Імуносенсори на основі поверхневого плазмонного резонансу для кількісного визначення розчинного фібрину та D-димеру людини
Розроблено два iмуносенсори на основi поверхневого плазмонного резонансу для кiлькiсного визначення розчинного фiбрину та D-димеру людини. В цих iмуносенсорах використано отриманi нами фiбринспецифiчнi та D-димерспецифiчнi моноклональнi антитiла, якi були iммобiлiзованi на п’ятишаровiй амiнопентацiа...
Gespeichert in:
| Datum: | 2009 |
|---|---|
| Hauptverfasser: | , , , , , , , , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Ukrainisch |
| Veröffentlicht: |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
2009
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/7750 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Імуносенсори на основі поверхневого плазмонного резонансу для кількісного визначення розчинного фібрину та D-димеру людини / П. Г. Гриценко, Е.В. Луговськой, К.В. Костюкевич, I.М. Колеснiкова, С.О. Костюкевич, Л.М. Литвинова, Н.Е. Луговська, О.П. Костюченко, А.Д. Замковий, Т.А. Кошель, С.В. Комiсаренко // Доп. НАН України. — 2009. — № 1. — С. 155-160. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1860269814136700928 |
|---|---|
| author | Гриценко, П.Г. Луговськой, Е.В. Костюкевич, К.В. Колеснікова, І.М. Костюкевич, С.О. Литвинова, Л.М. Луговська, Н.Е. Костюченко, О.П. Замковий, А.Д. Кошель, Т.А. Комісаренко, С.В. |
| author_facet | Гриценко, П.Г. Луговськой, Е.В. Костюкевич, К.В. Колеснікова, І.М. Костюкевич, С.О. Литвинова, Л.М. Луговська, Н.Е. Костюченко, О.П. Замковий, А.Д. Кошель, Т.А. Комісаренко, С.В. |
| citation_txt | Імуносенсори на основі поверхневого плазмонного резонансу для кількісного визначення розчинного фібрину та D-димеру людини / П. Г. Гриценко, Е.В. Луговськой, К.В. Костюкевич, I.М. Колеснiкова, С.О. Костюкевич, Л.М. Литвинова, Н.Е. Луговська, О.П. Костюченко, А.Д. Замковий, Т.А. Кошель, С.В. Комiсаренко // Доп. НАН України. — 2009. — № 1. — С. 155-160. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. |
| collection | DSpace DC |
| description | Розроблено два iмуносенсори на основi поверхневого плазмонного резонансу для кiлькiсного визначення розчинного фiбрину та D-димеру людини. В цих iмуносенсорах використано отриманi нами фiбринспецифiчнi та D-димерспецифiчнi моноклональнi антитiла, якi були iммобiлiзованi на п’ятишаровiй амiнопентацiанофератнiй плiвцi (Cu3[Fe(CN)5NH3]2). Кiнетичнi дослiдження показали, що чутливiсть розроблених iмуносенсорiв для розчинного фiбрину та D-димеру становить 0,5 та 1,0 мкг/мл вiдповiдно.
Two immunosensors based on the surface plasmon resonance effect for human soluble fibrin and D-dimer quantification have been elaborated. In these immune sensors, fibrin-specific and D-dimer-specific monoclonal antibodies immobilized on the aminopentacyanoferratic film (Cu3[Fe(CN)5NH3]2) have been used. Kinetic investigations showed that the sensitivities of immune sensors elaborated for soluble fibrin and D-dimer were 0.5 and 1 μg/ml, respectively.
|
| first_indexed | 2025-12-07T19:05:27Z |
| format | Article |
| fulltext |
оповiдi
НАЦIОНАЛЬНОЇ
АКАДЕМIЇ НАУК
УКРАЇНИ
1 • 2009
БIОХIМIЯ
УДК 535.394:539.233;577.112:612.115
© 2009
П.Г. Гриценко, Е.В. Луговськой, К. В. Костюкевич,
I.М. Колеснiкова, С. О. Костюкевич, Л.М. Литвинова,
Н.Е. Луговська, О. П. Костюченко, А.Д. Замковий, Т. А. Кошель,
академiк НАН України С. В. Комiсаренко
Iмуносенсори на основi поверхневого плазмонного
резонансу для кiлькiсного визначення розчинного
фiбрину та D-димеру людини
Розроблено два iмуносенсори на основi поверхневого плазмонного резонансу для кiль-
кiсного визначення розчинного фiбрину та D-димеру людини. В цих iмуносенсорах
використано отриманi нами фiбринспецифiчнi та D-димерспецифiчнi моноклональнi
антитiла, якi були iммобiлiзованi на п’ятишаровiй амiнопентацiанофератнiй плiвцi
(Cu3[Fe(CN)5NH3]2). Кiнетичнi дослiдження показали, що чутливiсть розроблених iму-
носенсорiв для розчинного фiбрину та D-димеру становить 0,5 та 1,0 мкг/мл вiд-
повiдно.
Останнiм часом зростає iнтерес щодо розробки портативних бiохiмiчних сенсорних при-
ладiв, якi дають змогу отримати iнформацiю про взаємодiю молекул у газових та рiдких
середовищах. Робота найбiльш чутливих сенсорних систем заснована на iмунохiмiчних реак-
цiях, якi дають змогу отримувати унiкальнi за специфiчнiстю та чутливiстю вiдгуки [1, 2].
Антитiла або антигени використовують як чутливi шари iмуносенсорiв; вони з високою спе-
цифiчнiстю зв’язуються з молекулами-аналiтами, вiдповiдно антигенами або антитiлами.
Захворювання людини, такi як тромбоз глибоких вен, тромбоемболiя легеневих артерiй,
ДВЗ-синдром (дисимiноване внутрiшньосудинне згортання кровi), iшемiчна хвороба сер-
ця, iшемiчний iнсульт, онкологiчнi, супроводжуються активацiєю системи згортання кровi
або є її наслiдком. В результатi активацiї системи згортання кровi утворюється фермент
тромбiн, який перетворює фiбриноген на фiбрин дезАА, здатний до спонтанної полiмери-
зацiї. При невеликих концентрацiях тромбiну фiбрин дезАА формує комплекси з фiбри-
ногеном, а далi розчиннi олiгомери фiбрину. Такi комплекси та олiгомери є так званим
розчинним фiбрином. При пiдвищених концентрацiях тромбiну олiгомери фiбрину утворю-
ють протофiбрили i далi фiбрили, якi формують тривимiрну сiтку фiбрину, що є каркасом
будь-якого тромбу. Отже, поява розчинного фiбрину в кровi є найбiльш раннiм показником
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2009, №1 155
та прямим iндикатором активацiї системи згортання кровi та загрози утворення тромбу.
В органiзмi людини утворення фiбрину та його розчеплення вiдбуваються практично од-
ночасно i найбiльш важливим молекулярним маркером цих паралельних процесiв є D-ди-
мер, яких формується в результатi розщеплення плазмiном фiбрину, стабiлiзованого фак-
тором XIIIa.
В умовах клiнiчної дiагностики вказаних вище захворювань та монiторингу ефектив-
ностi їх лiкування важливе значення має застосування експрес-методiв визначення концен-
трацiї розчинного фiбрину та D-димеру в плазмi кровi людини. Нами показано можливiсть
вимiрювання концентрацiї розчинного фiбрину та D-димеру людини з використанням оп-
тичного iмуносенсора, в основу дiї якого покладено оптичне збудження поверхневих плазмо-
нiв (ПП), тобто спостереження поверхневого плазмонного резонансу (ППР) у тонкiй плiвцi
золота [3]. Дослiдження проведенi на автоматизованому малогабаритному приладi “Плаз-
мон-5”, що розроблено в Iнститутi фiзики напiвпровiдникiв iменi В.Є. Лашкарьова НАН
України [4].
У приладi “Плазмон-5” реалiзовано збудження ПП за допомогою скляної призми
(кут 65◦, показник заломлення 1,61) за схемою Кретчмана, коли збуджуючий лазерний
промiнь р-поляризованого свiтла (λ = 670 нм) падає на металеву плiвку з боку призми
i вимiрюється кутова залежнiсть коефiцiєнта вiдбиття R(θ). Як вихiдний сигнал приладу
фiксується зсув резонансного кута ∆θППР у часi.
Плiвки золота (завтовшки 45 нм) наносили на склянi пiдкладинки (показник заломлен-
ня 1,61), якi були покритi тонким шаром хрому (∼ 1 нм) методом термiчного випаровування
у вакуумi та вiдпалювали при t ∼ 120 ◦С [5]. Оптичний контакт пiдкладки з призмою до-
сягали за допомогою iмерсiйної рiдини — полiфiнового ефiру, показник заломлення якого
дорiвнює 1,6.
При дослiдженнi молекулярних реакцiй розчин проб послiдовно надходив у кювету, що
контактувала з поверхнею золотої плiвки у проточному режимi за допомогою мiкронасосу
Г705 (насос розроблено в Iнститутi фiзики напiвпровiдникiв iменi В.Є. Лашкарьова НАН
України). Отриманi сигнали завжди порiвнювали в однаковому розчинi, оскiльки змiни
розчину призводять до змiн показника заломлення, якi викликають зсув резонансного кута.
Використання антитiл у бiосенсорних технологiях дозволяє проводити вимiрювання у
складних бiологiчних сумiшах, таких як сироватка або плазма кровi. Особливо цiкавими для
створення бiосенсорiв є моноклональнi антитiла (монАТ), якi є гомогенними iмуноглобулi-
нами однакової специфiчностi та можуть зв’язуватися з високою спорiдненiстю з вiдповiд-
ною дiлянкою (епiтопом) на антигенi [6]. Ранiше нами було розроблено iмуносенсор на основi
явища ППР для кiлькiсного визначення фiбриногену з використанням монАТ II-3b [7].
У вiддiлi молекулярної iмунологiї Iнституту бiохiмiї iменi О.В. Палладiна НАН Украї-
ни було отримано два унiкальнi монАТ — фiбринспецифiчне антитiло FnI-3C [8] та D-ди-
мерспецифiчне III-3b [9]. Данi монАТ не реагують з фiбриногеном, що надає можливiсть
використовувати їх для кiлькiсного визначення розчинного фiбрину й D-димеру в плазмi
кровi людини.
Як вiдомо, взаємодiя бiлкiв iз золотою поверхнею часто приводить до розриву дисуль-
фiдних зв’язкiв [10], внаслiдок чого в цих бiомолекулах спостерiгаються структурнi i кон-
формацiйнi змiни, а iнодi i повна втрата їх бiологiчної активностi. Тому важливою пробле-
мою є розробка методики закрiплення однiєї з взаємодiючих молекул на поверхнi сенсорно-
го чипу iз збереженням її нативного стану i доступною просторовою орiєнтацiєю активних
центрiв.
156 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2009, №1
Нами проведено роботу по з’ясуванню оптимального способу модифiкацiї поверхнi зо-
лота для запобiгання денатурацiї монАТ та втрати їх функцiональної активностi. Зокрема,
були випробуванi такi способи модифiкацiї золотої поверхнi.
Перша методика модифiкацiї золотої поверхнi, яку ми застосували, детально описана
у роботi [11]. Золоту поверхню обробляли розчином 4 ·10−5 моль/л роданiду калiю (KCNS).
Далi в кювету вносили розчин бiлка А (20 мкг/мл) у 0,01 моль/л фосфатному буферi (ФБ)
pH 7,3 з 0,14 моль/л NaCl. Пiсля промивки у ФБ додавали розчин монАТ III-3b (20 мкг/мл).
При наступнiй промивцi чипу буфером вiльнi мiсця для зв’язування блокували розчином
БСА (100 мкг/мл). Пiсля промивки у ФБ з 0,05% твiн-20 (ТФБ) до кювети вносили розчин
D-димеру в ТФБ у рiзних концентрацiях. Було встановлено, що мiнiмальна концентра-
цiя D-димеру, яку ще можна зафiксувати у данiй системi модифiкацiї золотої поверхнi,
становить ∼ 5 мкг/мл.
Далi ми випробовували спосiб модифiкацiї поверхнi золота з використанням глутарово-
го альдегiду та БСА. Для цього золоту поверхню обробляли розчином БСА (100 мкг/мл)
у ФБ. Далi у кювету вносили 1% розчин глутарового альдегiду. Через 60 хв кювету проми-
вали i додавали розчин монАТ III-3b (20 мкг/мл). Пiсля адсорбцiї антитiл вливали розчин
0,2 моль/л глiцину для блокування вiльних альдегiдних груп i витримували протягом 30 хв,
а пiсля промивки ТФБ до кювети вносили розчин D-димеру у ТФБ в рiзних концентрацiях.
Було виявлено, що чутливiсть даного iмуносенсора для D-димеру становила 6 10 мкг/мл.
Найбiльш оптимальним виявилося використання складних фероцiанiдiв перехiдних ме-
талiв — модифiкуючого покриття для орiєнтованого закрiплення антитiл на золотiй поверх-
нi ППР перетворювача. Даний метод розроблено у вiддiлi функцiональної оптоелектронiки
Iнституту фiзики напiвпровiдникiв iменi В.Є. Лашкарьова НАН України [12]. Вiн полягає
у поступовому формуваннi на поверхнi золота неорганiчної багатошарової плiвки амiно-
пентацiаноферату мiдi (Cu3[Fe(CN)5NH3]2, плiвка якого несе на своїй поверхнi рiвномiрно
розподiленi активованi амiногрупи (NH+
3
), з якими можуть утворювати ковалентнi зв’язки
карбоксильнi групи бiлкiв (у нашому випадку — моноклональних антитiл). Формування
амiнопентацiанофератних плiвок проводили таким чином. Скляну пластинку з золотою
плiвкою занурювали в 1 ммоль розчин додекантiолу HS(CH2)11COOH в етиловому спир-
тi на 24 год з подальшим промиванням у чистому етанолi i сушiнням у потоку чистого
повiтря. Формування плiвки Cu3[Fe(CN)5NH3]2 на поверхнi тiолу проводили шляхом зану-
рення пластинок спочатку на 10 хв у розчин 5 ·10−4 моль/л сульфату мiдi (CuSO4), а потiм
на 1 хв — у розчин 5 ·10−4 моль/л амiнопентацiаноферату натрiю (Na3[Fe(CN)5NH3]). Таку
процедуру повторювали п’ять разiв. Рiст плiвок амiнопентацiаноферату мiдi з подальшою
адсорбцiєю бiлка БСА було дослiджено in situ за допомогою приладу “Плазмон-5” (рис. 1).
Для порiвняння було дослiджено кiнетику адсорбцiї БСА на чисту поверхню золота. Вiдгук
на модифiкованiй поверхнi втричi перевищував вiдгук на немодифiкованiй поверхнi золота.
Нами дослiджено кiнетику взаємодiї фiбринспецифiчних монАТ FnI-3C, iммобiлiзова-
них на амiнопентацiанофератнiй плiвцi з фiбрином дезААВВ людини, який був отриманий
у лабораторiї Iнституту бiохiмiї iменi О.В. Палладiна НАН України за описаною ранiше
методикою [13]. Фiбрин дезААВВ широко використовують для отримання препаратiв роз-
чинного фiбрину. З метою гальмування полiмеризацiї фiбрину до розчинiв фiбрину дезА-
АВВ додають рiзнi iнгiбiтори полiмеризацiї — Gly-Pro-Arg-Pro пептид, фiбриноген, плазму
кровi тощо. Для кiнетичних дослiджень ми розчиняли фiбрин дезААВВ в у 0,01 моль/л
фосфатному буферi pH 7,3 з 0,14 моль/л NaCl та 0,1% твiн-20. 0,1% твiн-20 гальмував по-
лiмеризацiю фiбрину дезААВВ, який залишався в розчиненому станi. Для виготовлення
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2009, №1 157
Рис. 1. Сенсорограма формування п’ятишарової плiвки амiнопентацiаноферату мiдi (Cu3[Fe(CN)5NH3]2) на
поверхнi тiолату золота за рахунок повторюваностi процедури послiдовного внесення до кювети ППР сенсо-
ра водних розчинiв сульфату мiдi (CuSO4) та амiнопентацiаноферату натрiю (Na3[Fe(CN)5NH3]) з подаль-
шою адсорбцiєю БСА (100 мкг/мл) у 0,01 моль/л фосфатному буферi pH 7,3 з 0,14 моль/л NaCl (ФБ)
iмуносенсора на щойно сформованi амiнопентацiанофератнi плiвки у проточну кювету вли-
вали розчин монАТ FnI-3C з концентрацiю 50 мкг/мл у ФБ. Далi кювету промивали ТФБ,
пiсля чого вносили розчин БСА (100 мкг/мл) у ТФБ з метою блокування вiльних мiсць зв’я-
зування. На рис. 2 наведено типову сенсограму взаємодiї монАТ FnI-3C, що iммобiлiзованi
на амiнопентацiанофератнiй плiвцi, з фiбрином дезААВВ у концентрацiї 2 мкг/мл. Калiбру-
вальна крива для визначення концентрацiї бiлка, який зв’язується з чутливим елементом
ППР сенсора, може бути побудована з кiнетичних кривих адсорбцiї на пiдставi значень зсу-
ву резонансного кута при насиченнi, або з використанням значення тангенса кута нахилу
початкової дiлянки кiнетичної кривої (рис. 2) [14]. Переважним є калiбрування по тангенсу
кута нахилу, оскiльки це дає iстотну перевагу у часi детектування дослiджуваного бiлка.
Встановлено, що мiнiмальна концентрацiя фiбрину дезААВВ, яку можна зафiксувати за
допомогою розробленого нами iмуносенсора, становила 0,5 мкг/мл.
Концентрацiя розчинного фiбрину в плазмi кровi здорових донорiв варiює вiд 0 до
3 мкг/мл. На сьогоднi кiлькiсне визначення розчинного фiбрину в клiнiчнiй практицi має
найбiльше значення для дiагностики ДВЗ-синдрому, при якому рiвень розчинного фiбрину
може збiльшуватись у десять i бiльше разiв порiвняно з нормою [15]. Таким чином, чутли-
вiсть розробленого нами iмуносенсора теоретично дозволяє кiлькiсно визначати розчинний
фiбрин у плазмi кровi за норми та при ДВЗ-синдромi. Наступним етапом нашої роботи буде
дослiдження зразкiв плазми кровi здорових донорiв та хворих на ДВЗ-синдром.
На модифiкованi амiнопентацiанофератом мiдi поверхнi золота ми iммобiлiзували також
D-димерспецифiчнi монАТ III-3b. Отриманi чипи було використано для дослiдження кiне-
тики зв’язування монАТ III-3b з D-димером при рiзних концентрацiях, розчиненого у ТФБ.
Дослiдження показали, що чутливiсть методу при застосуваннi такої модифiкацiї золотої
поверхнi для D-димеру становить 1 мкг/мл. Кiлькiсне визначення D-димеру має найбiльше
158 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2009, №1
Рис. 2. Сенсорограма взаємодiї моноклональних антитiл (монАТ) FnI-3C, що iммобiлiзованi на поверхнi п’я-
тишарової плiвки амiнопентацiаноферату мiдi, з фiбрином дезААВВ (2 мкг/мл), розчиненому в 0,01 моль/л
фосфатному буферi pH 7,3 з 0,14 моль/л NaCl та 0,1% твiн-20
значення для дiагностики тромбозу глибоких вен та тромбоемболiї легеневих артерiй. Якщо
концентрацiя D-димеру в плазмi кровi не перевищує пороговий рiвень норми 500 нг/мл, то
це на 98–100% дозволяє виключити у пацiєнта згаданi вище патологiї. Чутливiсть ство-
реного нами iмуносенсора є недостатньою для використання його в дiагностицi тромбозу
глибоких вен та тромбоемболiї легеневих артерiй. Проте даний iмуносенсор може бути вико-
ристаний для дiагностики ДВЗ-синдрому, при якому концентрацiї D-димеру в плазмi кровi
хворих можуть зростати до 10 мкг/мл та навiть вище. Планується проведення роботи по
збiльшенню чутливостi розробленого iмуносенсора.
Таким чином, було розроблено два iмуносенсори на основi ППР з використанням фiб-
ринспецифiчних монАТ FnI-3C та D-димерспецифiчних монАТ III-3b, якi дозволяють про-
водити кiлькiсне визначення розчинного фiбрину та D-димеру людини у розчинi з чутли-
вiстю 0,5 та 1,0 мкг/мл вiдповiдно.
1. Биосенсоры: основы и приложения / Под ред. Э. Тернера, И. Карубе, Дж. Уилсона. – Москва: Мир,
1992. – 616 с.
2. Медянцева Э.П., Халдеева Е.В., Будников Г.К. Иммуносенсоры в биологии и медицине: анали-
тические возможности, проблемы и перспективы // Журн. аналит. химии. – 2001. – 56, № 10. –
С. 1015–1031.
3. Дмитрук М.Л., Маєва О. I., Соснова М.В. Оптичнi сенсори на основi поверхневого плазмонного
резонансу // Оптоэлектроника и полупроводник. техника. – 2006. – 41. – С. 29–45.
4. Пат. 46018 Україна, МПК G 01№ 21/55. Спосiб детектування та визначення концентрацiї бiомолекул
i молекулярних комплексiв та пристрiй для його здiйснення / Ю. М. Ширшов, Є.Ф. Венгер, А.В.
Прохорович та iн.; Заявл. 22.10.1997. – Опубл. 15.05.2002. – Бюл. № 5.
5. Snopok B.A., Kostyukevich E.V., Lysenko S. I. et al. Optical biosensors based on the surface plasmon
resonance phenomenon: optimization of the metal layer parameters // Semiconductor Phys., Quantum
Electron. and Optoelectron. – 2001. – 4, No 1. – P. 56–69.
6. Луговской Э.В., Комисаренко С.В. Моноклональные антитела как инструмент исследования поли-
меризации фибрина // Биоорган. химия. – 2000. – 26, № 12. – С. 883–891.
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2009, №1 159
7. Ширшов Ю.М., Костюкевич Е. В., Луговской Э. В. и др. Иммуносенсор на основе поверхностного
плазмонного резонанса для экспресс-анализа уровня фибриногена в плазме крови человека // Доп.
НАН України. – 2003. – № 7. – С. 167–170.
8. Колеснiкова I.М., Луговська Н.Е., Луговськой Е. В. та iн. Моноклональнi антитiла, специфiчнi до
фiбрину людини // Там само. – 2006. – № 9. – С. 181–185.
9. Lugovskoy E.V., Kolesnikova I.N., Gritsenko P.G. et al. A neoantigenic determinant in the D-dimer
fragment of fibrin // Thromb. Res. – 2002. – 107, No 3./4. – P. 151–156.
10. Jung Ch., Dannenberger O., Xu Y. et al. Self-assembled monolayers from organosulfur compounds: a
comparison between sulfides, disulfides, and thiols // Langmuir. – 1998. – 14. – P. 1103–1107.
11. Болтовец П.Н., Снопок Б.А., Ширшов Ю.М., Дяченко Н.С. Организованные белковые слои для
оптоэлектронных биосенсорных систем: ориентированная иммобилизация протеинов на модифици-
рованной поверхности золота // Доп. НАН України. – 2001. – № 11. – С. 137–144.
12. Snopok B.A., Goltsov Yu.G., Kostyukevich E.V. et al. Self-assembled multilayer super-structures as
immobilization support for bioreceptors // Sensors and Actuators B. – 2003. – 95. – P. 336–343.
13. Belitser V.A., Varetskaja T.V., Malneva G.V. Fibrinogen-fibrin interaction // Biochim. Biophys. Acta. –
1968. – 154. – P. 376–380.
14. Lofas S., Malmqvist M., Ronnberg I., Stenberg E. Bioanalysis with surface plasmon resonance // Sensors
and Actuators B. – 1991. – 5. – P. 79–84.
15. Dempfle C.E. The use of soluble fibrin in evaluating the acute and chronic hypercoagulable state //
Thromb. Haemost. – 1999. – 82, No 2. – P. 673–683.
Надiйшло до редакцiї 26.05.2008Iнститут бiохiмiї iм. О.В. Палладiна
НАН України, Київ
P.G. Gritsenko, E. V. Lugovskoy, K.V. Kostioukevich, I.N. Kolesnikova,
S.A. Kostioukevich, L. M. Litvinova, N. E. Lugovskaya, E. P. Kostuchenko,
A.D. Zamkoviy, T. A. Koshel, Academician of the NAS of Ukraine
S.V. Komisarenko
Immunosensors based on the surface plasmon resonance for human
soluble fibrin and D-dimer quantification
Two immunosensors based on the surface plasmon resonance effect for human soluble fib-
rin and D-dimer quantification have been elaborated. In these immune sensors, fibrin-speci-
fic and D-dimer-specific monoclonal antibodies immobilized on the aminopentacyanoferratic film
(Cu3[Fe(CN)5NH3]2) have been used. Kinetic investigations showed that the sensitivities of immune
sensors elaborated for soluble fibrin and D-dimer were 0.5 and 1 µg/ml, respectively.
160 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2009, №1
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-7750 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 1025-6415 |
| language | Ukrainian |
| last_indexed | 2025-12-07T19:05:27Z |
| publishDate | 2009 |
| publisher | Видавничий дім "Академперіодика" НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Гриценко, П.Г. Луговськой, Е.В. Костюкевич, К.В. Колеснікова, І.М. Костюкевич, С.О. Литвинова, Л.М. Луговська, Н.Е. Костюченко, О.П. Замковий, А.Д. Кошель, Т.А. Комісаренко, С.В. 2010-04-12T11:56:28Z 2010-04-12T11:56:28Z 2009 Імуносенсори на основі поверхневого плазмонного резонансу для кількісного визначення розчинного фібрину та D-димеру людини / П. Г. Гриценко, Е.В. Луговськой, К.В. Костюкевич, I.М. Колеснiкова, С.О. Костюкевич, Л.М. Литвинова, Н.Е. Луговська, О.П. Костюченко, А.Д. Замковий, Т.А. Кошель, С.В. Комiсаренко // Доп. НАН України. — 2009. — № 1. — С. 155-160. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. 1025-6415 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/7750 535.394:539.233;577.112:612.115 Розроблено два iмуносенсори на основi поверхневого плазмонного резонансу для кiлькiсного визначення розчинного фiбрину та D-димеру людини. В цих iмуносенсорах використано отриманi нами фiбринспецифiчнi та D-димерспецифiчнi моноклональнi антитiла, якi були iммобiлiзованi на п’ятишаровiй амiнопентацiанофератнiй плiвцi (Cu3[Fe(CN)5NH3]2). Кiнетичнi дослiдження показали, що чутливiсть розроблених iмуносенсорiв для розчинного фiбрину та D-димеру становить 0,5 та 1,0 мкг/мл вiдповiдно. Two immunosensors based on the surface plasmon resonance effect for human soluble fibrin and D-dimer quantification have been elaborated. In these immune sensors, fibrin-specific and D-dimer-specific monoclonal antibodies immobilized on the aminopentacyanoferratic film (Cu3[Fe(CN)5NH3]2) have been used. Kinetic investigations showed that the sensitivities of immune sensors elaborated for soluble fibrin and D-dimer were 0.5 and 1 μg/ml, respectively. uk Видавничий дім "Академперіодика" НАН України Біохімія Імуносенсори на основі поверхневого плазмонного резонансу для кількісного визначення розчинного фібрину та D-димеру людини Immunosensors based on the surface plasmon resonance for human soluble fibrin and D-dimer quantification Article published earlier |
| spellingShingle | Імуносенсори на основі поверхневого плазмонного резонансу для кількісного визначення розчинного фібрину та D-димеру людини Гриценко, П.Г. Луговськой, Е.В. Костюкевич, К.В. Колеснікова, І.М. Костюкевич, С.О. Литвинова, Л.М. Луговська, Н.Е. Костюченко, О.П. Замковий, А.Д. Кошель, Т.А. Комісаренко, С.В. Біохімія |
| title | Імуносенсори на основі поверхневого плазмонного резонансу для кількісного визначення розчинного фібрину та D-димеру людини |
| title_alt | Immunosensors based on the surface plasmon resonance for human soluble fibrin and D-dimer quantification |
| title_full | Імуносенсори на основі поверхневого плазмонного резонансу для кількісного визначення розчинного фібрину та D-димеру людини |
| title_fullStr | Імуносенсори на основі поверхневого плазмонного резонансу для кількісного визначення розчинного фібрину та D-димеру людини |
| title_full_unstemmed | Імуносенсори на основі поверхневого плазмонного резонансу для кількісного визначення розчинного фібрину та D-димеру людини |
| title_short | Імуносенсори на основі поверхневого плазмонного резонансу для кількісного визначення розчинного фібрину та D-димеру людини |
| title_sort | імуносенсори на основі поверхневого плазмонного резонансу для кількісного визначення розчинного фібрину та d-димеру людини |
| topic | Біохімія |
| topic_facet | Біохімія |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/7750 |
| work_keys_str_mv | AT gricenkopg ímunosensorinaosnovípoverhnevogoplazmonnogorezonansudlâkílʹkísnogoviznačennârozčinnogofíbrinutaddimerulûdini AT lugovsʹkoiev ímunosensorinaosnovípoverhnevogoplazmonnogorezonansudlâkílʹkísnogoviznačennârozčinnogofíbrinutaddimerulûdini AT kostûkevičkv ímunosensorinaosnovípoverhnevogoplazmonnogorezonansudlâkílʹkísnogoviznačennârozčinnogofíbrinutaddimerulûdini AT kolesníkovaím ímunosensorinaosnovípoverhnevogoplazmonnogorezonansudlâkílʹkísnogoviznačennârozčinnogofíbrinutaddimerulûdini AT kostûkevičso ímunosensorinaosnovípoverhnevogoplazmonnogorezonansudlâkílʹkísnogoviznačennârozčinnogofíbrinutaddimerulûdini AT litvinovalm ímunosensorinaosnovípoverhnevogoplazmonnogorezonansudlâkílʹkísnogoviznačennârozčinnogofíbrinutaddimerulûdini AT lugovsʹkane ímunosensorinaosnovípoverhnevogoplazmonnogorezonansudlâkílʹkísnogoviznačennârozčinnogofíbrinutaddimerulûdini AT kostûčenkoop ímunosensorinaosnovípoverhnevogoplazmonnogorezonansudlâkílʹkísnogoviznačennârozčinnogofíbrinutaddimerulûdini AT zamkoviiad ímunosensorinaosnovípoverhnevogoplazmonnogorezonansudlâkílʹkísnogoviznačennârozčinnogofíbrinutaddimerulûdini AT košelʹta ímunosensorinaosnovípoverhnevogoplazmonnogorezonansudlâkílʹkísnogoviznačennârozčinnogofíbrinutaddimerulûdini AT komísarenkosv ímunosensorinaosnovípoverhnevogoplazmonnogorezonansudlâkílʹkísnogoviznačennârozčinnogofíbrinutaddimerulûdini AT gricenkopg immunosensorsbasedonthesurfaceplasmonresonanceforhumansolublefibrinandddimerquantification AT lugovsʹkoiev immunosensorsbasedonthesurfaceplasmonresonanceforhumansolublefibrinandddimerquantification AT kostûkevičkv immunosensorsbasedonthesurfaceplasmonresonanceforhumansolublefibrinandddimerquantification AT kolesníkovaím immunosensorsbasedonthesurfaceplasmonresonanceforhumansolublefibrinandddimerquantification AT kostûkevičso immunosensorsbasedonthesurfaceplasmonresonanceforhumansolublefibrinandddimerquantification AT litvinovalm immunosensorsbasedonthesurfaceplasmonresonanceforhumansolublefibrinandddimerquantification AT lugovsʹkane immunosensorsbasedonthesurfaceplasmonresonanceforhumansolublefibrinandddimerquantification AT kostûčenkoop immunosensorsbasedonthesurfaceplasmonresonanceforhumansolublefibrinandddimerquantification AT zamkoviiad immunosensorsbasedonthesurfaceplasmonresonanceforhumansolublefibrinandddimerquantification AT košelʹta immunosensorsbasedonthesurfaceplasmonresonanceforhumansolublefibrinandddimerquantification AT komísarenkosv immunosensorsbasedonthesurfaceplasmonresonanceforhumansolublefibrinandddimerquantification |