Влияние высокомолекулярных полимеров на жизнеспособность, метаболическую активность и способность к мультилинейной дифференцировке мезенхимальных стромальных клеток, криоконсервированных в отсутствие ДМСО
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Datum: | 2014 |
| Hauptverfasser: | , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russisch |
| Veröffentlicht: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2014
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68808 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Влияние высокомолекулярных полимеров на жизнеспособность, метаболическую активность и способность к мультилинейной дифференцировке мезенхимальных стромальных клеток, криоконсервированных в отсутствие ДМСО / В.В. Муценко, Е.Ю. Рогульская, Д.Н. Тарусин, Ю.А. Петренко // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2014. — Т. 24, № 2. — С. 164. — рос., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859859980109217792 |
|---|---|
| author | Муценко, В.В. Рогульская, Е.Ю. Тарусин, Д.Н. Петренко, Ю.А. |
| author_facet | Муценко, В.В. Рогульская, Е.Ю. Тарусин, Д.Н. Петренко, Ю.А. |
| citation_txt | Влияние высокомолекулярных полимеров на жизнеспособность, метаболическую активность и способность к мультилинейной дифференцировке мезенхимальных стромальных клеток, криоконсервированных в отсутствие ДМСО / В.В. Муценко, Е.Ю. Рогульская, Д.Н. Тарусин, Ю.А. Петренко // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2014. — Т. 24, № 2. — С. 164. — рос., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| first_indexed | 2025-12-07T15:45:39Z |
| format | Article |
| fulltext |
164 проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 24, №/issue 2, 2014
Влияние высокомолекулярных полимеров на жизнеспособность,
метаболическую активность и способность к мультилинейной
дифференцировке мезенхимальных стромальных клеток,
криоконсервированных в отсутствие ДМСО
В.В. Муценко, Е.Ю. Рогульская, Д.Н. Тарусин, Ю.А. Петренко
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
Impact of High Molecular Weight Polymers on Viability, Metabolic Activity
and Multilineage Differentiation Ability of Mesenchymal Stromal Cells
Cryopreserved in Me2SO Absence
V.V. Mutsenko, E.Yu. Rogulska, D.N.Tarusin, Yu.A. Petrenko
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
Криоконсервирование мезенхимальных стромальных
клеток (МСК) по разработанному нами методу, вклю-
чающему комплексное использование сахарозы, поз-
воляет достичь показателей жизнеспособности клеток
на уровне 45% в отсутствие проникающих криопротек-
торов. В настоящей работе исследовали возможность
повышения эффективности данного метода за счет
введения высокомолекулярных полимеров.
В работе использовали МСК кожи человека 6–8
пассажей. Предобработка заключалась в культивирова-
нии клеток в присутствии 0,2 М сахарозы в течение 24 ч
до замораживания. В криозащитную среду вносили саха-
розу в концентрации 0,3 М и один из следующих полиме-
ров: фиколл (м. м. 400 000), декстран (м. м. 40 000), ГЭК
(м. м. 200 000) и ПЭГ (м. м. 8000). Замораживание МСК
осуществляли со скоростью 1 град/мин до –80°С, после
чего образцы погружали в жидкий азот. После отогрева
производился посев клеток без этапа отмывки. Сохран-
ность клеток определяли путем окрашивания трипано-
вым синим. Жизнеспособность и метаболическую ак-
тивность клеток оценивали по уровню восстановления
Alamar Blue. После культивирования в соответствующих
индуктивных средах оценивали дифференцировочный
потенциал МСК по окрашиванию на щелочную фосфа-
тазу и нейтральные липиды.
Установлено, что введение в сахарозосодержащую
среду криоконсервирования фиколла, декстрана или ГЭК
в концентрациях от 1 до 6% не значительно предотвра-
щало гибель клеток, предобработанных сахарозой. В то
же время присутствие ПЭГ-8000 в криозащитной среде
приводило к концентрационно-зависимому увеличению
сохранности. Максимальные показатели жизнеспособ-
ности и метаболической активности клеток (65 и 60%,
соответственно), были получены при использованиии
6%-го раствора ПЭГ-8000. В условиях монослойного
культивирования клетки, криоконсервированные под
защитой сахарозы и ПЭГ-8000, были способны к адгезии,
пролиферации и дифференцировке в остео- и адипо-
генном направлениях.
Таким образом, скрининг высокомолекулярных по-
лимеров показал, что ПЭГ-8000 позволяет повысить
эффективность криоконсервирования МСК в отсутствие
ДМСО.
Cryopreservation of mesenchymal stromal cells (MSCs)
according to the technique we previously developed, invol-
ved a complex application of sucrose and allowed to achie-
ve cell viability rates at the level of about 45% in the absence
of penetrating cryoprotectants. The aim of present work
was to assess the possible enhancement of the efficiency
of the technique by introducing high molecular weight poly-
mers.
Skin derived human MSCs of 6–8 passages have been
used in the study. The pretreatment step included cell
culturing in the presence of 0.2 M sucrose during 24 hrs
prior to freezing. Sucrose in the concentration of 0.3 M and
one of the following polymers such as ficoll (MW 400,000),
dextran (MW 40,000), HES (MW 200,000) and PEG (MW
8000) were introduced into cryoprotective medium. The
freezing of MSCs was performed with the cooling rate of
1 deg/min down to –80°C with following plunging of the
samples into liquid nitrogen. After thawing cells were
seeded without any washing step. Cell survival was deter-
mined by trypan blue staining. Cell viability and metabolic
activity were estimated by the level of Alamar Blue
reduction. Differentiation potential of MSCs was evaluated
after culturing in the corresponding inductive media by
staining for alkaline phosphatase and neutral lipids.
It was found that the introduction of ficoll, dextran or
HES in the concentration range of 1–6% into sucrose-
containing cryopreservation medium insignificantly preven-
ted the death of sucrose-pretreated cells. At the same time
the presence of PEG-8000 in cryoprotective medium led to
concentration-dependent increase in cell survival. Maximum
rates of cell viability and metabolic activity (65 and 60%,
respectively) were obtained in case of using 6% solution of
PEG-8000 . During monolayer culture the cells cryopreserved
under protection of sucrose and PEG-8000 were able to
adhere, proliferate and differentiate into osteo- and adipo-
genic directions.
Thus, screening of high molecular weight polymers has
shown that PEG-8000 allows to enhance the effectiveness
of MSCs cryopreservation in the absence of Me2SO.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-68808 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 2307-6143 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T15:45:39Z |
| publishDate | 2014 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Муценко, В.В. Рогульская, Е.Ю. Тарусин, Д.Н. Петренко, Ю.А. 2014-09-29T17:57:28Z 2014-09-29T17:57:28Z 2014 Влияние высокомолекулярных полимеров на жизнеспособность, метаболическую активность и способность к мультилинейной дифференцировке мезенхимальных стромальных клеток, криоконсервированных в отсутствие ДМСО / В.В. Муценко, Е.Ю. Рогульская, Д.Н. Тарусин, Ю.А. Петренко // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2014. — Т. 24, № 2. — С. 164. — рос., англ. 2307-6143 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68808 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Тезисы Влияние высокомолекулярных полимеров на жизнеспособность, метаболическую активность и способность к мультилинейной дифференцировке мезенхимальных стромальных клеток, криоконсервированных в отсутствие ДМСО Impact of High Molecular Weight Polymers on Viability, Metabolic Activity and Multilineage Differentiation Ability of Mesenchymal Stromal Cells Cryopreserved in Me₂SO Absence Article published earlier |
| spellingShingle | Влияние высокомолекулярных полимеров на жизнеспособность, метаболическую активность и способность к мультилинейной дифференцировке мезенхимальных стромальных клеток, криоконсервированных в отсутствие ДМСО Муценко, В.В. Рогульская, Е.Ю. Тарусин, Д.Н. Петренко, Ю.А. Тезисы |
| title | Влияние высокомолекулярных полимеров на жизнеспособность, метаболическую активность и способность к мультилинейной дифференцировке мезенхимальных стромальных клеток, криоконсервированных в отсутствие ДМСО |
| title_alt | Impact of High Molecular Weight Polymers on Viability, Metabolic Activity and Multilineage Differentiation Ability of Mesenchymal Stromal Cells Cryopreserved in Me₂SO Absence |
| title_full | Влияние высокомолекулярных полимеров на жизнеспособность, метаболическую активность и способность к мультилинейной дифференцировке мезенхимальных стромальных клеток, криоконсервированных в отсутствие ДМСО |
| title_fullStr | Влияние высокомолекулярных полимеров на жизнеспособность, метаболическую активность и способность к мультилинейной дифференцировке мезенхимальных стромальных клеток, криоконсервированных в отсутствие ДМСО |
| title_full_unstemmed | Влияние высокомолекулярных полимеров на жизнеспособность, метаболическую активность и способность к мультилинейной дифференцировке мезенхимальных стромальных клеток, криоконсервированных в отсутствие ДМСО |
| title_short | Влияние высокомолекулярных полимеров на жизнеспособность, метаболическую активность и способность к мультилинейной дифференцировке мезенхимальных стромальных клеток, криоконсервированных в отсутствие ДМСО |
| title_sort | влияние высокомолекулярных полимеров на жизнеспособность, метаболическую активность и способность к мультилинейной дифференцировке мезенхимальных стромальных клеток, криоконсервированных в отсутствие дмсо |
| topic | Тезисы |
| topic_facet | Тезисы |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68808 |
| work_keys_str_mv | AT mucenkovv vliânievysokomolekulârnyhpolimerovnažiznesposobnostʹmetaboličeskuûaktivnostʹisposobnostʹkmulʹtilineinoidifferencirovkemezenhimalʹnyhstromalʹnyhkletokkriokonservirovannyhvotsutstviedmso AT rogulʹskaâeû vliânievysokomolekulârnyhpolimerovnažiznesposobnostʹmetaboličeskuûaktivnostʹisposobnostʹkmulʹtilineinoidifferencirovkemezenhimalʹnyhstromalʹnyhkletokkriokonservirovannyhvotsutstviedmso AT tarusindn vliânievysokomolekulârnyhpolimerovnažiznesposobnostʹmetaboličeskuûaktivnostʹisposobnostʹkmulʹtilineinoidifferencirovkemezenhimalʹnyhstromalʹnyhkletokkriokonservirovannyhvotsutstviedmso AT petrenkoûa vliânievysokomolekulârnyhpolimerovnažiznesposobnostʹmetaboličeskuûaktivnostʹisposobnostʹkmulʹtilineinoidifferencirovkemezenhimalʹnyhstromalʹnyhkletokkriokonservirovannyhvotsutstviedmso AT mucenkovv impactofhighmolecularweightpolymersonviabilitymetabolicactivityandmultilineagedifferentiationabilityofmesenchymalstromalcellscryopreservedinme2soabsence AT rogulʹskaâeû impactofhighmolecularweightpolymersonviabilitymetabolicactivityandmultilineagedifferentiationabilityofmesenchymalstromalcellscryopreservedinme2soabsence AT tarusindn impactofhighmolecularweightpolymersonviabilitymetabolicactivityandmultilineagedifferentiationabilityofmesenchymalstromalcellscryopreservedinme2soabsence AT petrenkoûa impactofhighmolecularweightpolymersonviabilitymetabolicactivityandmultilineagedifferentiationabilityofmesenchymalstromalcellscryopreservedinme2soabsence |