Инфицированность пуповинной крови и эмбрионов ранних сроков гестации и гемопоэз в эмбриональной печени
Методом ПЦР исследованы образцы плаценты, материнской и пуповинной крови. Общее количество инфицированных образцов пуповинной крови составило 5,4%, плаценты – 20%. В анамнезе рожениц сведений о наличии данных инфекционных заболеваний не было. Исследование абортивных эмбрионов показало, что 47% пораж...
Saved in:
| Published in: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Date: | 2008 |
| Main Authors: | , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2008
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69039 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Инфицированность пуповинной крови и эмбрионов ранних сроков гестации и гемопоэз в эмбриональной печени / Г.С. Лобынцева, И.В. Ворожка, А.В. Ситникова // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 3. — С. 355-360. — Бібліогр.: 8 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-69039 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Лобынцева, Г.С. Ворожка, И.В. Ситникова, А.В. 2014-10-04T07:00:52Z 2014-10-04T07:00:52Z 2008 Инфицированность пуповинной крови и эмбрионов ранних сроков гестации и гемопоэз в эмбриональной печени / Г.С. Лобынцева, И.В. Ворожка, А.В. Ситникова // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 3. — С. 355-360. — Бібліогр.: 8 назв. — рос. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69039 616/618 Методом ПЦР исследованы образцы плаценты, материнской и пуповинной крови. Общее количество инфицированных образцов пуповинной крови составило 5,4%, плаценты – 20%. В анамнезе рожениц сведений о наличии данных инфекционных заболеваний не было. Исследование абортивных эмбрионов показало, что 47% поражено различными видами инфекций, которые определяются уже на 6–10 неделе развития. Изучен клеточный состав популяции гемопоэтических клеток, выделенных из эмбриональной печени плодов 7–12 недель гестации, и установлено его изменение при появлении внутриутробных инфекций. Методом ПЦР досліджено зразки плаценти, материнської та пуповинної крові. Загальна кількість інфікованих зразків пуповинної крові склала 5,4%, плаценти − 20%. В анамнезі породіль відомостей про наявність даних інфекційних захворювань не було. Дослідження абортивних ембріонів показало, що 47% уражено різними видами інфекцій, які виявляються вже на 6–10 тижні розвитку. Вивчен клітинний склад популяції гемопоетичних клітин, вилучених із ембріональної печінки плодів 7–12 тижнів гестації, та встановлено його зміну при появі внутрішньоутробних інфекцій. With PCR there were studied the samples of placenta, maternal and cord blood. The total number of infected samples for cord blood made 5.4% and 20% for placenta. There were no data on the presence of infectious diseases in anamnesis of parturient women. The investigation of abortive embryos has shown that 47% were differently infected, and they can be found even at 6–10 developmental weeks. There was studied the cell composition of hemopoietic cell population isolated form embryonic liver of 7–12 gestation weeks’ fetuses and its change was established when revealing the intrauterine infections. ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Секция «Криобанк пуповинной крови. Перспективы применения криоконсервированных препаратов пуповинной крови в медицине» Инфицированность пуповинной крови и эмбрионов ранних сроков гестации и гемопоэз в эмбриональной печени Infection of Cord Blood and Embryos at Early Gestation Terms and Hemopoiesis in Embryonic Liver Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Инфицированность пуповинной крови и эмбрионов ранних сроков гестации и гемопоэз в эмбриональной печени |
| spellingShingle |
Инфицированность пуповинной крови и эмбрионов ранних сроков гестации и гемопоэз в эмбриональной печени Лобынцева, Г.С. Ворожка, И.В. Ситникова, А.В. Секция «Криобанк пуповинной крови. Перспективы применения криоконсервированных препаратов пуповинной крови в медицине» |
| title_short |
Инфицированность пуповинной крови и эмбрионов ранних сроков гестации и гемопоэз в эмбриональной печени |
| title_full |
Инфицированность пуповинной крови и эмбрионов ранних сроков гестации и гемопоэз в эмбриональной печени |
| title_fullStr |
Инфицированность пуповинной крови и эмбрионов ранних сроков гестации и гемопоэз в эмбриональной печени |
| title_full_unstemmed |
Инфицированность пуповинной крови и эмбрионов ранних сроков гестации и гемопоэз в эмбриональной печени |
| title_sort |
инфицированность пуповинной крови и эмбрионов ранних сроков гестации и гемопоэз в эмбриональной печени |
| author |
Лобынцева, Г.С. Ворожка, И.В. Ситникова, А.В. |
| author_facet |
Лобынцева, Г.С. Ворожка, И.В. Ситникова, А.В. |
| topic |
Секция «Криобанк пуповинной крови. Перспективы применения криоконсервированных препаратов пуповинной крови в медицине» |
| topic_facet |
Секция «Криобанк пуповинной крови. Перспективы применения криоконсервированных препаратов пуповинной крови в медицине» |
| publishDate |
2008 |
| language |
Russian |
| container_title |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Infection of Cord Blood and Embryos at Early Gestation Terms and Hemopoiesis in Embryonic Liver |
| description |
Методом ПЦР исследованы образцы плаценты, материнской и пуповинной крови. Общее количество инфицированных образцов пуповинной крови составило 5,4%, плаценты – 20%. В анамнезе рожениц сведений о наличии данных инфекционных заболеваний не было. Исследование абортивных эмбрионов показало, что 47% поражено различными видами инфекций, которые определяются уже на 6–10 неделе развития. Изучен клеточный состав популяции гемопоэтических клеток, выделенных из эмбриональной печени плодов 7–12 недель гестации, и установлено его изменение при появлении внутриутробных инфекций.
Методом ПЦР досліджено зразки плаценти, материнської та пуповинної крові. Загальна кількість інфікованих зразків пуповинної крові склала 5,4%, плаценти − 20%. В анамнезі породіль відомостей про наявність даних інфекційних захворювань не було. Дослідження абортивних ембріонів показало, що 47% уражено різними видами інфекцій, які виявляються вже на 6–10 тижні розвитку. Вивчен клітинний склад популяції гемопоетичних клітин, вилучених із ембріональної печінки плодів 7–12 тижнів гестації, та встановлено його зміну при появі внутрішньоутробних інфекцій.
With PCR there were studied the samples of placenta, maternal and cord blood. The total number of infected samples for cord blood made 5.4% and 20% for placenta. There were no data on the presence of infectious diseases in anamnesis of parturient women. The investigation of abortive embryos has shown that 47% were differently infected, and they can be found even at 6–10 developmental weeks. There was studied the cell composition of hemopoietic cell population isolated form embryonic liver of 7–12 gestation weeks’ fetuses and its change was established when revealing the intrauterine infections.
|
| issn |
0233-7673 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69039 |
| citation_txt |
Инфицированность пуповинной крови и эмбрионов ранних сроков гестации и гемопоэз в эмбриональной печени / Г.С. Лобынцева, И.В. Ворожка, А.В. Ситникова // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 3. — С. 355-360. — Бібліогр.: 8 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT lobyncevags inficirovannostʹpupovinnoikroviiémbrionovrannihsrokovgestaciiigemopoézvémbrionalʹnoipečeni AT vorožkaiv inficirovannostʹpupovinnoikroviiémbrionovrannihsrokovgestaciiigemopoézvémbrionalʹnoipečeni AT sitnikovaav inficirovannostʹpupovinnoikroviiémbrionovrannihsrokovgestaciiigemopoézvémbrionalʹnoipečeni AT lobyncevags infectionofcordbloodandembryosatearlygestationtermsandhemopoiesisinembryonicliver AT vorožkaiv infectionofcordbloodandembryosatearlygestationtermsandhemopoiesisinembryonicliver AT sitnikovaav infectionofcordbloodandembryosatearlygestationtermsandhemopoiesisinembryonicliver |
| first_indexed |
2025-11-25T20:39:20Z |
| last_indexed |
2025-11-25T20:39:20Z |
| _version_ |
1850528266369105920 |
| fulltext |
355 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №3
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №3
УДК 616/618
Г.С. ЛОБЫНЦЕВА*, И.В. ВОРОЖКА, А.В. СИТНИКОВА
Инфицированность пуповинной крови и эмбрионов ранних
сроков гестации и гемопоэз в эмбриональной печени
UDC 616/618
G.S. LOBYNTSEVA*, I.V. VOROZHKA, A.V. SITNIKOVA
Infection of Cord Blood and Embryos at Early Gestation
Terms and Hemopoiesis in Embryonic Liver
Методом ПЦР исследованы образцы плаценты, материнской и пуповинной крови. Общее количество инфицированных
образцов пуповинной крови составило 5,4%, плаценты – 20%. В анамнезе рожениц сведений о наличии данных инфекционных
заболеваний не было. Исследование абортивных эмбрионов показало, что 47% поражено различными видами инфекций,
которые определяются уже на 6–10 неделе развития. Изучен клеточный состав популяции гемопоэтических клеток, выделенных
из эмбриональной печени плодов 7–12 недель гестации, и установлено его изменение при появлении внутриутробных инфекций.
Ключевые слова: пуповинная кровь, эмбрионы, вирусные и урогенитальные инфекции, эмбриональный гемопоэз, клеточный
состав.
Методом ПЦР досліджено зразки плаценти, материнської та пуповинної крові. Загальна кількість інфікованих зразків пу-
повинної крові склала 5,4%, плаценти − 20%. В анамнезі породіль відомостей про наявність даних інфекційних захворювань не
було. Дослідження абортивних ембріонів показало, що 47% уражено різними видами інфекцій, які виявляються вже на 6–10
тижні розвитку. Вивчен клітинний склад популяції гемопоетичних клітин, вилучених із ембріональної печінки плодів 7–12
тижнів гестації, та встановлено його зміну при появі внутрішньоутробних інфекцій.
Ключові слова: пуповинна кров, ембріони, вірусні та урогенітальні інфекції, ембріональний гемопоез, клітинний склад.
With PCR there were studied the samples of placenta, maternal and cord blood. The total number of infected samples for cord
blood made 5.4% and 20% for placenta. There were no data on the presence of infectious diseases in anamnesis of parturient women.
The investigation of abortive embryos has shown that 47% were differently infected, and they can be found even at 6–10 developmental
weeks. There was studied the cell composition of hemopoietic cell population isolated form embryonic liver of 7–12 gestation weeks’
fetuses and its change was established when revealing the intrauterine infections.
Key-words: umbilical cord blood, embryos, viral and urogenital infections, embryonic hemopoiesis, cell composition.
* Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию:
пр. Космонавта Комарова, 3, г. Киев, Украина 03680;
тел.:+38(044)206-66-66, факс: +38(044) 206-66-66, электронная
почта: info@stemcellclinic.com
Институт клеточной терапии, г. Киев, Украина Institute of Cell Therapy, Kiev, Ukraine
* To whom correspondence should be addressed: 3, Komarova
prospect, Kiev, Ukraine 03680; tel.:+38 044 2066666, fax: +38 044
2066666, e-mail:info@stemcellclinic.com
Источниками стволовых клеток, применяемых
в трансплантологии, являются костный мозг,
пуповинная кровь, плацента и абортивные эмб-
рионы ранних сроков гестации. Чистота получае-
мых препаратов гарантирует их качественное
использование в клинике. Однако уровень инфек-
ционного заражения населения очень высок, осо-
бенно распространены урогенитальные инфекции
среди молодых людей детородного возраста, кото-
рые являются потенциальными донорами стволо-
вых клеток. Согласно рекомендациям МОЗ Украи-
ны необходимо обследовать донорскую кровь на
наличие инфекционной флоры (гепатиты В и С,
ВИЧ 1/2, трепонема) методом иммунофермент-
ного анализа (ИФА), поэтому мы провели более
широкие исследования пуповинной крови с по-
мощью полимеразной цепной реакции (ПЦР)
(Наказ МОЗ Украины “Про інфекційну безпеку
донорської крові та її компонентів” №385 від
11.09.2005 р.; “Застосування полімеразної ланцю-
гової реакції для виявлення збудників інфекційних
захворювань людини”. Метод. вказівки МВ
9.9.5.101-2003).
Ранее считалось, что наиболее частые возбу-
дители внутриутробных инфекции – цитомегалови-
русы, вирусы простого герпеса 1 и 2 типов, возбу-
дители токсоплазмоза и краснухи. Однако резуль-
таты последних исследований во многом изменили
представления как об этиологической структуре
внутриутробной инфекции, так и о частоте внутри-
утробного инфицирования в целом.
Цель работы – определение инфекционного
агента в образцах аутологичной кордовой крови и
плаценте, поступивших на длительное хранение в
криобанк согласно договора с пациентами с по-
мощью ПЦР и ИФА (Ліцензія Міністерства охо-
рони здоров’я України №118962, 2004 р.).
Материалы и методы
Проведен сравнительный анализ инфици-
рованности кордовой крови и абортивных плодов
6–12 недель гестации, полученных с согласия
356 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №3
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №3
женщин во время добровольного прерывания бере-
менности и подготовленных для клинических
испытаний (Приказ МЗ СССР №1695 от 30.12.1985:
Провести клинические испытания “Метода лече-
ния нарушений гемопоэза различного генеза путем
трансфузии криоконсервированных с 5% ДМСО
гемопоэтических клеток эмбриональной печени
человека”). Образцы хранились в криобанке при
–196° С. Клеточный состав популяции гемопоэти-
ческих клеток при наличии и отсутствии инфекций
исследован на мазках, окрашенных по Романов-
скому, под иммерсией при увеличении 10×40 на
микроскопе СХ41 Olympus. Микрофотографии об-
разцов сохранены в памяти компьютера.
Пероксидазную активность определяли бензи-
диновым методом [6].
Для ПЦР-анализа, включающего выделение
РНК/ДНК, амплификацию и детекцию результатов,
использовали тест-системы производства ЦНИИЭ
Роспотребнадзора (АмплиСенсиТМ , Россия), для
выделения РНК (гепатит С) – комплект “Рибо-
золь-А”, ДНК – комплекты “ДНК-Сорб-В” и
“Цитолизин”. Детекцию результатов проводили
методами гибридизационно-ферментного анализа
(ГИФА) (гепатит С и ВИЧ) и электрофореза.
Некоторые образцы дополнительно подвергали
ИФА. Стерильность контролировали по классичес-
ким микробиологическим методикам (Наказ МОЗ
України “Про інфекційну безпеку донорської крові
та її компонентів” №385 від 11.09.2005 р.).
Достоверность различий между вариантами
оценивали по критерию Стьюдента. При уровне
значимости Р<0,05 различия считали достовер-
ными.
Результаты и обсуждение
Договор на длительное хранение в криобанке
аутологичной пуповинной крови заключается с
роженицами, у которых не обнаружена патогенная
флора. Даже в таких случаях мы выявляем у жен-
щин возбудителей, но не каждый рожденный ребе-
нок будет обязательно инфицирован. Из данных
(табл. 1) видно, что из 55 исследованных образцов
цитомегаловирус определен в плаценте (7,2%), в
кордовой крови новорожденных вирус не выявлен,
EBV также не обнаружен в крови, но найден в
плаценте (3,6%), РНК вируса гепатита С выявлена
в 3,6% кордовой крови и 5,4% плаценты. В анамнезе
рожениц сведений о наличии инфекционных забо-
леваний не было.
Если роды протекали с осложнениями: ранний
отход вод, длительное нахождение плода в безвод-
ном пространстве, околоплодные воды с запахом
и измененным цветом, при бактериологическом
контроле кордовой крови и плаценты отмечено при-
сутствие бактериальной флоры, т.е. кровь (6,6%)
и плацента (25,5%) были нестерильными.
Многие авторы считают, что урогенитальные
и вирусные инфекции попадают гематогенным
путем, а бактериальная флора – восходящим (кон-
таминация) при родах. Существует мнение, что для
будущего ребенка опасно инфицирование женщины
во время беременности, а инфицирование до бере-
менности не представляет угрозы для внутриут-
робного плода.
Дальнейшие исследования показали возмож-
ность попадания вирусов в эмбрион до формиро-
вания плаценты.
Мы исследовали абортивные эмбрионы (табл. 2)
и установили, что наиболее распространенной ин-
фекцией является микоплазма (Mycoplasma homi-
nis) (17%), возбудитель выявляется с 6 по 12 не-
делю внутриутробного развития в ткани печени,
почек, сердца, мозга и кроветворных клетках эмб-
рионов. Хламидиями поражено 5% эмбрионов,
уреаплазмой – 6%, гепатитом С – 4%, ЕВV – 2,5%,
Таблица 1. Выявление инфекционного агента в аутологичной кордовой крови и плаценте (n=55)
Примечание: Кр – кровь; Пл – плацента.
тнегайынноицкефнИ
VMC VBE VCH VGH .ru.lpaerU ,VMC .ru.lpaerU
.lpocyM
,.moh
.ru.lpaerU
рК лП рК лП рК лП рК лП рК лП рК лП рК лП
ьтсомеачертсВ - + - + - + + - - + - + - +
- + - + + +
- + + +
- +
овтсечилоК
хыннаворицифни
%,воцзарбо
2,7 6,3 4,5 8,1 8,1 8,1 8,1
357 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №3
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №3
выявлено большое количество смешанных инфек-
ций. В общем 47% исследованных эмбрионов зара-
жено различными видами инфекций, которые опре-
деляются уже на 6–10-й неделе развития. Это
свидетельствует о том, что указанные выше пути
проникновения инфекционного агента в данном
случае не совсем корректны.
Кроме того, изменения в клетках, вызванные
данными возбудителями, могут иметь серьезные
последствия для здоровья будущего ребенка.
Например, при гепатите С вирус локализуется в
печени, оказывая цитопатическое действие, в
клетках появляется большое количество вакуолей
и многоядерность. При заражении хламидиозом
увеличивается количество моноцитов и макро-
фагов, которые захватывают и фагоцитируют
возбудителя.
При исследовании тканей иммуноферментным
методом 10–11-недельных эмбрионов, инфициро-
ванных ВИЧ и НСV, были обнаружены антитела к
данным возбудителям. В образцах, содержащих
хламидии, уреоплазму, микоплазму, антитела
выявлены единично на 11–12 неделе.
Дана морфофункциональная характеристика
популяции гемопоэтических клеток эмбриональной
печени человека разных сроков развития (5–12 не-
дель).
Было выделено несколько возрастных групп
женщин и проведено исследование клеточного сос-
тава гемопоэтических клеток в вариантах: 1) без
определения инфекционного загрязнения в пробах
(табл. 3); 2)в чистых препаратах (табл. 4); 3) в об-
разце, пораженном вирусом гепатита С (табл. 5).
При морфологическом и цитохимическом ана-
лизе клеточной популяции в первом варианте уста-
новлено наличие разнообразных клеток: от недиф-
ференцируемых бластов, лимфоцитоподобных
клеток до зрелых макрофагов и нейтрофилов.
Таблица 2. Выявление инфекционного агента в тканях плодов 6–12 недель гестации (n=200)
тнегайынноицкефнИ
воцзарбохыньлетижолоповтсечилок/).ден(иицатсегкорС
% АФИGgI
6 7 8 9 01 11 21
)VСН(СтитапеГ 3 4 1 4 1-VCHtA
)VМС(суриволагемотиЦ 1 1 1 5,1 -
)VВЕ(арраБнйетшпЭсуриВ 1 2 2 5,2 -
)VIH(атицифедонуммисуриВ 1 5,0 VIHtA
).dillаp.реrТ(аменаперТ 1 5,0 тенtA
).moh.poсуМ(,амзалпокиМ 2 2 8 4 7 6 5 71 -
).rt.malhС(иидималХ 2 1 2 3 2 5 тенtA
).ru.раегU(амзалпоерУ 2 4 2 2 1 1 6 тенtA
)VMC(VCH 1 5,0 тенtA
.ru.paerU,VIH 1
.moh.pocyM,VCH 1 5,0 -
.ru.paerU,VSH 1 5,0 -
.moh.pocyM,.rt.malhC 1 1 2 1 5,2 -
.ru.paerU,.moh.pocyM 1 1 2 1 2 3 -
.ru.paerU,.rt.malhC 1 5,0 тенtA
.moh.pocyM,VBE,VCH 1 5,0 -
.ru.раегU,VBE,VCH 1 5,0 VCHtA
VMC,VCH,VIH 1 5,0 VIHtA
ru.paerU,.moh.pocyM,.rt.malhС 1 5,0 -
358 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №3
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №3
В отпечатках и мазках 5–6-недельной печени
обнаружен высокий процент недифференцируемых
бластных клеток (НБК) (17,0±1,5), которые пред-
ставлены крупными клетками округлой формы с
высоким ядерно-цитоплазматическим отноше-
нием. Лимфоцитоподобные клетки составляют
4,0±0,6 %, на 7–8-й неделе развития их количество
достоверно не изменялось, на 9–12 неделе число
недифференцируемых бластных и лимфоцитопо-
добных клеток снижалось до 6,0±0,6 и 2,0±0,2%
соответственно (Р < 0,05). По-видимому, это связа-
но с увеличением массы органа и количества ге-
мопоэтических клеток, происходит “разведение”
популяции более дифференцированными клетками-
предшественниками гемопоэза. Лимфоциты выяв-
лялись единично только на 11–12 неделе развития
(1,2±0,4%).
Примитивные эритробластические элементы
при выявлении пироксидазной активности давали
в зависимости от типа клеток различные оттенки
желтого окрашивания (от ярко-желтого в эритро-
бластах I типа до желто-коричневого в эритро-
бластах III типа). Эти клетки представляли почти
половину клеточной популяции на 5–6 неделе
развития, затем к 7–8 неделе их количество снижа-
лось до 30%. Различие было достоверным на 8–
12 неделе. Данная генерация эритроидных клеток
заменялась клетками дефинитивного эритропоэза,
которые на 5–6 неделе составляли 14,0±
1,3%, а к концу 12 недели – 52,0±5,0%
(Р < 0,05).
На 5–8 неделе развития около 20%
клеток были представлены клетками
моноцитарно-макрофагального ростка,
затем их число достоверно снижалось.
Количество моноцитов на 11–12 неделе
составляло 2,6±0,4 %, а макрофагов –
6,0±1,7% [4]. На мазках также встреча-
лись единичные мегакариоциты и миело-
бластные элементы.
Таким образом, если не учитывать
наличие инфекционной флоры в образцах,
усредненная популяция гемопоэтических
клеток эмбриональной печени 5–12-
недельного возраста представлена клет-
ками эритроидного ряда, находящимися
на разной стадии развития, моноцитарно-
макрофагальными и в меньшей степени
миелоидно-гранулоцитарными клетка-
ми.
При анализе препаратов, приготовлен-
ных из образцов, в которых методом
ПЦР не обнаружено наличие вирусов и
урогенитальных инфекций (см. табл. 4),
мы не выявили того разнообразия кле-
Таблица 3. Клеточный состав популяции гемопоэтических клеток,
выделенных из печени эмбрионов 5–12 недель гестации
ымрофеынчотелК
.ден,аноирбмэтсарзоВ
6-5
)5=n(
8-7
)8=n(
01-9
)6=n(
21-11
)5=n(
еынвитимирП
ытсалбортирэ 3,3±0,54 6,1±0,23 69,3±00,92 7,1±0,03
еынвитинифиД
ытсалбортирэ 3,1±0,41 8,1±0,12 8,1±0,75 0,5±0,25
КБДН 5,1±0,71 9,0±0,41 5,1±0,6 6,0±0,6
иктелкеындопотицофмиЛ 6,0±0,4 6,0±0,6 4,0±0,3
ытицофмиЛ 0 0 0 4,0±2,1
ытсалбоноМ
ытицоноМ 6,0±0,7 4,1±0,7 5,0±0,2 4,0±0,2
игафоркаМ 7,1±0,31 7,0±0,61 7,0±0,3 6,1±0,6
ытсалболеиМ 0 56,0±00,3 10,0±2,0 2,0±6,0
ытицолеиМ
:ытицолунарГ 40,0±2,0 31,0±0,1 10,0±02,0 4,0±2,1
ытицоиракагеМ 40,0±2,0 42,0±08,0 2,0±5,0 4,0±8,0
ток, который присутствовал в инфицированном
препарате. На мазках встречались клетки эрит-
роидного и моноцитарно-макрофагального ростка.
Небольшой процент недифференцируемых бласт-
ных и лимфоцитоподобных клеток. Клетки мие-
лоидного ростка найдены единично в 11–12-не-
дельных эмбрионах.
Отсутствие раннего гранулопоэза может быть
обусловлено тем, что у эмбриона при отсутствии
инфекционных агентов нет необходимости в этом
типе клеток, а также присутствием ингибиторов
пролиферации, выделяемых тканями плода.
Однако гемопоэтические клетки-предшественники
эмбриональной печени могут дифференцироваться
в различные клеточные линии и этот запрет, как
мы увидим далее, может быть снят при появлении
внутриутробной инфекции.
При наличии вируса гепатита С клеточный
состав резко изменился (см. табл. 5): увеличилось
количество клеток моноцитарно-макрофагального
ростка, появились миелоидные предшественники,
зрелые гранулоциты и эозинофилы. Аналогичные
результаты получены при анализе мазков из образ-
цов, пораженных другими видами инфекций.
В табл. 5 (в скобках) приведены данные Kele-
men et al. [7], из которых видно, что имеются рас-
хождения в клеточном составе эмбриональной пе-
чени с результатами, полученными нами. Наличие
гранулоцитов свидетельствует о
присутствии патогенной флоры
в препаратах, представленных
Kelemen для изучения.
Выводы
Проведенные исследования
позволили установить, что неко-
торые возбудители проникают в
эмбрион на ранних сроках гес-
тации до полного формирования
плаценты.
Как осуществляется на дан-
ном этапе эмбрионального раз-
вития механизм защиты эмб-
риона от инфекции? У здорового
человека попадающие в орга-
низм вирусы и микроорганизмы
не всегда могут быть причиной
болезни. Они распознаются и
разрушаются в течение нес-
кольких часов благодаря меха-
низмам врожденного иммуни-
тета, которые не являются анти-
генспецифическими и не тре-
буют длительного периода для
их индукции. Эта ранняя фаза
ответа на инфекцию помогает
сохранять ее под контролем до
тех пор, пока антигенспеци-
фические лимфоциты активи-
руются [5].
Пиогенные микроорганизмы
(пневмококки, стафилококки,
стрептококки и др.) элимини-
руются благодаря нейтрофилу,
иммуноглобулину и компле-
тарного кровотока, что свидетельствует о восхо-
дящем пути инфицирования, т.е. из полости матки,
и приводит к неразвившейся беременности [2].
Если произошла имплантация бластоцисты в
пораженный инфекцией эндометрий, в инфици-
рованных эмбрионах включается механизм врож-
денного иммунитета, который запускает в проли-
ферацию клетки-предшественники грануломо-
ноцитопоэза. При этом увеличивается количество
моноцитов, макрофагов, а также стимулируется
миелопоэз, отсутствующий в норме на данном
этапе развития эмбриона. Появляются грануло-
циты и эозинофилы, которые также участвуют в
процессе фагоцитоза.
Следовательно, в эмбриональной печени среди
недифференцируемых бластных и лимфоцито-
подобных клеток присутствуют ранние предшест-
венники гемопоэза, способные пролиферировать и
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №3
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №3
359
Таблица 4. Клеточный состав популяции эмбриональных кроветворных
клеток при отсутствии вирусной и микоплазменной флоры
менту, причем микробы гибнут в нейтрофиле, а
комплемент и иммуноглобулины (опсонины)
усиливают этот процесс. Внутриклеточные воз-
будители разрушаются Т-лимфоцитами, NK-
клетками и макрофагами, причем эти группы
клеток обладают способностью синтезировать
цитокины, резко усиливающие их функциональные
свойства. Т-лимфоциты появляются у плода на 12-й
неделе внутриутробного периода, после этого
срока плод способен проявлять слабые реакции
гиперчувствительности замедленного типа и от-
торжения трансплантата [1].
При изучении влияния инфекционных агентов
на репродуктивную систему женщин было уста-
новлено, что уреоплазмы, микоплазмы, вирус прос-
того герпеса, обнаруженные в эндометрии, вызы-
вают морфофункциональные изменения в его
клетках, задержку формирования маточно-плацен-
ымрофеынчотелК
)3=n(.ден,аноирбмэтсарзоВ
7 8 9 01 11 21
ытицортирЭ 6,33 73 4,81 52 8,12 3,03
еынвитимирП
ытсалбортирэ 1,6 8,1 9,3 2,1 - -
еыннаворицнереффиД
,ытсалбортирэ
:хинзи
еыньлифозаб(пит1 )
)еынтаморхилоп(пит2
)ытсалбомрон(пит3
6,72
2,4
1,7
2,9
2,83
7,9
6,31
9,41
2,74
8,21
2,91
2,51
7,76
0,51
4,32
3,92
5,95
8,81
4,12
3,91
0,55
6,41
5,22
9,71
КБДН 0,2 2,5 5,2 6,0 6,1 8,1
еынбодопотицофмиЛ
иктелк 9,1 4,1 - - 7,0
ытсалбофмиЛ - - - - - -
ытицофмиЛ - - - - - -
ытсалбоноМ 2,11 2,5 4,5 - 2,8 3,4
ытицоноМ 2,01 5,2 4,4 3,5 6,1 4,1
игафоркаМ 0,2 2,1 9,2 6,0 0,1 1,2
ытсалболеиМ - - - - 1,0 3,0
ытицолеиМ - - - - - -
:ытицолунарГ
еынредяокчолап
еынредяотнемгес
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
ылифонизоЭ - - - - - -
ытицоиракагеМ - - - - - -
360
дифференцироваться в необходимый организму
кроветворный росток. По данным авторов [8], они
образуют в 30 раз больше колоний, чем клетки
кордовой крови, и в 90 раз больше, чем гемопо-
этические клетки костного мозга. Кроме того,
эмбриональные гемопоэтические клетки обладают
высоким потенциалом самовоспроизводства, что
имеет большое значение при их клиническом
применении [3].
Установлено, что инфекционные агенты могут
проникать в эмбрион на ранних стадиях гестации.
Присутствие патогенов вызывает изменения в
клетках эмбриональной печени, которая в 1 три-
местре беременности является основным кровет-
ворным органом. Изменяется направленность
дифференцировки гемопоэтических клеток-пред-
шественников. Поэтому при исследовании эмбрио-
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №3
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №3
ымрофеынчотелК
)3=n(.ден,аноирбмэтсарзоВ
7
)3=n(
8
)5=n(
(9
)1=n
01
)6=n(
11
)31=n(
21
)3=n(
ытицортирЭ 9,81 1,53 6,42 8,72 61 1,72
еынвитимирП
ытсалбортирэ )32(6,3 )9(8,0 )5,1(57,1 )6,0(5,1 4,1 )0(63,0
ытсалбортирэорП 9,81 1,53 6,42 8,72 61 1,72
еыннаворицнереффиД
,ытсалбортирэ
:хинзи
пит1
пит2
пит3
)57(3,15
3,51
3,42
7,11
)68(3,34
7,31
4,81
2,11
)69(6,35
8,8
3,33
3,21
)89(0,05
31
8,52
2,11
7,34
51
7,23
0,6
)79(2,15
5,01
9,02
8,91
КБДН )8,0(5,4 )3,2(5,2 )5,1(0,7 )2,0(4,6 -2,4 )7,0(1,6
еындопотицофмиЛ
иктелк 8,1 7,0 - 6,0 4,0 27,0
ытсалбофмиЛ 9,0 - - 51,0 62,0 -
ытицофмиЛ )5,0(- )40,0(- )2,0(- )0,0(- - )8,0(-
ытсалбоноМ 1,8 9,0 - 38,1 35,2 5,2
ытицоноМ - 8,1 - 57,2 36,2 80,1
игафоркаМ )3,1(5,4 )0,1(0,3 )2,1(- )4,0(07,1 02.2 )20,0(9,2
ытсалболеиМ 7,2 2,1 - 27,1 06,1 27,0
ытицолеиМ 8,1 2,1 2,5 67,0 69,0 27,0
:ытицолунарГ
еынредяокчолап
еынредяотнемгес
)4,0(-
-
-
)0,1(7,0
4,0
2,0
)8,0(7,1
-
-
)6,0(50,1
03,0
03,0
88,0
16,0
71,0
)51,0(25,2
27,0
63,0
ылифонизоЭ - 1,0 7,1 06,0 01,0 44,1
ытицоиракагеМ )20,0(- )8,0(1,0 )4,0(- )4,0(51,0 - )9,0(-
Таблица 5. Клеточный состав эмбриональных кроветворных клеток
человека при наличии HCV
Примечание: * – в скобках приведены данные [7].
нального кроветворения для
исключения разногласий в
приводимых данных необхо-
димо тщательно подбирать
исходный материал с пред-
варительной проверкой нали-
чия патогенной флоры.
Кроме того, важно прово-
дить тщательное микробио-
логическое обследование
молодых пар, планирующих
рождение ребенка, чтобы
провести лечение до бере-
менности, а не в 1 триместре,
когда имеется внутриутроб-
ное инфицирование плода,
поскольку проведенная тера-
пия может быть малоэффек-
тивной.
Литература
Гистология / Под ред. Ю.И.
Афанасьева, Н.А. Юриной.–
М.: Медицина, 2001.– 744 с.
Краснопольский В.И., Серова
В.А., Туманова Н.В. и др.
Влияния инфекционных аген-
тов на репродуктивную сис-
тему женщин // Рос. Вестник
акушера-гинеколога.– 2005.–
5 с.
Кухарчук А.Л., Радченко В.В.,
Сирман В.М. Стволовые клет-
ки: эксперимент, теория, кли-
ника.– Киев: КРС-Медицинские
технологии, 2004.– 504 с.
Лобынцева Г.С., Гладких Ю.В.,
Лобынцев Д.В., Гладких В.Ю.
Стволовые эмбриональные
гемопоэтические клетки че-
ловека.– Киев: Наук. думка,
2004.– 167 с.
Петров Р.В. Иммунология.– М., 1987.– 286 с.
Пирс Э. Гистохимия.– М.: Иностр. лит., 1962.– 962 с.
Kelemen E., Calvo V., Hiedner T.M. Atlas of human hemo-
poietic development.– New York: Spinger-Verlag, 1979.– 266 c.
Nicolini F.E., Holyoake T.L., Cashman J.D. et al. Unique
differentiation programs of human fetal liver stem cells shown
both in vitro and in vivo in NOD/SCID mice // Blood.– 1999.–
Vol. 94, N8.– P. 2686–2695.
Поступила 14.07.2008
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
|