Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Дата: | 2008 |
| Автори: | , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Російська |
| Опубліковано: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2008
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68945 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов / Л.Т. Волова, В.В. Россинская, Т.В. Яценко, В.В. Болтовская // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 196. — рос., англ. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859839970859024384 |
|---|---|
| author | Волова, Л.Т. Россинская, В.В. Яценко, Т.В. Болтовская, В.В. |
| author_facet | Волова, Л.Т. Россинская, В.В. Яценко, Т.В. Болтовская, В.В. |
| citation_txt | Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов / Л.Т. Волова, В.В. Россинская, Т.В. Яценко, В.В. Болтовская // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 196. — рос., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| first_indexed | 2025-12-07T15:36:39Z |
| format | Article |
| fulltext |
196 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №2
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №2
Простой и экономичный метод криоконсервации
экспериментальных клеточных объектов
Л.Т. ВОЛОВА, В.В. РОССИНСКАЯ, Т.В. ЯЦЕНКО, В.В. БОЛТОВСКАЯ
Самарский государственный медицинский университет
Simple and Cost-Effective Method for Experimental Cell Object Cryopreservation
L.T. VOLOVA, V.V. ROSSINSKAYA, T.V. YATSENKO, V.V. BOLTOVSKAYA
Samara State Medical University, Russia
Цель работы − отработка и внедрение простого и
экономичного способа криоконсервации клеточных
культур.
Исследования проводили на клеточных культурах
дермальных фибробластов и фибробластоподобных
клеток из стромы гиалинового хряща человека и живот-
ных. Материалом для получения клеток служили: край-
няя плоть мальчиков 3–14 лет, полученная при операции
циркумцизии; абортивный материал; кожа новорожден-
ных крысят; суставной гиалиновый хрящ взрослых кро-
ликов. Криоконсервацию выполняли в жидком азоте в
сосуде Дьюара (полезный объем 6 л) с 6 цилиндрами. В
качестве криопротектора использовали диметилсульфо-
ксид (ДМСО) марки “хч” в концентрации 5 % от общего
объема замораживаемой суспензии. Сравнивали два ва-
рианта среды для замораживания клеток: с содержанием
сыворотки эмбрионов коров 20% (1 серия) и 70% (2
серия). Клетки замораживали в экспоненциальной и
стационарной фазе роста. Культуру клеток криоконсерви-
ровали в два этапа: криопробирки помещали в моро-
зильную камеру (–70°С) на 24 ч, затем погружали в
жидкий азот для длительного хранения. Исследования
проводили в течение 2 лет, при этом первые 6 месяцев
культуры размораживали раз в месяц, затем раз в 2 меся-
ца. Всего проведено 254 эксперимента. Состояние
культур до и после криоконсервации оценивали при
помощи морфологических и морфометрических мето-
дов.
Изучение морфофункциональных характеристик
клеток после размораживания показало, что при крио-
консервации в жидком азоте и использовании в качестве
протектора ДМСО лучшие результаты во всех исследо-
ванных культурах достигаются во 2-й серии эксперимен-
тов (содержание сыворотки в среде для замораживания
70%). В этом случае количество жизнеспособных клеток
остается постоянным и составляет 86,7±4,9% в течение
всего срока эксперимента. В 1-й серии с содержанием
сыворотки 20 % этот показатель сохранялся высоким в
течение первых 4 месяцев, после чего интенсивно сни-
жался и к концу второго года составил 48,4±2,1 %. Клетки
всех исследованных культур после размораживания
сохраняли форму, размеры, ядерно-цитоплазменные
отношения, скорость удвоения и плотность монослоя.
Таким образом, использованный нами метод не
требует специальной дорогостоящей аппаратуры, эф-
фективен для криоконсервации различных видов культур
клеток.
Our research aim was to master and introduce a sample
and cost-effective way for cell culture cryopreservation.
Research was carried-out in cell cultures of dermal
fibroblasts and fibroblast-like cells from human and animal
hyaline cartilage stroma. Cells were procured from the
following materials: prepitium of 3–15 years’ old boys, obtai-
ned after circumcision operation; abortive material; newborn
rat’s skin; joint hyaline cartilage of mature rabbits. Cryopre-
servation was performed in liquid nitrogen in Dewar vessel
(6 l net volume) with 6 cylinders. “Chemically pure” graded
dimethyl sulfoxide (DMSO) in 5% concentration of total
volume of frozen suspension was used as cryoprotectant.
We compared two variants of medium for cell freezing: with
20 and 70% bovine embryo serum (1 and 2 series, corres-
pondingly). Cells were cryopreserved in both exponential
and stationary growth phases. Cell culture was cryopreser-
ved in two steps: cryovials were placed in a freezing chamber
(–70°C) for 24 hrs, then immersed into liquid nitrogen for a
long-term storage. Research was realized within 2 years,
herewith the cultures were thawed once per month within
the first 6 months, then once per 2 months. There were
carried-out 254 experiments in total. Culture state prior to
and after cryopreservation was morphologically and mor-
phometrically assessed.
Study of cell morphofunctional characteristics after tha-
wing has demonstrated that under cryopreservation in liquid
nitrogen and with DMSO as cryoprotectant the highest
results in the whole studied cultures were obtained in the
2nd experimental series (70% serum content in freezing
medium). In this case the amount of viable cells remains
constant and makes 86.7±4.9% within all experimental term.
In the 1st series (20% serum content) this index remained
high within the first 4 months, then intensively reduced
and was 48.4±2.1% to the second year termination. Cells in
all studied cultures after thawing preserved the shape, size,
nuclear and cytoplasm ratios, doubling rate and monolayer
density.
Thus, the method we used does not require a special
expensive equipment, being efficient for different cell culture
cryopreservation.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-68945 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T15:36:39Z |
| publishDate | 2008 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Волова, Л.Т. Россинская, В.В. Яценко, Т.В. Болтовская, В.В. 2014-10-02T19:32:05Z 2014-10-02T19:32:05Z 2008 Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов / Л.Т. Волова, В.В. Россинская, Т.В. Яценко, В.В. Болтовская // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 196. — рос., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68945 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов Simple and Cost-Effective Method for Experimental Cell Object Cryopreservation Article published earlier |
| spellingShingle | Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов Волова, Л.Т. Россинская, В.В. Яценко, Т.В. Болтовская, В.В. Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» |
| title | Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов |
| title_alt | Simple and Cost-Effective Method for Experimental Cell Object Cryopreservation |
| title_full | Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов |
| title_fullStr | Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов |
| title_full_unstemmed | Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов |
| title_short | Простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов |
| title_sort | простой и экономичный метод криоконсервации экспериментальных клеточных объектов |
| topic | Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» |
| topic_facet | Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68945 |
| work_keys_str_mv | AT volovalt prostoiiékonomičnyimetodkriokonservaciiéksperimentalʹnyhkletočnyhobʺektov AT rossinskaâvv prostoiiékonomičnyimetodkriokonservaciiéksperimentalʹnyhkletočnyhobʺektov AT âcenkotv prostoiiékonomičnyimetodkriokonservaciiéksperimentalʹnyhkletočnyhobʺektov AT boltovskaâvv prostoiiékonomičnyimetodkriokonservaciiéksperimentalʹnyhkletočnyhobʺektov AT volovalt simpleandcosteffectivemethodforexperimentalcellobjectcryopreservation AT rossinskaâvv simpleandcosteffectivemethodforexperimentalcellobjectcryopreservation AT âcenkotv simpleandcosteffectivemethodforexperimentalcellobjectcryopreservation AT boltovskaâvv simpleandcosteffectivemethodforexperimentalcellobjectcryopreservation |