Криоконсервирование мезенхимальных стромальных клеток в широкопористых объемных альгинат-желатиновых носителях
Saved in:
| Published in: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Date: | 2013 |
| Main Authors: | , , , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2013
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68767 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Криоконсервирование мезенхимальных стромальных клеток в широкопористых объемных альгинат-желатиновых носителях / Ю.А. Петренко, А. Катцен-Глоба, И. Мейзер, Р.В. Иванов, В.И.Лозинский , Х. Циммерманн, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2013. — Т. 23, № 4. — С. 351-354. — Бібліогр.: 5 назв. — рос., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859723382919004160 |
|---|---|
| author | Петренко, Ю.А. Катцен-Глоба, А. Мейзер, И. Иванов, Р.В. Лозинский, В.И. Циммерманн, Х. Петренко, А.Ю. |
| author_facet | Петренко, Ю.А. Катцен-Глоба, А. Мейзер, И. Иванов, Р.В. Лозинский, В.И. Циммерманн, Х. Петренко, А.Ю. |
| citation_txt | Криоконсервирование мезенхимальных стромальных клеток в широкопористых объемных альгинат-желатиновых носителях / Ю.А. Петренко, А. Катцен-Глоба, И. Мейзер, Р.В. Иванов, В.И.Лозинский , Х. Циммерманн, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2013. — Т. 23, № 4. — С. 351-354. — Бібліогр.: 5 назв. — рос., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| first_indexed | 2025-12-01T11:03:19Z |
| format | Article |
| fulltext |
*Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию:
ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015;
тел.: (+38 057) 373-30-34, факс: (+38 057) 373-30-84,
электронная почта: yu.a.petrenko@gmail.com
*To whom correspondence should be addressed:
23, Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015;
tel.:+380 57 373 3034, fax: +380 57 373 3084,
e-mail: yu.a.petrenko@gmail.com
УДК 611.018.2/.6+615.014.41:664.644.7
Ю.А. Петренко1*, А. Катцен-Глоба2, И. Мейзер2, Р.В. Иванов3,
В.И.Лозинский3, Х. Циммерманн2, А.Ю. Петренко1
Криоконсервирование мезенхимальных стромальных клеток в
широкопористых объемных альгинат-желатиновых носителях#
UDC 611.018.2/.6+615.014.41:664.644.7
Y.A. Petrenko1*, A. Katsen-Globa2, I. Meiser2, R.V. Ivanov3,
V.I. Lozinsky3, H. Zimmermann2, A.Y. Petrenko1
Cryopreservation of Mesenchymal Stromal Cells within Wide-Porous
Three-Dimensional Alginate-Gelatin Scaffolds#
Ключевые слова: мезенхимальные стромальные клетки, криоконсервирование, альгинат-желатиновые носители,
тканевая инженерия.
Ключові слова: мезенхімальні стромальні клітини, кріоконсервування, альгінат-желатинові носії, тканинна інженерія.
Key words: mesenchymal stromal cells, cryopreservation, alginate-gelatin scaffolds, tissue engineering.
1Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the
National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
2Department for Biophysics and Cryotechnology, Fraunhofer
Institute for Biomedical Engineering, St. Ingbert, Germany.
3A.N. Nesmeyanov Institute of Organoelement Compounds of the
Russian Academy of Sciences, Moscow, Russian Federation
1Институт проблем криобиологии и криомедицины
НАН Украины, г. Харьков, Украина
2Отдел биофизики и криотехнологий, Институт
биомедицинской инженерии Общества Фраунгофера,
г. Санкт-Ингберт, Германия
3Институт элементоорганических соединений
им. А.Н. Несмеянова РАН, г. Москва, Россия
Поступила 15.06.2013
Принята в печать 01.12.2013
Проблемы криобиологии и криомедицины. – 2013. – Т. 23, №4. – С. 351–354.
© 2013 Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины
Received June, 15, 2013
Accepted December, 1, 2013
Problems of Cryobiology and Cryomedicine. – 2013. – Vol. 23, Nr. 4. – P. 351–354.
© 2013 Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
В настоящее время значительное количество ис-
следований посвящено оценке морфофункциональ-
ных свойств мультипотентных мезенхимальных
стромальных клеток (МСК) из различных источников
при монослойном культивировании in vitro [1]. Вместе
с тем монослойное культивирование не может
полностью имитировать природное окружение клеток
in vivo. Для достижения объемной организации кле-
точных элементов вне организма используют трех-
мерные носители (скаффолды) на основе различных
материалов [2]. Ранее нами были проведены иссле-
дования, посвященные оценке биосовместимости, а
также способности различных типов матриц-носи-
телей обеспечивать адгезию, пролиферацию и направ-
ленную дифференцировку МСК при объемном куль-
тивировании [4, 5]. Наиболее выраженный результат
был получен при использовании широкопористых
криогелевых альгинат-желатиновых носителей – в
условиях трехмерного культивирования МСК сохра-
няли способность к пролиферации и мультилинейной
дифференцировке [5]. Создание биоэквивалентов тка-
ни является трудоемким и сложным процессом,
включающим выделение и экспансию клеток, заселе-
ние в объемные носители и последующую диффе-
Nowadays, a large number of investigations is
intended to evaluate morphological and functional
properties of multipotent mesenchymal stromal cells
(MSCs) from various sources during in vitro monolayer
culture [1]. However, the monolayer culture can not
adequately simulate the conditions the cells experiencing
in vivo. To realize spatial organization of cells ex vivo
the three-dimensional carriers (scaffolds) based on vari-
ous materials are used [2]. We reported previously the
evaluations of biocompatibility of different types of
carriers and their ability to promote adhesion, proli-
feration and induced differentiation of MSCs during
three-dimensional culture [4, 5]. The most remarkable
results were obtained when using the wide-porous cryo-
gel alginate-gelatin carriers: during three-dimensional
culture the MSCs retained the ability for proliferation
and multilineage differentiation [5]. The formation of
tissue bioequivalents is a time-consuming and complex
process, which involve the selection and expansion of
cells, their seeding into three-dimensional carriers and
subsequent differentiation in a given direction. This could
be supported by development of effective cryopreserva-
tion methods that will allow to preserve morphological
and functional characteristics of the cells in three-dimen-
день стволовой клетки. краткое сообщение stem cell day. short communication
#This reseach was presented at minisymposium Stem Cell Day, held
in Kiev, Ukraine, on the 24th of May, 2013.
#Данное исследование было представлено на минисимпозиуме
«День стволовой клетки», проходившем 24 мая 2013 года в
г. Киеве.
ренцировку в заданном направлении. В связи с этим
разработка эффективных методов криоконсервиро-
вания, позволяющих сохранить морфофункциональ-
ные характеристики клеток в составе трехмерных
матриц-носителей, является актуальной задачей.
Целью настоящей работы было установить возмож-
ность криоконсервирования МСК в составе альгинат-
желатиновых скаффолдов (АЖС), а также оценить
влияние степени распластывания клеток на поверх-
ности носителя на их криоповреждение.
В работе использовали МСК костного мозга (КМ)
взрослого человека 3–5 пассажей. Культивирование
стромальных клеток проводили в среде α-MEM,
дополненной 15% эмбриональной сыворотки (ЭС)
крупного рогатого скота, пенициллина (50 ед/мл),
стрептомицина (50 мг/мл) и L-глутамина (2 мМ), в
инкубаторе при 37°С, 5% СО2 и 95%-й влажности.
Альгинат-желатиновые скаффолды в виде дисков
толщиной 2 мм и диаметром 10 мм получали согласно
методу, описанному ранее [5].
Криоконсервирование трехмерных культур МСК
проводили через 0,5 ч (группа 1) после заселения
матриц клетками, а также после 2 ч (группа 2) и 24 ч
(группа 3) инкубации биоконструкций в описанных
выше условиях. Заселенные МСК альгинат-желатино-
вые матрицы переносили в криоконтейнеры с 0,5 мл
криозащитной среды следующего состава: α-МЕМ,
15% ЭС и 10% диметилсульфоксида (ДМСО). Далее
образцы охлаждали со скоростью 1 град/мин до
–80°С, после чего погружали в жидкий азот. Размо-
раживание МСК в составе АЖС проводили на водя-
ной бане при 37°С, затем влажные структуры перено-
сили в 24-луночные планшеты, в которых трижды
мягко отмывали от криозащитной среды.
Жизнеспособность клеток оценивали по результа-
там комбинированного окрашивания флуоресцент-
ными красителями флуоресцеин диацетатом (ФДА)
и этидиум бромидом (ЭБ). Анализ проводили с помо-
щью конфокального сканирующего микроскопа
«LSM 510 Meta» («Carl Zeiss», Германия). Морфоло-
гические особенности клеток оценивали с использо-
ванием растрового электронного микроскопа
«FESEM XL30» («Phillips», Нидерланды).
Полученные результаты обрабатывали статисти-
чески с использованием t-критерия Стьюдента в про-
грамме Origin v.4.0. Статистически значимыми счита-
ли отличия между парными выборками при p < 0,05.
Все эксперименты выполнены с соблюдением
принципов биоэтики и норм биологической безопас-
ности.
Проведенный анализ степени распластывания МСК
в альгинат-желатиновых носителях показал, что через
0,5 ч после заселения большинство адгезировавших
МСК были округлой формы (рис. 1, А). Через 2 ч
инкубации некоторые МСК были распластаны на
sional carriers. In this regard, the aim of this work was
to evaluate the possibility of cryopreservation of MSCs
within alginate-gelatin scaffolds (AGSs), as well as to
assess how the extent of cell spreading on the carrier’s
surfaces affects their cryodamage.
Human adult bone marrow (BM) mesenchymal stro-
mal cells from 3rd–5th passages were used in the study.
Culture of MSCs was performed in α-MEM, supple-
mented with 15% fetal calf serum (FCS), Penicillin
(50 U/ml), Streptomycin (50 mg/ml) and L-glutamine
(2 mM) in an incubator at 37°C/5% CO2 and 95% humi-
dity.
Alginate-gelatin scaffolds were the 2 mm thick disks
with a diameter of 10 mm prepared according to our
method reported previously [5].
Cryopreservation of three-dimensional cultures of
MSCs was performed 0.5 hr (group 1) after cells seeding
into matrices, as well as 2 hrs (group 2) and 24 hrs
(group 3) post seeding and incubation of bioconstructs
in above described conditions. Alginate-gelatin carriers
populated with MSCs were transferred to cryovials filled
with 0.5 ml of cryoprotective medium: α-MEM, 15%
FCS and 10% dimethyl sulfoxide (Me2SO). Thereafter
the samples were cooled with 1 deg/min rate down to
–80°C and then plunged into liquid nitrogen. Thawing
of MSCs within AGSs was performed in a water bath
at 37°C, the wet structures were then transferred to
24-well plates and three times gently washed free of
cryoprotective medium.
Cell viability was assessed by combined staining with
fluorescent dyes fluorescein diacetate (FDA) and ethi-
dium bromide (EB). Analysis was carried out using
a confocal laser scanning microscope LSM 510 Meta
(Carl Zeiss, Germany). Morphological characteristics
of cells were evaluated using scanning electron micro-
scope FESEM XL30 (Phillips, Netherlands).
The results obtained were statistically processed using
Student t-test and Origin v. 4.0 software. Differences
between paired samples were considered as significant
at p < 0.05.
All the experiments were conducted in compliance
with the bioethical principles and biosafety regulations.
The performed analysis of spreading extent observed
in MSCs during culture in alginate-gelatin carriers
showed that 0.5 hr post seeding the majority of adhered
MSCs had a rounded shape (Fig. 1A). After 2 hr in-
cubation, some MSCs were flattened on the substrate
surface; however, rounded cells were also observed
(Fig. 1B). After 24 hrs of culturing, almost all MSCs
within AGSs were flattened and had fibroblast-like
morphology (Fig. 1B).
Analysis of FDA/EB double staining MSCs within
AGSs revealed a high viability of the cells prior to
cryopreservation (Fig. 2A, B, and C): more than 95%
cells had the cytoplasm stained with FDA and nuclei
352 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue 4, 2013
поверхности субстрата, однако наблюдались и ок-
руглые клетки (рис. 1, B). Через 24 ч культивирования
практически все МСК в составе АЖС были расплас-
таны и обладали фибробластоподобной морфологией
(рис. 1, C).
Анализ двойного окрашивания ФДА/ЭБ МСК в
составе АЖС показал высокую жизнеспособность
клеток до криоконсервирования (рис. 2, A, B, C):
более чем у 95% клеток цитоплазма была окрашена
ФДА, а ядра не имели окрашивания ЭБ (ФДА+/ЭБ–).
Значимых отличий между группами не отмечено.
Криоконсервирование приводило к значимому сни-
жению жизнеспособности клеток в составе трехмер-
unstained with EB (FDA+/EB–). No significant differen-
ces between the groups were found.
Cryopreservation resulted in a significant fall in
viability of the cells within three-dimensional constructs
(Fig. 2D, E, and F). Moreover the decrease of this pa-
rameter was unequal among the groups. In the groups 1
and 2 the number of viable cells (FDA+/EB–) was (81 ± 3)%
and (81 ± 5)%, respectively. Freeze-thawing of AGSs
24 hrs post cell seeding (group 3) resulted in a greater
reduction in the viability of MSCs down to (66 ± 5)%.
It was shown previously [3] that the viability of tha-
wed cells following 24 hrs re-culturing might differ signi-
ficantly from the values, assessed immediately after
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue 4, 2013
353
Рис. 1. Мезенхимальные стромальные клетки культивированные на поверхности широкопористых альгинат-желатиновых
носитетелей: A – через 0,5 ч; B – 2 ч; C – 24 ч после заселения; растровая электронная микроскопия; масштабный отрезок
10 мкм.
Fig. 1. Mesenchymal stromal cells cultured on the surfaces of wide-porous alginate-gelatin carriers: A – 0.5 hr; B – 2 hrs; and С –
24 hrs post seeding; raster electron microscopy; bar 10 µm.
A B C
ных конструкций (рис. 2, D, E,
F). Причем в разных группах
величина снижения данного
показателя была неодинаковой.
В экспериментальных группах
1 и 2 количество жизнеспособ-
ных клеток (ФДА+/ЭБ–) после
криоконсервирования состав-
ляло (81 ± 3)% и (81 ± 5)%
соответственно. Заморажива-
ние-отогрев АЖС через 24 ч
после заселения клетками
(группа 3) приводило к более
выраженному снижению жиз-
неспособности МСК до (66 ±
5)%.
Ранее было показано [3],
что жизнеспособность декон-
сервированных клеток после
24 ч рекультивирования может
значительно отличаться от по-
казателей, полученных непос-
редственно после отогрева. В
связи с этим для более кор-
ректной оценки эффективнос-
ти криоконсервирования МСК
в составе трехмерных АЖС,
проводили анализ жизнеспо-
собности клеток после рекуль-
Рис. 2. Жизнеспособность мезенхимальных стромальных клеток в составе альгинат-
желатиновых носителей до (A, B, C) и после (D, E, F) криоконсервирования: A, D –
группа 1 (0,5 ч после заселения); B, E – группа 2 (2 ч после заселения); C, F – группа 3 (24 ч
после заселения); лазерная конфокальная микроскопия; окрашивание ФДА (зеленый)/ЭБ
(красный); совмещение конфокальных изображений вдоль оси z (высота 100 мкм)
Fig. 2. Viablity of mesenchymal stromal cells within alginate-gelatin carriers prior to (A, B, C)
and after (D, E, F) cryopreservation: A, D – group 1 (0.5 hr post seeding); B, E – group 2
(2 hrs post seeding); C, F – group 3 (24 hrs post seeding); confocal laser scanning microscopy;
double staining with FDA (green fluorescence)/EB (red fluorescence); merged stack of
confocal images along z axis (100 µm).
A B C
D E F
354 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue 4, 2013
References
1. Keating A. Perspective mesenchymal stromal cells: new direc-
tions // Stem Сells. – 2012. – Vol. 10, №6. – P. 709–716.
2. Langer R. Vacanti P., Freed L.E., Vunjak-Novakovic G. Tissue
engineering?: biomedical applications // Tissue Engineering. –
1995. – Vol. 1, N2. – P. 151–161.
3. Malpique R., Ehrhart F., Katsen-Globa A. et al. Cryopreservation
of adherent cells: strategies to improve cell viability and
function after thawing // Tissue Engineering. Part C. – 2009. –
Vol. 15, N3. – P. 373–86.
4. Petrenko Y.A., Petrenko A.Y., Damshkaln L. et al. Growth and
adipogenic differentiation of mesenchymal stromal bone mar-
row cells during culturing in 3D macroporous agarose cryogel
sponges // Bull. Exp. Biol. Med. – 2008. – Vol. 146, N1. –
P. 129–132.
5. Petrenko Y.A., Ivanov R.V., Petrenko A.Y., Lozinsky V.I. Coup-
ling of gelatin to inner surfaces of pore walls in spongy alginate-
based scaffolds facilitates the adhesion, growth and differen-
tiation of human bone marrow mesenchymal stromal cells //
J. Mater. Sci. Mater. Med. – 2011. – Vol. 22, N6. – P. 1529–
1540.
Литература
1. Keating A. Perspective mesenchymal stromal cells: new direc-
tions // Stem Сells. – 2012. – Vol. 10, №6. – P. 709–716.
2. Langer R., Vacanti P., Freed L.E., Vunjak-Novakovic G. Tissue
engineering?: biomedical applications // Tissue Engineering. –
1995. – Vol. 1, N2. – P. 151–161.
3. Malpique R., Ehrhart F., Katsen-Globa A. et al. Cryopreservation
of adherent cells: strategies to improve cell viability and
function after thawing // Tissue Engineering. Part C. – 2009. –
Vol. 15, №3. – P. 373–86.
4. Petrenko Y.A., Petrenko A.Y., Damshkaln L. et al. Growth and
adipogenic differentiation of mesenchymal stromal bone mar-
row cells during culturing in 3D macroporous agarose cryogel
sponges // Bull. Exp. Biol. Med. – 2008. – Vol. 146, №1. –
P. 129–132.
5. Petrenko Y.A., Ivanov R.V., Petrenko A.Y., Lozinsky V.I. Coup-
ling of gelatin to inner surfaces of pore walls in spongy alginate-
based scaffolds facilitates the adhesion, growth and differen-
tiation of human bone marrow mesenchymal stromal cells //
J. Mater. Sci. Mater. Med. – 2011. – Vol. 22, №6. – P. 1529–
1540.
тивирования деконсервированных образцов. После
24 ч рекультивирования наблюдалось увеличение
количества ЭБ+-клеток в группах 1 и 2: жизнеспособ-
ность МСК составляла (75 ± 3)% и (77 ± 3)% соот-
ветственно; а в группе 3 не изменялась и составляла
(66 ± 4)%. После 48 ч рекультивирования большин-
ство МСК в составе широкопористых АЖС всех экс-
периментальных групп обладали фибробластоподоб-
ной морфологией. Жизнеспособность клеток после
48 ч рекультивирования составляла (88 ± 6), (93 ± 3) и
(91 ± 3)% в группах 1, 2 и 3 соответственно.
Таким образом, наше исследование показало
возможность криоконсервирования МСК в составе
объемных альгинат-желатиновых носителей. При этом
отмечено влияние степени распластывания клеток на
поверхности субстрата на их криоустойчивость. По-
следующее рекультивирование деконсервированных
МСК в составе объемных структур привело к увели-
чению показателя жизнеспособности во всех группах.
В целом полученные данные могут послужить
основой для разработки эффективных методов крио-
консервирования объемных биоинженерных конс-
трукций, содержащих МСК, и последующего созда-
ния низкотемпературных банков биоконструктов для
регенеративной медицины и тканевой инженерии.
thawing. In this regard, to evaluate more correctly the
outcomes of MSCs cryopreservation within the three-
dimensional AGSs we performed the analysis of cell
viability following re-culturing of thawed samples. After
24 hrs re-culturing the increase of EB+ cells number in
the group 1 (0.5 hr) and the group 2 (2 hrs) was observed:
viability of MSCs comprised (75 ± 3)% and (77 ± 3)%,
respectively. The viability of MSCs in group 3 did not
change during re-culturing and comprised (66 ± 4)%.
After 48 hours of re-culturing the most MSCs within
wide-porous AGSs in all experimental groups were of
fibroblast-like morphology. The viability of MSCs after
48 hrs of re-culturing was (88 ± 6), (93 ± 3) and (91 ±
3)%, respectively.
Collectively, our study showed the possibility to
cryopreserve MSCs within three-dimensional alginate-
gelatin carriers. The extent of cell spreading on the sub-
strate surface was shown to affect their cryostability.
Following re-culturing of thawed MSCs within three-
dimensional structures resulted in an increase of the
viability index. Overall, these data can serve as a basis
for the development of effective cryopreservation
methods intended for MSCs-comprising three-dimen-
sional bioengineered structures and the creation of low-
temperature banks of bioconstructs for regenerative
medicine and tissue engineering.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-68767 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 2307-6143 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-01T11:03:19Z |
| publishDate | 2013 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Петренко, Ю.А. Катцен-Глоба, А. Мейзер, И. Иванов, Р.В. Лозинский, В.И. Циммерманн, Х. Петренко, А.Ю. 2014-09-28T09:29:42Z 2014-09-28T09:29:42Z 2013 Криоконсервирование мезенхимальных стромальных клеток в широкопористых объемных альгинат-желатиновых носителях / Ю.А. Петренко, А. Катцен-Глоба, И. Мейзер, Р.В. Иванов, В.И.Лозинский , Х. Циммерманн, А.Ю. Петренко // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2013. — Т. 23, № 4. — С. 351-354. — Бібліогр.: 5 назв. — рос., англ. 2307-6143 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68767 611.018.2/.6+615.014.41:664.644.7 Данное исследование было представлено на минисимпозиуме «День стволовой клетки», проходившем 24 мая 2013 года в г. Киеве. ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины День стволовой клетки. краткие сообщения Криоконсервирование мезенхимальных стромальных клеток в широкопористых объемных альгинат-желатиновых носителях Cryopreservation of Mesenchymal Stromal Cells within Wide-Porous Three-Dimensional Alginate-Gelatin Scaffolds Article published earlier |
| spellingShingle | Криоконсервирование мезенхимальных стромальных клеток в широкопористых объемных альгинат-желатиновых носителях Петренко, Ю.А. Катцен-Глоба, А. Мейзер, И. Иванов, Р.В. Лозинский, В.И. Циммерманн, Х. Петренко, А.Ю. День стволовой клетки. краткие сообщения |
| title | Криоконсервирование мезенхимальных стромальных клеток в широкопористых объемных альгинат-желатиновых носителях |
| title_alt | Cryopreservation of Mesenchymal Stromal Cells within Wide-Porous Three-Dimensional Alginate-Gelatin Scaffolds |
| title_full | Криоконсервирование мезенхимальных стромальных клеток в широкопористых объемных альгинат-желатиновых носителях |
| title_fullStr | Криоконсервирование мезенхимальных стромальных клеток в широкопористых объемных альгинат-желатиновых носителях |
| title_full_unstemmed | Криоконсервирование мезенхимальных стромальных клеток в широкопористых объемных альгинат-желатиновых носителях |
| title_short | Криоконсервирование мезенхимальных стромальных клеток в широкопористых объемных альгинат-желатиновых носителях |
| title_sort | криоконсервирование мезенхимальных стромальных клеток в широкопористых объемных альгинат-желатиновых носителях |
| topic | День стволовой клетки. краткие сообщения |
| topic_facet | День стволовой клетки. краткие сообщения |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68767 |
| work_keys_str_mv | AT petrenkoûa kriokonservirovaniemezenhimalʹnyhstromalʹnyhkletokvširokoporistyhobʺemnyhalʹginatželatinovyhnositelâh AT katcenglobaa kriokonservirovaniemezenhimalʹnyhstromalʹnyhkletokvširokoporistyhobʺemnyhalʹginatželatinovyhnositelâh AT meizeri kriokonservirovaniemezenhimalʹnyhstromalʹnyhkletokvširokoporistyhobʺemnyhalʹginatželatinovyhnositelâh AT ivanovrv kriokonservirovaniemezenhimalʹnyhstromalʹnyhkletokvširokoporistyhobʺemnyhalʹginatželatinovyhnositelâh AT lozinskiivi kriokonservirovaniemezenhimalʹnyhstromalʹnyhkletokvširokoporistyhobʺemnyhalʹginatželatinovyhnositelâh AT cimmermannh kriokonservirovaniemezenhimalʹnyhstromalʹnyhkletokvširokoporistyhobʺemnyhalʹginatželatinovyhnositelâh AT petrenkoaû kriokonservirovaniemezenhimalʹnyhstromalʹnyhkletokvširokoporistyhobʺemnyhalʹginatželatinovyhnositelâh AT petrenkoûa cryopreservationofmesenchymalstromalcellswithinwideporousthreedimensionalalginategelatinscaffolds AT katcenglobaa cryopreservationofmesenchymalstromalcellswithinwideporousthreedimensionalalginategelatinscaffolds AT meizeri cryopreservationofmesenchymalstromalcellswithinwideporousthreedimensionalalginategelatinscaffolds AT ivanovrv cryopreservationofmesenchymalstromalcellswithinwideporousthreedimensionalalginategelatinscaffolds AT lozinskiivi cryopreservationofmesenchymalstromalcellswithinwideporousthreedimensionalalginategelatinscaffolds AT cimmermannh cryopreservationofmesenchymalstromalcellswithinwideporousthreedimensionalalginategelatinscaffolds AT petrenkoaû cryopreservationofmesenchymalstromalcellswithinwideporousthreedimensionalalginategelatinscaffolds |