Новые подходы к дифференциальной диагностике глютеновой энтеропатии
Мета дослідження: виявити можливості диференціальної діагностики глютеновою ентеропатії з використанням ендоскопії високої роздільної здатності та імуногістохімічних методів дослідження. Встановлено, що стан ворсинчастий структур при глютеновою ентеропатії, вивчених при проведенні ендоскопії високог...
Saved in:
| Published in: | Таврический медико-биологический вестник |
|---|---|
| Date: | 2011 |
| Main Authors: | , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Кримський науковий центр НАН України і МОН України
2011
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/74939 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Новые подходы к дифференциальной диагностике глютеновой энтеропатии / А.В. Килесса, А.К. Загорулько, Т.Г. Филоненко // Таврический медико-биологический вестник. — 2011. — Т. 14, № 1 (53). — С. 73-76. — Бібліогр.: 11 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-74939 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Килесса, А.В. Загорулько, А.К. Филоненко, Т.Г. 2015-01-24T18:48:12Z 2015-01-24T18:48:12Z 2011 Новые подходы к дифференциальной диагностике глютеновой энтеропатии / А.В. Килесса, А.К. Загорулько, Т.Г. Филоненко // Таврический медико-биологический вестник. — 2011. — Т. 14, № 1 (53). — С. 73-76. — Бібліогр.: 11 назв. — рос. 2070-8092 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/74939 616.341– 002 : 616.342 : 611:616 – 072:616-079 Мета дослідження: виявити можливості диференціальної діагностики глютеновою ентеропатії з використанням ендоскопії високої роздільної здатності та імуногістохімічних методів дослідження. Встановлено, що стан ворсинчастий структур при глютеновою ентеропатії, вивчених при проведенні ендоскопії високого дозволу, мають характерні ознаки, що визначаються за Z-шкалі. Дослідження біоптатів слизової оболонки дванадцятипалої кишки з проведенням фарбування гематоксилін - еозин не дозволяє достовірно встановити патоморфологічно діагноз. Використання імуногістохімічних маркерів до СD3, CD8 лімфоцитів і моноклональних антитіл Ki67 до мітотично активним ентероцитах дозволяє встановити патоморфологічно діагноз і провести диференційну діагностику глютеновою ентеропатії. Objective: to identify opportunities for differential diagnosis of gluten enteropathy using high resolution endoscopy and immunohistochemical methods. It was established that the state of villous structures with gluten enteropathy, studied during the high-resolution endoscopy, have characteristic symptoms, as assessed by Z-scale. Investigation of mucosal biopsies of the duodenum with the conduct of staining with hematoxylin - eosin can not reliably establish a tissue diagnosis. Use of immunohistochemical markers to CD3, CD8 lymphocytes and monoclonal antibodies to Ki67 mitotic activity in enterocytes allows us to establish a tissue diagnosis and to the differential diagnosis of gluten enteropathy. ru Кримський науковий центр НАН України і МОН України Таврический медико-биологический вестник Оригинальные статьи Новые подходы к дифференциальной диагностике глютеновой энтеропатии Нові підходи до диференціальної діагностики глютеновою ентеропатії New approaches to the differential diagnosis of gluten enteropathy Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Новые подходы к дифференциальной диагностике глютеновой энтеропатии |
| spellingShingle |
Новые подходы к дифференциальной диагностике глютеновой энтеропатии Килесса, А.В. Загорулько, А.К. Филоненко, Т.Г. Оригинальные статьи |
| title_short |
Новые подходы к дифференциальной диагностике глютеновой энтеропатии |
| title_full |
Новые подходы к дифференциальной диагностике глютеновой энтеропатии |
| title_fullStr |
Новые подходы к дифференциальной диагностике глютеновой энтеропатии |
| title_full_unstemmed |
Новые подходы к дифференциальной диагностике глютеновой энтеропатии |
| title_sort |
новые подходы к дифференциальной диагностике глютеновой энтеропатии |
| author |
Килесса, А.В. Загорулько, А.К. Филоненко, Т.Г. |
| author_facet |
Килесса, А.В. Загорулько, А.К. Филоненко, Т.Г. |
| topic |
Оригинальные статьи |
| topic_facet |
Оригинальные статьи |
| publishDate |
2011 |
| language |
Russian |
| container_title |
Таврический медико-биологический вестник |
| publisher |
Кримський науковий центр НАН України і МОН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Нові підходи до диференціальної діагностики глютеновою ентеропатії New approaches to the differential diagnosis of gluten enteropathy |
| description |
Мета дослідження: виявити можливості диференціальної діагностики глютеновою ентеропатії з використанням ендоскопії високої роздільної здатності та імуногістохімічних методів дослідження. Встановлено, що стан ворсинчастий структур при глютеновою ентеропатії, вивчених при проведенні ендоскопії високого дозволу, мають характерні ознаки, що визначаються за Z-шкалі. Дослідження біоптатів слизової оболонки дванадцятипалої кишки з проведенням фарбування гематоксилін - еозин не дозволяє достовірно встановити патоморфологічно діагноз. Використання імуногістохімічних маркерів до СD3, CD8 лімфоцитів і моноклональних антитіл Ki67 до мітотично активним ентероцитах дозволяє встановити патоморфологічно діагноз і провести диференційну діагностику глютеновою ентеропатії.
Objective: to identify opportunities for differential diagnosis of gluten enteropathy using high resolution endoscopy and immunohistochemical methods. It was established that the state of villous structures with gluten enteropathy, studied during the high-resolution endoscopy, have characteristic symptoms, as assessed by Z-scale. Investigation of mucosal biopsies of the duodenum with the conduct of staining with hematoxylin - eosin can not reliably establish a tissue diagnosis. Use of immunohistochemical markers to CD3, CD8 lymphocytes and monoclonal antibodies to Ki67 mitotic activity in enterocytes allows us to establish a tissue diagnosis and to the differential diagnosis of gluten enteropathy.
|
| issn |
2070-8092 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/74939 |
| citation_txt |
Новые подходы к дифференциальной диагностике глютеновой энтеропатии / А.В. Килесса, А.К. Загорулько, Т.Г. Филоненко // Таврический медико-биологический вестник. — 2011. — Т. 14, № 1 (53). — С. 73-76. — Бібліогр.: 11 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT kilessaav novyepodhodykdifferencialʹnoidiagnostikeglûtenovoiénteropatii AT zagorulʹkoak novyepodhodykdifferencialʹnoidiagnostikeglûtenovoiénteropatii AT filonenkotg novyepodhodykdifferencialʹnoidiagnostikeglûtenovoiénteropatii AT kilessaav novípídhodidodiferencíalʹnoídíagnostikiglûtenovoûenteropatíí AT zagorulʹkoak novípídhodidodiferencíalʹnoídíagnostikiglûtenovoûenteropatíí AT filonenkotg novípídhodidodiferencíalʹnoídíagnostikiglûtenovoûenteropatíí AT kilessaav newapproachestothedifferentialdiagnosisofglutenenteropathy AT zagorulʹkoak newapproachestothedifferentialdiagnosisofglutenenteropathy AT filonenkotg newapproachestothedifferentialdiagnosisofglutenenteropathy |
| first_indexed |
2025-11-24T23:21:57Z |
| last_indexed |
2025-11-24T23:21:57Z |
| _version_ |
1850500113283153920 |
| fulltext |
73
О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И
УДК 616.341– 002 : 616.342 : 611:616 – 072:616-079
© А. В. Килесса, А. К. Загорулько, Т. Г. Филоненко, 2011.
НОВЫЕ ПОДХОДЫ К ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ
ГЛЮТЕНОВОЙ ЭНТЕРОПАТИИ
А.В. Килесса, А.К. Загорулько, Т.Г. Филоненко
Клиника «Генезис» (директор Т. А. Сайкова ) МОЗ АР Крыма.
Кафедра патологической анатомии (зав. каф. профессор А. К. Загорулько), ГУ «Крымский государственный
медицинский университет им. С.И.Георгиевского», г.Симферополь.
NEWAPPROACHES TO THE DIFFERENTIAL DIAGNOSIS OF GLUTEN ENTEROPATHY
A. V. Kilessa, A. K. Zagorulko, T. G. Filonenko
SUMMARY
Objective: to identify opportunities for differential diagnosis of gluten enteropathy using high resolution
endoscopy and immunohistochemical methods. It was established that the state of villous structures with
gluten enteropathy, studied during the high-resolution endoscopy, have characteristic symptoms, as assessed
by Z-scale. Investigation of mucosal biopsies of the duodenum with the conduct of staining with hematoxylin
- eosin can not reliably establish a tissue diagnosis. Use of immunohistochemical markers to CD3, CD8
lymphocytes and monoclonal antibodies to Ki67 mitotic activity in enterocytes allows us to establish a tissue
diagnosis and to the differential diagnosis of gluten enteropathy.
НОВІ ПІДХОДИ ДО ДИФЕРЕНЦІАЛЬНОЇ ДІАГНОСТИКИ ГЛЮТЕНОВОЮ ЕНТЕРОПАТІЇ
А. В. Кілесса, О. К. Загорулько, Т. Г. Філоненко
РЕЗЮМЕ
Мета дослідження: виявити можливості диференціальної діагностики глютеновою ентеропатії з
використанням ендоскопії високої роздільної здатності та імуногістохімічних методів дослідження.
Встановлено, що стан ворсинчастий структур при глютеновою ентеропатії, вивчених при проведенні
ендоскопії високого дозволу, мають характерні ознаки, що визначаються за Z-шкалі. Дослідження
біоптатів слизової оболонки дванадцятипалої кишки з проведенням фарбування гематоксилін - еозин
не дозволяє достовірно встановити патоморфологічно діагноз. Використання імуногістохімічних
маркерів до СD3, CD8 лімфоцитів і моноклональних антитіл Ki67 до мітотично активним ентероцитах
дозволяє встановити патоморфологічно діагноз і провести диференційну діагностику глютеновою
ентеропатії.
Ключевые слова: глютеновая энтеропатия, дифференциальная диагностика.
В настоящее время глютеновая энтеропатия
(ГЭП) рассматривается как ненормальный иммун-
ный ответ слизистой оболочки тонкой кишки на гли-
адин [1]. Учитывая высокую генетическую предрас-
положенность к глютеновой энтеропатии, приближа-
ющуюся к 40% среди общей популяции населения
[2] и высокую смертность среди больных ГЭП (по
сравнению с общей популяцией населения более чем
в 4 раза [3] ранняя диагностика ГЭП представляется
чрезвычайно актуальной.
Использование серологических тестов не может
в полной мере демонстрировать клиническую зна-
чимость, в связи с тем, что выявление специфичес-
ких антител становиться возможным, чаще всего при
развитии деструктивных изменений в слизистой тон-
кой кишки (Marsh IIIC) [4,5,6].
Появление с 2004 года эндоскопических техноло-
гий с использованием режимов высокого увеличе-
ния (HME), высокого оптического разрешения (HRE)
и узкоспектральной визуализации (NBI) позволили
использовать данный метод в скрининге ГЭП, при
которой состояние ворсинчатой структур слизистой
оболочки оценивается по Z (zoom) - шкале [7], при
этом стало возможным не только детальная оценка
состояния ворсин, но и проведение топического за-
бора гистологического материала, особенно, при
очаговых формах ГЭП.
Доказана 100% корреляционная взаимосвязь
между данными эндоскопии высокого увеличения и
данными гистологического исследования при диаг-
ностике ГЭП [8]. Как известно, основными гистоло-
гическими критериями ГЭП по классификации пред-
ложенной Marsh [9] является подсчёт количества ме-
жэпителиальных лимфоцитов (МЭЛ), измерение со-
отношения высоты ворсин к глубине крипт и нали-
чие атрофии ворсин, что в совокупности позволяет
установить патоморфологический диагноз.
Однако, использование в большинстве гистоло-
гических лабораторий обзорной окраски биоптатов
гематоксилином и эозином не позволяет достовер-
но интерпретировать полученные данные при неде-
структивных стадиях ГЭП (Marsh I-II) и провести
дифференциальную диагностику ГЭП, между дру-
гими заболеваниями двенадцатиперстной кишки,
74
ТАВРИЧЕСКИЙ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК2011, том 14, № 1 (53)
имеющих схожие гистологические проявления.
Цель исследования - выявить возможные диффе-
ренциально – диагностические признаки состояния
ворсинчатых структур при проведении эндоскопии
высокого разрешения и увеличения, узкоспектраль-
ной визуализации в сопоставлении с иммуногисто-
химическими дифференциально – диагностически-
ми признаками глютеновой энтеропатии
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В нашей практике за период с 2008 по 2010 годы
было проведено 324 исследования двенадцатиперст-
ной кишки с использованием эндоскопии в режимах
HRE, HME и NBI.
Во всех случаях изучалось состояние ворсинча-
тых структур слизистой оболочки двенадцатиперст-
ной кишки. Состояние ворсинчатых структур оцени-
валось с использованием Z-шкалы [7], с последую-
щим топическим забором слизистой двенадцатипер-
стной кишки для гистологического и иммуногисто-
химического (ИГХ) исследования. Биоптаты фикси-
ровали 10% забуференым формалином, заливали в
парафин и изготавливали срезы толщиной 5 мкм.
Обзорные препараты окрашивали гематоксили-
ном и эозином. ИГХ исследование проводили по
стандартизованной методике с использованием па-
рафиновых блоков и реактивов компании DAKO:
моноклональных антител CD8-лимфоцитов (Clone С8/
144В), CD3-лимфоцитов (Clone F7.2.38), Кi-67 (Clone
MIB-1), системы визуализации FLEX, на автостейне-
ре фирмы DAKO [11]. Фотографирование проводи-
ли цифровой камерой OLYMPUS C 5050Z, установ-
ленной на микроскопе OLYMPUS CX 41. Морфомет-
рический анализ проводился с помощью програм-
мы « DPSoft».
Оценку уровня экспрессии CD8+, CD3+, Кi-67
проводили с учетом интенсивности окрашивания и
распределения моноклональных антител в процент-
ном эквиваленте при подсчете на 100 клеток. Под-
счет индекса экспрессии CD8+, CD3+ проводили в
строме и между эпителием. При подсчете индекса
экспресии Кi-67 в энтероцитах, который обнаружи-
вается в митотически активных клетках, судили о про-
лиферативной активности клеток.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
При использовании обзорной окраски биопта-
тов слизистой двенадцатиперстной кишки гематок-
силином и эозином патоморфологическая верифи-
кация глютеновой энтеропатии вызывала значитель-
ные затруднения. Мы столкнулись с проблемой диф-
ференциации и точного подсчёта межэпителиальных
лимфоцитов, а также точного измерения соотноше-
ния высоты ворсин к глубине крипт, что является па-
тогномоничными признаками для ГЭП.
Известно, что инфильтрация МЭЛ может наблю-
даться не только при ГЭП, но и при других воспали-
тельных заболеваниях двенадцатиперстной кишки
инфекционной и неинфекционной природы [1]. Ис-
пользование иммуногистохимического маркера к
CD3+ лимфоцитам [10] позволило определить точ-
ное распределение общего пула лимфоцитов как в
строме так и в межэпителиальной зоне. При выявле-
нии CD3+ МЭЛ свыше 30 на 100 энтероцитов слизис-
той двенадцатиперстной кишки мы считали, что пра-
вомочны думать о наличии ГЭП. Но в большинстве
случаев мы отмечали от 30% до 60% случаев инфиль-
трацию CD3+ в строме, что расценивался как при-
знак хронического воспалительного процесса.
Усиление экспрессии CD8+ МЭЛ свыше 30 на 100
энтероцитов в ворсинах двенадцатиперстной кишки
в общем пуле Т-лимфоцитов позволило более точно
определить наличие глютеновой энтеропатии, так как
усиливается действие Т-лимфоцитов супрессоров в
ответ на патологическую иммунную рекцию.
Установлено, что состояние ворсинчатых струк-
тур двенадцатиперстной кишки, при проведении
эндоскопии высокого увеличения (HME), высокого
разрешения (HRE) и узкоспектральной визуализации
(NBI) при ГЭП имеют характерные признаки, отли-
чимые от других воспалительных заболеваний две-
надцатиперстной кишки.
У 197 пациентов был диагностирован хроничес-
кий дуоденит различной степени активности воспа-
ления. Индекс экспрессии CD3+ Т-лимфоцитов в
межэпителиальной зоне был в пределах 10-30%, в
строме 30%-70%. Индекс экспрессии CD8+ Т-лим-
фоцитов в межэпителиальной зоне был в пределах 0-
10%, в строме 5%-10%. Пролиферативная активность
(индекс экспрессии Ki-67) в энтероцитах крипт вор-
син была в пределах 10%-30%. Низкая экспрессия
CD8+ Т-лимфоцитов в межэпителиальной зоне и стро-
ме среди повышенного общего пула CD3+ Т-лимфо-
цитов позволил диагностировать хронический вос-
палительный процесс различной степени выражен-
ности.
У 127 пациентов была диагностирована ГЭП раз-
личной стадии в зависимости от общепринятой клас-
сификации Marsh [4,5,6]. Из них у 67 пациентов ин-
декс экспрессии CD8+ Т-лимфоцитов в межэпители-
альной зоне был в пределах 30-70%, в строме 5%-
10%. Пролиферативная активность энтероцитов (ин-
декс экспрессии Кi-67) составила 10%, что не отли-
чалось от контрольних показателей в норме. Такая
ИГХ картина расценивалась как инфильтративная
стадия ГЭП (Marsh I) и соответствовала эндоскопи-
ческой визуализации в режимах HRE, HME и NBI по
шкале Z-2 (рис. 1, 2).
У 38 пациентов была диагностирована гиперпла-
стическая стадия ГЭП (Marsh II), основным призна-
ком которой является не только наличие МЭЛ, но и
пролиферация эпителия крипт, т.е. митотическая ак-
тивность энтероцитов крипт. При этом пролифера-
тивная активность энтероцитов составила 16%-50%,
несмотря на то, что соотношение ворсин к крипте
75
О Р И Г И Н А Л Ь Н Ы Е С Т А Т Ь И
оставалось сохранным (3:1) и также соответствовала
эндоскопической визуализации в режимах HRE, HME
и NBI по шкале Z-2. У 22 пациентов диагностирована
атрофическая стадия ГЭП (Marsh III), которая пред-
ставляла трудную дифференциально-диагностиче-
кую задачу. При этом наблюдалась высокая экспрес-
сия CD8+ МЭЛ-супрессоров (70%-80%) и стромаль-
ных CD8+ (50-70%), высокая пролиферативная актив-
ность энтероцитов крипт (50%-70%) при резком сни-
жении соотношения ворсины к крипте (1:1), эндос-
копически визуализировались изменения соответ-
ствующие шкале Z-3.
ВЫВОДЫ
Таким образом, совокупность методов диагнос-
тики ГЭП: исследование ворсинчатых структур две-
надцатиперстной кишки в режимах HRE, HME и NBI,
топический забор гистологического материала, гис-
тологическое исследование биоптатов с обзорной
окраской гематоксилином и эозином, применение
Рис.1. HME, HRE, NBI. Ворсины тип Z-2 (очаговая форма).
Рис.2. ГЭП, инфильтративная стадия (Marsh 1). Экспрессия CD8+ лимфоцитов в межэпителиальной
зоне. ИГХ. Система визуализации FLEX. Ув.400.
стандартизированного иммуногисто-химического
исследования с моноклональными антителами CD3,
CD8 и Ki67, морфометрический анализ с использо-
ванием программного обеспечения «DPSoft» позво-
ляет не только выявить ранние морфологические из-
менение ГЭП (Marsh I-II), но провести дифферен-
76
ТАВРИЧЕСКИЙ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК2011, том 14, № 1 (53)
циальную диагностику с другими воспалительными
заболевания двенадцатиперстной кишки.
Высокий индекс экспрессии CD8+ Т-лимфоци-
тов супрессоров в межэпителиальной зоне является
наиболее четким и патогенетически обоснованным
дифференциально-диагностическим признаком раз-
вития ГЭП.
ЛИТЕРАТУРА
1. Парфёнов А. И. Энтерология // А.И. Парфёнов
// Руководство для врачей. 2-е изд. «Медицинское ин-
формационное агенство» – Москва. – 2010. – 670c.
2. Martin F. Kagnoff. Celiac disease: pathogenesis
of a model immunogenetic disease //Martin F. Kagnoff/
/ The Journal of Clinical Investigation. – 2007.– ?Vol.117.
–№1. – P.41 – 49.
3. Alberto Rubio–Tapia. Increased Prevalence and
Mortality in Undiagnosed Celiac Disease // Alberto
Rubio–Tapia, Robert A. Kyle, Edward L. Kaplan, et al.//
Gastroenterology. – 2009. –Vol. 137. – Issue 1. – P.88 –93.
4. Oberhuber G. The histopathology of coeliac
disease: time for a standardized report scheme for
pathologists// G. Oberhuber, G. Granditsch, H.Vogelsang
// Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. – 1999 – Vol. 11 – P. –
1185 – 1194
5. Tursi A. Low prevalence of antigliadin and anti-
endomysium antibodies in subclinical silent coeliac
disease // A. Tursi, G. Brandimarte, G. Giorgetti, A.
Gigliobianco, et al// Am. J. Gastroenterol. – 2001. – №96.
– P.1507 –1510.
6. Julian A. Abrams. Seronegative Celiac Disease:
Increased Prevalence with Lesser Degrees of Villous
Atrophy // Julian A. Abrams, Beverly Diamond et al. //
Digestive Diseases and Sciences. – 2004. – Vol. 49. –
№4. – P. 546–550.
7. Badreldin R. How good is zoom endoscopy for
assessment of villous atrophy in coeliac disease? // R.
Badreldin, P. Barrett, D.A. Wooff, J. Mansfield, Y.
Yiannakou //Endoscopy. – 2005. – № 37. – P. 994 – 998.
8. Cammarota G. Direct visualization of intestinal
villi by high - resolution magnifying upper endoscopy:
a validation study // G. Cammarota, A. Martino, G.A.
Pirozzi, R. Cianci, et al. // Gastrointestinal Endoscopy. –
2004. – № 60. – P.732 – 738;
9. Marsh M.N. Morphology of the mucosal lesion
in gluten sensitivity // M.N. Marsh // Crowe Ballieres
Clinical Gastrointerology. – 1995. – № 9 – P. 273 – 293;
10. Gastrointestinal Pathology: An Atlas and Text /
/Fenoglio-Preiser, Cecilia M.; Noffsinger, Amy E. et al. /
/ 3rd Edition Copyright В©2008 Lippincott Williams &
Wilkins. – Р.714–724;
11. David Dabbs. Diagnostic immunohistochemistry
// David Dabbs //«Sanders». Philadelphia. – 2010. – 952р.
|