Влияние препарата кордовой крови на морфофункциональные свойства кожи крыс в культуре in vitro
Изучали характер влияния криоконсервированных ядросодержащих клеток кордовой крови на морфологию кожи в разные сроки культивирования in vitro. Под влиянием препарата кордовой крови на 15 дней продлевалась жизнеспособность кожи in vitro по сравнению с жизнеспособностью в контрольной группе, стимулиро...
Saved in:
| Published in: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Date: | 2008 |
| Main Authors: | , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2008
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69087 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Влияние препарата кордовой крови на морфофункциональные свойства кожи крыс в культуре in vitro / В.Ю. Пурышева, О.В. Кудокоцева, В.В. Волина, Л.В. Сокол // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 538-540. — Бібліогр.: 4 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1860269097753772032 |
|---|---|
| author | Пурышева, В.Ю. Кудокоцева, О.В. Волина, В.В. Сокол, Л.В. |
| author_facet | Пурышева, В.Ю. Кудокоцева, О.В. Волина, В.В. Сокол, Л.В. |
| citation_txt | Влияние препарата кордовой крови на морфофункциональные свойства кожи крыс в культуре in vitro / В.Ю. Пурышева, О.В. Кудокоцева, В.В. Волина, Л.В. Сокол // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 538-540. — Бібліогр.: 4 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| description | Изучали характер влияния криоконсервированных ядросодержащих клеток кордовой крови на морфологию кожи в разные сроки культивирования in vitro. Под влиянием препарата кордовой крови на 15 дней продлевалась жизнеспособность кожи in vitro по сравнению с жизнеспособностью в контрольной группе, стимулировались пролиферация клеток эпидермиса и дермы, в дерме резко увеличивалось количество фибробластов и волокнистых структур, а также клеточных элементов дериватов кожи.
Вивчали характер впливу кріоконсервованих ядровмісних клітин на морфологію шкіри в різні строки культивування in vitro. Під впливом кордової крові на 15 діб зростала тривалість життя шкіри in vitro у порівнянні з тривалістю життя шкіри в контрольній групі, стимулювалась проліферація клітин епідерміса та дерми, у дермі різко зростала кількість фібробластів і волокнистих структур, а також клітинних елементів дериватів шкіри.
The character of influence of the cryopreserved nucleated cells of cord blood on the skin morphology was investigated at different stages of skin culturing in vitro. Under the cord blood influence the period of skin’s viability increased by 15 days as compared with the duration period of control skin viability, the proliferation activities of epidermocytes and dermocytes are stimulated in derma, the fibroblasts number and fibers structures sharply increased. The gland’s structures were increased in derma under the cord blood influence. The cell number was increased in gland’s and in hair follicles in derma when cord blood was added to culturing media.
|
| first_indexed | 2025-12-07T19:04:23Z |
| format | Article |
| fulltext |
538 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
УДК 615.361:612.649;612.118.7:57.085.2
В.Ю. ПУРЫШЕВА*, О.В. КУДОКОЦЕВА, В.В. ВОЛИНА, Л.В. СОКОЛ
Влияние препарата кордовой крови на морфофункциональные
свойства кожи крыс в культуре in vitro
UDC 615.361:612.649;612.118.7:57.085.2
V.YU. PURYSHEVA*, O.V. KUDOKOTSEVA, V.V. VOLINA, L.V. SOKOL
Effect of Cord Blood Preparation on Morphofunctional
Properties of Rat’s Skin During In Vitro Culturing
Изучали характер влияния криоконсервированных ядросодержащих клеток кордовой крови на морфологию кожи в
разные сроки культивирования in vitro. Под влиянием препарата кордовой крови на 15 дней продлевалась жизнеспособность
кожи in vitro по сравнению с жизнеспособностью в контрольной группе, стимулировались пролиферация клеток эпидермиса
и дермы, в дерме резко увеличивалось количество фибробластов и волокнистых структур, а также клеточных элементов
дериватов кожи.
Ключевые слова: фрагменты кожи, кордовая кровь, культивирование in vitro.
Вивчали характер впливу кріоконсервованих ядровмісних клітин на морфологію шкіри в різні строки культивування in
vitro. Під впливом кордової крові на 15 діб зростала тривалість життя шкіри in vitro у порівнянні з тривалістю життя шкіри
в контрольній групі, стимулювалась проліферація клітин епідерміса та дерми, у дермі різко зростала кількість фібробластів
і волокнистих структур, а також клітинних елементів дериватів шкіри.
Ключові слова: фрагменти шкіри, кордова кров, культивування in vitro.
The character of influence of the cryopreserved nucleated cells of cord blood on the skin morphology was investigated at different
stages of skin culturing in vitro. Under the cord blood influence the period of skin’s viability increased by 15 days as compared with
the duration period of control skin viability, the proliferation activities of epidermocytes and dermocytes are stimulated in derma, the
fibroblasts number and fibers structures sharply increased. The gland’s structures were increased in derma under the cord blood
influence. The cell number was increased in gland’s and in hair follicles in derma when cord blood was added to culturing media.
Key-words: skin flaps, cord blood, culturing in vitro.
В свете современной концепции выделяют ес-
тественное и экзогенное старение кожи, проявляю-
щееся в снижении скорости ее обновления за счет
угнетения пролиферации и дифференцировки про-
гениторных клеток [2].
Для стимуляции процессов репарации повреж-
денной или регенерации стареющей, утратившей
тургор и эластичность кожи в последнее время все
чаще используют биологически активные препа-
раты – плаценту, ее экстракты, клеточные суспен-
зии [3, 4]. Однако механизм действия этих препа-
ратов изучен недостаточно. Полученные резуль-
таты не всегда однозначны [3, 4].
Цель работы – изучение влияния криоконсер-
вированных ядерных клеток кордовой крови чело-
века на морфофункциональные процессы в культи-
вируемой in vitro коже крыс.
Материалы и методы
Объектом исследования являлись образцы кожи
крыс. Фрагменты кожи размером 0,3×0,3 см отде-
ляли скальпелем от подкожной жировой клетчатки,
помещали на твердый агар, затем покрывали
стандартной культуральной ростовой средой в
объеме 0,5 мл.
При постановке эксперимента материал распре-
деляли на следующие группы: 1-я группа – интакт-
ная кожа; 2-я (контроль) – образцы кожи, помещен-
ные на поверхность агара с культуральной средой;
3-я (опыт) – образцы кожи, помещенные на поверх-
ность агара с культуральной средой, в которую
добавляли 10% препарата кордовой крови.
Препарат кордовой крови “Стемкорд” представ-
ляет собой криоконсервированную взвесь ядросо-
держащих клеток (ЯСК). Криоконсервирование
осуществляли по уникальной 4-этапной программе,
что позволило снизить концентрацию криопро-
тектора ДМСО до 3,5% и использовать препарат
сразу после отогрева без предварительного отмы-
вания от криопротектора [1]. Исследования ЯСК
(СD45+) кордовой крови, в том числе и гемопоэти-
ческих (СD34+), проведены до и после криоконсер-
вирования методом проточной цитометрии по
международному ISHAGE протоколу.
* Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию:
ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38
(057) 373-31-26, факс: +38 (057) 373-30-84, электронная почта:
cryo@online.kharkov.ua
Институт проблем криобиологии и криомедицины
НАН Украины, г. Харьков
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na-
tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
* To whom correspondence should be addressed: 23,
Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373
3126, fax: +380 57 373 3084, e-mail: cryo@online.kharkov.ua
539 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
Культивирование кожи выполняли in vitro в
условиях термостата при температуре 37°С и pH
среды 7,2. Фрагменты кожи извлекали на 5, 15 и
25-е сутки культивирования, фиксировали в 10%-м
формалине, заливали в целлоидин и готовили
гистологические срезы толщиной 5–7 мкм, кото-
рые окрашивали гематоксилином и эозином.
Все манипуляции с животными выполняли сог-
ласно принципам Европейской конвенции о защите
позвоночных животных, используемых для экспе-
риментальных и других научных целей (Страсбург,
1985).
Статистическую обработку полученных дан-
ных проводили по методу Стьюдента-Фишера.
Результаты и обсуждение
На гистологических препаратах структура ин-
тактной кожи соответствует норме и представ-
лена хорошо дифференцируемыми слоями – эпи-
дермисом и дермой. После 5 суток культивирова-
ния фрагментов кожи контрольной группы на
агаризованной ростовой среде наблюдалось умень-
шение толщины эпидермиса за счет снижения ко-
личества клеток в его слоях (кератинизация и миг-
рация клеток). Отмечалась сглаженность дермо-
эпидермальной границы, расширялись эпидермаль-
ные выросты. В сосочковом слое дермы наблюда-
лась пролиферация фибробластов, их количество
увеличилось по сравнению с интактной кожей. В
сетчатом слое дермы появились молодые коллаге-
новые волокна, которые интенсивно окрашивались,
увеличилось количество клеток в волосяных фол-
ликулах и железистых структурах.
Во фрагментах кожи, выращенных на агаризо-
ванной питательной среде, в которую был добавлен
препарат “Стемкорд” (группа 3), на 5-е сутки куль-
тивирования структура эпидермиса была сравнима
с интактной. Базальный слой содержал один ряд
клеток. Дермоэпидермальная граница в основном
контурировалась хорошо, однако местами наблю-
далось отслоение эпидермиса от дермы в области
базальной мембраны. Коллагеновые волокна обра-
зовывали плотную сеть, количество фибробластов
увеличивалось по сравнению с группами 1 и 2.
На 15-е сутки культивирования фрагментов
кожи без препарата уменьшалась толщина эпидер-
миса по сравнению с интактной кожей. Дермо-
эпидермальная граница контурировалась нечетко.
Структура соединительнотканных волокон дермы
соответствовала интактной коже. Количество фиб-
робластов увеличивалось. В волосяных фолли-
кулах и сальных железах наблюдалась проли-
ферация эпителиальных клеток, размеры которых
были увеличены.
В присутствии препарата “Стемкорд” на 15-е
сутки культивирования кожи по сравнению с груп-
пой 2 увеличивалась толщина эпидермиса, однако
дифференциация его клеточных слоев была затруд-
нена, в базальном слое обнаруживались клетки в
состоянии митоза. Клетки базального слоя эпидер-
миса имели выраженную базофилию (ядра гипер-
хромные, занимающие почти всю клетку, цитоплаз-
ма – ацидофильная). Дермоэпидермальная граница
контурировалась. В дерме, непосредственно в со-
сочковом слое, увеличивалось количество фибро-
бластов по сравнению с их содержанием в коже
групп 1 и 2. Соединительная ткань была представ-
лена плотно упакованными пучками коллагеновых
волокон, фибробласты гиперхромные.
На 25-е сутки культивирования на агаризо-
ванной среде без препарата в коже появлялись оча-
ги микронекроза. В эпидермисе увеличивались
межклеточные пространства, плохо дифференци-
ровались слои клеток. Ядра эпителиальных кле-
ток были пикнотичны, цитоплазма – вакуолизи-
рована. Отмечалась стертость границы между
эпидермисом и дермой, наблюдались очаги клеточ-
ного детрита. В дерме происходила дезорганизация
соединительной ткани в виде гомогенизации и
глыбчатого распада коллагеновых и эластиновых
волокон. Количество фибробластов уменьшалось.
Наблюдались отечность и деструкция железистых
структур и волосяных фолликулов.
При культивировании фрагментов кожи в среде
с добавлением препарата “Стемкорд” на 25-е сут-
ки некротические процессы как в эпидермисе, так
и в дерме не наблюдались. Толщина эпидермиса
сохранялась на уровне 15-х суток, причем базаль-
ный слой оставался активным, отмечалось увели-
чение количества слущивающихся роговых че-
шуек. Граница между эпидермисом и дермой была
четко выражена. В дерме сохранялась высокая
клеточность, хотя количество фибробластов
уменьшалось по сравнению с 15 сутками культиви-
рования. В сетчатом слое четко контурировались
коллагеновые и эластиновые волокна, которые фор-
мируют сетчатую структуру соединительной тка-
ни, однако их плотность уменьшалась по сравнению
с 15 сутками культивирования, а в некоторых
участках кожных фрагментов сохранялась плотная
структура соединительной ткани. Дериваты кожи –
волосяные фолликулы и железы – сохраняли свою
морфологию, хорошо контурировались. В отдель-
ных участках кожных фрагментов отмечались от-
слоение эпидермиса и микроочаги клеточного
детрита.
Выводы
Полученные результаты свидетельствуют о
том, что в присутствии препарата “Стемкорд” в
среде культивирования стимулируется пролифера-
тивная активность клеток дермы и эпидермиса.
При добавлении кордовой крови в культуральную
540 PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
Vol. 18, 2008, №4
ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
Т. 18, 2008, №4
среду за счет находящегося в препарате комплекса
клеточных и гуморальных факторов на 15 дней
дольше сохранялось гистологическое строение
образцов кожи по сравнению с контрольной группой,
отмечались процессы активного клеточного обнов-
ления.
Установленный факт стимулирующего действия
препарата “Стемкорд” на культивируемые in vitro
эксплантаты кожи позволяет ожидать положитель-
ного эффекта при его использовании в регене-
рационной медицине и косметологии, при проведе-
нии мезотерапии для улучшения тургора и элас-
тичности кожи.
Литература
Бабийчук Л.А., Кудокоцева О.В., Рязанцев В.В. и др. Новые
перспективы в криоконсервировании ядросодержащих
клеток кордовой крови // Гематологія і переливання крові.–
2008.– №34.– С. 17–21.
Калюжная Л.Д., Дзюбак В.Е. Старение кожи: патоге-
нетические и лечебные аспекты // Укр. мед. часопис.–
2002.– №2 (28).– С. 68–72.
Спивак Н.Я., Сухих Г.Т., Малайцев В.В., Богданова И.М.
Стволовые клетки. Биология и потенциальное клиничес-
кое использование // Трансплантологія.– 2005.– Т.8, №3.–
С. 6–14.
Morasso M.I., Tomic-Canic M. Epidermal stem cells: the cradle
of epidermal determination, differentiation and wound heal-
ing // Biol. Cell.– 2005.– Vol. 97, N3.– P. 173–183.
Поступила 19.06.2008
1.
2.
3.
4.
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-69087 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7673 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T19:04:23Z |
| publishDate | 2008 |
| publisher | Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Пурышева, В.Ю. Кудокоцева, О.В. Волина, В.В. Сокол, Л.В. 2014-10-04T16:02:25Z 2014-10-04T16:02:25Z 2008 Влияние препарата кордовой крови на морфофункциональные свойства кожи крыс в культуре in vitro / В.Ю. Пурышева, О.В. Кудокоцева, В.В. Волина, Л.В. Сокол // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 538-540. — Бібліогр.: 4 назв. — рос. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69087 615.361:612.649;612.118.7:57.085.2 Изучали характер влияния криоконсервированных ядросодержащих клеток кордовой крови на морфологию кожи в разные сроки культивирования in vitro. Под влиянием препарата кордовой крови на 15 дней продлевалась жизнеспособность кожи in vitro по сравнению с жизнеспособностью в контрольной группе, стимулировались пролиферация клеток эпидермиса и дермы, в дерме резко увеличивалось количество фибробластов и волокнистых структур, а также клеточных элементов дериватов кожи. Вивчали характер впливу кріоконсервованих ядровмісних клітин на морфологію шкіри в різні строки культивування in vitro. Під впливом кордової крові на 15 діб зростала тривалість життя шкіри in vitro у порівнянні з тривалістю життя шкіри в контрольній групі, стимулювалась проліферація клітин епідерміса та дерми, у дермі різко зростала кількість фібробластів і волокнистих структур, а також клітинних елементів дериватів шкіри. The character of influence of the cryopreserved nucleated cells of cord blood on the skin morphology was investigated at different stages of skin culturing in vitro. Under the cord blood influence the period of skin’s viability increased by 15 days as compared with the duration period of control skin viability, the proliferation activities of epidermocytes and dermocytes are stimulated in derma, the fibroblasts number and fibers structures sharply increased. The gland’s structures were increased in derma under the cord blood influence. The cell number was increased in gland’s and in hair follicles in derma when cord blood was added to culturing media. ru Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Секция «Криобанк пуповинной крови. Перспективы применения криоконсервированных препаратов пуповинной крови в медицине» Влияние препарата кордовой крови на морфофункциональные свойства кожи крыс в культуре in vitro Effect of Cord Blood Preparation on Morphofunctional Properties of Rat’s Skin During In Vitro Culturing Article published earlier |
| spellingShingle | Влияние препарата кордовой крови на морфофункциональные свойства кожи крыс в культуре in vitro Пурышева, В.Ю. Кудокоцева, О.В. Волина, В.В. Сокол, Л.В. Секция «Криобанк пуповинной крови. Перспективы применения криоконсервированных препаратов пуповинной крови в медицине» |
| title | Влияние препарата кордовой крови на морфофункциональные свойства кожи крыс в культуре in vitro |
| title_alt | Effect of Cord Blood Preparation on Morphofunctional Properties of Rat’s Skin During In Vitro Culturing |
| title_full | Влияние препарата кордовой крови на морфофункциональные свойства кожи крыс в культуре in vitro |
| title_fullStr | Влияние препарата кордовой крови на морфофункциональные свойства кожи крыс в культуре in vitro |
| title_full_unstemmed | Влияние препарата кордовой крови на морфофункциональные свойства кожи крыс в культуре in vitro |
| title_short | Влияние препарата кордовой крови на морфофункциональные свойства кожи крыс в культуре in vitro |
| title_sort | влияние препарата кордовой крови на морфофункциональные свойства кожи крыс в культуре in vitro |
| topic | Секция «Криобанк пуповинной крови. Перспективы применения криоконсервированных препаратов пуповинной крови в медицине» |
| topic_facet | Секция «Криобанк пуповинной крови. Перспективы применения криоконсервированных препаратов пуповинной крови в медицине» |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69087 |
| work_keys_str_mv | AT puryševavû vliâniepreparatakordovoikrovinamorfofunkcionalʹnyesvoistvakožikrysvkulʹtureinvitro AT kudokocevaov vliâniepreparatakordovoikrovinamorfofunkcionalʹnyesvoistvakožikrysvkulʹtureinvitro AT volinavv vliâniepreparatakordovoikrovinamorfofunkcionalʹnyesvoistvakožikrysvkulʹtureinvitro AT sokollv vliâniepreparatakordovoikrovinamorfofunkcionalʹnyesvoistvakožikrysvkulʹtureinvitro AT puryševavû effectofcordbloodpreparationonmorphofunctionalpropertiesofratsskinduringinvitroculturing AT kudokocevaov effectofcordbloodpreparationonmorphofunctionalpropertiesofratsskinduringinvitroculturing AT volinavv effectofcordbloodpreparationonmorphofunctionalpropertiesofratsskinduringinvitroculturing AT sokollv effectofcordbloodpreparationonmorphofunctionalpropertiesofratsskinduringinvitroculturing |