Витрификация стволовых клеток
Saved in:
| Published in: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Date: | 2008 |
| Main Authors: | , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2008
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68992 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Витрификация стволовых клеток / А. Хелбиг, Я. Наалджик, А. Штолцинг // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 243. — рос., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-68992 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Хелбиг, А. Наалджик, Я. Штолцинг, А. 2014-10-03T13:49:48Z 2014-10-03T13:49:48Z 2008 Витрификация стволовых клеток / А. Хелбиг, Я. Наалджик, А. Штолцинг // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 243. — рос., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68992 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Cтендовые доклады Витрификация стволовых клеток Vitrification of Stem Cells Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Витрификация стволовых клеток |
| spellingShingle |
Витрификация стволовых клеток Хелбиг, А. Наалджик, Я. Штолцинг, А. Cтендовые доклады |
| title_short |
Витрификация стволовых клеток |
| title_full |
Витрификация стволовых клеток |
| title_fullStr |
Витрификация стволовых клеток |
| title_full_unstemmed |
Витрификация стволовых клеток |
| title_sort |
витрификация стволовых клеток |
| author |
Хелбиг, А. Наалджик, Я. Штолцинг, А. |
| author_facet |
Хелбиг, А. Наалджик, Я. Штолцинг, А. |
| topic |
Cтендовые доклады |
| topic_facet |
Cтендовые доклады |
| publishDate |
2008 |
| language |
Russian |
| container_title |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Vitrification of Stem Cells |
| issn |
0233-7673 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68992 |
| citation_txt |
Витрификация стволовых клеток / А. Хелбиг, Я. Наалджик, А. Штолцинг // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 243. — рос., англ. |
| work_keys_str_mv |
AT helbiga vitrifikaciâstvolovyhkletok AT naaldžikâ vitrifikaciâstvolovyhkletok AT štolcinga vitrifikaciâstvolovyhkletok AT helbiga vitrificationofstemcells AT naaldžikâ vitrificationofstemcells AT štolcinga vitrificationofstemcells |
| first_indexed |
2025-11-25T20:34:21Z |
| last_indexed |
2025-11-25T20:34:21Z |
| _version_ |
1850525378057076736 |
| fulltext |
Витрификация стволовых клеток
А. ХЕЛБИГ, Я. НААЛДЖИК, А. ШТОЛЦИНГ
Институт клеточной терапии и иммунологии, Лейпциг, Германия
Vitrification of Stem Cells
A. HELBIG, Y. NAALDJIK, A. STOLZING
Fraunhofer Institute for Cell Therapy and Immunology, Leipzig, Germany
Mesenchymal stem cells (MSCs) are multipotent proge-
nitor cells isolated from the bone marrow and they have the
capacity for self-renewal. MSCs have been shown to be
capable of differentiating into multiple cell types such as
adipocytes, chondrocytes, osteocytes, hepatocytes, cardio-
myocytes and neurons.
MSCs can be preserved by cryopreservation and there
proliferation rate and osteogenic potential seems to be
normal after thawing, thus allowing for future “off-the-shelf”
therapy approaches. Animal trials looking at reconstitution
of damaged tissues such as cartilage, bone, muscle, heart
muscle and tendon using MSCs have shown great promises
for the use in human treatment.
Cell or tissue viability after cryopreservation is lower
compared to fresh cells and tissues. Several factors interfere
with cryopreservation leading to cell and tissue damage
such as, fluctuation in the temperature during the freezing
and thawing of the cells, use of inadequate cryoprotectant
combi-nations.
Absence of the cryoprotectant DMSO (dimethylsul-
foxide), one of the most used cryoprotectant known in clini-
cal applications, is toxic for the cell and causes side effects
when injected into patient. It would be very useful if DMSO
could be eliminated completely.
The aim of our study is to determine a cryopreservation
method to conserve stem cells and to improve their viability
and differentiation potential after freezing using current
methods. New cryoprotectant mixtures need to be identified
in order to minimize toxicity and to eliminate the need for
washing off the DMSO before transfer into a patient.
Classical cryopreservation and controlled freezing
methods will be compared to vitrification using different
cryprotectant solutions.
By using the controlled rate freezing machine from Cryo-
Med we are able to work with different freezing protocols.
After freezing the cells, assays will be performed to deter-
mine cell viability using the trypan blue assay, measure cell
proliferation by MTT assay, and the ability of the stem
cells to differentiation will be analyzed by CFU-f and
quantitative ALP and methylene blue measurement.
We will use human/rat MSC and fibroblasts. Experiments
will be performed using cells between passage 2 and 4.
Different cryoprotectants penetrating cells (DMSO,
glycerol, propandiol) and non-penetrating (propylene
glycol and ethylene glycol) will be compared.
Specific protocols for the different cells types were
established and tested. We were able to set up protocols
eliminating the need for washing and use of serum in the
cryomedia. This will improve the transplantation success
in patients and minimize complications and side effects.
Мезенхимальные стволовые клетки (МСК) – мульти-
потентные клетки-предшественники, выделенные из
костного мозга и способные к самообновлению. Пока-
зано, что МСК могут дифференцироваться во многие
типы клеток: адипоциты, хондроциты, остео-циты,
гепатоциты, кардиомиоциты и нейроны.
Мезенхимальные стволовые клетки можно сохранять
с помощью криобиологических методов, скорость их
пролиферации и остеогенный потенциал после размора-
живания остаются нормальными, что делает возмож-
ным их будущее использование уже при существующих
терапевтических подходах. Эксперименты на животных
по восстановлению поврежденных тканей ( хрящ, кость,
мышцы, мышцы сердца и связки) с использованием
МСК показали их перспективность при лечении заболева-
ний человека.
Жизнеспособность клеток или тканей после крио-
консервирования ниже таковой для свежих клеток и тка-
ней. При криоконсервировании такие факторы, как флук-
туация температуры при замораживании и оттаивании,
сочетание криопротекторов приводят к повреждению
клеток и тканей.
Диметилсульфоксид (ДМСО), один из наиболее
используемых в клинической практике криопротекторов,
является токсичным для клеток и вызывает побочные
эффекты при введении пациенту. Поэтому было бы целе-
сообразно полностью исключить ДМСО.
Цель исследования – определение способа крио-
консервирования, сохраняющего стволовые клетки,
повышающего их жизнеспособность и потенциал диф-
ференцировки после замораживания, с использованием
современных методов; идентификация новых комбина-
ций криопротекторов для минимизации токсичности и
устранения необходимости отмывания ДМСО перед
применением клеток.
Мы сравним классическое криоконсервирование и
контролируемые методы замораживания с витрифика-
цией, используя различные растворы криопротекторов.
Используя устройство CryoMed с контролируемой
скоростью замораживания, мы можем применять в
работе различные протоколы замораживания. После
замораживания клеток в образцах мы будем определять
выживаемость клеток, используя тест на окрашивание
трипановым синим, измерять пролиферацию клеток с
помощью стандартного теста МТТ, а также анализиро-
вать способность стволовых клеток к дифференцировке
с помощью КОЕ-ф, количественной АЛФ и измерения
метиленового синего.
Мы будем использовать МСК человека/крысы и
фибробласты. Эксперименты будут проводиться на
клетках между 2-м и 4-м пассажами. Будут сравниваться
различные крипротекторы, проникающие в клетку
(ДМСО, глицерин, пропандиол) и непроникающие
(пропиленгликоль и этиленгликоль).
Установлены и проверены специальные протоколы
для различных типов клеток. Мы смогли определить
протоколы, исключающие необходимость отмывания и
использования сыворотки в криосредах, что повысит
успешность трансплантаций и уменьшит осложнения и
побочные эффекты.
243 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №2
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №2
|