Криоконсервированные клетки хориона – перспективный объект для биотехнологии

Криоконсервированные клетки хориона – перспективный объект для биотехнологии

Показана возможность применения криоконсервированных клеток хориона для восстановления участков повреждённого суставного хряща и в терапии ожогов. Показана можливість застосування кріоконсервованих клітин хоріона для відновлення ділянок ушкодженого хряща та терапії опіків. The possibility of cryopre...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Опубліковано в: :Проблемы криобиологии и криомедицины
Дата:2008
Автор: Гончарук, Е.И.
Формат: Стаття
Мова:Russian
Опубліковано: Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2008
Теми:
Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия»
Онлайн доступ:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69067
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Криоконсервированные клетки хориона – перспективный объект для биотехнологии / Е.И. Гончарук // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 459-461. — Бібліогр.: 4 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-69067
record_format dspace
spelling Гончарук, Е.И.
2014-10-04T15:09:41Z
2014-10-04T15:09:41Z
2008
Криоконсервированные клетки хориона – перспективный объект для биотехнологии / Е.И. Гончарук // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 459-461. — Бібліогр.: 4 назв. — рос.
0233-7673
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69067
616-001.17-08-092.9:576.535.2:611-013.84
Показана возможность применения криоконсервированных клеток хориона для восстановления участков повреждённого суставного хряща и в терапии ожогов.
Показана можливість застосування кріоконсервованих клітин хоріона для відновлення ділянок ушкодженого хряща та терапії опіків.
The possibility of cryopreserved chorion cell aplication for damaged cartilage restoration and burn therapy was demonstrated in experimental investigation.
Автор искренне благодарит Е.П. Жуликову, Н.А. Волкову и И.А. Засаднюка за оказанную плодотворную помощь.
ru
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
Проблемы криобиологии и криомедицины
Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия»
Криоконсервированные клетки хориона – перспективный объект для биотехнологии
Cryopreservation of Chorion cells as Prospective Object for Biotechnology
Article
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title Криоконсервированные клетки хориона – перспективный объект для биотехнологии
spellingShingle Криоконсервированные клетки хориона – перспективный объект для биотехнологии
Гончарук, Е.И.
Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия»
title_short Криоконсервированные клетки хориона – перспективный объект для биотехнологии
title_full Криоконсервированные клетки хориона – перспективный объект для биотехнологии
title_fullStr Криоконсервированные клетки хориона – перспективный объект для биотехнологии
title_full_unstemmed Криоконсервированные клетки хориона – перспективный объект для биотехнологии
title_sort криоконсервированные клетки хориона – перспективный объект для биотехнологии
author Гончарук, Е.И.
author_facet Гончарук, Е.И.
topic Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия»
topic_facet Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия»
publishDate 2008
language Russian
container_title Проблемы криобиологии и криомедицины
publisher Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
format Article
title_alt Cryopreservation of Chorion cells as Prospective Object for Biotechnology
description Показана возможность применения криоконсервированных клеток хориона для восстановления участков повреждённого суставного хряща и в терапии ожогов. Показана можливість застосування кріоконсервованих клітин хоріона для відновлення ділянок ушкодженого хряща та терапії опіків. The possibility of cryopreserved chorion cell aplication for damaged cartilage restoration and burn therapy was demonstrated in experimental investigation.
issn 0233-7673
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69067
citation_txt Криоконсервированные клетки хориона – перспективный объект для биотехнологии / Е.И. Гончарук // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 459-461. — Бібліогр.: 4 назв. — рос.
work_keys_str_mv AT gončarukei kriokonservirovannyekletkihorionaperspektivnyiobʺektdlâbiotehnologii
AT gončarukei cryopreservationofchorioncellsasprospectiveobjectforbiotechnology
first_indexed 2025-11-25T20:42:33Z
last_indexed 2025-11-25T20:42:33Z
_version_ 1850528286524833792
fulltext 459 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 18, 2008, №4 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 18, 2008, №4 УДК 616-001.17-08-092.9:576.535.2:611-013.84 Е.И.ГОНчАРУК Криоконсервированные клетки хориона – перспективный объект для биотехнологии UDC 616-001.17-08-092.9:576.535.2:611-013.84 E.I. GONCHARUK Cryopreservation of Chorion Cells as Prospective Object for Biotechnology Показана возможность применения криоконсервированных клеток хориона для восстановления участков повреждённого суставного хряща и в терапии ожогов. Ключевые слова: клеточная терапия, клетки хориона, ожоги, патология суставов. Показана можливість застосування кріоконсервованих клітин хоріона для відновлення ділянок ушкодженого хряща та терапії опіків. Ключові слова: клітинна терапія, клітини хоріона, опіки, патологія суглобів. The possibility of cryopreserved chorion cell aplication for damaged cartilage restoration and burn therapy was demonstrated in experimental investigation. Key-words: cell therapy, chorion cells, burns, joint pathology. Развитие клеточной биологии открывает новые перспективы в реконструктивной ортопедии [4], комбустиологии [1] и других областях медицины, связанных с репарацией тканей и органов. Несмот- ря на достижения и новые разработки консерватив- ных и оперативных методов в ортопедии, вопрос восстановления поврежденного суставного хряща далек от решения. Ожоги были и остаются серьез- ной медицинской и социальной проблемой, требую- щей поиска новых эффективных подходов к ее решению. В данном исследовании изложены данные, касающиеся использования клеток хориона ранних сроков гестации для терапии дефекта суставного хряща и ожогов 3 степени. Представленные ре- зультаты являются разделом проводящихся докли- нических исследований препарата криоконсервиро- ванных клеток хориона (ККХ). Материалы и методы Суспензию клеток хориона получали и криокон- сервировали по методикам [2, 3]. Исследования суставов выполнены на 24 сам- цах крыс линии Вистар массой 180–200 г. В опыте моделировали дефект суставного хряща без пов- реждения субхондрального слоя кости. Дефект на- носили в дистальном ненагружаемом суставном отделе бедренной кости диаметром 2 мм. На 3-и сутки в полость сустава вводили суспензию ККХ в количестве 105. Контроль: аналогичный дефект с введением 100 мкл физиологического раствора.. Ожоги 3 степени моделировали на самках лабо- раторных крыс линии Вистар массой 150–180 г од- ного возраста, которых содержали в одинаковых условиях. Опытная группа получала клеточную терапию с применением ККХ человека в коли- честве 105 /см2 на поверхность ожоговой раны на вторые сутки после нанесения ожога. Эффектив- ность лечения оценивали с учетом изменений размера и характеристик ожоговой поверхности, а также показателей количества лейкоцитов в крови (на 3, 10 и 20 сутки). Контрольную группу сос- тавляли животные без лечения. Крыс выводили из эксперимента на 21 сутки. Манипуляции проводили в соответствии с “Общими принципами экспериментов на животных”, одоб- ренными I Национальным конгрессом по биоэтике (20.09.04, г. Киев) и согласованными с положениями “Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей” (г. Страсбург, 1985). Для длительного наблюдения за клетками трансплантата in vivo использовали флюорес- центный зонд РКН-26 (Sigma). Детекцию меченых клеток проводили на криостатных срезах толщиной 5 мкм с помощью микроскопа Olympus. Результаты и обсуждение Для моделирования экспериментальной пато- логии сустава была выбрана описанная выше модель, поскольку механические повреждения являются наиболее распространенными причинами Адрес для корреспонденции: ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38 (057) 373-31-26, факс: +38 (057) 373- 30-84, электронная почта: cryo@online.kharkov.ua Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na- tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine * Address for copprespondence : 23, Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373 3126, fax: +380 57 373 3084, e- mail: cryo@online.kharkov.ua 460 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 18, 2008, №4 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 18, 2008, №4 патологий хряща коленного сустава. При этом хря- щевая ткань, постоянно подвергающаяся травма- тизации, раздражению продуктами лизиса, изме- нению химического состава синовиальной жид- кости в условиях нарушенного тканевого обмена, обладает сниженными регенераторными способ- ностями, что обусловливает развитие остеоарт- роза. Наблюдения показали, что контрольные животные в течение первых 8 дней с момента на- несения дефекта не опирались на оперированную лапу. У животных опытной группы уже через 5 су- ток наблюдения было отмечено улучшение мото- рики движения. У животных контрольной группы через 20 суток после повреждения суставного хряща выявлено увеличенное количество синовиальной жидкости. Дефект суставного хряща был частично наполнен тканью желтого цвета. Микроскопически дефект суставного хряща был заполнен гранулярной сое- динительной тканью с признаками формирования синовиального пласта с ворсинками на его поверх- ности. Поверхность регенерата неровная, матрикс дезорганизованный, особенно в поверхностной и средней зонах, что проявляется в его расслоении. Клеточный состав регенерата представлен преи- мущественно веретенообразными клетками, в ко- торых наблюдаются признаки дистрофии и нек- роза. Количество клеток неоднородное в разных отделах; более плотно они располагаются в глубо- кой зоне и местами в поверхностной. В участках невредимого материнского хряща местами наблю- дается отслоение ткани регенерата. В опытной группе патологических изменений со стороны капсулы и синовиальной оболочки не выявлено. Микроскопически дефект суставного хряща был полностью заполнен гиалиноподобной хрящевой тканью с ровной, однородной поверх- ностью. Местами поверхностная зона регенерата приобретала признаки фиброзной ткани. Кле- точный состав регенерата представлен клетками, которые морфологически приближаются к клет- кам гиалинового хряща. Количество клеток уве- личено, неоднородно в разных отделах, более плотно они располагались в глубокой зоне и мес- тами на поверхности. В участках невредимого материнского хряща местами наблюдалось от- слоение ткани регенерата. У животных, которым были трансплантированы меченые клетки, через 21 сутки после нанесения дефекта в криостатных срезах обнаруживали клет- ки с донорской меткой. Меченые клетки, которые флюоресцировали в красной зоне спектра, были расположены непосредственно над зоной дефекта равномерным компактным конгломератом. В не- которых случаях наблюдали диффузное располо- жение трансплантированных клеток в участках поврежденной хрящевой ткани. Изучение ранозаживляющей активности ККХ на модели ожоговых ран крыс показало, что на 3-и сутки после нанесения ожога площадь раны в контрольной группе составляла 7,2±0,6 см2. Пло- щадь ожоговой поверхности животных, которых лечили ККХ, была значительно меньше и сос- тавляла 5,6±0,3 см2. При этом не отмечалось гной- ного и сукровичного отделяемого из ран в отличие от ожогов животных контрольной группы. На 10-е сутки площадь ожогов в контрольной группе животных уменьшалась незначительно и равнялась 6,3±0,5 см2. Площади ожоговой поверхности, на которые наносили ККХ, была в 5 раз меньше контроля и в среднем составляла 0,8±0,1 см2. Раны были чистые без струпа. На 20-е сутки площадь ожоговой поверхности контрольных животных уменьшилась до 1,4±0,3 см2, что почти в 5 раз меньше в сравнении с соответствующими показа- телями на 10 сутки. У животных, которые подвер- гались терапии, раны практически отсутствовали. На месте ожога была молодая кожа с почти пол- ной эпителизацией. Площади ожоговой поверхности животных, которых подвергали лечению, были в 7 раз меньше площади ожога контрольных живот- ных. Содержание количества лейкоцитов в крови – один из показателей воспаления. Норма у крыс составляет 15,5–16,5×109 клеток/л. В результате проведенных исследований было установлено, что на 3 сутки после нанесения ожога в крови контроль- ных животных содержалось 44,6±2,3×109 клеток/л, что в 2,7 раз превышало норму. В группе, где про- водилось лечение ККХ, эти показатели составляли 21,1±2,3×109 клеток/л. На 10 сутки количество лейкоцитов умень- шилось практически в 2 раза относительно конт- рольных значений, что свидетельствовало об уменьшении воспаления. На 20 сутки лейкоциты в контроле продолжали оставаться выше нормы, тогда как в опытной группе их количество нор- мализовалось, что указывало на завершение ра- невого процесса. Гистологические исследования (не представлены) подтвердили полученные результаты. Выводы Введение в зону дефекта сустава культуры ККХ приводит к формированию гиалиноподобной хрящевой ткани в отличие от контрольной группы. Показано, что введенные донорские клетки встраи- ваются в поврежденную архитектонику хряща и оказывают содействие воспроизведению дефекта, что положительно влияет на ход репаративного процесса. Применение препарата ККХ при экспери- ментальных термических ожогах 3 степени у крыс привело к хорошему терапевтическому эффекту. 461 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 18, 2008, №4 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 18, 2008, №4 Было выявлено сокращение сроков эпителизации ран, наблюдалась положительная динамика плани- метрических показателей и содержания лейкоцитов в крови животных в сравнении с контролем. Полученные данные позволяют рассматривать ткань хориона как потенциальный источник при создании запасов криоконсервированных клеток для коррекции определенных патологических сос- тояний. Вероятно, терапевтическая эффективность ККХ как оптимизаторов тканевой регенерации обусловлена как мощным пролиферативным потенциалом, высокой пластичностью и низкой иммуногенностью клеток, так и активизацией про- цессов синтеза, продуцированием ряда гормонов, а также факторов роста, стимулирующих пролифе- рацию всех типов клеточных элементов, участ- вующих в процессе регенерации. Положительные результаты, которые мы получили при терапии с помощью ККХ моделей двух таких социально зна- чимых патологий, как заболевания суставов и ожо- ги, позволяют рекомендовать к дальнейшей работе предложенный препарат. Автор искренне благодарит Е.П. Жуликову, Н.А. Волкову и И.А. Засаднюка за оказанную плодо- творную помощь. Литература Золотовицкая Н.Н., Колсанов А.В., Волова Л.Т., Орлов Е.В. Экспериментально-клиническое обоснование приме- нения культуры фибробластов в лечении рубцовых дефектов кожи. Инновационные технологии в транс- плантации органов, тканей и клеток // Материалы Всерос. конф. Россия, Самара, 18-20 июня 2008.– С.177–180. Патент №64540А, МПК7А61К 35/48, Україна. Препарат «Ембріогель» для зовнішнього застосування та спосіб його отримання / О.І. Гончарук, С.В. Кощій, Т.П. Петренко, Г.О. Гапон, О.Б. Ревенко, В.І. Грищенко. Заявл. 24.06.03. Опубл. 16.02.2004. Бюл.№2, С. 4.42. Патент №58997А, МПК7А01N1/02, Україна. Спосіб кріоконсервування гемопоетичних клітин / В.І. Грищенко, В.П. Семиноженко, О.Ю. Петренко, А.І. Тарасов, Ю.О. Пет- ренко, В.П. Грищук, Ю.А. Дьомін. Заявл. 03.12.02. Опубл. 15.08.03. Бюл. №8. С. 4.9. Vacanti C.A., Vacanti J.P. Tissue engineering in orthopedic surgery// Orthopedic Clinics of North America.– 2000.– Vol. 31, N3.– P. 351–356. Поступила 23.07.2008 1. 2. 3. 4.

Схожі ресурси