Криоконсервирование бактерий рода Enterococcus
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Дата: | 2008 |
| Автори: | , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Російська |
| Опубліковано: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2008
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68975 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Криоконсервирование бактерий рода Enterococcus / М.Н. Калашникова, Е.Г. Перетятко // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 226. — рос., англ. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859740734601560064 |
|---|---|
| author | Калашникова, М.Н. Перетятко, Е.Г. |
| author_facet | Калашникова, М.Н. Перетятко, Е.Г. |
| citation_txt | Криоконсервирование бактерий рода Enterococcus / М.Н. Калашникова, Е.Г. Перетятко // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 226. — рос., англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| first_indexed | 2025-12-01T17:44:55Z |
| format | Article |
| fulltext |
Криоконсервирование бактерий рода Enterococcus
М.Н. КАЛАШНИКОВА1, Е.Г. ПЕРЕТЯТКО2
1Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
2Институт микробиологии и иммунологии им. И.И. Мечникова АМН Украины, г. Харьков
Cryopreservation of Enterococcus bacteria
M.N. KALASHNIKOVA1, E.G. PERETYATKO2
1Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
2Institute of Microbiology and Immunology named after I.I. Mechnikov
of the Academy of Medical Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
Бактерии рода Enterococcus часто являются этиологи-
ческим фактором внутрибольничных и гнойно-септи-
ческих инфекций. Для решения вопросов диагностики,
этиотропной терапии и специфической профилактики
этих заболеваний необходимо создание коллекций клини-
ческих изолятов энтерококков. В существующих коллек-
циях наиболее часто используются хранение под мине-
ральным маслом с периодическими пересевами и
лиофилизация. Технологии криоконсервирования бакте-
рий этого рода в настоящее время не разработаны.
Цель исследования − изучение влияния режимов и
состава среды консервирования на сохранность бактерий
рода Enterococcus. Объектами исследования служили
эталонный штамм Enterococcus faecalis ATCC №29213
и 2 клинических изолята Enterococcus faecium №167 и
№113. В качестве сред консервирования использовали
дистиллированную воду, физиологический раствор NaCl
и сахарный бульон. Замораживание проводили по трем
режимам: режим 1 – быстрое погружение образцов в
жидкий азот; режим 2 – охлаждение со скоростью
1°С/мин от 18 до –40°С с последующим погружением в
жидкий азот; режим 3 – охлаждение со скоростью
2-3°С/мин от 18 до –28°С, выдерживание при этой
температуре в течение 15 мин и последующее погруже-
ние в жидкий азот. Жизнеспособность бактерий оцени-
вали чашечным методом Коха, биохимические свойства
изучали с помощью набора EN-COCCUStest. Каталазную
и гемолитическую активность, подвижность, резистент-
ность бактерий к теллуриту калия определяли общепри-
нятыми методами.
При изучении влияния режимов охлаждения и сос-
тава среды консервирования на жизнеспособность бак-
терий было установлено, что сохранность бактерий
E. faecalis на исходном уровне обеспечивало замора-
живание по режиму 3 в сахарном бульоне; бактерий
E. faecium №167 – замораживание по режимам 1 и 2 в
дистиллированной воде и сахарном бульоне; бактерий
E. faecium № 113 – замораживание по всем трем режимам
в дистиллированной воде, по режимам 2 и 3 – в физиоло-
гическом растворе, по режиму 1 – в сахарном бульоне.
В остальных условиях эксперимента жизнеспособность
всех трех видов бактерий была ниже исходной. Заморажи-
вание по разным режимам и в разных средах консервиро-
вания не влияло на исходные биохимические и биологи-
ческие свойства бактерий.
В результате проведенных экспериментов показана
возможность эффективного криоконсервирования бак-
терий рода Enterococcus. Криоконсервирование обеспе-
чивает сохранность исходных генетически детерминиро-
ванных биохимических и биологических свойств
бактерий этого рода.
226 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №2
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №2
Enterococcus bacteria are frequently etiological factor
of hospital and pyo-spetic infections. For solving the tasks
of diagnostics, etiotropic therapy and specific prophylaxis
of these diseases it is necessary to establish the collec-
tions of clinical isolates of enterococci. In the existing col-
lections the storage under mineral oil with periodical re-
plating and lyophilization are the most frequently used.
Cryo-preservation protocols for the bacteria of these spe-
cies for this moment have not been developed.
The research aim of this study was investigation of the
effect of regimens and composition of cryopreservation
medium on the integrity of Enterococcus bacteria. The re-
search objects were reference strain Enterococcus faecalis
ATCC N29213 and 2 clinical isolates Enterococcus faecium
N167 and N113. As the cryopreservation media there were
used distilled water, physiological solution NaCl and sugar
broth. Freezing was performed according to three regimens:
regimen 1 comprised rapid plunging of the samples into
liquid nitrogen; regimen 2 consisted in cooling with the rate
of 1°C/min from 18 to –40°C with following plunging into
liquid nitrogen; regimen 3 included the cooling with the
rate of 2–3°C/min from 18 to –28°C, maintenance at this
temperature for 15 min and following plunging into liquid
nitrogen. Bacteria viability was estimated with Koch plate
method, biochemical properties were studied using the kit
EN-COCCUStest. Catalase and hemolytical activity, motil-
ity, resistance of bacteria to potassium tellurite was found
with traditional methods.
When examining the effect of cooling regimens and the
cryopreservation media compositions on viability of bacte-
ria there has been established that the integrity of E. faecalis
bacteria at initial level was provided with freezing accord-
ing to regimen 3 in sugar broth; freezing on regimens 1 and
2 in distilled water and sugar broth for bacteria E. faecium
N167; E. faecium N113 for the one on all three regimens in
distilled water, according to regimens 2 and 3 in physiologi-
cal solution, on regimen 1 in sugar broth. In the rest experi-
mental conditions the viability of three bacteria types was
lower versus initial one. Freezing on different regimens and
various cryopreservation media did not affect initial bio-
chemical and biological properties of bacteria.
In the result of performed experiments there was shown
the possibility of effective cryopreservation of Enterococ-
cus bacteria. Cryopreservation provides the integrity of ini-
tial genetically determined biochemical and biological pro-
perties of bacteria of this genus.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-68975 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-01T17:44:55Z |
| publishDate | 2008 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Калашникова, М.Н. Перетятко, Е.Г. 2014-10-03T07:00:37Z 2014-10-03T07:00:37Z 2008 Криоконсервирование бактерий рода Enterococcus / М.Н. Калашникова, Е.Г. Перетятко // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 226. — рос., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68975 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Cтендовые доклады Криоконсервирование бактерий рода Enterococcus Cryopreservation of Enterococcus bacteria Article published earlier |
| spellingShingle | Криоконсервирование бактерий рода Enterococcus Калашникова, М.Н. Перетятко, Е.Г. Cтендовые доклады |
| title | Криоконсервирование бактерий рода Enterococcus |
| title_alt | Cryopreservation of Enterococcus bacteria |
| title_full | Криоконсервирование бактерий рода Enterococcus |
| title_fullStr | Криоконсервирование бактерий рода Enterococcus |
| title_full_unstemmed | Криоконсервирование бактерий рода Enterococcus |
| title_short | Криоконсервирование бактерий рода Enterococcus |
| title_sort | криоконсервирование бактерий рода enterococcus |
| topic | Cтендовые доклады |
| topic_facet | Cтендовые доклады |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68975 |
| work_keys_str_mv | AT kalašnikovamn kriokonservirovaniebakteriirodaenterococcus AT peretâtkoeg kriokonservirovaniebakteriirodaenterococcus AT kalašnikovamn cryopreservationofenterococcusbacteria AT peretâtkoeg cryopreservationofenterococcusbacteria |