Лиофилизация дрожжевых грибов рода Saccharomyces
Saved in:
| Published in: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Date: | 2008 |
| Main Author: | |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2008
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68962 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Лиофилизация дрожжевых грибов рода Saccharomyces / А.В. Кантерова // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 213. — рос., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859606149839454208 |
|---|---|
| author | Кантерова, А.В. |
| author_facet | Кантерова, А.В. |
| citation_txt | Лиофилизация дрожжевых грибов рода Saccharomyces / А.В. Кантерова // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 213. — рос., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| first_indexed | 2025-11-28T04:44:50Z |
| format | Article |
| fulltext |
213 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №2
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №2
Лиофилизация дрожжевых грибов рода Saccharomyces
А.В. КАНТЕРОВА
Институт микробиологии НАН Беларуси, г. Минск
Freeze-Drying of Saccharomyces Yeast Fungi
A.V. KANTEROVA
Institute of Microbiology of National Academy of Sciences of Belarus, Minsk, Belarus
Для хранения дрожжевых грибов в Белорусской
коллекции непатогенных микроорганизмов используют-
ся методы лиофилизации, криоконсервирования и суб-
культивирования на агаризованных средах под слоем
вазелинового масла.
Известно, что микроорганизмы наиболее устойчивы
к замораживанию и высушиванию в стационарной фазе
роста, однако, по литературным данным, крупнокле-
точные дрожжи рода Saccharomyces плохо переносят
лиофилизацию, поэтому сублимационное высушивание
дрожжевых культур Saccharomyces cereviciae БИМ Y-56,
БИМ Y-177, БИМ Y-178 и БИМ Y-182 проводили как в
стационарной фазе роста, так и на стадии спорообразо-
вания. Клетки в стационарной фазе роста получали после
3-х суток культивирования на сусло-агаре. Для получе-
ния спорулирующей культуры первоначально штаммы
сахаромицетов выращивали в течение 2-х суток при
температуре 25–26°С на среде следующего состава, г/л:
глюкоза – 10,0; пептон – 5,0; дрожжевой экстракт – 3,0;
агар – 20,0 и сусло (15% сухих веществ) – 1 л. Выросшие
2-х суточные культуры дрожжей пересевали на косяки
со средой, используемой для индукции аскоспорооб-
разования (среда Городковой), г/л: глюкоза – 1,0; пеп-
тон – 10,0; NaCl – 5,0; агар – 20,0; вода – 1 л. Затем сахаро-
мицеты выращивали при температуре 25°С в течение 38
суток до активного образования аскоспор. Наблюдалось
образование спор у 60–80% клеток. Лиофилизацию куль-
тур производили на сублимационной установке “MO-
DULYO-4K” английской фирмы Edwards. Первичная
сушка проходила при температуре –55°С и глубине ваку-
ума 6×10-2 mbar в течение 4-х часов; досушивание на
гребенке аппарата вторичной сушки при комнатной
температуре под вакуумом 8×10-2 mbar – 18 часов. В
качестве протектора использовали сахарозо-желатино-
вую среду (10%-й раствор сахарозы с 1,5% желатины и
0,1% агар-агара). Количество живых клеток дрожжей
определяли методом предельных разведений в 1 мл
суспензии перед и после лиофилизации, а также через 1
и 2 года, 5 и 8 лет хранения культур.
Установлено, что количество жизнеспособных клеток
у всех штаммов сахаромицетов, лиофилизированных на
стадии спорообразования, было значительно выше по
сравнению с культурами, находившимися в стационар-
ной фазе роста, независимо от сроков хранения как че-
рез сутки после сублимационного высушивания, так и
после 8 лет хранения.
Полученные данные свидетельствуют о целесооб-
разности лиофилизации дрожжей рода Saccharomyces в
стадии спорообразования. Консервирование их в таком
состоянии обеспечивает высокую степень выживаемос-
ти и не изменяет физиологические и биохимические
свойства культур.
The methods of freeze-drying, cryopreservation and
subculturing on agarised media under paraffin oil layer are
used to store the yeast fungi in Collection of non-pathoge-
nic microorganisms of Belarus.
Microorganisms are known to be the most resistant to
freezing and drying in a stationary growth phase, but as
reported, the magnocellular Saccharomyces yeast endure
poorly the freeze-drying, therefore a freeze-drying of
Saccharomyces cereviciae BIM Y-56, BIM Y-177, BIM Y-
178 and BIM Y-182 yeast cultures was carried-out both in a
stationary growth and spore formation phases. Cells under
stationary growth phase were derived after 3 days of cultu-
ring on wort agar. To obtain a sporulating culture the Saccha-
romyces strains were initially cultured within 2 days at 25–
26°C with medium of following composition, g/l: 10.0
glucose; 5.0 peptone; 3.0 yeast extract; 20.0 agar and 1 l
wort (15% dry substances). The grown 2 days’ yeast cultures
were re-cultured to slopes with the medium, used for
ascospore formation induction (Gorodkova’s medium), g/l:
1.0 glucose; 10.0 peptone; 5.0 NaCl; 20.0 agar; 1l water.
Afterwards the Saccharomyces were cultured at 25°C for 38
days up to an active formation of ascospores. Spore
formation was observed in 60-80% cells. Cultures were fro-
zen-dried with “MODULYO-4K” sublimation device (Ed-
wards, Great Britain). Primary drying was realised at –55°C
and 6×10–2 mbar vacuum depth for 4 hrs; final drying was
done with secon-dary drying device rack at room tempera-
ture under 8×10–2 mbar vacuum for 18 hrs. Sucrose-gelatine
medium (10% sucrose solution with 1.5% gelatine and 0.1%
agar-agar) was used as a protectant. Number of viable yeast
cells was determined using the method of limiting dilutions
in 1 ml suspension prior to and after freeze-drying, as well
as 1 and 2, 5 and 8 years after culture storage.
The number of viable cells in whole Saccharomyces
strains, frozen-dried at the spore formation stage, was establi-
shed as significantly higher than in the cultures, being under
stationary growth phase, independently on storage terms
both following 1 day of freeze-drying and after 8 years’
storage.
The data obtained testified to the expediency of Saccha-
romyces yeast freeze-drying at the spore formation stage.
Their preservation under this state provides a high survival
degree and does not change physiological and biochemical
properties of cultures.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-68962 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-11-28T04:44:50Z |
| publishDate | 2008 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Кантерова, А.В. 2014-10-03T06:29:13Z 2014-10-03T06:29:13Z 2008 Лиофилизация дрожжевых грибов рода Saccharomyces / А.В. Кантерова // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 213. — рос., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68962 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Cтендовые доклады Лиофилизация дрожжевых грибов рода Saccharomyces Freeze-Drying of Saccharomyces Yeast Fungi Article published earlier |
| spellingShingle | Лиофилизация дрожжевых грибов рода Saccharomyces Кантерова, А.В. Cтендовые доклады |
| title | Лиофилизация дрожжевых грибов рода Saccharomyces |
| title_alt | Freeze-Drying of Saccharomyces Yeast Fungi |
| title_full | Лиофилизация дрожжевых грибов рода Saccharomyces |
| title_fullStr | Лиофилизация дрожжевых грибов рода Saccharomyces |
| title_full_unstemmed | Лиофилизация дрожжевых грибов рода Saccharomyces |
| title_short | Лиофилизация дрожжевых грибов рода Saccharomyces |
| title_sort | лиофилизация дрожжевых грибов рода saccharomyces |
| topic | Cтендовые доклады |
| topic_facet | Cтендовые доклады |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68962 |
| work_keys_str_mv | AT kanterovaav liofilizaciâdrožževyhgribovrodasaccharomyces AT kanterovaav freezedryingofsaccharomycesyeastfungi |