Визначення експресії антигенів HLA нейроклітинами людини різного терміну гестації при культивуванні in vitro
Вивчена експресія антигенів HLA нейроклітинами (НК) людини різного терміну гестації та ступеня диференціювання на протеїновому рівні і на рівні мРНК методами імунофенотипування і RT-PCR. В процесі культивування НК людини 5–9 тижня гестації в середовищі DMEM + ретинолу ацетат зменшується кількість і...
Saved in:
| Published in: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Date: | 2008 |
| Main Authors: | , , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Ukrainian |
| Published: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2008
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69073 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Визначення експресії антигенів HLA нейроклітинами людини різного терміну гестації при культивуванні in vitro / М.І. Лісяний, Л.Д. Любич, В.М. Семенова, Л.П. Стайно, М.С. Висоцький, А.І. Потапова // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 486-489. — Бібліогр.: 19 назв. — укр. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1860059427178020864 |
|---|---|
| author | Лісяний, М.І. Любич, Л.Д. Семенова, В.М. Стайно, Л.П. Висоцький, М.С. Потапова А.І. |
| author_facet | Лісяний, М.І. Любич, Л.Д. Семенова, В.М. Стайно, Л.П. Висоцький, М.С. Потапова А.І. |
| citation_txt | Визначення експресії антигенів HLA нейроклітинами людини різного терміну гестації при культивуванні in vitro / М.І. Лісяний, Л.Д. Любич, В.М. Семенова, Л.П. Стайно, М.С. Висоцький, А.І. Потапова // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 486-489. — Бібліогр.: 19 назв. — укр. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| description | Вивчена експресія антигенів HLA нейроклітинами (НК) людини різного терміну гестації та ступеня диференціювання на протеїновому рівні і на рівні мРНК методами імунофенотипування і RT-PCR. В процесі культивування НК людини 5–9 тижня гестації в середовищі DMEM + ретинолу ацетат зменшується кількість і відсоток клітин, що експресують антигени HLA I і II класу на протеїновому рівні, та на рівні мРНК, тоді як присутність у середовищі факторів росту сприяє збереженню (FGF) або зростанню (EGF) кількості таких клітин. При культивуванні у DMEM кількість клітин Bulbus olfactorius, що експресують антигени гістосумісності I та II класів, зменшується з 10-ї по 20-у добу.
Изучена экспрессия антигенов HLA нейроклетками (НК) человека разного срока гестации и различной степени дифференциации на протеиновом уровне и на уровне мРНК методами иммунофенотипирования и RT-PCR. В процессе культи- вирования НК человека 5–9 недель гестации в среде DMEM + ретинола ацетат уменьшают количество и процент клеток, экспрессирующих антигены HLA I и II классов на протеиновом уровне мРНК, тогда как присутствие в среде факторов роста способствует сохранению (FGF) или нарастанию (EGF) количества таких клеток. При культивировании в DMEM количество клеток Bulbus olfactorius, экспрессирующих антигены гистосовместимости I и II классов, уменьшается с 10-х по 20-е сутки.
The HLA expression by human neurocells (NC) of different gestation term and differentiation on the protein and mRNA levels using methods of immunophenotyping and RT-PCR has been studied. Under culturing human NC of 5–6 week’ gestation term in DMEM + retinol acetate the amount and percentage of HLA I and II expressing cells on the protein and mRNA levels were decreased whereas the presence in the culturing medium of the growth factors contributed to preservation (FGF) or increasing (EGF) of positive expressing cells amount. Under culturing in DMEM the HLA I and II expressing Bulbus olfactorius cells number decreased from day 10th to 20th.
|
| first_indexed | 2025-12-07T17:03:12Z |
| format | Article |
| fulltext |
486 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
УДК 576.8.097.2:611-018.46-018.82:591.882
М.І. ЛіСЯНИЙ*, Л.Д. ЛЮБИч, В.М. СЕМЕНОВА, Л.П. СТАЙНО, М.С. ВИСОЦЬКИЙ, А.І. ПОТАПОВА
Визначення експресії антигенів HLA нейроклітинами людини
різного терміну гестації при культивуванні in vitro
UDC 576.8.097.2:611-018.46-018.82:591.882
M.I. LISYANYY*, L.D. LYUBICH, V.M. SEMENOVA, L.P. STAYNO, M.S. VYSOTSKIY, A.I. POTAPOVA
Study of Antigen Expression by Human Neurocells of Different
Gestation Term during Culturing In Vitro
Вивчена експресія антигенів HLA нейроклітинами (НК) людини різного терміну гестації та ступеня диференціювання на
протеїновому рівні і на рівні мРНК методами імунофенотипування і RT-PCR. В процесі культивування НК людини 5–9 тижня
гестації в середовищі DMEM + ретинолу ацетат зменшується кількість і відсоток клітин, що експресують антигени HLA I і II
класу на протеїновому рівні, та на рівні мРНК, тоді як присутність у середовищі факторів росту сприяє збереженню (FGF)
або зростанню (EGF) кількості таких клітин. При культивуванні у DMEM кількість клітин Bulbus olfactorius, що експресують
антигени гістосумісності I та II класів, зменшується з 10-ї по 20-у добу.
Ключові слова: нейроклітини, культивування, антигени.
Изучена экспрессия антигенов HLA нейроклетками (НК) человека разного срока гестации и различной степени диф-
ференциации на протеиновом уровне и на уровне мРНК методами иммунофенотипирования и RT-PCR. В процессе культи-
вирования НК человека 5–9 недель гестации в среде DMEM + ретинола ацетат уменьшают количество и процент клеток,
экспрессирующих антигены HLA I и II классов на протеиновом уровне мРНК, тогда как присутствие в среде факторов роста
способствует сохранению (FGF) или нарастанию (EGF) количества таких клеток. При культивировании в DMEM количество
клеток Bulbus olfactorius, экспрессирующих антигены гистосовместимости I и II классов, уменьшается с 10-х по 20-е сутки.
Ключевые слова: нейроклетки, культивирование, антигены.
The HLA expression by human neurocells (NC) of different gestation term and differentiation on the protein and mRNA levels
using methods of immunophenotyping and RT-PCR has been studied. Under culturing human NC of 5–6 week’ gestation term in
DMEM + retinol acetate the amount and percentage of HLA I and II expressing cells on the protein and mRNA levels were decreased
whereas the presence in the culturing medium of the growth factors contributed to preservation (FGF) or increasing (EGF) of positive
expressing cells amount. Under culturing in DMEM the HLA I and II expressing Bulbus olfactorius cells number decreased from day
10th to 20th.
Key-words: neurocells, culturing, antigens.
ДУ “Інститут нейрохірургії ім. акад. Ромоданова АМН України”,
м. Київ
* To whom correspondence should be addressed: 32,
Manuilskogo str., Kiev, Ukraine 04050; tel.:+380 44 4838193,
e-mail: lisyanyi@neuro.kiev.ua
Institute of Neurosurgery named after Acad. A.P. Romodanov of
Academy of Medical Sciences of Ukraine, Kiev, Ukraine
* Автор, якому необхідно направляти кореспонденцію:
вул. Мануїльського, 32, м. Київ, Україна 04050; тел.:+38 (044)
483-81-93, електронна пошта: lisyanyi@neuro.kiev.ua
Актуальним предметом досліджень є клітини
ембріонального мозку, нейральні стовбурові (НСК)
та прогеніторні (НПК) клітини [6, 8]. Інтенсивно
вивчається їх диференціювання в культурі та при
трансплантації у мозок, однак відкритими залиша-
ються питання про тривале виживання алотранс-
плантатів та механізми відторгнення стовбурових
клітин (СК).
На сьогодні не існує усталеної думки щодо екс-
пресії антигенів HLA I i II класів НСК. Молекули
HLA не виявлені у гамет, зиготи (запліднена
яйцеклітина) і на наступних стадіях поділу (морула,
бластоциста) [1]. Від стадії бластоцисти до стадії
ектоплацентарного конуса не спостерігається кла-
сичний набір антигенів МНС І класу на зовнішніх
клітинах ембріона або відмічається їх мала кіль-
кість [1]. За даними [10, 11], ембріональні СК люди-
ни експресують HLA-А, -В, -С в малій кількості,
тоді як у дослідженні [9] показано, що НСК людини
in vitro експресували тільки МНС ІІ класу. У
процесі диференціювання експресія HLA за одними
даними знижувалась [10, 15], за іншими – зростала
[11]. При культивуванні in vitro нейральних прекур-
сорів людини по мірі росту нейросфер збільшу-
валась експресія HLA І і ІІ класів [16].
Попередніми дослідженнями показано [3], що
нейроклітини (НК) мозку людини 5–9 тижнів
гестації містять 8–20% HLA-A, -B, -C+ – клітин і
10–30% – HLA-DR+ – клітин, тоді як експресія
мРНК HLA-A1 і HLA-DRa1 наростає від повної
відсутності або незначної кількості у нейральних
клітинах людини 5–9 тижнів гестації (НСК і ней-
ральні прогенітори) до часткової експресії у регіо-
нарних НСК зрілого мозку (клітини Bulbus olfac-
torius) і до значної експресії у клітинах білої і,
особливо, сірої речовини зрілого мозку.
Мета дослідження – вивчення експресії анти-
генів HLA нейральними стовбуровими клітинами
487 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
та нейроклітинами різного ступеня диференціації
при культивуванні in vitro.
Матеріали і методи
Матеріалом для дослідження були: 1) клітини
головного мозку людини 5, 7, 8 та 9 тижнів гестації;
2) клітини Bulbus olfactorius людини (зразки отри-
мані під час проведення оперативного видалення
пухлин у хворих із пухлинами головного мозку).
Суспензії нейральних клітин-попередників (НКП)
отримували за методикою [2]. Кількість і життє-
здатність клітин визначали згідно з рекомендаціями
[7]. Вплив складу культурального середовища на
НКП вивчали при культивуванні клітин у безсиро-
ватковому середовищі DМЕМ і додаванні в культу-
ральне середовище факторів росту: 1) ретинолу
ацетату (0,2 мг/мл, АТ “Київський вітамінний за-
вод”); 2) EGF (20 нг/мл, “Sigma”); 3) FGF (10 нг/мл,
“Sigma”). Експресію антигенів HLA (HLA-А, -В,
-С і HLA-DR) на культивованих НКП визначали
за допомогою імунофенотипування непрямим
імунофлюоресцентним методом [17], експресію
мРНК антигенів HLA (HLA-A1, HLA-DRa, HLA-
DQb, CIITA) – методом RT-PCR [3]. Математичну
обробку отриманих результатів проводили з
використанням пакета програм “Statistica 5.0”.
Результати і обговорення
Результати дослідження експресії антигенів
HLA-A, -B, -C i HLA-DR нативними нейроклітина-
ми людини на протеїновому рівні (табл. 1) пока-
зують, що НКП, які отримані з тканин мозку 5–
9 тижня гестації, містять в середньому 15–18%
HLA-A, -B, -C+ – клітин (розмах коливань 8,3–25,9)
і 17–21% HLA-DR+ – клітин (розмах коливань 10,3–
37,3). Це підтверджено даними [5, 18], які проде-
монстрували значну гетерогенність ембріонального
матеріалу 8–12-тижневих плодів людини. На 7–
8 добу культивування кількість HLA-A, -B, -C+ –
клітин у суспензіях клітин-попередників зменшува-
лась у 2–3 рази як під впливом ретинолу ацетату,
так і ростових факторів EGF і FGF. Однак відсоток
HLA-A, -B, -C+ – клітин був вищим у культурах
під впливом EGF і FGF (23–25%), ніж DМЕМ +
ретинол ацетат (15,67%). На 9–10 добу у культурах
під впливом ретинолу ацетату і EGF кількість HLA-
A, -B, -C+ – клітин зменшувалась, досягаючи 9–
10%, тоді як під впливом FGF відсоток HLA-A,
-B, -C+ – клітин залишався на рівні 20%, а їх кіль-
кість зростала вдвічі. На 13–14 добу кількість
HLA-A, -B, -C+– клітин у культурі під впливом рети-
нолу ацетату дещо збільшувалась, при цьому відсо-
ток +клітин зменшувався, а під впливом EGF зрос-
тала як кількість, так і відсоток HLA-A, -B, -C+ –
клітин. Таким чином, культивування нейроклітин
людини 5–9 тижня гестації у присутності ретинолу
ацетату сприяло зменшенню у 2,3 рази кількості і
відсотка клітин, що експресують антигени гістосу-
місності І класу; тоді як додавання в середовище
факторів росту залишало кількість цих клітин збере-
женою (FGF) протягом культивування або віднов-
лювало їх кількість (EGF) до 14 доби культивування.
Таблиця 1. Вплив культивування на експресію антигенів HLA-A, -B, -C i HLA-DR нативними
нейроклітинами людини 5–9 тижня гестації (M±m)
Примітка: * – різниця достовірна порівняно з показниками 0-ї доби (P<0,05); # – різниця достовірна порівняно з показниками
інших груп (P<0,05).
далкС
ащиводерес икинзакоП
ALH - ,A - ,B -C+ %,нитiлк- ALH - RD + %,нитiлк-
абоД абоД
0 8-7 01-9 41-21 0 8-7 01-9 41-21
+МЕМD
лонитер
)6=n(
котосдiВ
+ нитiлк 35,3±27,51 34,6±76,51 04,1±01,9
# 08,0±07,6 *# 06,5±07,71 09,5±05,51 01,1±04,31 03,0±06,3 *#
ьтсiкьлiК
+ ,нитiлк
× 01 6
26,0±00,1 41,0±13,0 20,0±11,0 20,0±32,0 06,0±11,1 31,0±03,0 20,0±71,0 20,0±21,0
+МЕМD
FGE
)4=n(
котосдiВ
+ нитiлк 75,3±67,81 34,2±01,32 01,1±03,01
# 28,0±02,81 # 30,8±32,12 03,2±06,71 - 03,0±00,84 *#
ьтсiкьлiК
+ ,нитiлк
× 01 6
90,0±56,0 40,0±91,0 20,0±01,0 20,0±64,0 92,0±55,0 30,0±41,0 - 20,0±02,1
+МЕМD
FGF
)4=n(
котосдiВ
+ нитiлк 75,3±67,81 51,2±04,52 45,1±08,91
# - 30,8±32,12 01,2±02,71 30,4±53,71 -
ьтсiкьлiК
+ ,нитiлк
× 01 6
90,0±56,0 90,0±42,0 90,0±05,0 - 92,0±55,0 30,0±71,0 81,0±63,0 -
488 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
Кількість HLA-DR+ – клітин зменшувалась на
7–8 добу культивування у всіх культурах, однак від-
соток +клітин змінювався незначно (табл. 1). На
9–14 добу під впливом ретинолу ацетату кількість
HLA-DR+ – клітин продовжувала зменшуватись,
тоді як під впливом EGF їх кількість на 13–14 добу
зросла вдвічі (до 48%). Ми не зареєстрували значної
зміни кількості HLA-DR+ – клітин під впливом FGF
у процесі культивування. Отже, культивування ней-
роклітин людини 5–9 тижня гестації у присутності
ретинолу ацетату сприяло зменшенню в 4–5 разів
кількості і відсотка клітин, що експресують антиге-
ни гістосумісності ІІ класу; тоді як додавання в
середовище факторів росту залишало кількість цих
клітин збереженою (FGF) протягом культивування
або збільшувало вдвічі їх кількість (EGF) до 14 до-
би культивування.
При культивуванні in vitro у середовищі DMEM
клітин Bulbus olfactorius (табл. 2) відсоток HLA-
A, -B, -C+ – i HLA-DR+ – клітин зменшувався на
20 добу. Таким чином, при культивуванні у DMEM
кількість клітин Bulbus olfactorius, що експре-
сують антигени гістосумісності І та ІІ класів, змен-
шується з 10 по 20 добу у 2–5 разів.
Крім дослідження на протеїновому рівні (іму-
нофенотипування), клітини досліджували на рівні
мРНК (табл. 3). Культивування протягом 14 діб у
середовищі DMEM не впливало на експресію
Таблиця 2. Вплив культивування на експресію
антигенів HLA-A, -B, -C i HLA-DR нейроклітинами
Bulbus olfactorius людини (% +клітин, M±m)
мРНК генів HLA; лише в одному зразку (9 тиж-
день гестації) зафіксовано слабку експресію мРНК
HLA-DRa1 на 12 добу культивування у DMEM.
Додавання у культиваційне середовище ростових
факторів (ретинол ацетат, EGF, FGF) не індукувало
експресію мРНК антигенів HLA у НК людини.
Нами також не зафіксовано в цих умовах експресії
мРНК CIITA – трансактиватора, який відповідає
за індукцію експресії генів HLA під впливом IFN-γ.
Це дозволяє припустити, що НК людини 7–8 тижня
гестації, культивовані у вказаних умовах, не повинні
збільшувати експресію антигенів HLA під впливом
прозапальних стимулів. Крім того, як ми показали
раніше [4], в результаті культивування у вказаних
умовах на 9–10 добу в культурі переважають ві-
ментин-позитивні нейральні попередники. З викла-
деного випливає, що отримувані нейральні прогені-
тори не експресують мРНК антигенів HLA і не
повинні збільшувати експресію антигенів HLA під
впливом прозапальних стимулів.
У виділених клітинах Bulbus olfactorius нами
зафіксовано експресію мРНК HLA-A1 та HLA-
DRa в одному із чотирьох зразків, але на 10 і 20 до-
бу культивування вона не виявлялась. В другому
зразку, навпаки, експресія мРНК HLA-A1 та HLA-
DRa виявлялась тільки на 10 добу культивування;
а в третьому зразку – не виявлялась у жодний із
всіх термінів дослідження.
Таким чином, НК людини 5–9 тижнів гестації
(НСК та нейральні прогенітори) не експресують
або експресують низькі рівні мРНК HLA-A1, HLA-
DRa, HLA-DQb, CIITA; тоді як клітини Bulbus
olfactorius (регіонарні НСК зрілого мозку) можуть
експресувати значно частіше мРНК HLA-A1 та
HLA-DRa. При культивуванні у DMEM змен-
шувалась також кількість клітин Bulbus olfactorius,
що експресують антигени гістосумісності І та ІІ
класів.
Отримані результати узгоджуються з деякими
відомими даними, однак вони суперечливі. Експре-
сія МНС І класу на поверхні ембріональних стов-
Таблиця 3. Вплив культивування на експресію мРНК антигенів HLA нативними нейроклітинами людини
абоД
яннавувитьлук
)5=n(
далкС
ащиводерес ALH - ,A - ,B -C
+ ALH - RD +
0 MEMD 73,3±50,5 )30,51-0(
20,6±27,01
)37,22-0(
01 MEMD 10,3±99,5 )04,11-08,1(
41,4±70,9
)05,12-49,1(
02 MEMD 73,1±15,2 )00,5-06,0(
74,1±16,2
)08,5-03,1(
козарЗ абоД
яннавувитьлук
ьтсiкьлiК
вiкзарз
ALHКНРмяiсерпскЕ
ALH - 1A ALH - aRD ALH - bQD ATIIC
инидюлКН
iцатсегвiнжит9-5 ¿
лонитер+МЕМD
0
7-6
01-9
41-21
)борп81(01=n
)борп6(4=n
)иборп3(2=n
борп5(4=n
)81/1(+
)6/1(+
0
0
)81/1(+
0
0
)5/1(+
0
0
0
0
0
0
0
0
suirotcaflosubluB
МЕМD
0
01
02
)иборп4(4=n
)иборп3(3=n
)иборп3(3=n
)4/1(+
)3/1(+
0
)4/2(+
)3/1(+
0
0
0
0
0
0
0
489 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
бурових клітин людини була дуже низькою і
зростала при диференціації in vitro та in vivo, а МНС
ІІ класу не експресувались на поверхні стовбурових
недиференційованих і диференційованих клітин [10].
За даними [16] при культивуванні in vitro нейраль-
них прекурсорів людини по мірі росту нейросфер
збільшувалась експресія HLA І і ІІ класів. За да-
ними фенотипічного аналізу НСК людини, отри-
маних з 8–12-тижневих плодів, перед початком
культивування кількість HLA-А, -В,- С+ – клітин ста-
новила 6,4–13,9%, HLA-DR+ – клітин – 3,0–9,8%;
через 14 діб культивування кількість HLA-А, -В,
-С+ – клітин – не більше 15%, HLA-DR+-клітин –
не менше 5% [18]. Культивування і диференціюван-
ня НСК супроводжувались зниженням експресії
антигенів МНС І класу [15]. В культурах феталь-
ного мозку людини in vitro спостерігалась експресія
HLA-DR в цитоплазмі і на клітинній поверхні GFAP+-
астроцитів [13, 14], яка зростала по мірі тривалості
культури і клітинних пасажів [12]. Фактор росту
bFGF збільшував експресію HLA І класу та
індукував низьку HLA-DR експресію на МСК [19].
За нашими даними, 10–17% нейроклітин людини
5–9 тижнів гестації експресують на своїй поверхні
антигени МНС ІІ класу, кількість яких зменшуєть-
ся, а при додаванні у середовище факторів росту
зберігається або зростає.
Висновки
В процесі культивування НК людини 5–9 тижнів
гестації в середовищі DMEM + ретинол ацетат змен-
шуються кількість і відсоток клітин, що експре-
сують антигени HLA І і ІІ класів як на протеїно-
вому рівні, так і на рівні мРНК, тоді як присутність
у середовищі факторів росту сприяє збереженню
(FGF) або зростанню (EGF) кількості таких клітин.
При культивуванні у DMEM кількість клітин Bulbus
olfactorius, що експресують антигени гістосу-
місності І та ІІ класів, зменшується з 10 по 20 добу.
Література
Демина Т.Н., Майлян Э.А., Гюльмамедова И.Д., Гюль-
мамедов В.А. Современные взгляды на иммунологию
гестационного процесса // Репродуктивное здоровье
женщины.– 2003.– Т. 13, №1.– С. 43–48.
Зозуля Ю.А., Лисяный Н.И., Любич Л.Д. и др. Длительное
культивирование in vitro криоконсервированных и натив-
ных нейроклеток эмбрионов человека // Укр. нейрохі-
рургічний журн.– 2003.– №2.– С. 11–14.
Лісяний М.І., Любич Л.Д., Семенова В.М. та інш.
Дослідження впливу експресії антигенів HLA нейрокліти-
нами людини різного терміну гестації in vitro // Імунологія
та алергологія.– 2008.– №1.– С. 14–19.
Любич Л.Д., Лисяный Н.И. Получение, культивирование
и индукция дифференцировки эмбриональных нейро-
клеток // Трансплантологія.– 2005.– Т. 8, №2.– С. 21–33.
Полтавцева Р.А., Марей М.В., Дубровина И.В. и др. Раз-
витие и дифференцировка мультипотентных нейральных
клеток человека in vitro // Докл. АН.– 2001.– Т. 379, №6.–
С. 845–849.
Репин В.С. Эмбриональная стволовая клетка: от фунда-
ментальных исследований в клинику// Патологич. физио-
логия и эксперимент. терапия.– 2001.– №2.– C. 3–8.
Руководство по культивированию нервной ткани.
Методы. Техника. Проблемы / В.П. Божкова, Л.А. Бре-
жестовский, В.М. Буравлев и др.– М.: Наука, 1988.– 318 с.
Цимбалюк В.И., Медведев В.В. Нейрогенные стволовые
клетки.– Киев, 2005.– 595 с.
Al Nimer F., Wennersten A., Holmin S. et al. MHC expression
after human neural stem cell transplantation to brain contused
rats // Neuroreport.– 2004.– Vol. 15, N12.– P. 1871–1875.
Draper J.S., Pigott C., Thomson J.A., Andrews P.W. Surface
antigens of human embryonic stem cells: changes upon
differentiation in culture // J. Anat.– 2002.– Vol. 200, N3.–
P. 249–258.
Drukker M., Katz G., Urbach A. et al. Characterization of the
expression of MHC proteins in human embryonic stem cells //
Proc. Natl. Acad. Sci. USA.– 2002.– Vol. 99, N15.– P. 9864–
9869.
Ennas M.G., Cocchia D., Silvetti E. et al. Immunocompetent
cell markers in human fetal astrocytes and neurons in culture //
J. Neurosci. Res.– 1992.– Vol. 32, N3.– P. 424–436.
Hassan-Zahraee M., Ladiwala U., Lavoie P.M. et al. Super-
antigen presenting capacity of human astrocytes // J. Neuro-
immunol.– 2000.– Vol. 102, N2.– P. 131–136.
McLaren F.H., Svendsen C.N., Van der Meide P., Joly E.
Analysis of neural stem cells by flow cytometry: cellular
differentiation modifies patterns of MHC expression // J.
Neuroimmunol.– 2001.– Vol. 112, N1–2.– P. 35–46.
Modo M., Mellodew K., Rezaie P. In vitro expression of major
histocompatibility class I and class II antigens by conditionally
immortalized murine neural stem cells // Neurosci. Lett.– 2003.–
Vol. 337, N2.– P. 85–88.
Odeberg J., Piao J.H., Samuelsson E.B. et al. Low immuno-
genicity of in vitro-expanded human neural cells despite high
MHC expression// J. Neuroimmunol.– 2005.–Vol. 161, N1–
2.– P. 1–11.
Parks D.R., Lanier L.L., Herzenberg L.A. Flow cytometry
and fluorescence activated cell sortimg (FACS) // In:
Handbook of Experimental Immunology/ Ed. by Weir D.M.–
Edinburgh: Blackwell Scientific, 1986.– P. 275–301.
Poltavtseva R.A., Marey M.V., Aleksandrova M.A. et al.
Evaluation of progenitor cell cultures from human embryos
for neurotransplantation // Brain Res. Dev. Brain Res.– 2002.–
Vol. 134, N1–2.– P. 149–154.
Sotiropoulou P.A., Perez S.A., Salagianni M. et al. Charac-
terization of the optimal culture conditions for clinical scale
production of human mesenchymal stem cells // Stem Cells.–
2006.– Vol. 24, N2.– P. 462–471.
Надійшла 05.06.2008
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-69073 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Ukrainian |
| last_indexed | 2025-12-07T17:03:12Z |
| publishDate | 2008 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Лісяний, М.І. Любич, Л.Д. Семенова, В.М. Стайно, Л.П. Висоцький, М.С. Потапова А.І. 2014-10-04T15:27:02Z 2014-10-04T15:27:02Z 2008 Визначення експресії антигенів HLA нейроклітинами людини різного терміну гестації при культивуванні in vitro / М.І. Лісяний, Л.Д. Любич, В.М. Семенова, Л.П. Стайно, М.С. Висоцький, А.І. Потапова // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 486-489. — Бібліогр.: 19 назв. — укр. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69073 576.8.097.2:611-018.46-018.82:591.882 Вивчена експресія антигенів HLA нейроклітинами (НК) людини різного терміну гестації та ступеня диференціювання на протеїновому рівні і на рівні мРНК методами імунофенотипування і RT-PCR. В процесі культивування НК людини 5–9 тижня гестації в середовищі DMEM + ретинолу ацетат зменшується кількість і відсоток клітин, що експресують антигени HLA I і II класу на протеїновому рівні, та на рівні мРНК, тоді як присутність у середовищі факторів росту сприяє збереженню (FGF) або зростанню (EGF) кількості таких клітин. При культивуванні у DMEM кількість клітин Bulbus olfactorius, що експресують антигени гістосумісності I та II класів, зменшується з 10-ї по 20-у добу. Изучена экспрессия антигенов HLA нейроклетками (НК) человека разного срока гестации и различной степени дифференциации на протеиновом уровне и на уровне мРНК методами иммунофенотипирования и RT-PCR. В процессе культи- вирования НК человека 5–9 недель гестации в среде DMEM + ретинола ацетат уменьшают количество и процент клеток, экспрессирующих антигены HLA I и II классов на протеиновом уровне мРНК, тогда как присутствие в среде факторов роста способствует сохранению (FGF) или нарастанию (EGF) количества таких клеток. При культивировании в DMEM количество клеток Bulbus olfactorius, экспрессирующих антигены гистосовместимости I и II классов, уменьшается с 10-х по 20-е сутки. The HLA expression by human neurocells (NC) of different gestation term and differentiation on the protein and mRNA levels using methods of immunophenotyping and RT-PCR has been studied. Under culturing human NC of 5–6 week’ gestation term in DMEM + retinol acetate the amount and percentage of HLA I and II expressing cells on the protein and mRNA levels were decreased whereas the presence in the culturing medium of the growth factors contributed to preservation (FGF) or increasing (EGF) of positive expressing cells amount. Under culturing in DMEM the HLA I and II expressing Bulbus olfactorius cells number decreased from day 10th to 20th. uk Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» Визначення експресії антигенів HLA нейроклітинами людини різного терміну гестації при культивуванні in vitro Study of Antigen Expression by Human Neurocells of Different Gestation Term during Culturing In Vitro Article published earlier |
| spellingShingle | Визначення експресії антигенів HLA нейроклітинами людини різного терміну гестації при культивуванні in vitro Лісяний, М.І. Любич, Л.Д. Семенова, В.М. Стайно, Л.П. Висоцький, М.С. Потапова А.І. Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» |
| title | Визначення експресії антигенів HLA нейроклітинами людини різного терміну гестації при культивуванні in vitro |
| title_alt | Study of Antigen Expression by Human Neurocells of Different Gestation Term during Culturing In Vitro |
| title_full | Визначення експресії антигенів HLA нейроклітинами людини різного терміну гестації при культивуванні in vitro |
| title_fullStr | Визначення експресії антигенів HLA нейроклітинами людини різного терміну гестації при культивуванні in vitro |
| title_full_unstemmed | Визначення експресії антигенів HLA нейроклітинами людини різного терміну гестації при культивуванні in vitro |
| title_short | Визначення експресії антигенів HLA нейроклітинами людини різного терміну гестації при культивуванні in vitro |
| title_sort | визначення експресії антигенів hla нейроклітинами людини різного терміну гестації при культивуванні in vitro |
| topic | Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» |
| topic_facet | Секция «Современные проблемы выделения, культивирования, дифференциации и криоконсервирования стволовых клеток. Клеточная и тканевая терапия» |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69073 |
| work_keys_str_mv | AT lísâniimí viznačennâekspresííantigenívhlaneiroklítinamilûdiniríznogotermínugestacííprikulʹtivuvanníinvitro AT lûbičld viznačennâekspresííantigenívhlaneiroklítinamilûdiniríznogotermínugestacííprikulʹtivuvanníinvitro AT semenovavm viznačennâekspresííantigenívhlaneiroklítinamilûdiniríznogotermínugestacííprikulʹtivuvanníinvitro AT stainolp viznačennâekspresííantigenívhlaneiroklítinamilûdiniríznogotermínugestacííprikulʹtivuvanníinvitro AT visocʹkiims viznačennâekspresííantigenívhlaneiroklítinamilûdiniríznogotermínugestacííprikulʹtivuvanníinvitro AT potapovaaí viznačennâekspresííantigenívhlaneiroklítinamilûdiniríznogotermínugestacííprikulʹtivuvanníinvitro AT lísâniimí studyofantigenexpressionbyhumanneurocellsofdifferentgestationtermduringculturinginvitro AT lûbičld studyofantigenexpressionbyhumanneurocellsofdifferentgestationtermduringculturinginvitro AT semenovavm studyofantigenexpressionbyhumanneurocellsofdifferentgestationtermduringculturinginvitro AT stainolp studyofantigenexpressionbyhumanneurocellsofdifferentgestationtermduringculturinginvitro AT visocʹkiims studyofantigenexpressionbyhumanneurocellsofdifferentgestationtermduringculturinginvitro AT potapovaaí studyofantigenexpressionbyhumanneurocellsofdifferentgestationtermduringculturinginvitro |