Разработка эффективных условий криоконсервирования дрожжеподобных грибов рода Candida
Изучали влияние скорости охлаждения в диапазоне 0,25–100°С/мин и криопротекторов ДМСО, глицерина и этанола на жизнеспособность дрожжеподобных грибов C.albicans АТСС 885. Показано, что максимальную жизнеспособность обеспечивает замораживание со скоростью охлаждения от 3,5 до 10°С/мин в пивном сусле с...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Дата: | 2008 |
| Автори: | , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2008
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69022 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Разработка эффективных условий криоконсервирования дрожжеподобных грибов рода Candida / И.П. Высеканцев, В.Ф. Марценюк, А.Ю. Сиренко // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 3. — С. 297-298. — Бібліогр.: 4 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-69022 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Высеканцев, И.П. Марценюк, В.Ф. Сиренко, А.Ю. 2014-10-04T06:23:44Z 2014-10-04T06:23:44Z 2008 Разработка эффективных условий криоконсервирования дрожжеподобных грибов рода Candida / И.П. Высеканцев, В.Ф. Марценюк, А.Ю. Сиренко // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 3. — С. 297-298. — Бібліогр.: 4 назв. — рос. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69022 57.043: 579 Изучали влияние скорости охлаждения в диапазоне 0,25–100°С/мин и криопротекторов ДМСО, глицерина и этанола на жизнеспособность дрожжеподобных грибов C.albicans АТСС 885. Показано, что максимальную жизнеспособность обеспечивает замораживание со скоростью охлаждения от 3,5 до 10°С/мин в пивном сусле с добавлением 5% ДМСО или 5% глицерина. Вивчали вплив швидкості охолодження в діапазоні 0,25–100°С/хв і кріопротекторів ДМСО, гліцерину та етанону на життєздатність дріжджеподібних грибів C.albicans АТСС 885. Показано, що максимальну життєздатність забезпечує заморожування зі швидкістю охолодження 3,5 до 10°С/хв у пивному суслі з доданням 5% ДМСО або 5% гліцерину. The influences of freezing rates over 0.25–100°C/min range and DMSO, glycerol and ethanol cryoprotectants on the viability of yeast-like fungi C.albicans ATCC885 were studied. It has been shown that maximum level of survival of yeast-like fungi was provided by freezing rates over 3.5–10°C/min range in beer wort and adding of 5% DMSO or 5% glycerol. ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Секция «Низкотемпературное консервирование биологических объектов» Разработка эффективных условий криоконсервирования дрожжеподобных грибов рода Candida Design of Effective Cryopreservation Conditions for Candida Yeast-Like Fungi Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Разработка эффективных условий криоконсервирования дрожжеподобных грибов рода Candida |
| spellingShingle |
Разработка эффективных условий криоконсервирования дрожжеподобных грибов рода Candida Высеканцев, И.П. Марценюк, В.Ф. Сиренко, А.Ю. Секция «Низкотемпературное консервирование биологических объектов» |
| title_short |
Разработка эффективных условий криоконсервирования дрожжеподобных грибов рода Candida |
| title_full |
Разработка эффективных условий криоконсервирования дрожжеподобных грибов рода Candida |
| title_fullStr |
Разработка эффективных условий криоконсервирования дрожжеподобных грибов рода Candida |
| title_full_unstemmed |
Разработка эффективных условий криоконсервирования дрожжеподобных грибов рода Candida |
| title_sort |
разработка эффективных условий криоконсервирования дрожжеподобных грибов рода candida |
| author |
Высеканцев, И.П. Марценюк, В.Ф. Сиренко, А.Ю. |
| author_facet |
Высеканцев, И.П. Марценюк, В.Ф. Сиренко, А.Ю. |
| topic |
Секция «Низкотемпературное консервирование биологических объектов» |
| topic_facet |
Секция «Низкотемпературное консервирование биологических объектов» |
| publishDate |
2008 |
| language |
Russian |
| container_title |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Design of Effective Cryopreservation Conditions for Candida Yeast-Like Fungi |
| description |
Изучали влияние скорости охлаждения в диапазоне 0,25–100°С/мин и криопротекторов ДМСО, глицерина и этанола на жизнеспособность дрожжеподобных грибов C.albicans АТСС 885. Показано, что максимальную жизнеспособность обеспечивает замораживание со скоростью охлаждения от 3,5 до 10°С/мин в пивном сусле с добавлением 5% ДМСО или 5% глицерина.
Вивчали вплив швидкості охолодження в діапазоні 0,25–100°С/хв і кріопротекторів ДМСО, гліцерину та етанону на життєздатність дріжджеподібних грибів C.albicans АТСС 885. Показано, що максимальну життєздатність забезпечує заморожування зі швидкістю охолодження 3,5 до 10°С/хв у пивному суслі з доданням 5% ДМСО або 5% гліцерину.
The influences of freezing rates over 0.25–100°C/min range and DMSO, glycerol and ethanol cryoprotectants on the viability of yeast-like fungi C.albicans ATCC885 were studied. It has been shown that maximum level of survival of yeast-like fungi was provided by freezing rates over 3.5–10°C/min range in beer wort and adding of 5% DMSO or 5% glycerol.
|
| issn |
0233-7673 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69022 |
| citation_txt |
Разработка эффективных условий криоконсервирования дрожжеподобных грибов рода Candida / И.П. Высеканцев, В.Ф. Марценюк, А.Ю. Сиренко // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 3. — С. 297-298. — Бібліогр.: 4 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT vysekancevip razrabotkaéffektivnyhusloviikriokonservirovaniâdrožžepodobnyhgribovrodacandida AT marcenûkvf razrabotkaéffektivnyhusloviikriokonservirovaniâdrožžepodobnyhgribovrodacandida AT sirenkoaû razrabotkaéffektivnyhusloviikriokonservirovaniâdrožžepodobnyhgribovrodacandida AT vysekancevip designofeffectivecryopreservationconditionsforcandidayeastlikefungi AT marcenûkvf designofeffectivecryopreservationconditionsforcandidayeastlikefungi AT sirenkoaû designofeffectivecryopreservationconditionsforcandidayeastlikefungi |
| first_indexed |
2025-11-25T23:50:50Z |
| last_indexed |
2025-11-25T23:50:50Z |
| _version_ |
1850586950085378048 |
| fulltext |
297 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №3
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №3
УДК 57.043: 579
И.П. ВЫСЕКАНЦЕВ*, В.Ф. МАРЦЕНЮК, А.Ю. СИРЕНКО
Разработка эффективных условий криоконсервирования
дрожжеподобных грибов рода Candida
UDC 57.043: 579
I.P. VYSEKANTSEV*, V.F. MARTSENYUK, A.YU. SIRENKO
Design of Effective Cryopreservation Conditions
for Candida Yeast-Like Fungi
Изучали влияние скорости охлаждения в диапазоне 0,25–100°С/мин и криопротекторов ДМСО, глицерина и этанола на
жизнеспособность дрожжеподобных грибов C.albicans АТСС 885. Показано, что максимальную жизнеспособность обеспечивает
замораживание со скоростью охлаждения от 3,5 до 10°С/мин в пивном сусле с добавлением 5% ДМСО или 5% глицерина.
Ключевые слова: дрожжеподобные грибы, жизнеспособность, криоконсервирование, криопротекторы.
Вивчали вплив швидкості охолодження в діапазоні 0,25–100°С/хв і кріопротекторів ДМСО, гліцерину та етанону на
життєздатність дріжджеподібних грибів C.albicans АТСС 885. Показано, що максимальну життєздатність забезпечує
заморожування зі швидкістю охолодження 3,5 до 10°С/хв у пивному суслі з доданням 5% ДМСО або 5% гліцерину.
Ключові слова: дріжджеподібні гриби, життєздатність, кріоконсервування, кріопротектори.
The influences of freezing rates over 0.25–100°C/min range and DMSO, glycerol and ethanol cryoprotectants on the viability of
yeast-like fungi C.albicans ATCC885 were studied. It has been shown that maximum level of survival of yeast-like fungi was provided
by freezing rates over 3.5–10°C/min range in beer wort and adding of 5% DMSO or 5% glycerol.
Key-words: yeast-like fungi, viability, cryopreservation, cryoprotectants.
* Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию:
ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38
(057) 373-31-26, факс: +38 (057) 373-30-84, электронная почта:
cryo@online.kharkov.ua
Институт проблем криобиологии и криомедицины
НАН Украины, г. Харьков
Дрожжеподобные грибы рода Candida играют
определенную роль в патогенезе заболеваний
кожи, желудочно-кишечного тракта, органов систе-
мы репродукции и аутоиммунных заболеваний. В
связи с этим создаются коллекции клинических
изолятов этих грибов для разработки рациональных
схем лечения, создания новых антифунгальных
препаратов, исследования механизмов резистент-
ности к этим препаратам [1].
Наиболее эффективными способами хранения
грибов рода Candida являются лиофилизация и
криоконсервирование. Технологии криоконсервиро-
вания грибов рода Candida в настоящее время
разрабатываются. И вместе с тем дрожжеподоб-
ные грибы, являясь низшими эукариотами с непро-
должительным циклом деления, представляют
удобную модель для изучения криоповреждения и
криозащиты клеток.
Цель данного исследования – изучение влияния
режимов охлаждения и состава консервирующей
среды на жизнеспособность дрожжеподобных гри-
бов рода Candida.
Материалы и методы
В работе использовали коллекционный штамм
C. albicans АТСС 885.
Культуру C. albіcans выращивали в пивном сус-
ле на протяжении 24 ч до начала стационарной фа-
зы роста, которая характеризуется относительно
высокой криоустойчивостью для большинства
классов микроорганизмов [3, 4].
Опыты проводили с суспензиями клеток на пив-
ном сусле (8% Б) с концентрацией 1×107 клеток/мл.
Жизнеспособность клеток определяли “чашеч-
ным методом” Коха по числу макроколоний, вы-
росших на чашке [2].
Образцы размораживали на водяной бане при
30°С.
Результаты и обсуждение
Было изучено влияние криопротекторов на сох-
ранность клеток C. albicans. Показатели жизне-
способности C. albicans после экспозиции с исполь-
зованными криопротекторами приведены на рис.1.
Полученные результаты показывают, что 5%
ДМСО, 5% глицерина и 1; 2 и 3 М растворы этанола
не оказывают токсического действия на клетки
C. albicans при экспозиции в течение 30 и 60 мин.
Экспозиция с ДМСО и глицерином в концентрации
10 и 15% приводит к достоверному снижению жиз-
неспособности клеток C. albicans.
В экспериментах по изучению влияния режимов
замораживания на грибы C. albicans образцы
охлаждали до –40 °С/мин со скоростями охлаж-
дения 0,25; 1; 3,5; 7; 10; 20; 35; 80 и 100 °С/мин,
после чего образцы переносили в жидкий азот.
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na-
tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
* To whom correspondence should be addressed: 23,
Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373
3126, fax: +380 57 373 3084, e-mail:cryo@online.kharkov.ua
298 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №3
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №3
Рис. 1. Зависимость жизнеспособности C.albicans от
экспозиции с криопротекторами: 1 – 5% ДМСО; 2 – 10%
ДМСО; 3 – 15% ДМСО; 4 – 5% глицерин; 5 – 10%
глицерин; 6 – 15% глицерин; 7 – 1 М этанол; 8 – 2 М
этанол; 9 – 3 М этанол. – 30 мин; – 60 мин.
Вид концентрации криопротектора
Ж
из
не
сп
ос
об
но
ст
ь
кл
ет
ок
,
%
о
т
ко
нт
ро
ля
Рис. 2. Зависимость жизнеспособности грибов C. albicans
от скорости охлаждения.
Скорость охлаждения, °С/мин
Ж
из
не
сп
ос
об
но
ст
ь
кл
ет
ок
,
%
о
т
ко
нт
ро
ля
Результаты жизнеспособности грибов после ука-
занных режимов охлаждения приведены на рис.2.
Построенная кривая зависимости жизнеспо-
собности от скорости охлаждения показывает, что
максимальную жизнеспособность при заморажи-
вании C. albicans обеспечивают скорости охлаж-
дения от 3,5 до 10 и 100°С/мин.
Была изучена жизнеспособность клеток дрож-
жеподобных грибов C. аlbicans после заморажи-
вания до –196°С со скоростями от 0,25 до 100°С/мин
в разных криозащитных средах с последующим
хранением при –196°С на протяжении 8 месяцев.
Было установлено, что на жизнеспособность кле-
ток C. аlbicans достоверно влияют состав криоза-
щитной среды и режим охлаждения (рис.3). Мак-
симальную жизнеспособность обеспечивает замо-
раживание со скоростью охлаждения от 3,5 до
0
20
40
60
80
100
120
1 2 3 4 5 6 7 8 9
Ж
из
не
сп
ос
об
но
ст
ь
кл
ет
ок
,
КО
Е×
10
6
Скорость охлаждения, °С/мин
10°С/мин в пивном сусле с добавлением 5%
ДМСО или 5% глицерина.
Выводы
1. Было изучено влияние экспозиции с крио-
протекторами ДМСО, глицерином, этанолом в
разных концентрациях на жизнеспособность клеток
C. albіcans. Показано, что ДМСО и глицерин в
концентрации 5% и этанол в концентрации 1–3 М
на протяжении 60 мин не приводят к гибели клеток
C. albіcans.
2. Исследовано влияние скорости охлаждения
в диапазоне 0,25–100°С/мин на жизнеспособность
клеток C. albіcans. Установлено, что максималь-
ную сохранность клеток C. albіcans, суспендиро-
ванных в пивном сусле, обеспечивает охлаждение
со скоростями от 3,5 до 10°С/мин.
3. Экспериментально показано криозащитное
действие криопротекторов ДМСО и глицерина при
замораживании грибов C. albіcans.
Рис. 3. Зависимость жизнеспособности грибов C.аlbicans
от состава криозащитной среды и скорости охлаждения: 1–
без криопротектора; 2 – 5% глицерина; 3 – 2 М этанол; 4 –
5% ДМСО; 5 – 10% глицерина; 6 – 10% ДМСО; 7 – 1 М
этанол.
Литература
Биргер М.О. Справочник по микробиологическим и виру-
сологическим методам исследования.– М.: Медицина,
1967.– 463 с.
Луста К.А., Фихте Б.А. Методы определения жизнеспо-
собности микроорганизмов / Под ред. В.К. Ерошина.–
Пущино: ОНТИ НЦБИ АН СССР, 1990.– 186 с.
Практикум по микробиологии / Под. ред. Н.С. Егорова.–
М.: Изд-во МГУ, 1976.– 307 с.
Руководство к практическим занятиям по медицинской
микробиологии, вирусологии и иммунологии / Под ред.
В.В. Теца.– М.: Медицина, 2002.– 351 с.
Поступила 8.07.2008
1.
2.
3.
4.
0
50
100
150
200
250
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
1
2
3
4
5
6
7
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
|