Еластази при штучному гіпометаболізмі у щурів

Розвиток ШГМС у щурів за методом Анджуса-Бахметьєва-Джайя призводить до тканиноспецифічного підвищення активності еластази, металоеластази та зниження рівня ендотеліальної еластази. Ці зміни частково нормалізуються через 24 год, при цьому α-1-інгібітора протеїназ залучається до пригнічення надлишков...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Veröffentlicht in:	Проблемы криобиологии и криомедицины
Datum:	2008
Hauptverfasser:	Самохіна, Л.М., Ломако, В.В., Шило, О.В.
Format:	Artikel
Sprache:	Ukrainian
Veröffentlicht:	Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2008
Schlagworte:	Секция «Фундаментальные и прикладные проблемы охлаждения организма человека и животных»
Online Zugang:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69093
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:	Еластази при штучному гіпометаболізмі у щурів / Л.М. Самохіна, В.В. Ломако, О.В. Шило // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 557-560. — Бібліогр.: 9 назв. — укр.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-69093
record_format	dspace
spelling	Самохіна, Л.М. Ломако, В.В. Шило, О.В. 2014-10-04T16:20:01Z 2014-10-04T16:20:01Z 2008 Еластази при штучному гіпометаболізмі у щурів / Л.М. Самохіна, В.В. Ломако, О.В. Шило // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 557-560. — Бібліогр.: 9 назв. — укр. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69093 616.379-008.9-056.7.001.6-092:577.15 Розвиток ШГМС у щурів за методом Анджуса-Бахметьєва-Джайя призводить до тканиноспецифічного підвищення активності еластази, металоеластази та зниження рівня ендотеліальної еластази. Ці зміни частково нормалізуються через 24 год, при цьому α-1-інгібітора протеїназ залучається до пригнічення надлишкової активності еластаз в деяких тканинах. Развитие искусственного гипометаболического состояния у крыс способствует тканеспецифическому повышению активности эластазы, металлоэластазы и снижению уровня эндотелиальной эластазы. Эти изменения приближаются к контрольному уровню через 24 ч, при этом отмечено участие α-1-ингибитора протеиназ в угнетении избыточной активности эластаз. The development of artificial hypometabolism in rats contributes to tissue-specific rise in elastase activity, metalloeastase and decreased level of endothelial elastase. These changes are partially normalized in 24 hrs, herewith there was noted the participation of alpha-1-inhibitor of proteinases in suppressing of surplus activity of elastases. uk Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Секция «Фундаментальные и прикладные проблемы охлаждения организма человека и животных» Еластази при штучному гіпометаболізмі у щурів Elastases under Artificial Hypometabolism in Rats Article published earlier
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
title	Еластази при штучному гіпометаболізмі у щурів
spellingShingle	Еластази при штучному гіпометаболізмі у щурів Самохіна, Л.М. Ломако, В.В. Шило, О.В. Секция «Фундаментальные и прикладные проблемы охлаждения организма человека и животных»
title_short	Еластази при штучному гіпометаболізмі у щурів
title_full	Еластази при штучному гіпометаболізмі у щурів
title_fullStr	Еластази при штучному гіпометаболізмі у щурів
title_full_unstemmed	Еластази при штучному гіпометаболізмі у щурів
title_sort	еластази при штучному гіпометаболізмі у щурів
author	Самохіна, Л.М. Ломако, В.В. Шило, О.В.
author_facet	Самохіна, Л.М. Ломако, В.В. Шило, О.В.
topic	Секция «Фундаментальные и прикладные проблемы охлаждения организма человека и животных»
topic_facet	Секция «Фундаментальные и прикладные проблемы охлаждения организма человека и животных»
publishDate	2008
language	Ukrainian
container_title	Проблемы криобиологии и криомедицины
publisher	Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
format	Article
title_alt	Elastases under Artificial Hypometabolism in Rats
description	Розвиток ШГМС у щурів за методом Анджуса-Бахметьєва-Джайя призводить до тканиноспецифічного підвищення активності еластази, металоеластази та зниження рівня ендотеліальної еластази. Ці зміни частково нормалізуються через 24 год, при цьому α-1-інгібітора протеїназ залучається до пригнічення надлишкової активності еластаз в деяких тканинах. Развитие искусственного гипометаболического состояния у крыс способствует тканеспецифическому повышению активности эластазы, металлоэластазы и снижению уровня эндотелиальной эластазы. Эти изменения приближаются к контрольному уровню через 24 ч, при этом отмечено участие α-1-ингибитора протеиназ в угнетении избыточной активности эластаз. The development of artificial hypometabolism in rats contributes to tissue-specific rise in elastase activity, metalloeastase and decreased level of endothelial elastase. These changes are partially normalized in 24 hrs, herewith there was noted the participation of alpha-1-inhibitor of proteinases in suppressing of surplus activity of elastases.
issn	0233-7673
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69093
citation_txt	Еластази при штучному гіпометаболізмі у щурів / Л.М. Самохіна, В.В. Ломако, О.В. Шило // Проблемы криобиологии. — 2008. — Т. 18, № 4. — С. 557-560. — Бібліогр.: 9 назв. — укр.
work_keys_str_mv	AT samohínalm elastaziprištučnomugípometabolízmíuŝurív AT lomakovv elastaziprištučnomugípometabolízmíuŝurív AT šiloov elastaziprištučnomugípometabolízmíuŝurív AT samohínalm elastasesunderartificialhypometabolisminrats AT lomakovv elastasesunderartificialhypometabolisminrats AT šiloov elastasesunderartificialhypometabolisminrats
first_indexed	2025-11-24T21:03:30Z
last_indexed	2025-11-24T21:03:30Z
_version_	1850497485791821824
fulltext	557 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 18, 2008, №4 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 18, 2008, №4 УДК 616.379-008.9-056.7.001.6-092:577.15 Л.М. САМОХіНА1, В.В. ЛОМАКО2, О.В. ШИЛО2 Еластази при штучному гіпометаболізмі у щурів UDC 616.379-008.9-056.7.001.6-092:577.15 L.M. SAMOKHINA1, V.V. LOMAKO2, A.V. SHILO2 Elastases Under Artificial Hypometabolism in Rats Розвиток ШГМС у щурів за методом Анджуса-Бахметьєва-Джайя призводить до тканиноспецифічного підвищення активності еластази, металоеластази та зниження рівня ендотеліальної еластази. Ці зміни частково нормалізуються через 24 год, при цьому α-1-інгібітора протеїназ залучається до пригнічення надлишкової активності еластаз в деяких тканинах. Ключові слова: еластаза, ендотеліальна еластаза, металоеластаза, α-1-інгібітор протеїназ, штучний гіпометаболічний стан. Развитие искусственного гипометаболического состояния у крыс способствует тканеспецифическому повышению активности эластазы, металлоэластазы и снижению уровня эндотелиальной эластазы. Эти изменения приближаются к контрольному уровню через 24 ч, при этом отмечено участие α-1-ингибитора протеиназ в угнетении избыточной активности эластаз. Ключевые слова: эластаза, эндотелиальная эластаза, металлоэластаза, α-1-ингибитор протеиназ, искусственное гипометаболическое состояние. The development of artificial hypometabolism in rats contributes to tissue-specific rise in elastase activity, metalloeastase and decreased level of endothelial elastase. These changes are partially normalized in 24 hrs, herewith there was noted the participation of alpha-1-inhibitor of proteinases in suppressing of surplus activity of elastases. Key-words: elastase, endothelial elastase, metalloelastase, alpha-1-inhibitor of proteinases, artificial hypometabolic state. Дослідження адаптивної відповіді організму на вплив фізичних факторів, особливо тригерів гіпоме- таболічних станів (ГМС), що характеризуються зворотним зниженням інтенсивності обмінних процесів [5], має велике значення для біології та медицини. Перспективним є вивчення ендогенних захисних систем клітин і організму, які підвищують їх неспецифічну резистентність. Важливу роль у формуванні неспецифічної відповіді організму віді- грають протеїнази, які здійснюють свою регулятор- ну функцію в реакціях лімітованого протеолізу з розщепленням одного або декількох специфічних пептидних зв’язків в молекулах білків, а також утво- рюють активні форми білків та пептидів. Однією з таких протеїназ є еластаза (Ел) (КФ3.4.21.37) – серінова протеїназа азурофільних гранул нейтро- фільних гранулоцитів, яка підвищує каталітичну здатність інших протеолітичних ферментів [8], гідролізує еластин, протеоглікани, гемоглобін, фібриноген, неспіральні ланцюги колагену, розщеп- лює поперечні зв’язки між ними та інш. [1]. Подібну дію мають серінова Ел гладком’язових клітин, металоеластаза макрофагів (матрична металопро- теаза 12) і тіолова Ел ендотеліоцитів [2]. Мета роботи – дослідити активність еластаз при штучному гіпометаболічному стані у щурів. Матеріали і методи Штучний гіпометаболічний стан (ШГМС) викликали у дорослих щурів-самців узимку за методом Анджуса-Бахметьєва-Джайя [3]: тварин тримали 3 год у герметично закритій камері (об‘єм 3 дм3), яку поміщали в темну холодову камеру при температурі 3–5°С. Після розвитку ШГМС тварин вилучали із камери і переводили в умови з норм- альним газовим складом повітря і температурою 22–24°С. Експерименти проведені відповідно до “Загаль- них принципів експериментів на тваринах”, схвалених IІ Національним конгресом з біоетики (20.09.2004 р., м. Київ) і узгоджених з положеннями “Європейської конвенції про захист хребетних тварин, що використовуються для експеримен- тальних та інших наукових цілей” (Страсбург, 1985 р.). Досліджено 4 групи тварин (n = 5): контроль, ШГМС, через 2 та 24 год після ШГМС (ранній і пізній етапи відновлення). Тварин декапітували. У без’ядерних фракціях гомогенатів тканин кори (КМ) і стовбуру (СМ) мозку , легень, серця, печінки і ни- рок визначали: загальну активність еластаз; актив- ність ендотеліальної (тіолової) Ел (ЕЕл) і макрофа- гальної Ел (металоеластази) (метЕл); еластазо- Автор, якому необхідно направляти кореспонденцію: вул. Переяславська, 23, м. Харків, Україна 61015; тел.:+38 (057) 373-31-26, факс: +38 (057) 373-30-84, електронна пошта: cryo@online.kharkov.ua 1ДУ “Інститут терапії імені Л.Т. Малої АМН України”, м. Харків 2Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків 1State Enterprise “Institute of Therapy Named After L.T. Malaya of Academy of Medical Scinces”, Kharkov, Ukraine 2Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na- tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine * To whom correspondence should be addressed: 23, Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373 3126, fax: +380 57 373 3084, e-mail:cryo@online.kharkov.ua 558 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 18, 2008, №4 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 18, 2008, №4 інгібіторну активність α-1-інгібітора протеїназ (ЕІА α-1-ІП) високочутливим (10-10–10-12 од/мл) фер- ментативним методом [6]. Принцип методу зас- новано на використанні в якості субстрату протео- літичної реакції іммобілізованого на поверхні полі- стиролу маркерного ферменту – пероксидази хро- ну (ПХ), який завчасно був кон’югований із Аlа- Аlа. Для контрольних вимірювань використовували розчини Ел активністю від 0,0005 до 0,5 од/мг білка. Для визначення активності ЕЕл перед протео- літичною реакцією пригнічували серінові протеїнази та металопротеїнази доданням до дослідних зразків 1:1 інгібіторного розчину, який містить 0,02 % феніл- сульфонілфлюориду (ФСФ) та 6 % етилендіамін- тетраацетату (ЕДТА). Для визначення активності метЕл перед протеолітичною реакцією пригні- чували серінову Ел та тіолову ЕЕл доданням до дослідних зразків 0,04 % ФСФ та 0,1 % монойод- ацетату. Інкубували 5 хв при 37°С. Для визначення ЕІА α-1-ІП перед протеолітичною реакцією до дос- ліджуваних зразків додавали надлишок еластази 1:1 (розчин активністю 0,5 од/мг білка) для зв’язування з інгібітором, інкубували 15 хв при 20°С. Після протеолітичної реакції відмиванням видаляли продукти реакції і визначали оптичну щільність ПХ. Одержані результати виражали в одиницях на міліграм білка. У дослідженнях використовували ПХ, ФСФ, монойодацетат фірми “ICN” (США), Ala-Ala фірми “Fluka” (Німеччина), Ел, ЕДТА, полістиролові плашки стріпові (Росія) та фотометр-аналізатор імуноферментний Human- reader № 2106-1709 фірми «Human» (Німеччина). Статистичну обробку отриманих даних про- водили за методом Стьюдента-Фішера з викорис- танням програмного забезпечення Exсel. Результати і обговорення Виявлено, що при ШГМС активність Ел зростає у всіх зразках, окрім СМ (табл. 1). Це може бути обумовлено розвитком оксидативного стресу, пошкодженням клітинного гомеостазу, індуко- ваними гіпотермічною складовою ШГМС [7]. При оксидативному стресі відбувається активація нейт- рофілів, які здатні вивільняти серінову Ел разом з вільними радикалами та іншими ферментами [4]. Відсутність зростання активності Ел у СМ обумов- лена імовірно наявністю її високого локального вихідного рівня. Через 2 год активність Ел підви- щується майже у всіх органах, крім нирок, де вона повертається до контрольного рівня. Через 24 год активність Ел у всіх зразках знижується, що вказує на її можливе залучення в деструктивних процесах на фоні відсутності синтезу та/або вивільнення. Активність ЕЕл при ШГМС знижується у всіх зразках, що також може бути наслідком її витра- чення на фоні відсутності вивільнення ЕЕл ендо- теліоцитами, це, можливо, пов’язано зі зменшенням еластичності судинної стінки. Активність ЕЕл відновлюється лише у СМ через 2 год, що імовірно обумовлено суттєвою роллю цієї структури в регуляції функцій внутрішніх органів. Через 24 год відзначена тенденція до зростання активності ЕЕл у серці і нирках, що може свідчити про стимулю- вання, в першу чергу, функціонування структур серцево-судинного центру, ендотелію судин серця та нирок. Активність метЕл при ШГМС значно зростає в КМ та печінці, менш – в легенях, що, імовірно, обумовлено локальною активацією макрофагів, яка, можливо, пов’язана з розвитком деструктивних процесів, порушенням функціонування більшості сенсорних шляхів, усіх рухових шляхів, які пере- дають сигнали управління від півкуль головного мозку, це може безпосередньо впливати на зни- ження інтенсивності обмінних процесів в організмі, найбільш у печінці. Активність метЕл через 2 год залишається підвищеною у мозку, повертається до контрольного рівня в печінці, зростає в серці, нирках і знижується порівняно з ШГМС у легенях, що вказує на недостатній термін для повного віднов- лення організму; через 24 год вона знижується порівняно з контрольним рівнем, особливо в леге- нях, це може свідчити про її залучення до деструк- тивних процесів на фоні відсутності синтезу та/або вивільнення макрофагами і обумовлювати недос- татнє поновлення функціонування легень порівняно з нормою. В серці через 24 год виявлено більш високий рівень металоеластази, що може свідчити про локальну активацію макрофагів і бути пов’язано з нормалізацією діяльності серця. Ймовірно залу- чення метЕл і до деструктивних процесів [4]. Еластазоінгібіторна активність α-1-ІП при ШГМС практично не змінюється, це може вказу- вати на первинний характер впливу таких факторів ШГМС, як гіпоксія, гіпотермія, гіперкапнія, на активність еластаз (табл. 2). Але через 2 год після ШГМС ЕІА α-1-ІП вірогідно знижується в КМ та нирках, що пов’язано з участю даного інгібітора в пригніченні надлишкової активності еластаз. Через 24 год вказані зміни нормалізуються, крім того, ЕІА α-1-ІП вірогідно зростає в легенях. Це може обумовлювати суттєве зниження активності сері- нової Ел, металоеластази, в меншому ступені – ЕЕл. Висновки Розвиток ШГМС у щурів за методом Анджуса- Бахметьєва-Джайя призводить до тканиноспеци- фічного зростання активності еластази, метало- еластази та зниження рівня ендотеліальної елас- тази. Ці зміни частково нормалізуються через 24 год, при цьому α-1-ІП залучається до пригнічення надлишкової активності еластаз в деяких тканинах. 559 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 18, 2008, №4 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 18, 2008, №4 Таблиця 1. Активність еластаз (од/мг білка) при ШГМС у щурів Примітка: 1,2,3 – ступінь вірогідності відмінностей порівняно з контролем (р<0,05, 0,01, 0,001) відповідно; 4 – після 2 год відновлення (р<0,05); 5 – порівняно з ШГМС (р<0,05). икзарЗ ьлортноК СМГШ яннелвондiвипатЕ )дог2(йiннар )дог42(йiнзiп изатсалеьтсiнвиткА МК 7000,0±1200,0 210,0±730,0 1 510,0±640,0 2 60000,0±81000,0 4 МС 700,0±920,0 900,0±820,0 500,0±510,0 10000,0±30000,0 iнегеЛ 1000,0±3000,0 900,0±320,0 1 600,0±020,0 1 10000,0±50000,0 ецреС 6000,0±9100,0 700,0±120,0 300,0±210,0 2 80000,0±42000,0 4 акнiчеП 4200,0±7600,0 700,0±120,0 110,0±730,0 50000,0±71000,0 1 икриН 6000,0±8100,0 600,0±020,0 100,0±400,0 1000,0±3000,0 оньлаiлетоднеьтсiнвиткА ї изатсале МК 1300,0±9800,0 3000,0±1100,0 5000,0±5100,0 51000,0±64000,0 МС 2000,0±5100,0 20000,0±70000,0 1 5100,0±6400,0 1000,0±4000,0 1 iнегеЛ 1100,0±4300,0 2000,0±8000,0 6000,0±2200,0 1000,0±4000,0 4 ецреС 7200,0±1010,0 58000,0±3200,0 1 2000,±0100,0 2 2100,0±6400,0 акнiчеП 2500,0±7810,0 2000,0±9000,0 2 4000,0±3100,0 3 22000,0±17000,0 1 икриН 1500,0±5510,0 4000,0+2100,0 3000,0±5100,0 1100,0±5300,0 изатсалеолатемьтсiнвиткА МК 3000,0±0100,0 800,0±420,0 200,0±210,0 2 20000,0±01000,0 4 МС 5000,0±8100,0 100,0±600,0 3 710,0±150,0 10000,0±60000,0 5 iнегеЛ 5000,0±3200,0 6100,0±4500,0 5000,0±5100,0 5 10000,0±70000,0 5,4,1 ецреС 8000,0±5200,0 4000,0±3200,0 0300,0±3700,0 6000,0±0200,0 акнiчеП 2100,0±3300,0 800,0±420,0 1100,0±8200,0 80000,0±52000,0 икриН 6000,0±8100,0 2000,0±6000,0 500,0±510,0 50000,0±71000,0 Таблиця 2. Еластазоінгібіторна активність α-1-інгібітора протеїназ (од/мг білка) при ШГМС у щурів Примітка: 1,2 – ступінь вірогідності відмінностей порівняно з контролем (р<0,05, 0,01) відповідно. икзарЗ ьлортноК СМГШ яннелвондiвипатЕ ).дог2(йiннар ).дог42(йiнзiп МК 300,0±889,0 210,0±479,0 230,0±029,0 1 100,0±489,0 МС 310,0±769,0 300,0±989,0 860,0±498,0 400,0±089,0 iнегеЛ 7000,0±7699,0 200,0±299,0 320,0±659,0 3000,0±3999,0 2 ецреС 100,0±499,0 310,0±869,0 320,0±659,0 7100,0±8699,0 акнiчеП 100,0±499,0 710,0±379,0 010,0±179,0 100,0±799,0 560 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 18, 2008, №4 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 18, 2008, №4 1. 2. 3. 4. 5. Література Антоняк Г.Л. Роль протеолитических ферментов в функциональной активности нейтрофильных грануло- цитов // Успехи совр. биологии.– 1999.– Т. 119, № 5.– С. 476–486. Досенко В.Е. Определение различных форм эластазы в аорте при экспериментальном артериосклерозе // Лаб. диагностика.– 1998.– №1.– С.24. Мельничук С.Д., Мельничук Д.О. Гіпобіоз тварин (молекулярні механізми та практичне значення для сільського господарства і медицини).– Київ, 2007.– 220 с. Самохіна Л.М., Коваль С.М., Старченко Т.Г. та інш. Еластази, катепсин G та продукти перекисного окислення ліпідів у хворих на гіпертонічну хворобу з супутнім цукро- вим діабетом 2-го типу // Медична хімія.– 2004.– №4.– С. 68–72. Самохина Л.М., Самохин А.А. Химаза, тонин и эластаза у крыс при окислительном стрессе, вызванном введе- нием хлорида кобальта // Укр. биохим. журн.– 2001.– Т. 73, № 5.– С. 47–51. Тимофеев Н.Н., Прокопьева Л.П. Нейрохимия гипобиоза и пределы криорезистентности организма.– М.: Медицина, 1997.– 208 с. Пат. України №45068А МПК G01N33/48, A61B19/02. Набір для визначення активності ендотеліальної еластази в біологічних рідинах / Л.М.Самохіна, Н.А.Максимова. Заявл. 23.04.2001; Опубл. 15.03.2002.– Бюл.№ 3. Blagojevic D.R. Antioxidant systems in supporting enviro- nmental and programmed adaptations to low temperatures // Cryo-Letters.– 2007.– Vol. 28, N3.– P. 137–150. Shamamian P., Pocock B.J., Schwarts J.D. et al. Neutrophil- derived serine proteinases enhance membrane type-1 matrix metalloproteinase-dependent tumor cell invasion // Surgery.– 2000.– Vol. 127, N2.– Р. 142–147. Надійшла 14.07.2008 6. 7. 8. 9.

Еластази при штучному гіпометаболізмі у щурів

Institution

Ähnliche Einträge