Чувствительность трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов к регуляции фенилэфрином после экспозиции в растворах диметилсульфоксида и 1,2-пропандиола, а также замораживания-отогрева
Методом микрофлуориметрии одиночных клеток оценивали интенсивность флуоресценции агрегатов зонда JС-1 и агонист-индуцированные изменения трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов крыс до и после замораживания-отогрева. Показано, что экспозиция клеток в растворах 10% диметилсульфоксида (ДМС...
Saved in:
| Published in: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Date: | 2013 |
| Main Authors: | , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2013
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68717 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Чувствительность трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов к регуляции фенилэфрином после экспозиции в растворах диметилсульфоксида и 1,2-пропандиола, а также замораживания-отогрева / М.Ю. Малюкина, Н.С. Кавок, И.А. Боровой, Е.А. Аверченко // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2013. — Т. 23, № 2. — С. 143-151. — Бібліогр.: 22 назв. — рос., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-68717 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Малюкина, М.Ю. Кавок, Н.С. Боровой, И.А. Аверченко, Е.А. 2014-09-27T12:40:38Z 2014-09-27T12:40:38Z 2013 Чувствительность трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов к регуляции фенилэфрином после экспозиции в растворах диметилсульфоксида и 1,2-пропандиола, а также замораживания-отогрева / М.Ю. Малюкина, Н.С. Кавок, И.А. Боровой, Е.А. Аверченко // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2013. — Т. 23, № 2. — С. 143-151. — Бібліогр.: 22 назв. — рос., англ. 2307-6143 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68717 547.569.2:611.36.018.1:577.336 Методом микрофлуориметрии одиночных клеток оценивали интенсивность флуоресценции агрегатов зонда JС-1 и агонист-индуцированные изменения трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов крыс до и после замораживания-отогрева. Показано, что экспозиция клеток в растворах 10% диметилсульфоксида (ДМСО) или 1,2-пропандиола (1,2-ПД) в течение часа и последующая отмывка не приводили к уменьшению флуоресценции агрегатов красителя. После замораживания-отогрева клеток в присутствии данных криопротекторов (2-ступенчатое замораживание до температуры жидкого азота, отогрев и отмывка криопротекторов) отмечено снижение интенсивности флуоресценции агрегатов красителя до (83 ± 6)% от контроля в случае использования ДМСО, в случае 1,2-ПД этот показатель составил менее 10%. В отличие от свежевыделенных клеток, в которых отмечалось повышение интенсивности флуоресценции агрегатов на 30% в ответ на краткосрочную стимуляцию фенилэфрином (10⁻⁵ М), в гепатоцитах, инкубированных в растворах ДМСО, динамика ответа нарушалась. После замораживания-отогрева клеток отмечено частичное восстановление их чувствительности к действию гормона, однако ответ регистрировался только при повышении концентрации гормона до 10⁻⁴ М. Методом мікрофлуориметрії поодиноких клітин оцінювали інтенсивність флуоресценції агрегатів зонда JС-1 та агоніст-індуковані зміни трансмембранного потенціалу мітохондрій гепатоцитів щурів до та після заморожування-відігрівання. Показано, що експозиція клітин у розчинах 10% диметилсульфоксиду (ДМСО) або 1,2-пропандіолу (1,2-ПД) впродовж години і подальше відмивання не призводили до зменшення флуоресценції агрегатів барвника. Після заморожування-відігрівання клітин в присутності цих кріопротекторів (2-ступінчасте заморожування до температури рідкого азоту, відігрів і відмивання кріопротекторів) встановлено зниження інтенсивності флуоресценції агрегатів барвника до (83 ± 6)% від контролю у випадку використання ДМСО, у випадку 1,2-ПД цей показник був менше 10%. На відміну від свіжовиділених клітин, в яких відмічено підвищення інтенсивності флуоресценції агрегатів на 30% у відповідь на короткострокову стимуляцію фенилефрином (10⁻⁵ М), в гепатоцитах, інкубованих у розчині ДМСО, динаміка відповіді порушувалась. Після заморожування-відігрівання клітин спостерігали часткове відновлення їх чутливості до дії гормона, але відповідь реєстрували лише при підвищенні концентрації гормона до 10⁻⁴ М. Intensity of JC-1 probe aggregates fluorescence and agonist-induced changes in mitochondria transmembrane potential of rat hepatocytes prior to and after freeze-thawing were assessed by single-cell microfluorimetry. It was shown that incubation of the cells in 10% dimethyl sulfoxide (DMSO) and 1,2-propanediol (1,2-PD) solutions within an hour and the following washing decreased the fluorescence of dye aggregates. After freeze-thawing of cells with the cryoprotectants (2-step freezing down to the temperature of liquid nitrogen, thawing and washing-out the cryoprotectants) the intensity of dye aggregates fluorescence decreased down to 83 ± 6% of control in case of DMSO, and in the case of 1,2-PD the index made less than 10%. Unlike the fresh cell suspension where the rise of aggregates fluorescence intensity by 30% was found in response to short-term stimulation with phenylephrine (10⁻⁵ M) the hepatocyte suspension incubated in DMSO solution showed no response. After freeze-thawing of cells we revealed a partial recovery of their sensitivity to the hormone effect, but the response was recorded only after increasing the hormone concentration up to 10⁻⁴ M. ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Теоретическая и экспериментальная криобиология Чувствительность трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов к регуляции фенилэфрином после экспозиции в растворах диметилсульфоксида и 1,2-пропандиола, а также замораживания-отогрева Sensitivity of Hepatocyte Mitochondria Transmembrane Potential to Regulation with Phenylephrine after Exposure in Dimethyl Sulfoxide and 1,2-Propanediol Solutions, and Freeze-Thawing Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Чувствительность трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов к регуляции фенилэфрином после экспозиции в растворах диметилсульфоксида и 1,2-пропандиола, а также замораживания-отогрева |
| spellingShingle |
Чувствительность трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов к регуляции фенилэфрином после экспозиции в растворах диметилсульфоксида и 1,2-пропандиола, а также замораживания-отогрева Малюкина, М.Ю. Кавок, Н.С. Боровой, И.А. Аверченко, Е.А. Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| title_short |
Чувствительность трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов к регуляции фенилэфрином после экспозиции в растворах диметилсульфоксида и 1,2-пропандиола, а также замораживания-отогрева |
| title_full |
Чувствительность трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов к регуляции фенилэфрином после экспозиции в растворах диметилсульфоксида и 1,2-пропандиола, а также замораживания-отогрева |
| title_fullStr |
Чувствительность трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов к регуляции фенилэфрином после экспозиции в растворах диметилсульфоксида и 1,2-пропандиола, а также замораживания-отогрева |
| title_full_unstemmed |
Чувствительность трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов к регуляции фенилэфрином после экспозиции в растворах диметилсульфоксида и 1,2-пропандиола, а также замораживания-отогрева |
| title_sort |
чувствительность трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов к регуляции фенилэфрином после экспозиции в растворах диметилсульфоксида и 1,2-пропандиола, а также замораживания-отогрева |
| author |
Малюкина, М.Ю. Кавок, Н.С. Боровой, И.А. Аверченко, Е.А. |
| author_facet |
Малюкина, М.Ю. Кавок, Н.С. Боровой, И.А. Аверченко, Е.А. |
| topic |
Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| topic_facet |
Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| publishDate |
2013 |
| language |
Russian |
| container_title |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Sensitivity of Hepatocyte Mitochondria Transmembrane Potential to Regulation with Phenylephrine after Exposure in Dimethyl Sulfoxide and 1,2-Propanediol Solutions, and Freeze-Thawing |
| description |
Методом микрофлуориметрии одиночных клеток оценивали интенсивность флуоресценции агрегатов зонда JС-1 и агонист-индуцированные изменения трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов крыс до и после замораживания-отогрева. Показано, что экспозиция клеток в растворах 10% диметилсульфоксида (ДМСО) или 1,2-пропандиола (1,2-ПД) в течение часа и последующая отмывка не приводили к уменьшению флуоресценции агрегатов красителя. После замораживания-отогрева клеток в присутствии данных криопротекторов (2-ступенчатое замораживание до температуры жидкого азота, отогрев и отмывка криопротекторов) отмечено снижение интенсивности флуоресценции агрегатов красителя до (83 ± 6)% от контроля в случае использования ДМСО, в случае 1,2-ПД этот показатель составил менее 10%. В отличие от свежевыделенных клеток, в которых отмечалось повышение интенсивности флуоресценции агрегатов на 30% в ответ на краткосрочную стимуляцию фенилэфрином (10⁻⁵ М), в гепатоцитах, инкубированных в растворах ДМСО, динамика ответа нарушалась. После замораживания-отогрева клеток отмечено частичное восстановление их чувствительности к действию гормона, однако ответ регистрировался только при повышении концентрации гормона до 10⁻⁴ М.
Методом мікрофлуориметрії поодиноких клітин оцінювали інтенсивність флуоресценції агрегатів зонда JС-1 та агоніст-індуковані зміни трансмембранного потенціалу мітохондрій гепатоцитів щурів до та після заморожування-відігрівання. Показано, що експозиція клітин у розчинах 10% диметилсульфоксиду (ДМСО) або 1,2-пропандіолу (1,2-ПД) впродовж години і подальше відмивання не призводили до зменшення флуоресценції агрегатів барвника. Після заморожування-відігрівання клітин в присутності цих кріопротекторів (2-ступінчасте заморожування до температури рідкого азоту, відігрів і відмивання кріопротекторів) встановлено зниження інтенсивності флуоресценції агрегатів барвника до (83 ± 6)% від контролю у випадку використання ДМСО, у випадку 1,2-ПД цей показник був менше 10%. На відміну від свіжовиділених клітин, в яких відмічено підвищення інтенсивності флуоресценції агрегатів на 30% у відповідь на короткострокову стимуляцію фенилефрином (10⁻⁵ М), в гепатоцитах, інкубованих у розчині ДМСО, динаміка відповіді порушувалась. Після заморожування-відігрівання клітин спостерігали часткове відновлення їх чутливості до дії гормона, але відповідь реєстрували лише при підвищенні концентрації гормона до 10⁻⁴ М.
Intensity of JC-1 probe aggregates fluorescence and agonist-induced changes in mitochondria transmembrane potential of rat hepatocytes prior to and after freeze-thawing were assessed by single-cell microfluorimetry. It was shown that incubation of the cells in 10% dimethyl sulfoxide (DMSO) and 1,2-propanediol (1,2-PD) solutions within an hour and the following washing decreased the fluorescence of dye aggregates. After freeze-thawing of cells with the cryoprotectants (2-step freezing down to the temperature of liquid nitrogen, thawing and washing-out the cryoprotectants) the intensity of dye aggregates fluorescence decreased down to 83 ± 6% of control in case of DMSO, and in the case of 1,2-PD the index made less than 10%. Unlike the fresh cell suspension where the rise of aggregates fluorescence intensity by 30% was found in response to short-term stimulation with phenylephrine (10⁻⁵ M) the hepatocyte suspension incubated in DMSO solution showed no response. After freeze-thawing of cells we revealed a partial recovery of their sensitivity to the hormone effect, but the response was recorded only after increasing the hormone concentration up to 10⁻⁴ M.
|
| issn |
2307-6143 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68717 |
| citation_txt |
Чувствительность трансмембранного потенциала митохондрий гепатоцитов к регуляции фенилэфрином после экспозиции в растворах диметилсульфоксида и 1,2-пропандиола, а также замораживания-отогрева / М.Ю. Малюкина, Н.С. Кавок, И.А. Боровой, Е.А. Аверченко // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2013. — Т. 23, № 2. — С. 143-151. — Бібліогр.: 22 назв. — рос., англ. |
| work_keys_str_mv |
AT malûkinamû čuvstvitelʹnostʹtransmembrannogopotencialamitohondriigepatocitovkregulâciifeniléfrinomposleékspoziciivrastvorahdimetilsulʹfoksidai12propandiolaatakžezamoraživaniâotogreva AT kavokns čuvstvitelʹnostʹtransmembrannogopotencialamitohondriigepatocitovkregulâciifeniléfrinomposleékspoziciivrastvorahdimetilsulʹfoksidai12propandiolaatakžezamoraživaniâotogreva AT borovoiia čuvstvitelʹnostʹtransmembrannogopotencialamitohondriigepatocitovkregulâciifeniléfrinomposleékspoziciivrastvorahdimetilsulʹfoksidai12propandiolaatakžezamoraživaniâotogreva AT averčenkoea čuvstvitelʹnostʹtransmembrannogopotencialamitohondriigepatocitovkregulâciifeniléfrinomposleékspoziciivrastvorahdimetilsulʹfoksidai12propandiolaatakžezamoraživaniâotogreva AT malûkinamû sensitivityofhepatocytemitochondriatransmembranepotentialtoregulationwithphenylephrineafterexposureindimethylsulfoxideand12propanediolsolutionsandfreezethawing AT kavokns sensitivityofhepatocytemitochondriatransmembranepotentialtoregulationwithphenylephrineafterexposureindimethylsulfoxideand12propanediolsolutionsandfreezethawing AT borovoiia sensitivityofhepatocytemitochondriatransmembranepotentialtoregulationwithphenylephrineafterexposureindimethylsulfoxideand12propanediolsolutionsandfreezethawing AT averčenkoea sensitivityofhepatocytemitochondriatransmembranepotentialtoregulationwithphenylephrineafterexposureindimethylsulfoxideand12propanediolsolutionsandfreezethawing |
| first_indexed |
2025-12-07T19:13:53Z |
| last_indexed |
2025-12-07T19:13:53Z |
| _version_ |
1850878023160561664 |