благоприятных
естественных условиях, однако операция транс-
плантации в этом случае оказывается инвазивной,
а объем трансплантата ограничивается размерами
яичника [13]. Первая ортотопическая транспланта-
ция овариальной ткани человека была выполнена
Oktay K. и Karlikaya G. 29-летней пациентке с дву-
сторонней овариоэктомией [43]. Фрагменты крио-
консервированной овариальной ткани лапароскопи-
чески трансплантировали под тазовую брюшину.
При этом было получено кровоснабжение в транс-
плантате, был образован фолликул размером до
17 мм, восстановлен менструальный цикл у па-
циентки после гормональной стимуляции, норма-
лизован уровень половых гормонов в плазме крови
до физиологической нормы. Восстановление уров-
ня половых гормонов у пациенток наблюдали в
период между 3-м и 6-м месяцем после аутотранс-
плантации в область тазовой брюшины или на по-
верхность медиального слоя яичника. К настояще-
му времени известно 10 успешных случаев орто-
топической трансплантации криоконсервированной
овариальной ткани после использования режима
медленного замораживания. Следует отметить,
case appeared to be invasive and the transplant volume
is limited by the ovary sizes [13]. The first orthotopic
transplantation of human ovarian tissue was carried
out by Oktay K. and Karlikaya G. to 29-year-old
patient with bilateral ovariectomy [43]. The fragments
of cryopreserved ovarian tissue were laparascopically
transplanted under pelvic peritonium. As the result, the
blood supply was restored in the transplant, follicle of
17 mm size was formed, menstrual cycle in the patient
was recovered after hormonal stimulation , the level
of reproductive hormones in blood plasma was nor-
malized to the physiological norm. The restoration of
reproductive hormones level in the patients was obser-
ved in the period between the 3rd and 6th month after
autotransplantation into pelvic peritonium or onto the
surface of ovary medial layer. By now, there are
reported 10 successful cases of orthotopic transplan-
tation of cryopreserved ovarian tissue after using the
regimen of slow freezing. It is worth noting that all the
women labored the children were younger than 30,
that was probably associated with a high pool of primor-
dial follicles in the fragments of ovarian tissue cortical
layer [3, 14, 17, 18, 37, 44, 45].
Heterotopic transplantation of ovarian tissue frag-
ments is performed mainly under the skin of frontal
abdominal wall or forearm, it is not associated with
the limits in the number of transplanted tissue frag-
ments. It is relatively simple and enables to easily ob-
serve the development of follicles and perform their
puncture. But the restoration of reproductive function
is possible only with performing the assisted reproduc-
tive technologies [50]. The functioning of cryopreser-
ved ovarian tissue in muscular ‘pocket’ of abdominal
wall and the zone of forearm in 46–49 years old women
[9] was similar to the functioning of freshly isolated
tissue. Moreover, in 3–4 months after transplantation
of ovarian tissue into abdominal wall there was noted
the re-storation of estradiol level and follicle-stimulating
hor-mone to the physiological indices while after ‘im-
plantation’ of tissue into the forearm zone no endocrine
function in the patients was observed. By now among
61 cases of heterotopic transplantation of cryopreserv-
ed ovarian tissue in 43 cases the patients were obser-
ved to have the restoration of menstrual cycle during
several months [4]. However, no pregnancies were
achieved after the transfer into uterus cavity of the
embryos derived from oocytes after follicular pa-
racentesis performed after heterotopic transplantation
of ovary tissue [44, 45, 48]. It was possibly associated
with a negative impact of microenvironment after
heterotopic transplantation, as well as temperature and
mechanic factors and as a result with the disordered
endocrine and paracrine regulation of folliculogenesis
in ovarian tissue. In the investigation Demeestere I. et
al. [13, 14] have demonstrated that after autologous
transplantation of cryopreserved ovary cortex frag-
ments performed heterotopically (subcutaneously and
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue1, 2013
9
что все женщин, которые родили детей, были моло-
же 30 лет, и успех, вероятно, связан с высоким пу-
лом примордиальных фолликулов во фрагментах
кортикального слоя овариальной ткани [3, 14, 17,
18, 37, 44, 45].
Гетеротопическая трансплантация фрагментов
яичниковой ткани осуществляется в основном под
кожу передней брюшной стенки или предплечья,
не связана с ограничениями в количестве переса-
живаемых фрагментов ткани, относительно проста,
позволяет легко наблюдать за развитием фоллику-
лов и производить их пункцию, однако восстанов-
ление репродуктивной функции возможно лишь с
использованием вспомогательных репродуктивных
технологий [50]. Показано, что функционирование
криоконсервированной овариальной ткани в мы-
шечном «кармане» брюшной стенки и в зоне пред-
плечья 46–49-летних женщин [9] сравнимо с функ-
ционированием свежевыделенной ткани. При этом
через 3–4 месяца после трансплантации овариаль-
ной ткани в брюшную стенку отмечалось восста-
новление уровня эстрадиола и фолликулостимули-
рующего гормона до физиологических значений,
тогда как при «подсадке» ткани в зону предплечья
эндокринная функция у пациенток отсутствовала.
На сегодняшний день из 61-го случая гетеротопи-
ческой трансплантации криоконсервированной
овариальной ткани в 43 случаях наблюдали у па-
циенток восстановление менструального цикла в
течение нескольких месяцев [4]. Однако после пе-
реноса в полость матки эмбрионов, полученных из
ооцитов при пункции фолликулов после гетеро-
топической трансплантации ткани яичника, не на-
ступала ни одна беременность [44, 45, 48]. Возмож-
но, это связано с негативным воздействием в
условиях гетеротопической трансплантации микро-
окружения, а также температурного и механичес-
кого факторов, и как следствие – с нарушением
эндокринной и паракринной регуляции процесса
фолликулогенеза в овариальной ткани. В исследо-
вании Demeestere I. и соавт. [13, 14] было проде-
монстрировано, что при аутологичной трансплан-
тации фрагментов криоконсервированного корково-
го вещества яичника гетеротопично (подкожно и
в переднюю мышцу живота) и аутотопично (на
поверхность яичника) развитие фолликулов до
диаметра более 15 мм отмечено в 7, 24 и 69% мен-
струальных циклах соответственно. Приведенные
выше литературные данные указывают на то, что
выбор оптимальной области при гетеротопической
трансплантации является основным фактором для
успешного функционирования ткани. Еще одним
ключевым фактором, ограничивающим успех про-
цедуры трансплантации, является возникновение
ишемии во фрагментах овариальной ткани до мо-
мента их реваскуляризации. Показано, что около
in frontal abdominal muscle) and autotopically (onto
the ovary surface) the development of follicles upto
the diameter more than 15 mm was noted in 7, 24 and
69% menstrual cycles, respectively. The reported data
attest that selection of optimal site for heterotopic
transplantation is an essential factor for normal
functioning of tissue. One more key factor limiting the
success of transplantation is the appearance of
ischemia in the fragments of ovarian tissue before the
moment of their revascularization. About 50% of
primordial follicles of general pool were shown to die
due to ischemic injuries, therefore the term of trans-
plant functioning reduced and the probability of fertility
recovery decreased [26, 40]. There are reported the
data about the possibility of application of different
substances with antioxidant properties during the
sampling of ovary tissue, for example vitamin E, as-
corbic acid, mannitol aiming to decrease the degree of
ischemic damage, but by now the most of these inves-
tigations were done in experimental animals [14, 41,
49]. In addition there are the data [31] that a rapid re-
vascularization of transplant may be stipulated by
growth factors (factor of fibroblasts, transforming
growth factor β, vessel endothelial growth factor
(VEGF)) as well as the level of gonadotropins in the
organism. The introduction of exogenic gonadotropins
was shown to lead to the increase of endogenic VEGF,
improvement of transplant vascularization and follicular
development [31]. Recently a great attention has been
paid to the discussion of the prospects of using
hormonal maintenance scheme of pre- and postope-
rative stage, agonists and antagonists of gonadotropin
releasing hormone, exogenic gonadotropins and estro-
gen-gestagen drugs to optimize the transplant function-
ing, maximal preservation of ovarian reservoir and
fertility recovery. However, the results of investigations
directed to the increase of a transplant viability by
exogenic growth factors were not efficient so they
can not be used in clinical practice. Consequently, the
tasks associated with the selection of transplantation
place, providing of vascularization, growth and deve-
lopment of follicles as well as improvement of oocytes
quality have remained unsolved.
Conclusion
It could be concluded that cryopreservation and
transplantation of ovarian tissue is an intensively deve-
loping technology for preservation of women reproduc-
tive and endocrine functions. In spite of promising re-
sults presented in this review, the effectiveness of
this technology nowadays unfortunately is low, that
stipulate the extension of further investigations in this
field. The following questions need to be answered:
which structural or molecular injuries occur during low-
temperature preservation? Is full-value development
of gametes possible after freeze-thawing?
10 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue1, 2013
Current tendencies in transplantation of frozen-
thawed ovarian tissue transplantation include optimi-
zation of freeze-thawing protocols and transplantation
technologies enabling to reduce post-transplantation
ischemic damages, preserve maximal pool of follicles,
determine an optimal amount of tissue for transplan-
tation for increasing the terms of transplant functioning
as well the site of transplantation for possible recovery
of fertility either natural or using IVF. Moreover, the
perspectives of low-temperature storage of ovarian
tissue are associated with the implementation in
laboratory practice of culturing of follicles in 3D scaf-
folds reconstructing the conditions for in vitro culturing
of the human follicles procured from frozen-thawed
fragments of ovary tissue [53, 54]. Thus, the develop-
ment of researches in the field of cryopreservation
and transplantation of ovarian tissue lead to the appea-
rance of new possibilities to restore the fertility at
pathologies of reproductive system of different gene-
sis.
50% примордиальных фолликулов от общего пула
гибнет в результате ишемических повреждений,
следовательно сокращаются сроки функциониро-
вания трансплантата и уменьшается вероятность
восстановления фертильности [26, 40]. Для умень-
шения степени ишемического повреждения в
литературе обсуждается возможность применения
различных веществ с антиоксидантными свойст-
вами во время забора фрагментов ткани яичника,
например витамина Е, аскорбиновой кислоты, ман-
нитола, однако большинство этих исследований но-
сило экспериментальный характер [14, 41, 49].
Кроме того, имеются данные [31], что быстрой
реваскуляризации трансплантата могут способст-
вовать факторы роста (фактор фибробластов,
трансформирующий фактор роста β, сосудистый
эндотелиальный фактор (VEGF)), а также уровень
гонадотропинов в организме. Показано, что вве-
дение экзогенных гонадотропинов приводит к уве-
личению эндогенного VEGF, улучшению васкуля-
ризации и фолликулярного развития трансплантата
[31]. В последнее время уделяется значительное
внимание обсуждению перспектив использования
схем гормональной поддержки пред- и послеопера-
ционного этапа: агонистов и антагонистов гонадо-
тропин-релизинг-гормона, экзогенных гонадотропи-
нов и эстроген-гестагенных препаратов с целью
оптимизации функционирования трансплантата,
максимального сохранения овариального резерва
и восстановления фертильности. Однако результа-
ты исследований, направленных на повышение
жизнеспособности трансплантата экзогенными
факторами роста, были не эффективны, поэтому
не могут быть использованы в клинической прак-
тике. Следовательно, вопросы, связанные с выбо-
ром места трансплантации, обеспечением реваску-
ляризации, роста и развития фолликулов, а также
улучшением качества ооцитов, остаются нерешен-
ными.
Заключение
Таким образом, криоконсервирование и транс-
плантация овариальной ткани – интенсивно раз-
вивающаяся технология сохранения репродуктив-
ной и эндокринной функции женщин. Несмотря на
приведенные выше многообещающие результаты,
к сожалению, эффективность данной технологии в
настоящее время невелика, что обуславливает раз-
витие дальнейших исследований в этой области.
Необходимо дать ответы на следующие вопросы:
какие структурные или молекулярные поврежде-
ния происходят в процессе низкотемпературного
консервирования? Возможно ли полноценное раз-
витие гамет после замораживания-отогрева?
Современные направления трансплантации
криоконсервированной овариальной ткани вклю-
чают оптимизацию как протоколов заморажива-
References
1. Adamyan L.V., Beloborodov S.M. ART potential in reproductive
function restoration after treatment of malignancies // Russian
Journal of Human Reproduction. – 2003. – N6. – P. 29–41.
2. Chub N.N. Morphofunctional state of human ovarian tissue at
stages of low-temperature preservation: Abstract of thesis …
of the candidate of biological sciences. – Kharkov, 1988. –
23 p.
3. Andersen C.Y., Rosendahl M., Byskov A.G. et al. Two suc-
cessful pregnancies following autotransplantation of frozen/
thawed ovarian tissue // Hum. Reprod. – 2008. – Vol. 23, N10. –
P. 2266–2272.
4. Bedaiwy M.A., Shahin A.Y., Falcone T. Reproductive organ
transplantation: advances and controversies // Fertil. Steril. –
2008. – Vol. 90, N6.– P. 2031–2055.
5. Blatt J. Pregnancy outcome in long-term survivors of child-
hood cancer // Med. Pediatr. Oncol. – 1999. – Vol. 33, N1. –
P. 29–33.
6. Boiso I., Martо А.M., Santalo А.J. et al. The meiotic spindle
configuration of human oocytes cryopreserved in the germinal
vesicle and metaphase II stage // Hum. Reprod. – 2002. –
Vol. 17, N7. – P. 1885–1891.
7. Boiso I., Veiga A., Tresserra F. et al. Ovarian tissue freezing, a
promising method for fertility preservation // Ref. Gynecol.
Obstet. – 2001. – Vol. 8, N6 – P. 448–452.
8. Bordes A., Lornage J., Demirci B. et al. Normal gestations and
live births after orthotopic autograft of vitrified-warmed hemi-
ovaries into ewes // Hum. Reprod. – 2005. – Vol. 20, N10. – P.
2745–2748.
9. Callejo J., Salvador C., Miralles A. et al. Long term ovarian
function evaluation after autografting by implantation with fresh
and frozen-thawed human ovarian tissue // J. Clin. Endocrinol.
Metab. – 2001. – Vol. 86, N9. – P. 4489–4494.
10. Candy C.J., Wood M.J., Whittingham D.G. Follicular develop-
ment in cryopreserved marmoset ovarian tissue after trans-
plantion // Hum. Reprod. – 1995. – Vol. 10, N9. – P. 2334–2338.
11. Choi J., Lee J.Y., Lee E. et al. Cryopreservation of the mouse
ovary inhibits the onset of primordial follicle development //
Cryobiology. – 2007, N1. – Vol. 54. – P. 55–62.
12. Cox S.L., Shaw J., Jenkin G. Transplantation of cryopreserved
fetal ovarian tissue to adult recipients in mice // J. Reprod.
Fertil. – 1996. – Vol. 107, N2. – P. 315–322.
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue1, 2013
11
ния-отогрева, так и технологии трансплантации,
которые позволят снизить посттрансплантацион-
ные ишемические повреждения, сохранить макси-
мальный пул фолликулов, определить оптимальное
количество ткани для трасплантации с целью
увеличения сроков функционирования трансплан-
тата, а также место трансплантации для возмож-
ности восстановления либо природной фертильнос-
ти, или с применением ЭКО. Кроме того, перспек-
тивы низкотемпературного хранения овариальной
ткани связывают с внедрением в лабораторную
практику культивирования фолликулов в новых
трехмерных системах, воссоздающих естествен-
ные условия для выращивания фолликулов че-
ловека in vitro из криоконсервированных фраг-
ментов ткани яичника [53, 54]. Таким образом, с
развитием научно-исследовательских работ в об-
ласти криоконсервирования и трансплантации
овариальной ткани появляются новые возможности
восстановления фертильности при патологиях
репродуктивной системы различного генеза.
Литература
1. Адамян Л.В., Белобородов С.М. Возможность сохранения
репродуктивной функции у онкологических больных//
Проблемы репродукции. – 2003. – №6. – С. 29–41.
2. Чуб Н.Н. Морфофункциональное состояние овариальной
ткани человека на этапах низкотемпературного консерви-
рования: Автореф. дис. … канд.биол.наук. – Харьков, 1988. –
23 с.
3. Andersen C.Y., Rosendahl M., Byskov A.G. et al. Two
successful pregnancies following autotransplantation of
frozen/thawed ovarian tissue // Hum. Reprod. – 2008. – Vol. 23,
№10. – P. 2266–2272.
4. Bedaiwy M.A., Shahin A.Y., Falcone T. Reproductive organ
transplantation: advances and controversies // Fertil. Steril. –
2008. – Vol. 90, №6.– P. 2031–2055.
5. Blatt J. Pregnancy outcome in long-term survivors of childhood
cancer // Med. Pediatr. Oncol. – 1999. – Vol. 33, №1. – P. 29–33.
6. Boiso I., Martо А.M., Santalo А.J. et al. The meiotic spindle
configuration of human oocytes cryopreserved in the germinal
vesicle and metaphase II stage // Hum. Reprod. – 2002. –
Vol. 17, №7. – P. 1885–1891.
7. Boiso I., Veiga A., Tresserra F. et al. Ovarian tissue freezing, a
promising method for fertility preservation // Ref. Gynecol.
Obstet. – 2001. – Vol. 8, №6 – P. 448–452.
8. Bordes A., Lornage J., Demirci B. et al. Normal gestations and
live births after orthotopic autograft of vitrified-warmed hemi-
ovaries into ewes // Hum. Reprod. – 2005. – Vol. 20, №10. –
P. 2745–2748.
9. Callejo J., Salvador C., Miralles A. et al. Long term ovarian
function evaluation after autografting by implantation with fresh
and frozen-thawed human ovarian tissue // J. Clin. Endocrinol.
Metab. – 2001. – Vol. 86, №9. – P. 4489–4494.
10. Candy C.J., Wood M.J., Whittingham D.G. Follicular develop-
ment in cryopreserved marmoset ovarian tissue after trans-
plantion // Hum. Reprod. – 1995. – Vol. 10, №9. – P. 2334–2338.
11. Choi J., Lee J.Y., Lee E. et al. Cryopreservation of the mouse
ovary inhibits the onset of primordial follicle development //
Cryobiology. – 2007, №1. – Vol. 54. – P. 55–62.
12. Cox S.L., Shaw J., Jenkin G. Transplantation of cryopreserved
fetal ovarian tissue to adult recipients in mice // J. Reprod.
Fertil. – 1996. – Vol. 107, №2. – P. 315–322.
13.Demeestere I., Simon P., Emiliani S. et al. Orthotopic and hete-
rotopic ovarian tissue transplantation // Hum. Reprod. Update. –
2009. – Vol. 15, N6. – P. 649–665.
14.Demeestere I., Simon P., Buxant F. et al. Ovarian function and
spontaneous pregnancy after combined heterotopic and or-
thotopic cryopreserved ovarian tissue transplantation in a pa-
tient previously treated with bone marrow transplantation:
case report // Hum. Reprod. – 2006. – Vol. 21, N8. – P. 2010–
2014.
15.Demeestere I., Simon P., Emiliani S. et al. Options to preserve
fertility before oncological treatment: cryopreservation of ova-
rian tissue and its clinical application // Acta. Clin. Belg. –
2006. – Vol. 61, N5. – P. 259–263.
16. Demirci B., Salle B., Frappart L. et al. Morphological alterations
and DNA fragmentation in oocytes from primordial and primary
follicles after freezing-thawing of ovarian cortex in sheep //
Fertil. Steril. – 2002. – Vol. 77, N3. – P. 595–600.
17.Donnez J., Dolmans M.M., Demylle D. et al. Livebirth after
orthotopic transplantation of cryopreserved ovarian tissue //
Lancet. – 2004. – Vol. 364, N9443. – P. 1405–1410.
18.Donnez J., Silber S., Andersen C.Y. et al. Children born after
autotransplantation of cryopreserved ovarian tissue. A review
of 13 live births // Ann. Med. – 2011. – Vol. 43, N6. – P. 437–450
19.Gook D.A., Osborn S.M., Bourne H., Johnston W.I. Fertilization
of human oocytes following cryopreservation; normal karyo-
types and absence of stray chromosomes // Hum. Reprod. –
1994. – Vol. 9, N4. – P. 684–691.
20.Gook D.A., Osborn S.M., Johnston W.I. Cryopreservation of
mouse and human oocytes using 1,2-propanediol and the con-
figuration of the meiotic spindle // Hum. Reprod. – 1993. –
Vol. 8, N7 – P. 1101–1109.
21.Gook D.A., Osborn S.M., Johnston W.I. Parthenogenetic acti-
vation of human oocytes following cryopreservation using
1,2-propanediol // Hum. Reprod.– 1995. – Vol. 10, N3. – P. 654–
658.
22.Gook D.A., Schiewe M.C., Osborn S.M. et al. Intracytoplasmic
sperm injection and embryo development of human oocytes
cryopreserved using 1,2-propanediol // Hum. Reprod. – 1995. –
Vol. 10, N10. – P. 2637–2641.
23.Gook D.A., Edgar D.H., Stern C. Effect of cooling rate and
dehydration regimen on the histological appearance of human
ovarian cortex following cryopreservation in 1,2-propanediol //
Hum. Reprod. – 1999. – Vol. 14, N8. – P. 2061–2068.
24.Gook D.A., Edgar D.H., Stern C. The effects of cryopreserva-
tion regimens on the morphology of human ovarian tissue //
Mol. Cell. Endocrinol. – 2000. – Vol. 169, N1–2. – P. 99–103.
25.Gosden R.G., Baird D.T., Wade J.C., Webb G. Restoration of
fertility to oophorectomized sheep by ovarian autografts stored
at –196°C // Hum. Reprod. –1994. – Vol. 9, N4. – P. 597–603.
26.Gosden R.G. Low temperature storage and grafting of human
ovarian tissue // Mol. Cell. Endocrinol. – 2000. – Vol. 163, N1–
2. – P. 125–129.
27.Green S.H., Smith A.U., Zuckerman S. The number of ovarian
oocytes in ovarian autografts after freezing and thawing // J.
Endocrinol. – 1956. – Vol. 13, N3. – P. 330–334.
28.Grischenko V.I., Tchoob N.N., Lobyntseva G.S. et al. Creation
of a bank of cryopreserved human ovarian tissue for allotran-
splantations in gynaecology // Сryobiology – 1987. – Vol. 3. –
P. 7–11.
29.Harp R., Leibach J., Black J. et al. Cryopreservation of murine
ovarian tissue // Cryobiology – 1994. –Vol. 31, N4. – P. 336–
343.
30.Hovatta O., Silye R., Krausz T. et al. Cryopreservation of human
ovarian tissue using dimethylsulphoxide and propanediol-suc-
rose as cryoprotectants // Hum. Reprod. – 1996. – Vol. 11,
N6. – P. 1268–1272.
31.Imthurn B., Cox S., Jenkin G. et al. Gonadotrophin administration
can benefit ovarian tissue grafted to the body wall: implications
for human ovarian grafting // Mol. Cell. Endocrinol. – 2000. –
Vol. 163, N1–2. – P. 141–146.
32. Isachenko V., Isachenko E., Kreienberg R. et al. Human ovarian
tissue cryopreservation: quality of follicles as a criteria of ef-
12 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue1, 2013
13.Demeestere I., Simon P., Emiliani S. et al. Orthotopic and hete-
rotopic ovarian tissue transplantation // Hum. Reprod. Update. –
2009. – Vol. 15, №6. – P. 649–665.
14.Demeestere I., Simon P., Buxant F. et al. Ovarian function and
spontaneous pregnancy after combined heterotopic and or-
thotopic cryopreserved ovarian tissue transplantation in a
patient previously treated with bone marrow transplantation:
case report // Hum. Reprod. – 2006. – Vol. 21, №8. – P. 2010–
2014.
15.Demeestere I., Simon P., Emiliani S. et al. Options to preserve
fertility before oncological treatment: cryopreservation of ova-
rian tissue and its clinical application // Acta. Clin. Belg. –
2006. – Vol. 61, №5. – P. 259–263.
16. Demirci B., Salle B., Frappart L. et al. Morphological alterations
and DNA fragmentation in oocytes from primordial and primary
follicles after freezing-thawing of ovarian cortex in sheep //
Fertil. Steril. – 2002. – Vol. 77, №3. – P. 595–600.
17.Donnez J., Dolmans M.M., Demylle D. et al. Livebirth after
orthotopic transplantation of cryopreserved ovarian tissue //
Lancet. – 2004. – Vol. 364, №9443. – P. 1405–1410.
18.Donnez J., Silber S., Andersen C.Y. et al. Children born after
autotransplantation of cryopreserved ovarian tissue. A review
of 13 live births // Ann. Med. – 2011. – Vol. 43, №6. – P. 437–
450.
19.Gook D.A., Osborn S.M., Bourne H., Johnston W.I. Fertilization
of human oocytes following cryopreservation; normal karyo-
types and absence of stray chromosomes // Hum. Reprod. –
1994. – Vol. 9, №4. – P. 684–691.
20.Gook D.A., Osborn S.M., Johnston W.I. Cryopreservation of
mouse and human oocytes using 1,2-propanediol and the con-
figuration of the meiotic spindle // Hum. Reprod. – 1993. –
Vol. 8, №7 – P. 1101–1109.
21.Gook D.A., Osborn S.M., Johnston W.I. Parthenogenetic activa-
tion of human oocytes following cryopreservation using 1,2-
propanediol // Hum. Reprod.– 1995. – Vol. 10, №3. – P. 654–658.
22.Gook D.A., Schiewe M.C., Osborn S.M. et al. Intracytoplasmic
sperm injection and embryo development of human oocytes
cryopreserved using 1,2-propanediol // Hum. Reprod. – 1995. –
Vol. 10, №10. – P. 2637–2641.
23.Gook D.A., Edgar D.H., Stern C. Effect of cooling rate and
dehydration regimen on the histological appearance of human
ovarian cortex following cryopreservation in 1,2-propanediol //
Hum. Reprod. – 1999. – Vol. 14, №8. – P. 2061–2068.
24.Gook D.A., Edgar D.H., Stern C. The effects of cryopreserva-
tion regimens on the morphology of human ovarian tissue //
Mol. Cell. Endocrinol. – 2000. – Vol. 169, №1–2. – P. 99–103.
25.Gosden R.G., Baird D.T., Wade J.C., Webb G. Restoration of
fertility to oophorectomized sheep by ovarian autografts stored
at –196°C // Hum. Reprod. –1994. – Vol. 9, №4. – P. 597–603.
26.Gosden R.G. Low temperature storage and grafting of human
ovarian tissue // Mol. Cell. Endocrinol. – 2000. – Vol. 163, №1–
2. – P. 125–129.
27.Green S.H., Smith A.U., Zuckerman S. The number of ovarian
oocytes in ovarian autografts after freezing and thawing // J.
Endocrinol. – 1956. – Vol. 13, №3. – P. 330–334.
28.Grischenko V.I., Tchoob N.N., Lobyntseva G.S. et al. Creation of
a bank of cryopreserved human ovarian tissue for allotran-
splantations in gynaecology // Сryobiology – 1987. – Vol. 3. – P. 7–11.
29.Harp R., Leibach J., Black J. et al. Cryopreservation of murine
ovarian tissue // Cryobiology – 1994. –Vol. 31, №4. – P. 336–343.
30.Hovatta O., Silye R., Krausz T. et al. Cryopreservation of human
ovarian tissue using dimethylsulphoxide and propanediol-suc-
rose as cryoprotectants // Hum. Reprod. – 1996. – Vol. 11,
№6. – P. 1268–1272.
31.Imthurn B., Cox S., Jenkin G. et al. Gonadotrophin administration
can benefit ovarian tissue grafted to the body wall: implications
for human ovarian grafting // Mol. Cell. Endocrinol. – 2000. –
Vol. 163, №1–2. – P. 141–146.
32. Isachenko V., Isachenko E., Kreienberg R. et al. Human ovarian
tissue cryopreservation: quality of follicles as a criteria of ef-
fectiveness // Reprod. Biomed. Online. – 2010. – Vol. 20, №4. –
P. 441–442.
fectiveness // Reprod. Biomed. Online. – 2010. – Vol. 20, N4. –
P. 441–442.
33.Keros V., Xella S., Hultenby K. et al. Vitrification versus cont-
rolled-rate freezing in cryopreservation of human ovarian tis-
sue // Hum. Reprod. – 2009. – Vol. 24, N7. – P. 1670–1683.
34.Klock S.C., Zhang J.X., Kazer R.R. Fertility preservation for
female cancer patients: early clinical experience // Fertil. Ste-
ril. – 2010. – Vol. 94, N1. – P. 149–155.
35.Lee R.K., Li S.H., Lu C.H. et al. Abnormally low expression of
connexin 37 and connexin 43 in subcutaneously transplanted
cryopreserved mouse ovarian tissue // J. Assist. Reprod. Ge-
net. – 2008, N9–10. – Vol. 25. – P. 489–497.
36.Meirow D., Nugent D. The effects of radiotherapy and che-
motherapy on female reproduction // Hum. Reprod. Update. –
2001. – Vol. 7, N6. – P. 535–543.
37.Meirow D., Levron J., Eldar-Geva T. et al. Pregnancy after
transplantation of cryopreserved ovarian tissue in a patient
with ovarian failure after chemotherapy // N. Engl. J. Med. –
2005. – Vol. 353, N3. – P. 318–321.
38.Navarro-Costa P., Correia S.C., Gouveia-Oliveira A. et al. Ef-
fects of mouse ovarian tissue cryopreservation on granulosa
cell-oocyte interaction // Hum. Reprod. – 2005. – Vol. 20, N6. –
P. 1607–1614.
39.Newton H., Aubard Y., Rutherford A. et al. Low temperature
storage and grafting of human ovarian tissue // Hum. Reprod. –
1996. – Vol. 11, N7. – P. 1487–1491.
40.Nugent D., Meirow D., Brook P.F. et al. Transplantation in
reproductive medicine: previous experience, present know-
ledge and future prospects // Hum. Reprod. Update. – 1997. –
Vol. 3, N3. – P. 267–280.
41.Nugent D., Newton H., Gallivan L. et al. Protective effect of
vitamin E on ischaemia-reperfusion injury in ovarian grafts //
J. Reprod. Fertil. – 1998. –Vol. 114, N2. – P. 341–346.
42.Oktay K., Newton H., Gosden R.G. Transplantation of cryopre-
served human ovarian tissue results in follicle growth initiation
in SCID mice // Fertil. Steril. – 2000. – Vol. 73, N3. – P. 599–603.
43.Oktay K., Karlikaya G. Ovarian function after transplantation
of frozen, banked autologous ovarian tissue // N. Engl. J. Med. –
2000. – Vol. 342, N25. – P. 1919.
44.Oktay K., Tilly J. Livebirth after cryopreserved ovarian tissue
autotransplantation // Lancet. – 2004. – Vol. 364, N9451. –
P. 2091–2092.
45. Oktay K. Ovarian tissue cryopreservation and transplantation:
preliminary findings and implications for cancer patients // Hum.
Reprod. Update. – 2001. –Vol. 7, N6. – 526–534.
46.Parrot D. The fertility of mice with orthotopic ovarian grafts
derived from frozen tissue // J. Reprod. Fertil. – 1960. – Vol. 1. –
P. 230–241.
47.Porcu E., Fabbri R., Ciotti P.M. et al. Oocytes or embryo sto-
rage // Fertil. Steril. – 2002. – Vol. 78, N1. – 5–38.
48.Rosendahl M., Loft A., Byskov A.G. et al. Biochemical pregnan-
cy after fertilization of an oocyte aspirated from a heterotopic
autotransplant of cryopreserved ovarian tissue: case report //
Hum. Reprod. – 2006. – Vol. 21, N8. – 2006–2009.
49.Sagsz N., Kisa U., Apan A. Ischaemia-reperfusion injury of rat
ovary and the effects of vitamin C, mannitol and verapamil //
Hum. Reprod. – 2002. – Vol. 17, N11. – P. 2972–2976.
50.Sonmezer M., Oktay K. Orthotopic and heterotopic ovarian
tissue transplantation // Best Pract. Res. Clin. Obstet.
Gynaecol. – 2010 – Vol. 24, N1. – P. 113–126.
51.Sugimoto M., Maeda S., Manabe N. et al. Development of infantile
rat ovaries autotransplanted after cryopreservation by
vitrification // Theriogenology. – 2000. – Vol. 53, N5. – P. 1093–
1103.
52.Sztein J., Sweet H., Farley J., Mobraaten K. Cryopreservation
and orthotopic transplantation of mouse ovaries: new ap-
proach in gamete banking // Biol. Reprod. – 1998. – Vol. 58,
N1. – P. 1071–1074.
53. Xu M., West-Farrell E.R., Stouffer R.L. et al. Encapsulated
three-dimensional culture supports development of nonhuman
primate secondary follicles// Biol. Reprod. – 2009. – Vol. 58,
N3 – P. 587–594.
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue1, 2013
13
33.Keros V., Xella S., Hultenby K. et al. Vitrification versus cont-
rolled-rate freezing in cryopreservation of human ovarian tis-
sue // Hum. Reprod. – 2009. – Vol. 24, №7. – P. 1670–1683.
34.Klock S.C., Zhang J.X., Kazer R.R. Fertility preservation for
female cancer patients: early clinical experience // Fertil. Ste-
ril. – 2010. – Vol. 94, №1. – P. 149–155.
35.Lee R.K., Li S.H., Lu C.H. et al. Abnormally low expression of
connexin 37 and connexin 43 in subcutaneously transplanted
cryopreserved mouse ovarian tissue // J. Assist. Reprod. Ge-
net. – 2008, №9–10. – Vol. 25. – P. 489–497.
36.Meirow D., №ugent D. The effects of radiotherapy and che-
motherapy on female reproduction // Hum. Reprod. Update. –
2001. – Vol. 7, №6. – P. 535–543.
37.Meirow D., Levron J., Eldar-Geva T. et al. Pregnancy after
transplantation of cryopreserved ovarian tissue in a patient
with ovarian failure after chemotherapy // N. Engl. J. Med. –
2005. – Vol. 353, №3. – P. 318–321.
38.Navarro-Costa P., Correia S.C., Gouveia-Oliveira A. et al. Ef-
fects of mouse ovarian tissue cryopreservation on granulosa
cell-oocyte interaction // Hum. Reprod. – 2005. – Vol. 20, №6. –
P. 1607–1614.
39.Newton H., Aubard Y., Rutherford A. et al. Low temperature
storage and grafting of human ovarian tissue // Hum. Reprod. –
1996. – Vol. 11, №7. – P. 1487–1491.
40.Nugent D., Meirow D., Brook P.F. et al. Transplantation in
reproductive medicine: previous experience, present know-
ledge and future prospects // Hum. Reprod. Update. – 1997. –
Vol. 3, №3. – P. 267–280.
41.Nugent D., №ewton H., Gallivan L. et al. Protective effect of
vitamin E on ischaemia-reperfusion injury in ovarian grafts //
J. Reprod. Fertil. – 1998. –Vol. 114, №2. – P. 341–346.
42.Oktay K., Newton H., Gosden R.G. Transplantation of cryopre-
served human ovarian tissue results in follicle growth initiation in
SCID mice // Fertil. Steril. – 2000. – Vol. 73, №3. – P. 599–603.
43.Oktay K., Karlikaya G. Ovarian function after transplantation
of frozen, banked autologous ovarian tissue // N. Engl. J. Med. –
2000. – Vol. 342, №25. – P. 1919.
44.Oktay K., Tilly J. Livebirth after cryopreserved ovarian tissue
autotransplantation // Lancet. – 2004. – Vol. 364, №9451. –
P. 2091–2092.
45.Oktay K. Ovarian tissue cryopreservation and transplantation:
preliminary findings and implications for cancer patients // Hum.
Reprod. Update. – 2001. –Vol. 7, №6. – 526–534.
46.Parrot D. The fertility of mice with orthotopic ovarian grafts
derived from frozen tissue // J. Reprod. Fertil. – 1960. – Vol. 1. –
P. 230–241.
47.Porcu E., Fabbri R., Ciotti P.M. et al. Oocytes or embryo storage //
Fertil. Steril. – 2002. – Vol. 78, №1. – 5–38.
48.Rosendahl M., Loft A., Byskov A.G. et al. Biochemical pregnan-
cy after fertilization of an oocyte aspirated from a heterotopic
autotransplant of cryopreserved ovarian tissue: case report //
Hum. Reprod. – 2006. – Vol. 21, №8. – 2006–2009.
49.Sagsz N., Kisa U., Apan A. Ischaemia-reperfusion injury of rat
ovary and the effects of vitamin C, mannitol and verapamil //
Hum. Reprod. – 2002. – Vol. 17, №11. – P. 2972–2976.
50.Sonmezer M., Oktay K. Orthotopic and heterotopic ovarian
tissue transplantation // Best Pract. Res. Clin. Obstet. Gynaecol. –
2010 – Vol. 24, №1. – P. 113–126.
51.Sugimoto M., Maeda S., Manabe N. et al. Development of infantile
rat ovaries autotransplanted after cryopreservation by vitrifica-
tion // Theriogenology. – 2000. – Vol. 53, №5. – P. 1093–1103.
52.Sztein J., Sweet H., Farley J., Mobraaten K. Cryopreservation
and orthotopic transplantation of mouse ovaries: new ap-
proach in gamete banking // Biol. Reprod. – 1998. – Vol. 58,
№1. – P. 1071–1074.
53.Xu M., West-Farrell E.R., Stouffer R.L. et al. Encapsulated
three-dimensional culture supports development of nonhuman
primate secondary follicles// Biol. Reprod. – 2009. – Vol. 58,
№3 – P. 587–594.
54. Xu M., Kreeger P.K., Shea L.D. et al. Tissue-engineered follicles
produce live, fertile offspring// Tiss. Eng. – 2006. – Vol. 12,
№10 – P. 2739–2746.
54. Xu M., Kreeger P.K., Shea L.D. et al. Tissue-engineered follicles
produce live, fertile offspring// Tiss. Eng. – 2006. – Vol. 12,
N10 – P. 2739–2746.
14 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue1, 2013
|