Дозозалежний вплив екстракту кріоконсервованих фрагментів шкіри поросят на метаболічну активність фібробластів шкіри в культурі
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
|---|---|
| Datum: | 2013 |
| 1. Verfasser: | |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Ukrainian |
| Veröffentlicht: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2013
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69126 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Дозозалежний вплив екстракту кріоконсервованих фрагментів шкіри поросят на метаболічну активність фібробластів шкіри в культурі / І.Г. Беспалова // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2013. — Т. 23, № 2. — С. 181. — укр., англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-69126 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Беспалова, І.Г. 2014-10-05T09:40:04Z 2014-10-05T09:40:04Z 2013 Дозозалежний вплив екстракту кріоконсервованих фрагментів шкіри поросят на метаболічну активність фібробластів шкіри в культурі / І.Г. Беспалова // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2013. — Т. 23, № 2. — С. 181. — укр., англ. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69126 uk Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Проблемы криобиологии и криомедицины Тезисы Дозозалежний вплив екстракту кріоконсервованих фрагментів шкіри поросят на метаболічну активність фібробластів шкіри в культурі Dose-Related Effect of Extract of Cryopreserved Newborn Piglets' Skin Fragments on Metabolic Activity of Skin Fibroblasts in Culture Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Дозозалежний вплив екстракту кріоконсервованих фрагментів шкіри поросят на метаболічну активність фібробластів шкіри в культурі |
| spellingShingle |
Дозозалежний вплив екстракту кріоконсервованих фрагментів шкіри поросят на метаболічну активність фібробластів шкіри в культурі Беспалова, І.Г. Тезисы |
| title_short |
Дозозалежний вплив екстракту кріоконсервованих фрагментів шкіри поросят на метаболічну активність фібробластів шкіри в культурі |
| title_full |
Дозозалежний вплив екстракту кріоконсервованих фрагментів шкіри поросят на метаболічну активність фібробластів шкіри в культурі |
| title_fullStr |
Дозозалежний вплив екстракту кріоконсервованих фрагментів шкіри поросят на метаболічну активність фібробластів шкіри в культурі |
| title_full_unstemmed |
Дозозалежний вплив екстракту кріоконсервованих фрагментів шкіри поросят на метаболічну активність фібробластів шкіри в культурі |
| title_sort |
дозозалежний вплив екстракту кріоконсервованих фрагментів шкіри поросят на метаболічну активність фібробластів шкіри в культурі |
| author |
Беспалова, І.Г. |
| author_facet |
Беспалова, І.Г. |
| topic |
Тезисы |
| topic_facet |
Тезисы |
| publishDate |
2013 |
| language |
Ukrainian |
| container_title |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Dose-Related Effect of Extract of Cryopreserved Newborn Piglets' Skin Fragments on Metabolic Activity of Skin Fibroblasts in Culture |
| issn |
0233-7673 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/69126 |
| citation_txt |
Дозозалежний вплив екстракту кріоконсервованих фрагментів шкіри поросят на метаболічну активність фібробластів шкіри в культурі / І.Г. Беспалова // Проблемы криобиологии и криомедицины. — 2013. — Т. 23, № 2. — С. 181. — укр., англ. |
| work_keys_str_mv |
AT bespalovaíg dozozaležniivplivekstraktukríokonservovanihfragmentívškíriporosâtnametabolíčnuaktivnístʹfíbroblastívškírivkulʹturí AT bespalovaíg doserelatedeffectofextractofcryopreservednewbornpigletsskinfragmentsonmetabolicactivityofskinfibroblastsinculture |
| first_indexed |
2025-11-25T03:46:56Z |
| last_indexed |
2025-11-25T03:46:56Z |
| _version_ |
1850505593234653184 |
| fulltext |
Дозозалежний вплив екстракту кріоконсервованих фрагментів шкіри поросят
на метаболічну активність фібробластів шкіри в культурі
І.Г. Беспалова
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, м. Харків
Dose-Related Effect of Extract of Cryopreserved Newborn Piglet Skin
Fragments on Metabolic Activity of Skin Fibroblasts in Culture
I.G. Bespalova
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine
Research of tissue specificity and dose-related effects
of the extract of frozen-thawed newborn piglet skin frag-
ments (NPSE) on metabolic activity of skin fibroblasts in
culture is interesting both in terms of elucidation of the
mechanism of their action and to determine the possibility
of culturing cells in media with lower content of fetal bovine
serum (FBS). Reducing the concentration of serum in the
culture medium decreases the risk of contamination of cul-
ture and possible immune response in experimental or clinical
application of fibroblasts.
The aim of this research was to establish the dose-related
influence of NPSE on metabolic activity of skin fibroblast in
culture.
The extract was derived from frozen-thawed fragments
of piglet skin by their incubation with physiological solution
for 60 min. The extract was warmed up in a boiling water
bath and filtered for removal of high molecular and ther-
molabile proteins. The obtained extracts were sterilized by
autoclaving.
Primary culture of neonatal rat skin fibroblasts was obtai-
ned by free cell transfer from skin fragments and the follo-
wing reseeding. The obtained fibroblasts were incubated
in DMEM/F12 culture medium supplemented with 10% FBS,
the test samples were supplemented with 5 or 2% FBS, and
NPSE up to the final peptide concentration 0.1, 0.5, 1.0 and
1.5 µg/ml, into the control ones the equivalent volume of
physiological solution was introduced. Metabolic activity
was assessed by the reduction of nontoxic Alamar Blue
redox indicator and by MTT test.
The cell metabolic activity of fibroblasts was statistically
significantly increased after addition of NPSE to the culture
medium up to the final peptide concentration of 0.1µg/ml.
Decreasing of FBS concentration in the culture medium from
5% down to 2% and the addition of NPSE up to the final
peptide concentration of 1 and 1.5 µg/ml resulted in the
preservation of the metabolic activity of fibroblasts at the
level observed in the control samples with 10% FBS. On the
5th day of culturing the number of fibroblasts in medium
with 2% FBS and 1 µg/ml of peptides was higher than in the
medium without NPSE, but less than in medium with 5%
FBS. No differences in cell metabolic activity in AlamarBlue
or MTT tests were found.
Thus, the addition of NPSE allowed to reduce the
concentration of FBS without loss of metabolic activity of
fibroblasts.
Дослідження тканиноспецифічності та дозозалежнос-
ті впливу екстракту кріоконсервованих фрагментів шкіри
поросят (ЕШП) на метаболічну активність фібробластів
шкіри дозволяє з’ясувати механізм їх дії і визначити
можливості культивування клітин у середовищах з мен-
шим вмістом ембріональної телячої сироватки (ЕТС).
Зниження концентрації сироватки в середовищі культиву-
вання зменшує ризик інфікування культури та можливої
імунної відповіді при експериментальному або клініч-
ному застосуванні фібробластів.
Мета роботи – вивчити дозозалежний вплив ЕШП на
метаболічну активність фібробластів шкіри в культурі.
Екстракт одержували з кріоконсервованих фрагментів
шкіри поросят при їх інкубації в фізіологічному розчині
протягом 60 хв. Для видалення високомолекулярних
термолабільних білків екстракт прогрівали на киплячій
водяній бані та фільтрували. Одержані екстракти стерилі-
зували в автоклаві. Первинну культуру фібробластів
шкіри новонароджених щурів отримували шляхом віль-
ного виселення клітин з фрагментів шкіри і подальшого
пересівання фібробластів. Одержані фібробласти інку-
бували в живильному середовищі DMEM/F12 з 10% ЕТС,
в дослідні зразки додавали 5 або 2% ЕТС та вносили ЕШП
до кінцевої концентрації пептидів 0,1, 0,5, 1,0 і 1,5 мкг/мл,
а в контрольні – еквівалентний об’єм фізіологічного роз-
чину. Метаболічну активність клітин оцінювали по від-
новленню нетоксичного редокс-індикатора АlamarBlue
та за допомогою МТТ-тесту.
Додавання до середовища культивування ЕШП при
кінцевій концентрації пептидів 0,1 мкг/мл статистично
достовірно збільшило метаболічну активність фібро-
бластів. При зменшенні концентрації ЕТС в середовищі
культивування з 5 до 2% та додаванні ЕШП в кінцевій
концентрації пептидів 1 і 1,5 мкг/мл метаболічна актив-
ність фібробластів зберігалася на рівні, який спостері-
гався в контрольних пробах з 10% ЕТС. На 5 добу культи-
вування фібробластів їх кількість в середовищі з 2% ЕТС
та 1 мкг/мл пептидів більша, ніж в середовищі без ЕШП,
але менша, ніж в середовищі з 5% ЕТС. Відмінностей в
метаболічній активності клітин при визначенні за допо-
могою АlamarBlue або МТТ-тесту виявлено не було.
Таким чином, при додаванні ЕШП в культуру фібро-
бластів є можливість знизити концентрацію ЕТС без
втрати метаболічної активності фібробластів.
проблемы криобиологии и криомедицины
problems of cryobiology and cryomedicine
том/volume 23, №/issue 2, 2013
181
|