Изучение криозащитного действия холинхлорида при замораживании лейкоцитов до –40°C
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Дата: | 2008 |
| Автори: | , , , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2008
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68996 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Изучение криозащитного действия холинхлорида при замораживании лейкоцитов до –40°C / О.О. Зайцева, Е.П. Сведенцов, О.Н. Соломина, Т.В. Туманова, Г.А. Никулина, С.В. Утемов, А.А. Костяев, Ф.С. Шерстнев // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 247. — рос., англ. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-68996 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Зайцева, О.О. Сведенцов, Е.П. Соломина, О.Н. Туманова, Т.В. Никулина, Г.А. Утемов, С.В. Костяев, А.А. Шерстнев, Ф.С. 2014-10-03T13:57:53Z 2014-10-03T13:57:53Z 2008 Изучение криозащитного действия холинхлорида при замораживании лейкоцитов до –40°C / О.О. Зайцева, Е.П. Сведенцов, О.Н. Соломина, Т.В. Туманова, Г.А. Никулина, С.В. Утемов, А.А. Костяев, Ф.С. Шерстнев // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 247. — рос., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68996 ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Cтендовые доклады Изучение криозащитного действия холинхлорида при замораживании лейкоцитов до –40°C Study of Choline Chloride Cryoprotective Effect Under Leukocyte Freezing Down to – 40°C Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Изучение криозащитного действия холинхлорида при замораживании лейкоцитов до –40°C |
| spellingShingle |
Изучение криозащитного действия холинхлорида при замораживании лейкоцитов до –40°C Зайцева, О.О. Сведенцов, Е.П. Соломина, О.Н. Туманова, Т.В. Никулина, Г.А. Утемов, С.В. Костяев, А.А. Шерстнев, Ф.С. Cтендовые доклады |
| title_short |
Изучение криозащитного действия холинхлорида при замораживании лейкоцитов до –40°C |
| title_full |
Изучение криозащитного действия холинхлорида при замораживании лейкоцитов до –40°C |
| title_fullStr |
Изучение криозащитного действия холинхлорида при замораживании лейкоцитов до –40°C |
| title_full_unstemmed |
Изучение криозащитного действия холинхлорида при замораживании лейкоцитов до –40°C |
| title_sort |
изучение криозащитного действия холинхлорида при замораживании лейкоцитов до –40°c |
| author |
Зайцева, О.О. Сведенцов, Е.П. Соломина, О.Н. Туманова, Т.В. Никулина, Г.А. Утемов, С.В. Костяев, А.А. Шерстнев, Ф.С. |
| author_facet |
Зайцева, О.О. Сведенцов, Е.П. Соломина, О.Н. Туманова, Т.В. Никулина, Г.А. Утемов, С.В. Костяев, А.А. Шерстнев, Ф.С. |
| topic |
Cтендовые доклады |
| topic_facet |
Cтендовые доклады |
| publishDate |
2008 |
| language |
Russian |
| container_title |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Study of Choline Chloride Cryoprotective Effect Under Leukocyte Freezing Down to – 40°C |
| issn |
0233-7673 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/68996 |
| citation_txt |
Изучение криозащитного действия холинхлорида при замораживании лейкоцитов до –40°C / О.О. Зайцева, Е.П. Сведенцов, О.Н. Соломина, Т.В. Туманова, Г.А. Никулина, С.В. Утемов, А.А. Костяев, Ф.С. Шерстнев // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 2. — С. 247. — рос., англ. |
| work_keys_str_mv |
AT zaicevaoo izučeniekriozaŝitnogodeistviâholinhloridaprizamoraživaniileikocitovdo40c AT svedencovep izučeniekriozaŝitnogodeistviâholinhloridaprizamoraživaniileikocitovdo40c AT solominaon izučeniekriozaŝitnogodeistviâholinhloridaprizamoraživaniileikocitovdo40c AT tumanovatv izučeniekriozaŝitnogodeistviâholinhloridaprizamoraživaniileikocitovdo40c AT nikulinaga izučeniekriozaŝitnogodeistviâholinhloridaprizamoraživaniileikocitovdo40c AT utemovsv izučeniekriozaŝitnogodeistviâholinhloridaprizamoraživaniileikocitovdo40c AT kostâevaa izučeniekriozaŝitnogodeistviâholinhloridaprizamoraživaniileikocitovdo40c AT šerstnevfs izučeniekriozaŝitnogodeistviâholinhloridaprizamoraživaniileikocitovdo40c AT zaicevaoo studyofcholinechloridecryoprotectiveeffectunderleukocytefreezingdownto40c AT svedencovep studyofcholinechloridecryoprotectiveeffectunderleukocytefreezingdownto40c AT solominaon studyofcholinechloridecryoprotectiveeffectunderleukocytefreezingdownto40c AT tumanovatv studyofcholinechloridecryoprotectiveeffectunderleukocytefreezingdownto40c AT nikulinaga studyofcholinechloridecryoprotectiveeffectunderleukocytefreezingdownto40c AT utemovsv studyofcholinechloridecryoprotectiveeffectunderleukocytefreezingdownto40c AT kostâevaa studyofcholinechloridecryoprotectiveeffectunderleukocytefreezingdownto40c AT šerstnevfs studyofcholinechloridecryoprotectiveeffectunderleukocytefreezingdownto40c |
| first_indexed |
2025-11-26T15:06:20Z |
| last_indexed |
2025-11-26T15:06:20Z |
| _version_ |
1850625693695606784 |
| fulltext |
247 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №2
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №2
Изучение криозащитного действия холинхлорида
при замораживании лейкоцитов до –40°C
О.О. ЗАЙЦЕВА1, Е.П. СВЕДЕНЦОВ1, О.Н. СОЛОМИНА1, Т.В.ТУМАНОВА1,
Г.А. НИКУЛИНА1, С.В. УТЕМОВ2, А.А. КОСТЯЕВ2, Ф.С. ШЕРСТНЕВ2
1Институт физиологии Коми НЦ УрО РАН, г. Сыктывкар
2Кировский НИИ гематологии и переливания крови Росмедтехнологий
Study of Choline Chloride Cryoprotective Effect
Under Leukocyte Freezing Down to –40°C
O.O. ZAJTSEVA1, E.P. SVEDENTSOV1, O.N. SOLOMINA1, T.V. TUMANOVA1,
G.A. NIKULINA1, S.V. UTEMOV2, A.A. KOSTYAEV2, F.S. SHERSTNEV2
1Institute of Physiology of Komi Scientific Center of Ural Division
of Russian Academy of Sciences, Syktyvkar, Russia
2Kirov Research Institute of Hematology and Blood Transfusion, Russia
В современной криобиологии актуальным остается
поиск новых веществ, обладающих криозащитными
свойствами. При замораживании эритроцитов крови
человека до –196°С по быстрой и медленной линейной
программам Гулевским А.К. и соавт. (1987 г.) проведено
исследование фазовых переходов и физических состоя-
ний водных растворов холинхлорида и его криозащитных
свойств. Авторы предложили применять данное вещест-
во как дополнительный ингредиент в составе криозащит-
ных сред для повышения их эффективности.
Цель работы − изучение криозащитных свойств
холинхлорида при замораживании ядерных клеток крови
до умеренно низкой температуры (–40°С) по экспонен-
циальному режиму.
Объектом исследования служил концентрат лейкоци-
тов, выделенный из цельной донорской крови путем
цитoфереза. Среднее количество биообъекта составляло
18,2±5,3 мл. Клетки смешивали в соотношении 1:1 с крио-
защитным раствором в пластиковом контейнере “Компо-
пласт 300” и выдерживали при комнатной температуре в
течение 20 мин. Использовали 2 криозащитных раствора:
1-й включал только эндоцеллюлярный криопротектор
1,2-пропандиол (ПД) в конечной концентрации 21%; 2-й –
дополнительно холинхлорид в конечной концентрации
1%. Замораживание клеток производили по медленной
трехэтапной программе сначала в спиртовой (96°) ванне
камеры электроморозильника “Криостат”, охлажденной
до –28°С в течение 15 мин, затем в морозильнике на
–40°С. Быстрое размораживание биообъекта осущест-
вляли через сутки в 20-литровой водяной ванне, нагретой
до 38°С в течение 45–60 с (в зависимости от объема
биообъекта) при интенсивном покачивании контейнера.
Результаты исследований показали, что при замора-
живании лейкоцитов с раствором 1 количество лейко-
цитов после их отогрева составило 67,2±16,1% от исход-
ного уровня, а с раствором 2 – достоверно (p<0,05) боль-
ше (89,6±9,2%). При анализе лейкоформулы в опытах с
раствором 1 количество гранулоцитов также было
достоверно ниже, чем в опытах с раствором 2, и состави-
ло 39,2±9,8 и 77,9±11,2% соответственно. Оценить фагоци-
тарную активность нейтрофилов (ФАН) стало возможно
только в опытах с раствором, содержащим холинхлорид.
Она наблюдалась у 66,4±5,2% отогретых нейтрофилов. В
опытах, содержащих только ПД, определить ФАН не
удалось в связи с быстрым разрушением клеток после
размораживания. Таким образом, применение холинхло-
рида совместно с основным криопротектором сущест-
венно повышает эффективность замораживания лейко-
цитов до –40°С по экспоненциальному режиму.
The search for new substances with cryoprotective
properties has remained to be actual in current cryobiology.
When freezing human erythrocytes down to –196°C with
rapid and slow linear programs [Gulevsky A.K. et al., 1987]
there were studied the phase transitions and physical states
of choline chloride aqueous solutions and its cryoprotective
properties. The authors have proposed to apply this sub-
stance as an additional ingredient as a part of cryoprotective
media to increase their efficiency. This research was aimed
to study the choline chloride cryoprotective properties when
freezing blood nucleated cells down to a moderately low
temperature (–40°°°°°C) by an exponential regimen.
Leukocyte concentrate, isolated from the whole donor
blood by cytapheresis, served as the research object. An
average number of bioobject was 18.2±5.3 ml. Cells were mi-
xed with cryoprotective solutions in 1:1 ratio in “Kompo-
plast 300” plastic container and exposed at room temperature
for 20 min. We have used 2 cryoprotective solutions: the 1st
one comprised only 1,2-propanediol (PD) endocellular cryo-
protectant in 21% final concentration; the 2nd one did an
additional choline chloride in 1% final concentration. Cells
were frozen by a slow three-step program primarily in alcohol
(96°) bath of “Kriostat” electric freezer chamber, cooled down
to –28°C for 15 min, then in a freezer at –40°C. Rapid thawing
of bioobject was realized one day later in 20 l water bath,
heated up to 38°C for 45-60 sec (depending on bioobject’s
volume) under intensive container shaking.
Research results have demonstrated that under freezing
of leukocytes with the 1st solution, their number after tha-
wing was 67.2±16.1% of an initial level, and with the 2nd one
it was statistically and significantly (p<0.05) higher
(89.6±9.2%). When analysing leukoformula in trials with
the 1st solution the granulocyte number was also statistically
and significantly lower, than in those with the 2nd solution
and made 39.2±9.8 and 77.9±11.2%, correspondingly. The
estimation of neutrophil phagocyte activity (NPA) occurred
to be possible only in trials with choline chloride-containing
solution. NPA was observed in 66.4±5.2% of thawed neutro-
phils. In the trials, containing only PD, the NPA deter-
mination failed due to a rapid cell destruction after freeze-
thawing. Thus, the choline chloride application together
with the main cryoprotectant significantly increases the
efficiency of leukocyte freezing down to –40°°°°°C by expo-
nential regimen.
|