Морфологическое исследование экстрацеллюлярного матрикса девитализированных сердечно-сосудистых трансплантатов
Проведено дослідження з отримання девіталізованого сполучнотканинного матриксу клапанів серця з метою виготовлення біомодифікованих серцево-судинних трансплантатів. Для цього у клітинах трансплантату ініціювалась апоптотична загибель під дією децелюляризуючого розчину. Після обробки даним розчином...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Таврический медико-биологический вестник |
|---|---|
| Datum: | 2013 |
| Hauptverfasser: | , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russisch |
| Veröffentlicht: |
Кримський науковий центр НАН України і МОН України
2013
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/76367 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Морфологическое исследование экстрацеллюлярного матрикса девитализированных сердечно-сосудистых трансплантатов/ А.Г. Попандопуло, М.В. Петрова, Д.Л. Юдицкий // Таврический медико-биологический вестник. — 2013. — Т. 16, № 1, ч. 2 (61). — С. 161-163. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859916738394587136 |
|---|---|
| author | Попандопуло, А.Г. Петрова, М.В. Юдицкий, Д.Л. |
| author_facet | Попандопуло, А.Г. Петрова, М.В. Юдицкий, Д.Л. |
| citation_txt | Морфологическое исследование экстрацеллюлярного матрикса девитализированных сердечно-сосудистых трансплантатов/ А.Г. Попандопуло, М.В. Петрова, Д.Л. Юдицкий // Таврический медико-биологический вестник. — 2013. — Т. 16, № 1, ч. 2 (61). — С. 161-163. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Таврический медико-биологический вестник |
| description | Проведено дослідження з отримання девіталізованого сполучнотканинного матриксу клапанів серця з
метою виготовлення біомодифікованих серцево-судинних трансплантатів. Для цього у клітинах трансплантату
ініціювалась апоптотична загибель під дією децелюляризуючого розчину. Після обробки даним розчином
сполучнотканинний матрикс графту зберігає структурну цілісність і, таким чином, є придатним до подальшого
заселення клітинами реципієнту (рецелюляризації).
Our goal was to produce a biomodificated cardiovascular graft by decellularisation of the heart valve
extracellular matrix. To achieve decellularisaton we used a special solution inducing an apoptotic death of the
graft cells.After the treatment with decellularizing solution, the graft extracellular matrix preserved the structural
integrity and therefore was applicable for further colonization by the recipient’s cells to realize the recellularization.
|
| first_indexed | 2025-12-07T16:05:34Z |
| format | Article |
| fulltext |
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
УДК 611.018:616.12–089
© А. Г. Попандопуло, М. В. Петрова, Д. Л. юдицкий, 2013
мОРфОЛОГИЧЕСкОЕ ИССЛЕДОвАНИЕ
экСТРАцЕЛЛЮЛяРНОГО мАТРИкСА ДЕвИТАЛИЗИРОвАННЫх
СЕРДЕЧНО-СОСуДИСТЫх ТРАНСпЛАНТАТОв
А. Г. попандопуло, м. В. петрова, Д. Л. Юдицкий
Лаборатория клеточного и тканевого культивирования (зав. – проф. Попандопуло А. Г.), ГУ «Институт неотложной
и восстановительной хирургии им. В. К. Гусака НАМНУ». 83045 Украина, г. Донецк, пр-т Ленинский, 47. E-mail: pmv-
07@yandex.ru
Morphological eXaMinaTion oF The eXTracellular MaTriX oF decelluriZed
cardiovascular graFTs
a. popandopulo, M. petrova, d. yuditskiy
SUMMARY
Our goal was to produce a biomodificated cardiovascular graft by decellularisation of the heart valve
extracellular matrix. To achieve decellularisaton we used a special solution inducing an apoptotic death of the
graft cells.After the treatment with decellularizing solution, the graft extracellular matrix preserved the structural
integrity and therefore was applicable for further colonization by the recipient’s cells to realize the recellularization.
мОРФОЛОГічНЕ ДОСЛіДЖЕННЯ ЕКСТРАЦЕЛЮЛЯРНОГО мАТРИКСУ ДЕВіТАЛіЗОВАНИх СЕРЦЕВО-
СУДИННИх ТРАНСпЛАНТАТіВ.
А. Г. попандопуло, м. В. петрова, Д. Л. Юдицький
РЕЗюМЕ
Проведено дослідження з отримання девіталізованого сполучнотканинного матриксу клапанів серця з
метою виготовлення біомодифікованих серцево-судинних трансплантатів. Для цього у клітинах трансплантату
ініціювалась апоптотична загибель під дією децелюляризуючого розчину. Після обробки даним розчином
сполучнотканинний матрикс графту зберігає структурну цілісність і, таким чином, є придатним до подальшого
заселення клітинами реципієнту (рецелюляризації).
Ключевые слова: графт, соединительнотканный (экстрацелюлярный) матрикс, девитализация, адгезия,
ревитализация.
Сердце – это биологический насос, в котором
клапанные структуры играют принципиально ту же
роль, что и клапанные конструкции, применяемые
в технике и обеспечивающие одностороннее движе-
ние жидкости (крови) [5, 8, 13, 14].
Ранее считалось, что все сердечные клапа-
ны – простые структуры, пассивно движущиеся
в ответ на действующий градиент давления.
Сейчас становится очевидным, что они имеют
более сложное строение и функцию [11]. Поэтому
создание «активного» заменителя клапана серд-
ца предполагает значительную схожесть его по
структуре и функции с естественным клапаном,
что вполне реально благодаря развитию тканевой
инженерии [1, 15]. Примером такого заменителя
являются децеллюлированные аллогенные или
ксеногенные трансплантаты. Однако, для пол-
ноценного выполнения своих функций, будущий
трансплантат наравне с минимизацией клеточной
составляющей донорской ткани, что обеспечивает
низкую иммуногенность протеза, а также мень-
шую его подверженность деструкции в результате
кальцификации, должен обладать неизмененной
структурой внеклеточного каркаса.
Межклеточный матрикс образует каркас органа
и является универсальным «биологическим» клеем;
участвует в регуляции водно-солевого обмена.
Матрикс створки клапана по своей толщине
неоднороден и представлен тремя различными слоя-
ми – фиброзным, губчатым и желудочковым.
Фиброзный слой лежит около выходной наружной
поверхности клапанов [10] и формирует устойчивый
к нагрузкам каркас створки, состоящий из слоев кол-
лагеновых волокон [6, 7, 12]. Эти волокна располага-
ются радиально в виде складок, давая возможность
растяжения артериальных клапанов при закрытии.
Желудочковый слой намного тоньше, чем осталь-
ные, и изобилует эластичными волокнами, которые
позволяют тканям противостоять постоянной де-
формации [3].
Между фиброзным и желудочковым находится
губчатый слой (спонгиоза), состоящий из слабоорга-
низованной соединительной ткани в вязкой среде. До-
минирующими матриксными компонентами этого слоя
являются протеогликаны с произвольно ориентирован-
ным коллагеном и тонкими слоями эластина [2, 4, 9].
Таким образом, значение внеклеточного ма-
трикса для нормального функционирования органа
сложно переоценить. Основной целью данной
работы было получение морфологически не из-
мененного бесклеточного экстрацеллюлярного
матрикса сосудисто-клапанного графта, способного
к адекватному упруго-прочностному ответу на про-
гнозируемое физическое воздействие in vivo.
161
ТАвРИЧЕСкИЙ мЕДИкО-бИОЛОГИЧЕСкИЙ вЕСТНИк2013, том 16, №1, ч.2 (61)
МАТЕРИАЛы И МЕТОДы
Исследование проводили с использованием сер-
дечных клапанов 4–6-месячных свиней. Образцы, при-
нимавшие участие в исследованиях, были подвержены
воздействию раствора, оказывающего апоптотическое
воздействие на клеточную составляющую графта,
в течение 2-х суток. В качестве такового использовался
раствор ЭДТА (Sigma, США) в концентрации 10 мМ.
По истечении заданного времени экспозиции образцы
тщательно отмывались в среде с содержанием солей
в концентрации близкой к физиологической.
Полученный гистологический материал фикси-
ровали в 10% растворе забуференного нейтрального
формалина в течение 24 часов. После дегидратации
материал заливали в высокоочищенный парафин
с полимерными добавками (Richard-Allan Scientific,
США) при температуре не выше 60 °C. Из парафи-
новых блоков на ротационном микротоме Shandon
Finesse 325 (Thermo Scientific, США) делали срезы
ткани толщиной 5 мкм. Микроскопическое иссле-
дование проводили с использованием методики
серийных срезов. Срезы ткани помещали на пред-
метные стекла и затем окрашивали по стандартным
методикам гематоксилином и эозином, а также по
Вергофу для оценки состояния эластических во-
локон и производили постановку ШИК-реакции
с целью исследования состояния коллагеновых
волокон.
Изучение препаратов в проходящем свете про-
водили на исследовательском микроскопе Olympus
AX70 (Япония) с цифровой видеокамерой Olympus
DP50, соединенной с персональным компьютером.
РЕЗУЛЬТАТы И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Согласно результатам гистологического анали-
за (рис.1) на фоне уменьшегося количества клеток
в ткани экстрацеллюлярный матрикс остается в прак-
тически неизмененном состоянии.
Заметна слабой выраженности базофилия ткани,
что, предположительно, связано с достаточно долгим
пребыванием образцов в жидкой среде апоптозин-
дуцирующего раствора.
В срезах, сделанных из ткани в области сты-
ка створки клапана, стенки аорты и фиброзного
кольца, наблюдается ШИК-позитивная реакция.
Наиболее интенсивно данная реакция выражена
в области створки клапана. По результатам окраски
эластических волокон по Вергофу участок стенки
аорты окрасился в темно-бордовый цвет, в области
створки клапана препарат окрашен в малиновый
цвет (рис.2).
ВыВОДы
Позитивные результаты специфической окраски
внеклеточного матрикса дают нам основание пола-
гать, что воздействие децеллюлирующим раствором
не вызывает структурных изменений в волокнах и их
физиологическая целостность не нарушена. Матрикс
сохраняет свои морфо-функциональные свойства
и, следовательно, при условии равного сохранения
им физико-механических свойств, пригоден для
дальнейшего использования в качестве каркаса
сердечно-сосудистого протеза.
Рис.2 Результат гистологического анализа внеклеточного матрикса. Увеличение х 300.
а) результат pas-реакции на коллаген; б) окраска по Вергофу
а б
Рис. 1 Створка клапана. Окраска
гематоксилином и эозином. Увеличение × 400
(окуляр-10, объектив-40)
162
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-76367 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 2070-8092 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T16:05:34Z |
| publishDate | 2013 |
| publisher | Кримський науковий центр НАН України і МОН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Попандопуло, А.Г. Петрова, М.В. Юдицкий, Д.Л. 2015-02-10T06:11:19Z 2015-02-10T06:11:19Z 2013 Морфологическое исследование экстрацеллюлярного матрикса девитализированных сердечно-сосудистых трансплантатов/ А.Г. Попандопуло, М.В. Петрова, Д.Л. Юдицкий // Таврический медико-биологический вестник. — 2013. — Т. 16, № 1, ч. 2 (61). — С. 161-163. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. 2070-8092 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/76367 611.018:616.12-089 Проведено дослідження з отримання девіталізованого сполучнотканинного матриксу клапанів серця з метою виготовлення біомодифікованих серцево-судинних трансплантатів. Для цього у клітинах трансплантату ініціювалась апоптотична загибель під дією децелюляризуючого розчину. Після обробки даним розчином сполучнотканинний матрикс графту зберігає структурну цілісність і, таким чином, є придатним до подальшого заселення клітинами реципієнту (рецелюляризації). Our goal was to produce a biomodificated cardiovascular graft by decellularisation of the heart valve extracellular matrix. To achieve decellularisaton we used a special solution inducing an apoptotic death of the graft cells.After the treatment with decellularizing solution, the graft extracellular matrix preserved the structural integrity and therefore was applicable for further colonization by the recipient’s cells to realize the recellularization. ru Кримський науковий центр НАН України і МОН України Таврический медико-биологический вестник Оригинальные статьи Морфологическое исследование экстрацеллюлярного матрикса девитализированных сердечно-сосудистых трансплантатов Morphological examination of the extracellular matrix of decellurized cardiovascular grafts Морфологічне дослідження екстрацелюлярного матриксу девіталізованих серцево-судинних трансплантатів Article published earlier |
| spellingShingle | Морфологическое исследование экстрацеллюлярного матрикса девитализированных сердечно-сосудистых трансплантатов Попандопуло, А.Г. Петрова, М.В. Юдицкий, Д.Л. Оригинальные статьи |
| title | Морфологическое исследование экстрацеллюлярного матрикса девитализированных сердечно-сосудистых трансплантатов |
| title_alt | Morphological examination of the extracellular matrix of decellurized cardiovascular grafts Морфологічне дослідження екстрацелюлярного матриксу девіталізованих серцево-судинних трансплантатів |
| title_full | Морфологическое исследование экстрацеллюлярного матрикса девитализированных сердечно-сосудистых трансплантатов |
| title_fullStr | Морфологическое исследование экстрацеллюлярного матрикса девитализированных сердечно-сосудистых трансплантатов |
| title_full_unstemmed | Морфологическое исследование экстрацеллюлярного матрикса девитализированных сердечно-сосудистых трансплантатов |
| title_short | Морфологическое исследование экстрацеллюлярного матрикса девитализированных сердечно-сосудистых трансплантатов |
| title_sort | морфологическое исследование экстрацеллюлярного матрикса девитализированных сердечно-сосудистых трансплантатов |
| topic | Оригинальные статьи |
| topic_facet | Оригинальные статьи |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/76367 |
| work_keys_str_mv | AT popandopuloag morfologičeskoeissledovanieékstracellûlârnogomatriksadevitalizirovannyhserdečnososudistyhtransplantatov AT petrovamv morfologičeskoeissledovanieékstracellûlârnogomatriksadevitalizirovannyhserdečnososudistyhtransplantatov AT ûdickiidl morfologičeskoeissledovanieékstracellûlârnogomatriksadevitalizirovannyhserdečnososudistyhtransplantatov AT popandopuloag morphologicalexaminationoftheextracellularmatrixofdecellurizedcardiovasculargrafts AT petrovamv morphologicalexaminationoftheextracellularmatrixofdecellurizedcardiovasculargrafts AT ûdickiidl morphologicalexaminationoftheextracellularmatrixofdecellurizedcardiovasculargrafts AT popandopuloag morfologíčnedoslídžennâekstracelûlârnogomatriksudevítalízovanihsercevosudinnihtransplantatív AT petrovamv morfologíčnedoslídžennâekstracelûlârnogomatriksudevítalízovanihsercevosudinnihtransplantatív AT ûdickiidl morfologíčnedoslídžennâekstracelûlârnogomatriksudevítalízovanihsercevosudinnihtransplantatív |