Биофизические характеристики фолликулярной жидкости яичника человека до и после низкотемпературного консервирования
В работе исследованы основные биофизические параметры фолликулярной жидкости человека до и после действия низких температур. Показано незначительное влияние криоконсервирования на осмотическое давление, рН, плотность фолликулярной жидкости и увеличение динамической вязкости криоконсервированной фолл...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Дата: | 2008 |
| Автори: | , , , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Російська |
| Опубліковано: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2008
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69058 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Биофизические характеристики фолликулярной жидкости яичника человека до и после низкотемпературного консервирования / А.Ф. Тодрин, Н.Н. Чуб, О.В. Липина, В.В. Чеканова, Е.Е. Нипот, В.И. Пиняев, П. Тодоров, О.А. Горобченко // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 420-422. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1860125344657309696 |
|---|---|
| author | Тодрин, А.Ф. Чуб, Н.Н. Липина, О.В. Чеканова, В.В. Нипот, Е.Е. Пиняев, В.И. Тодоров, П. Горобченко, О.А. |
| author_facet | Тодрин, А.Ф. Чуб, Н.Н. Липина, О.В. Чеканова, В.В. Нипот, Е.Е. Пиняев, В.И. Тодоров, П. Горобченко, О.А. |
| citation_txt | Биофизические характеристики фолликулярной жидкости яичника человека до и после низкотемпературного консервирования / А.Ф. Тодрин, Н.Н. Чуб, О.В. Липина, В.В. Чеканова, Е.Е. Нипот, В.И. Пиняев, П. Тодоров, О.А. Горобченко // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 420-422. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| description | В работе исследованы основные биофизические параметры фолликулярной жидкости человека до и после действия низких температур. Показано незначительное влияние криоконсервирования на осмотическое давление, рН, плотность фолликулярной жидкости и увеличение динамической вязкости криоконсервированной фолликулярной жидкости приблизительно на 40%.
У роботі досліджено головні біофізичні параметри фолікулярної рідини людини до та після дії низьких температур. Виявлено незначний вплив кріоконсервування на осмолярність, рН, щільність фолікулярної рідини та збільшення динамічної в’язкості кріоконсервованої фолікулярної рідини приблизно на 40%.
In the work the basic biophysical parameters of human follicular fluid prior to and after cryopreservation have been investigated. It has been shown an insignificant effect of cryopreservation on osmotic pressure, pH and density of follicular fluid, and a dynamic viscosity of cryopreserved follicular fluid increases approximately by 40%.
|
| first_indexed | 2025-12-07T17:41:39Z |
| format | Article |
| fulltext |
420 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
УДК 612.621.014.462:615.014.41
А.Ф. ТОДРИН1, Н.Н. ЧУБ1*, О.В. ЛИПИНА1, В.В. ЧЕКАНОВА1,
Е.Е. НИПОТ1, В.И. ПИНЯЕВ1, П. ТОДОРОВ2, О.А. ГОРОБЧЕНКО3
Биофизические характеристики фолликулярной жидкости яичника
человека до и после низкотемпературного консервирования
UDC 612.621.014.462:615.014.41
F.A. TODRIN1, N.N. CHUB1*, O.V. LIPINA1, V.V. CHEKANOVA1,
E.E. NIPOT1, V.I. PINYAEV1, P. TODOROV2, O.A. GOROBCHENKO3
Biophysical Characteristics of Human Follicular Fluid
Prior To and After Low Temperature Preservation
В работе исследованы основные биофизические параметры фолликулярной жидкости человека до и после действия низких
температур. Показано незначительное влияние криоконсервирования на осмотическое давление, рН, плотность фолликулярной
жидкости и увеличение динамической вязкости криоконсервированной фолликулярной жидкости приблизительно на 40%.
Ключевые слова: фолликулярная жидкость, криоконсервирование.
У роботі досліджено головні біофізичні параметри фолікулярної рідини людини до та після дії низьких температур.
Виявлено незначний вплив кріоконсервування на осмолярність, рН, щільність фолікулярної рідини та збільшення динамічної
в’язкості кріоконсервованої фолікулярної рідини приблизно на 40%.
Ключові слова: фолікулярна рідина, кріоконсервування.
In the work the basic biophysical parameters of human follicular fluid prior to and after cryopreservation have been investigated.
It has been shown an insignificant effect of cryopreservation on osmotic pressure, pH and density of follicular fluid, and a dynamic
viscosity of cryopreserved follicular fluid increases approximately by 40%.
Key-words: follicular fluid, cryopreservation.
Фолликулярная жидкость (ФЖ) – биологически
активная среда яичников человека, которая играет
важную роль в процессах фолликулогенеза, ову-
ляции, созревания ооцита, транспорта и взаимо-
действия гамет [8]. В настоящее время при лече-
нии бесплодия методом экстракорпорального оп-
лодотворения (ЭКО) пациенткам проводится гор-
мональная стимуляция овуляции. Использование
высоких доз белковых и стероидных гормонов, а
также низкотемпературное консервирование (НТК)
могут влиять на физико-химические параметры
ФЖ.
Цель работы – исследование влияния заморажи-
вания-оттаивания на биофизические характерис-
тики фолликулярной жидкости яичника человека.
Материалы и методы
Фолликулярную жидкость получали в медицин-
ском центре репродукции и генетики “Имплант”
(г. Харьков) с согласия женщин, проходивших про-
грамму ЭКО. После аспирации фолликулов и по-
мещения яйцеклеток в условия культивирования
ФЖ делили на 2 образца: первый (контрольный)
исследовали в течение 3–6 ч после пункции фол-
ликулов, второй – расфасовывали в пластиковые
ампулы по 0,7–1,0 мл, маркировали и замора-
живали погружением в жидкий азот. Разморажи-
вали ФЖ на водяной бане (37°С) до образования
жидкой фазы. Значение рН в образцах ФЖ, полу-
ченных из больших 16–22 мм (БФ) и малых 14–
16 мм (МФ) фолликулов, измеряли на цифровом
ионометре “рН-301” (Германия) при 20°С. Опреде-
ляли буферную емкость в 20, 50 и 100% растворах
ФЖ [4]. Осмотическое давление ФЖ (n=44) ис-
следовали с помощью криоскопического метода на
осмометре ОМКА-01 (Украина). Плотность ФЖ
(n=6) измеряли в пикнометре (1мл) и вычисляли
по формуле:
m-m
0,99823m)-(mp
1
2 ×= ,
где m – масса сухого пикнометра; m1 – масса
пикнометра с дистиллированной водой; m2 – масса
пикнометра с ФЖ (в граммах).
* Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию:
ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38
(057) 373-31-19, факс: +38 (057) 373-30-84, электронная
почта:cryo@online.kharkov.ua
1Институт проблем криобиологии и криомедицины
НАН Украины, г. Харьков
2Институт иммунологии репродукции БАН, г.София
3Харьковский национальный университет им. В.Н. Каразина
* To whom correspondence should be addressed: 23, Pereyaslavskaya
str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 3733119 , fax: +380 57
373 3084, e-mail:cryo@online.kharkov.ua
1Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na-
tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
2Institute for Immunology of Reproduction of Bulgarian Academy of
Sciences, Sofia, Bulgaria
3V.N. Karazin Kharkov National University, Kharkov, Ukraine
421 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
Вязкость ФЖ определяли двумя
способами, предварительно центрифу-
гируя ее при 3000 об/мин 15 мин. При
первом способе использовали капил-
лярно-рамочный вискозиметр типа
Копли с капилляром длиной 98 мм и ра-
диусом узкой части 0,38 мм, широкой –
0,78 мм при напряжении сдвига 2,85;
3,80; 5,70; 7,60; 9,50 дин/см2 [7]. Для
измерения вязкости вторым способом
применяли специальный вискозиметр
с шириной щели капилляра 0,8–0,9 мм,
длиной – 2 мм, высотой 2–3,6 мкм [5].
Диэлектрическую проницаемость
ФЖ измеряли на дифференциальном
на который, по-видимому влияют, принимаемые
пациенткой в программе ЭКО гормональные бел-
ковые препараты. После криоконсервирования ос-
мотическое давление ФЖ снижалось независимо
от величины фолликулов.
При исследовании рН и плотности ФЖ было
показано, что криоконсервирование не влияет на
данные показатели (табл.1). Поддержка рН внут-
ренних сред организма осуществляется с помощью
физиологических и физико-химических механиз-
мов компенсации через буферные системы – кровь,
плазму и другие биологические жидкости, которые
характеризуются буферной емкостью [4]. Буфер-
ная ёмкость ФЖ составляла 0,6 моль/л, что сопос-
тавимо с буферной емкостью плазмы крови [4].
Однако в наших исследованиях значение рН
нативной ФЖ значительно выше, чем установлено
ранее [8]. По-видимому, данный факт связан со
стимуляцей овуляции в программе ЭКО, что необ-
ходимо учитывать при культивировании ооцитов
человека.
При измерении динамической вязкости первым
способом до и после замораживания была отмече-
Таблица 1. Биофизические параметры ФЖ до и после НТК
Примечание: * – различия достоверны при сравнении с данными для БФ,
р<0,05.
еымеуделссИ
ыртемарап
ЖФяанвитаН ЖФяаннаворивреснокеД
ФМ ФБ ФМ ФБ
Нр 20,0±170,8 50,0±281,8 40,0±651,8 80,0±962,8
,ьтсонтолП
м/гк 3 2201-1201 2201-1201
,ьтсонряломсО
мсОм 7,7±5,872 * 2,7±7,392 5,5±5,072 * 1,7±7,382
Таблица 2. Динамическая вязкость (измерение первым
способом)ФЖ до и после НТК
Примечание: * – различия достоверны при сравнении с данными для БФ,
р<0,05.
яиволсУ
атнемирепскэ
мс/нид,агивдсеинежярпаН 2
58,2 08,3 07,5 06,7 05,9
Пс,ьтсокзяВ
одФБзиЖФ
)41=n(КТН 11,0±4,4 12,0±04,3 02,0±20,3 91,0±24,2 50,0±22,2
ФБзиЖФ
КТНелсоп 81,0±4,4 21,0±3,3 81,0±00,3 12,0±83,2 40,0±20,2
одФМзиЖФ
)9=n(КТН 22,0±8,4 81,0±23,3 22,0±40,3 51,0±9,2 21,0±45,2
ФМзиЖФ
КТНелсоп 22,0±8,4 * 02,0±83,3 02,0±40,3 02,0±8,2 02,0±95,2
микроволновом диэлектрометре резонаторного
типа [3] и рассчитывали по изменению частоты
резонатора по формулам Дебая [2]. Для определе-
ния изменений диэлектрической проницаемости
∆ε эталоном была дистиллированная вода. Отно-
сительная ошибка измерений составляла 0,1%.
Статистическую обработку полученных резуль-
татов проводили с использованием критерия Стью-
дента-Фишера.
Результаты и обсуждение
Известно, что в яичниках при фолликулогенезе
осмотическое давление ФЖ связано с локальными
регуляторными механизмами осмоса. При росте
фолликула происходят многочисленные химичес-
кие преобразования, вследствие чего внутри фол-
ликулярных клеток повышается осмотическое дав-
ление, и ток жидкости направлен из крови через
клетки гранулезы в ФЖ [9]. Установлено, что осмо-
лярность ФЖ, полученной из МФ, была достовер-
но ниже, чем в ФЖ из БФ (табл. 1). Следует отме-
тить значительную индивидуальную вариабель-
ность данного показателя (от 245 до 305 мОсм),
на тенденция к ее увеличению в ФЖ,
полученной из МФ, и зависела от
напряжения сдвига (табл. 2).
При измерении вторым способом
вязкость ФЖ, аспирированной из
МФ, была достоверно выше, чем из
БФ. После криоконсервирования
вязкость ФЖ увеличивалась пример-
но на 40% независимо от величины
фолликулов (табл.3). Значительное
повышение вязкости после замора-
живания-оттаивания ФЖ, по-види-
мому, связано с появлением белко-
вых агрегатов [6].
При исследовании диэлектричес-
кой проницаемости ФЖ было пока-
зано, что ∆ε ФЖ, выделенной из МФ,
422 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
достоверно выше, чем в ФЖ, полученной из БФ,
однако замораживание-оттаивание незначительно
повышало ∆ε (4%). Увеличение ∆ε позволяет
предположить, что полученный эффект связан с
различным белковым и гормональным составом
ФЖ, полученной из разных фолликулов, и конформа-
ционными изменениями макромолекул в результате
действия низких температур. Аналогичную зави-
симость ∆ε после НТК наблюдали при иссле-
довании сыворотки кордовой крови человека [1].
Выводы
Замораживание ФЖ путем погружения в жид-
кий азот незначительно влияло на ее биофизичес-
кие характеристики, однако зависело от величи-
ны фолликулов.
Таблица 3. Вязкость (измерение вторым
способом) ФЖ яичника человека
до и после НТК
яиволсУ
атнемирепскэ
Пс,ьтсокзяВ
КТНод КТНелсоп
)8=n(ФБзиЖФ 32,0±98,1 63,0±36,2 2
)7=n(ФМзиЖФ 92,0±13,2 1 83,0±3,3 2,1
Примечания: 1 – различия достоверны при сравнении с
данными для БФ, р<0,05; 2 – различия достоверны при
сравнении с данными до НТК, р<0,05.
Литература
Горобченко О.А., Мошко Ю.А., Николов О.Т. и др. Влияние
режимов замораживания на диэлектрические свойства
сыворотки кордовой крови // Пробл. криобиологии.– 2004.–
№2.– С. 4–10.
Дебай П. Полярные молекулы.– М., 1931.– 245 с.
Николаев О.Т., Жиляков Т.А. Измерение комплексной ди-
электрической проницаемости жидких диэлектриков с
большими потерями // Журн. физ. химии.– 1991.– Т. 65,
№5.– С. 1312–1316.
Садовничая Л.П., Хухрянский. В.Г., Цыганенко А.Я.
Биофизическая химия.– Киев, 1986.– 68 с.
Тодрин А.Ф. Влияние гематокрита на вязкость суспензии
эритроцитов в капиллярном вискозиметре при малых раз-
мерах капилляров // Пробл. криобиологии.– 2005.– Т. 15,
№1.– С. 14–16.
Сhan T., Jafrin M.Y., Seshardi V., McKay C. Flow of red blood
cell suspensions through narrow two-dimensional channels //
Biorheology.– 1982.– Vol. 19, N1-2.– P. 253–267.
Сopley A.I., Scott G.W.,Glover F.A., Thorley R.S. Capillery
flow and wall adherrence of bovine blood, plasme and serum
in contact with glass and fibril surfacel // Kolloid Zeitschrifl.–
1960.– Vol. 68, N2.– Р. 101–107.
Edwards R.G. Follicular fluid // J. Reprod. Fertil.– 1974.–
Vol. 37, N1.– Р. 189–219.
Intragonadal regulation of reproduction / Ed. by P. Franchi-
mont, C.P. Channing.– London: Academic Press, 1981.– 210 p.
Поступила 07.07.08
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-69058 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T17:41:39Z |
| publishDate | 2008 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Тодрин, А.Ф. Чуб, Н.Н. Липина, О.В. Чеканова, В.В. Нипот, Е.Е. Пиняев, В.И. Тодоров, П. Горобченко, О.А. 2014-10-04T14:50:28Z 2014-10-04T14:50:28Z 2008 Биофизические характеристики фолликулярной жидкости яичника человека до и после низкотемпературного консервирования / А.Ф. Тодрин, Н.Н. Чуб, О.В. Липина, В.В. Чеканова, Е.Е. Нипот, В.И. Пиняев, П. Тодоров, О.А. Горобченко // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 420-422. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69058 612.621.014.462:615.014.41 В работе исследованы основные биофизические параметры фолликулярной жидкости человека до и после действия низких температур. Показано незначительное влияние криоконсервирования на осмотическое давление, рН, плотность фолликулярной жидкости и увеличение динамической вязкости криоконсервированной фолликулярной жидкости приблизительно на 40%. У роботі досліджено головні біофізичні параметри фолікулярної рідини людини до та після дії низьких температур. Виявлено незначний вплив кріоконсервування на осмолярність, рН, щільність фолікулярної рідини та збільшення динамічної в’язкості кріоконсервованої фолікулярної рідини приблизно на 40%. In the work the basic biophysical parameters of human follicular fluid prior to and after cryopreservation have been investigated. It has been shown an insignificant effect of cryopreservation on osmotic pressure, pH and density of follicular fluid, and a dynamic viscosity of cryopreserved follicular fluid increases approximately by 40%. ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Секция «Низкотемпературное консервирование биологических объектов» Биофизические характеристики фолликулярной жидкости яичника человека до и после низкотемпературного консервирования Biophysical Characteristics of Human Follicular Fluid Prior To and After Low Temperature Preservation Article published earlier |
| spellingShingle | Биофизические характеристики фолликулярной жидкости яичника человека до и после низкотемпературного консервирования Тодрин, А.Ф. Чуб, Н.Н. Липина, О.В. Чеканова, В.В. Нипот, Е.Е. Пиняев, В.И. Тодоров, П. Горобченко, О.А. Секция «Низкотемпературное консервирование биологических объектов» |
| title | Биофизические характеристики фолликулярной жидкости яичника человека до и после низкотемпературного консервирования |
| title_alt | Biophysical Characteristics of Human Follicular Fluid Prior To and After Low Temperature Preservation |
| title_full | Биофизические характеристики фолликулярной жидкости яичника человека до и после низкотемпературного консервирования |
| title_fullStr | Биофизические характеристики фолликулярной жидкости яичника человека до и после низкотемпературного консервирования |
| title_full_unstemmed | Биофизические характеристики фолликулярной жидкости яичника человека до и после низкотемпературного консервирования |
| title_short | Биофизические характеристики фолликулярной жидкости яичника человека до и после низкотемпературного консервирования |
| title_sort | биофизические характеристики фолликулярной жидкости яичника человека до и после низкотемпературного консервирования |
| topic | Секция «Низкотемпературное консервирование биологических объектов» |
| topic_facet | Секция «Низкотемпературное консервирование биологических объектов» |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69058 |
| work_keys_str_mv | AT todrinaf biofizičeskieharakteristikifollikulârnoižidkostiâičnikačelovekadoiposlenizkotemperaturnogokonservirovaniâ AT čubnn biofizičeskieharakteristikifollikulârnoižidkostiâičnikačelovekadoiposlenizkotemperaturnogokonservirovaniâ AT lipinaov biofizičeskieharakteristikifollikulârnoižidkostiâičnikačelovekadoiposlenizkotemperaturnogokonservirovaniâ AT čekanovavv biofizičeskieharakteristikifollikulârnoižidkostiâičnikačelovekadoiposlenizkotemperaturnogokonservirovaniâ AT nipotee biofizičeskieharakteristikifollikulârnoižidkostiâičnikačelovekadoiposlenizkotemperaturnogokonservirovaniâ AT pinâevvi biofizičeskieharakteristikifollikulârnoižidkostiâičnikačelovekadoiposlenizkotemperaturnogokonservirovaniâ AT todorovp biofizičeskieharakteristikifollikulârnoižidkostiâičnikačelovekadoiposlenizkotemperaturnogokonservirovaniâ AT gorobčenkooa biofizičeskieharakteristikifollikulârnoižidkostiâičnikačelovekadoiposlenizkotemperaturnogokonservirovaniâ AT todrinaf biophysicalcharacteristicsofhumanfollicularfluidpriortoandafterlowtemperaturepreservation AT čubnn biophysicalcharacteristicsofhumanfollicularfluidpriortoandafterlowtemperaturepreservation AT lipinaov biophysicalcharacteristicsofhumanfollicularfluidpriortoandafterlowtemperaturepreservation AT čekanovavv biophysicalcharacteristicsofhumanfollicularfluidpriortoandafterlowtemperaturepreservation AT nipotee biophysicalcharacteristicsofhumanfollicularfluidpriortoandafterlowtemperaturepreservation AT pinâevvi biophysicalcharacteristicsofhumanfollicularfluidpriortoandafterlowtemperaturepreservation AT todorovp biophysicalcharacteristicsofhumanfollicularfluidpriortoandafterlowtemperaturepreservation AT gorobčenkooa biophysicalcharacteristicsofhumanfollicularfluidpriortoandafterlowtemperaturepreservation |