Цитогенетическая изменчивость клеточных линий Ungernia victoris при выращивании на питательных средах различного состава

Клеточные линии U. victoris, полученные от одной луковицы и длительное время выращиваемые на различных по составу агаризованyых и жидких средах, значительно отличались по числу хромосом. Не обнаружено влияния компонентов питательных сред, в том числе фитогормонов, на формирование определенных соотно...

Full description

Saved in:

Bibliographic Details
Date:	2008
Main Authors:	Бублик, Е.Н., Адонин, В.И., Кунах, В.А.
Format:	Article
Language:	Russian
Published:	Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України 2008
Subjects:	Оригинальные работы
Online Access:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8046
Tags:	Add Tag No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:	Цитогенетическая изменчивость клеточных линий Ungernia victoris при выращивании на питательных средах различного состава / Е.Н. Бублик, В.И. Адонин, В.А. Кунах // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 1. — С. 29-36. — Бібліогр.: 18 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

_version_	1859634898523914240
author	Бублик, Е.Н. Адонин, В.И. Кунах, В.А.
author_facet	Бублик, Е.Н. Адонин, В.И. Кунах, В.А.
citation_txt	Цитогенетическая изменчивость клеточных линий Ungernia victoris при выращивании на питательных средах различного состава / Е.Н. Бублик, В.И. Адонин, В.А. Кунах // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 1. — С. 29-36. — Бібліогр.: 18 назв. — рос.
collection	DSpace DC
description	Клеточные линии U. victoris, полученные от одной луковицы и длительное время выращиваемые на различных по составу агаризованyых и жидких средах, значительно отличались по числу хромосом. Не обнаружено влияния компонентов питательных сред, в том числе фитогормонов, на формирование определенных соотношений клеток разной плоидности. При этом установлено увеличение доли метафаз с диплоидным набором хромосом при переведении каллуса в жидкую среду. Отримані від однієї цибулини клітинні лінії U. victoris, які тривалий час вирощували на різних за складом агаризованих і рідких середовищах, значно відрізнялися за числом хромосом. Не виявлено впливу компонентів живильних середовищ, у тому числі регуляторів росту, на формування певних співвідношень клітин різної плоїдності, проте встановлено збільшення частки метафаз із диплоїдним набором хромосом при переведенні калюсу в рідке середовище. Chromosome numbers of U. victoris cell lines obtained from the same bulb and cultured for a long time on different agar-solidified and liquid nutrient media differed significantly. The components of the nutrient media including phytohormones did not influence the ratio of cells with different ploidy levels in various lines while transfer of the calluses to the liquid media resulted in the increase of diploid metaphase frequencies.
first_indexed	2025-12-07T13:15:34Z
format	Article
fulltext	Клеточные линии U. victoris, полученные от одной лу� ковицы и длительное время выращиваемые на различных по составу агаризованных и жидких средах, значитель� но отличались по числу хромосом. Не обнаружено влия� ния компонентов питательных сред, в том числе фито� гормонов, на формирование определенных соотношений клеток разной плоидности. При этом установлено уве� личение доли метафаз с диплоидным набором хромосом при переводе каллуса в жидкую среду. Введение. Унгерния Виктора, Ungernia victoris Vved. ex Artjushenko (2n = 22), принадлежит к се� мейству Amaryllidaceae. Это лекарственное рас� тение было высоко оценено как врачами древ� него Тибета, так и современной медициной. Фармакологическая ценность вида обусловлена синтезом изохинолиновых алкалоидов, основ� ные из которых – галантамин и ликорин [1]. Унгерния Виктора – эндемик, распростра� ненный только на Гиссарском хребте и его юж� ных отрогах (Таджикистан, Узбекистан). На сегодняшний день проблемой является не только недостаточность природной сырьевой базы унгернии Виктора для получения биоло� гически активных веществ, но и сохранение генофонда этого исчезающего вида. В качестве альтернативного источника ле� карственного сырья и метода ускоренного размножения растений широко используют культуру тканей in vitro. Однако в большинст� ве изученных случаев культивируемые клетки характеризуются высоким уровнем сомакло� нальной изменчивости – различных перестро� ек генома, в том числе изменений числа хро� мосом, которые часто наблюдают в культуре in vitro [2, разд. 7, 8]. Изменения генома ослож� няют сохранение генофонда растений в куль� туре in vitro и могут приводить к нарушению синтеза вторичных метаболитов [2, разд. 13]. Существенное влияние на уровень и спектр возникающих in vitro геномных аберраций оказывают условия культивирования и ком� поненты питательных сред, среди которых особое значение придают влиянию экзоген� ных фитогормонов. Литературные данные по влиянию компонентов питательных сред и условий культивирования на изменение числа хромосом в культуре in vitro достаточно проти� воречивы. Возможно, это связано с тем фак� том, что разные виды растений реагируют на внешние факторы, в частности на экзогенные фитогормоны, по�разному [2, разд. 7–9]. На� ша работа, посвященная исследованию влия� ния компонентов сред на хромосомную измен� чивость культуры тканей унгернии Виктора, является следующим шагом в направлении изучения этой проблемы. Материалы и методы. Материалом для ис� следования служили 8 клеточных линий U. vic� toris, полученных из одной луковицы в 1995 г. Растение�донор произрастало в районе естес� твенного ареала на Памире (Южные склоны ІSSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2008. № 1 29 © Е.Н. БУБЛИК, В.И. АДОНИН, В.А. КУНАХ, 2008 УДК (575.22 + 576.5) 582.573.21 Е.Н. БУБЛИК, В.И. АДОНИН, В.А. КУНАХ Институт молекулярной биологии и генетики НАН Украины, ул. Aкад. Заболотного, 150, Киев 03143, Украина Е%mail: kunakh@imbg.org.ua ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЙ UNGERNIA VICTORIS ПРИ ВЫРАЩИВАНИИ НА ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕДАХ РАЗЛИЧНОГО СОСТАВА Е.Н. Бублик, В.И. Адонин, В.А. Кунах Гиссарского хребта, Таджикистан). Каллусную ткань получали из свежих чешуй луковицы. С целью поиска условий, оптимальных для биосинтеза веществ вторичного метаболизма и высокого прироста биомассы, культуры вы� ращивали на разных по составу питательных средах. Использовали агаризованные и жид� кие среды с общей минеральной основой по прописи Воллосовича и др. [3], но с раз� личным содержанием сахарозы, фитогормо� нов и микродобавок. Компоненты, по кото� рым отличались использованные варианты питательных сред, приведены в табл. 1. Пол� ный состав сред и условия культивирования приведены в описании к патенту [4]. Генеало� гия изученных клеточных линий U. victoris приведена на рис. 1. Длительное выращивание клеток на разных по составу питательных средах не привело к возникновению у изученных клеточных линий существенных отличий ни по морфологии, ни по темпу роста. Линии характеризуются ста� бильным неорганизованным типом и интен� сивным темпом роста. Выход сырой (свежей) биомассы с 1 л среды на 50–60�е сутки роста составляет 400–500 г, иногда до 580 г. В пере� расчете на сухую массу выход составляет 19–39 г/л за пассаж, а ростовой индекс колеб� лется в пределах 4–6 для каллусной культуры и 3–5 – для суспензионной при длительности пассажа до пересадки 40–50 сут и до съема уро� жая – 55–65 сут. Содержание алкалоидов в био� массе незначительно, а галантамин найден лишь в следовых количествах [5]. Для цитогенетического анализа ткань фик� сировали в ацеталкоголе (1 : 3) в течение суток и готовили давленые ацетоорсеиновые препа� раты по методике [6]. Фиксацию тканей про� водили на 5, 8, 13�е сутки пассажа в одно и то же время суток, данные трех сроков фик� сации по каждой из линий объединяли в об� щий пул. Суспензионные культуры анализи� ровали на 13�е сутки пассажа. Для каждого срока фиксации подсчитывали число хромо� сом в метафазных пластинках на нескольких препаратах, приготовленных из разных участ� ков каллусной ткани. В ходе исследования выяснилось, что ана� лиз числа хромосом унгернии Виктора ослож� нен большим количеством полиплоидных ме� тафаз, значительной длиной хромосом и отсут� ствием данных по их морфологии. Точность подсчета хромосом в метафазе зависела от их числа. Метафазы с числом хромосом от 2n до 3n подсчитаны с точностью до одной хромо� сомы, от 4n до 6n – с точностью до двух хро� мосом, свыше 6n – до трех�четырех хромосом. В связи с указанной причиной и для удобства статистической обработки результатов получен� ный в исследовании ряд хромосомных чисел разбивали на классы (клетки окологаплоид� ные, околодиплоидные, околотриплоидные и т.д.). Достоверность отличий полученных дан� ных определяли по критерию Стъюдента. Результаты исследований и их обсуждение. Согласно литературным данным, диплоидное число хромосом для рода Ungernia составляет 2n = 22 [7]. Проведенный нами анализ пока� ISSN 0564–3783. Цитология и генетика.2008. № 130 5C1 5C01 5C3Н 5C 2C 5 5 5 5 2 Среда Сахароза, % Кинетин – 0,1; 2, 4�Д – 1 Кинетин – 1; α�НУК – 2 Кинетин – 0,02; α�НУК – 0,5 – – Тиамин – 1, пиридоксин – 0,5, никотиновая кислота – 0,5 То же » Тиамин – 1 То же Глицин – 2, мезоинозит – 80, гидролизат казеина – 500 То же Мезоинозит – 20, гидролизат казеина – 50 – – Регуляторы роста Витамины Другие добавки мг/г Та б л и ц а 1 Компоненты, по которым отличались использованные варианты питательных сред зал, что изученные клеточные линии предс� тавляют собой миксоплоидные клеточные по� пуляции. Размах хромосомных чисел в них сос� тавлял от гаплоидного до гипероктаплоидно� го. Встречались отдельные высокоплоидные клетки с набором хромосом, достигающим 36n (рис. 2). Значительную долю составляли анеуплоидные клетки всех уровней плоиднос� ти, их суммарная частота у всех линий дости� гала 50 %. Данные по структуре клеточных популя� ций каллусных линий, выращиваемых на ага� ІSSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2008. № 1 31 Цитогенетическая изменчивость клеточных линий Ungernia victoris при выращивании Рис. 1. Генеалогия клеточных линий U. victoris: использованные питательные среды и количество пассажей на них (в скобках). Нижний индекс «ж» в названии среды означает, что каллусная ткань выращивалась в жидкой среде без агара на качалках, в остальных случаях выращивание было поверхностным на агаризованных средах Рис. 2. Метафазы с разным числом хромосом в культуре тканей U. victoris (2n = 22): а – 11 хро� мосом; б – 22; в – 33; г – около 44 хромосом; д – около 150 хромосом ризованных средах разного состава, приведе� ны на рис. 3. Две из клеточных линий – № 2 и 6 – имели почти идентичную историю культи� вирования (рис. 1). Несмотря на это, структу� ра их клеточных популяций коренным обра� зом отличалась. Линия № 2 характеризовалась четко выраженным модальным классом с око� лодиплоидным числом хромосом, он составил 82,3 ± 2,1 %. У линии № 6 модальный класс был околотетраплоидным (57,8 ± 3,6 %), су� щественную долю составляли «соседние» около� триплоидный и околопентаплоидный классы – 14,6 ± 2,6 и 13,5 ± 2,5 % соответственно. Структура линии № 3 существенно отлича� лась от «материнской» линии № 2 (рис. 1), а также от всех остальных линий. Она характе� ризовалась наличием трех ведущих классов: околодиплоидные клетки составляли 41,5 ± ± 2,7 %, околотриплоидные – 32,1 ± 2,5 %, околотетраплоидные – 17,9 ± 2,1 %, т.е. по сравнению с линией № 2 за счет модального околодиплоидного класса произошло увели� чение долей клеток в первую очередь около� триплоидного, а также околотетраплоидного классов (Р < 0,001). Модальный класс линии № 7 составляли околотетраплоидные метафазы (49,5 ± 3,0 %), также были достаточно высоки доли клеток с околодиплоидным и околотриплоидным на� борами хромосом. По сравнению с исходной линией № 6 (рис. 1) у линии № 7 содержание околопентаплоидных клеток ниже на 0,1%� ISSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2008. № 132 Е.Н. Бублик, В.И. Адонин, В.А. Кунах Рис. 3. Распределение по количеству наборов хромосом каллусных линий U. victoris при поверхностном выращива� нии на агаризованных средах: а – линия № 1; б – линия № 9а; в – линия № 3; г – линия № 6; д – линия № 7; по вер� тикали – метафазы, %; по горизонтали – количество наборов хромосом n; N – количество изученных метафаз ном уровне значимости. Несущественно упала и доля модального околотетраплоидного клас� са. За их счет возросли доли околодиплоид� ных и околотриплоидных метафаз (на 5� и 0,1%�ном уровнях значимости соответственно). Несмотря на то, что клеточные линии № 3 и 7 имели подобную историю культивирования, они характеризовались разными модальными классами, но при этом имели и общую черту – одинаковое, достаточно высокое содержание околотриплоидных метафаз. Гормононезависимая линия № 9а досто� верно не отличалась от линии № 2, доля око� лодиплоидных митозов у нее составила 85,8 ± ± 2,1 %. Характерной чертой этой линии был более узкий, чем у остальных линий, размах хромосомных чисел – от гаплоидного до ги� пертетраплоидного набора. Еще одна пара, характеризующаяся подоб� ной структурой клеточной популяции – ли� нии № 6 и 7. Модальный класс этих линий составляли тетраплоидные и околотетрапло� идные клетки, у обеих линий встречались одиночные гептаплоидные клетки, которые не были характерны для остальных линий. Эта пара линий лишь несколько отличалась по ко� личеству диплоидных, триплоидных и пен� таплоидных митозов. Для изучения влияния условий культиви� рования (поверхностное выращивание на ага� ризованных средах или глубинное выращива� ние в жидких средах того же состава) на пло� идность клеточных популяций U. victoris были проанализированы хромосомные числа трех суспензионных линий – аналогов каллусных линий, растущих на агаризованных средах (рис. 4). Проведено сравнение трех пар линий: № 3 и 11, № 6 и 12, № 7 и 10. Размах хромосомных чисел для линии № 11 составил от гаплоидного до гиперпентаплоид� ного набора хромосом с диплоидным модаль� ным классом (86,7 ± 3,3 %). По сравнению с линией�аналогом № 3 в суспензионной ли� нии № 11 значительно повысилась доля око� лодиплоидных метафаз. Это произошло в основном за счет снижения частот околотри� и околотетраплоидных клеток. В результате соотношение метафаз с разным числом хро� мосом линии № 11 стало таким же, как у ли� ний № 2 и 9а. Суспензионные линии № 10 и 12 сформи� ровали практически идентичные по частоте клеток разной плоидности популяции, в кото� рых преобладали околоди�, околотри� и око� лотетраплоидные метафазы (рис. 4). У линии № 12 по сравнению с исходной ли� нией № 6 установлено почти семикратное по� вышение доли диплоидных метафаз. Это про� изошло за счет уменьшения частоты делений околотетраплоидных, а также околопентапло� идных клеток, однако при этом в митоз вступа� ли клетки и более высокого уровня плоидности (рис. 3 и 4). Подобные изменения зафиксиро� вали и для линии № 10. Частота диплоидных метафаз увеличилась по сравнению с каллус� ным аналогом – линией № 7 – в 3,2 раза, втрое уменьшилась доля околотетраплоидных мито� зов, снизились частоты околотри�, околотетра� и околопентаплоидных классов, возрос размах по числу хромосом (рис. 3 и 4). ІSSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2008. № 1 33 Цитогенетическая изменчивость клеточных линий Ungernia victoris при выращивании Рис. 4. Распределение по количеству наборов хромосом суспензионных линий U. victoris: а – линия № 10; б – линия № 11; в – линия № 12; по вертикали – метафазы, %; по горизонтали – количество наборов хромосом n; N – количество изученных метафаз Наблюдали также наличие в метафазах от 1 до 6 микрохромосом. По доле метафаз с мик� рохромосомами линии разделились на две груп� пы, достоверно отличающиеся между собой (табл. 2). В первую группу, характеризующу� юся более высоким процентом метафаз с мик� рохромосомами, вошли линии № 6, 10 и 12, а во вторую – пять остальных линий. У линий № 9а и 11 микрохромосомы были обнаружены в метафазах класса 2n, у линии № 2 – 2n и 3n, у линии № 3 – от 2n до 4n, у ли� нии № 10 – от n до 4n, у линии № 12 – от 2n до 5n и 7n, у линии № 6 – от 2n до 6n и 8n, т.е. их наблюдали во всех классах плоидности, которые были в достаточной мере представле� ны в популяции. Исключение составила лишь линия № 7, микрохромосомы которой были присущи исключительно околотетраплоидно� му классу митозов. Среди всех метафаз, содер� жащих микрохромосомы, метафазы с одной микрохромосомой составляли наибольшую долю (66,7 %), с двумя – 21,0 %, с тремя – 6,2 %, с четырьмя – 3,7 %, с пятью и шестью – по 1,2 %. Околодиплоидные клетки содержа� ли одну, реже две микрохромосомы, при уве� личении плоидности клеток не было выявле� но четкой зависимости по увеличению числа микрохромосом на клетку. Таким образом, при подсчете хромосом бы� ли обнаружены значительные отличия струк� туры клеточных популяций разных каллусных линий U. victoris, полученных от одной луко� вицы. Некоторые из линий обладали сходными соотношениями метафаз разной плоидности, по этому показателю можно выделить четыре группы: n линии № 2, 9а и 11 с ярко выраженным диплоидным модальным классом; n линии № 6 и 7 с тетраплоидным модаль� ным классом; n линии № 10 и 12 с преобладанием дипло� идных и тетраплоидных метафаз; n линия № 3 с преобладанием диплоидного и триплоидного классов. Несоответствие группирования линий по распределению хромосомных чисел и группи� рования по питательным средам, на которых они выращиваются, или их истории культиви� рования свидетельствует о случайном характере установления определенной структуры клеточ� ных популяций линий U. victoris и отсутствии заметного влияния на этот процесс состава пи� тательной среды и условий культивирования. Варьирование числа хромосом в культуре in vitro частично может быть привнесено сома� тическими мутациями и миксоплоидией ис� ходных эксплантов [8–11]. Поэтому подобие генетических структур некоторых исследован� ных линий может быть обусловлено тем, что эти линии были получены из соседних участ� ков луковицы, ткани которых могли отличать� ся по плоидности, подобно тому, как это наб� людали у спаржи аптечной [12]. Однако мало� вероятно, что исходная генетическая структу� ра могла остаться неизменной в течение столь длительного времени культивирования. При введении и в процессе культивирова� ния in vitro могут возникать изменения числа хромосом, вызванные повреждением веретена деления, ведущим к нерасхождению и отста� ванию хромосом в анафазе, слиянием веретен деления в двухъядерных клетках, фрагмента� цией ядер и эндоредупликацией. Изменчи� вость хромосомных чисел при формировании каллусных штаммов может соответствовать разным типам эволюции: дивергенции, кон� вергенции и параллельной изменчивости [2, разд. 7, 8], т.е. из одного исходного материала даже в одинаковых условиях могут формиро� ваться цитогенетически отличающиеся штам� мы, как это наблюдали, например, у ели евро� ISSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2008. № 134 Е.Н. Бублик, В.И. Адонин, В.А. Кунах 12 10 6 13,8 ± 3,3 11,9 ± 3,2 8,3 ± 2,0 1–3 1–2 1–6 34,7 37,2 42,8 № линии Метафазы с микро� хромосомами, % Микрохромосом на метафазу, шт. Среднее число хромосом I группа II группа 3 7 2 11 9а 3,5 ± 1,0 2,5 ± 0,9 2,1 ± 0,8 1,9 ± 1,3 1,4 ± 0,7 1–2 1–4 1–3 1–2 1–2 28,8 37,6 24,3 22,4 22,3 Та б л и ц а 2 Относительное количество метафаз с микрохромосомами, количество микрохромосом на метафазу и среднее число хромосом у клеточных линий U. victoris (2n = 22) пейской Picea abies (L.) Karst. [13] и лиственни� цы Larix decidua [14]. В то же время при различ� ном исходном уровне плоидности у сахарной свеклы [15] в процессе пассирования начали преобладать клетки одинаковой плоидности. В каждом конкретном случае изменение числа хромосом происходит по специфическому сце� нарию, вероятно, подверженному влиянию ге� нотипа, физиологического состояния исходно� го материала, а также состава питательной сре� ды и условий культивирования, прежде всего – наличия в среде фитогормонов, их типа, кон� центрации и соотношения [2, разд. 7–9]. То, что в нашем исследовании не было вы� явлено заметного влияния компонентов сред на направленность изменчивости хромосомных чисел, может быть связано с относительно низкими концентрациями использованных в опытах регуляторов роста (кинетин – 0,02– 1 мг/л; α�НУК – 0,5–2 мг/л) или даже их пол� ным отсутствием (среды 5С и 2С). По литера� турным данным, эти регуляторы роста у дру� гих видов растений вызывали существенные геномные изменения лишь в концентрациях, превышающих максимальные концентрации НУК в настоящей работе в 5 раз [16] и кине� тина – в 8 раз [17]. Сравнение трех пар каллусных и суспензи� онных линий позволило проследить влияние способа выращивания на структуру клеточных популяций линий U. victoris. Каждая из суспен� зионных линий отличалась от каллусного ана� лога более высокой частотой околодиплоид� ных метафаз, доля же полиплоидных клеток была ниже. Как правило, подобный тип изменчивости характерен для смены условий культивирова� ния у сформированных миксоплоидных штам� мов [2, разд. 8]. При этом на начальных пасса� жах происходит увеличение доли диплоидных клеток, однако в дальнейшем зачастую восста� навливается исходное соотношение между клетками с разным числом хромосом. В нашем же случае такого восстановления не произош� ло, хотя линии выращивали в жидкой среде в течение 43 пассажей. В каллусных и суспензионных линиях U. victoris наряду с клетками, содержащими лишь хромосомы обычных размеров, встречались и клетки с микрохромосомами. Возможно, наб� людаемые микрохромосомы или часть из них можно отнести к так называемым В�хромосо� мам – добавочным к основному хромосомному набору эгоистичным генетическим элементам с автономным способом наследования, обыч� но имеющим меньший размер по сравнению с А�хромосомами (хромосомами основного на� бора) и состоящим из гетерохроматина [18]. Однако без проведения кариотипирования мы не можем с уверенностью говорить о при� роде обнаруженных микрохромосом. Количество микрохромосом на метафазу колебалось от одной до шести. Значительно (примерно в десять раз) отличались линии и по доле метафаз с микрохромосомами. Так, линия № 12 содержала 13,8 ± 3,3 % таких мета� фаз, а линия № 9а – лишь 1,4 ± 0,7 %. Для рас� тений в природе описан подобный характер ва� рьирования количества В�хромосом: клетки отдельной особи могут содержать от 1 до более 30 В�хромосом, количество их может отличать� ся в клетках и тканях одной особи [18]. Зависимости частоты метафаз с микрохро� мосомами или количества микрохромосом на метафазу от состава питательной среды или способа культивирования обнаружено не бы� ло. Не наблюдали и четкой зависимости ука� занных параметров от уровня плоидности клеточной линии. Однако обращает на себя внимание тот факт, что линии с диплоидным модальным классом (№ 2, 9а и 11) обладали наименьшей долей метафаз с микрохромосо� мами. У линий, содержащих значительное ко� личество полиплоидных клеток, частота мета� фаз с микрохромосомами выше (табл. 2). Выводы. На примере восьми клеточных ли� ний U. victoris, полученных от одной луковицы, более девяти лет выращиваемых на питатель� ных средах с различным содержанием органи� ческих добавок (регуляторов роста, витаминов и других стимуляторов роста), не установлено влияния компонентов среды на особенности хромосомного полиморфизма клеточных по� пуляций. Отсутствие зависимости уровня пло� идности культивируемых клеток от состава питательной среды и условий выращивания (поверхностное или глубинное) можно объяс� нить дивергентной эволюцией генетической структуры клеточных линий на основе стохас� тических процессов изменчивости in vitro. ІSSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2008. № 1 35 Цитогенетическая изменчивость клеточных линий Ungernia victoris при выращивании Установлено увеличение доли метафаз с дипло� идным набором хромосом при переходе с по� верхностного на глубинное выращивание. Авторы выражают признательность канд. биол. наук И.О. Андрееву и канд. биол. наук Е.В. Спиридоновой за критические замечания при подготовке статьи, а также Л.П. Можи� левской за предоставление для исследования коллекционных клеточных линий U. victoris. SUMMARY. Chromosome numbers of U. victoris cell lines obtained from the same bulb and cultured for a long time on different agar�solidified and liquid nutrient media differed significantly. The components of the nutrient media including phytohormones did not influence the ratio of cells with different ploidy levels in various lines while transfer of the calluses to the liquid media resulted in the increase of diploid metaphase frequencies. РЕЗЮМЕ. Отримані від однієї цибулини клітинні лінії U. victoris, які тривалий час вирощували на різних за складом агаризованих і рідких середовищах, значно відрізнялися за числом хромосом. Не виявлено впливу компонентів живильних середовищ, у тому числі регу� ляторів росту, на формування певних співвідношень клітин різної плоїдності, проте встановлено збільшен� ня частки метафаз із диплоїдним набором хромосом при переведенні калюсу в рідке середовище. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Ходжиматов М. Дикорастущие лекарственные растения Таджикистана. – Душанбе : Гл. науч. ред. Тадж. Сов. Энциклопедии, 1989. – 368 с. 2. Кунах В.А. Біотехнологія лікарських рослин. Гене� тичні та фізіолого�біохімічні основи. – К.: Логос, 2005. – 724 с. 3. Воллосович А.Г., Пучинина Г.М., Николаева Л.А. Оптимизация состава макросолей для культуры тканей Rauwolfia serpentinа Benth. // Растит. ресур� сы. – 1979. – 15, № 4. – С. 516–526. 4. Кунах В.А., Алпатова Л.К., Можилевська Л.П. Жи� вильне середовище для одержання і вирощування калюсних тканин рослин : Патент України № 10338А. Опубл. 25.12.96. Бюл. № 4. 5. Кунах В.А., Можилевская В.А., Потапчук Е.А., Му� зыка В.И., Колонина И.В. Получение культуры тка� ней Ungernia victoris и ее особенности при выращи� вании на питательных средах различного состава // Биотехнология. – 2007. – № 1. – С. 14–21. 6. Кунах В.А., Левенко Б.А. Модификация метода дав� леных препаратов для изучения хромосом в клет� ках культуры тканей растений // Цитология и ге� нетика. – 1975. – 9, № 1. – С. 56–58. 7. Агапова Н.Д., Архарова К.Б., Вахтина Л.И., Земско� ва Е.А., Тарвис Л.В. Числа хромосом цветковых растений флоры СССР: семейства Aceraceae–Me� nyanthaceae. – Ленинград : Наука, 1990. – С. 48. 8. Menendez�Yuffa A., Da Silva R., Rios L., de Enrech N. Mitotic aberrations in coffee (Coffea arabica cv. ‘Catimor’) leaf explants and their derived embryogenic calli // Electronic J. Biotechnol. – 2000. – 3, № 2. 9. Radi S., Proli M., Pavlica M, Pevalek�Kozlina B. Cytogenetic stability of Centaurea ragusina long�term culture // Plant Cell, Tissue and Organ Cult. – 2005. – 82, № 3. – Р. 343–348. 10. Козыренко Л.М., Артюкова Е.В., Лауве Л.С., Журав� лев Ю.Н., Реунова Г.Д. Генетическая изменчивость каллусных линий женьшеня Panax ginseng // Био� технология. – 2001. – № 1.– С. 19–26. 11. Козыренко Г.Д., Артюкова Е.В., Лауве Л.С., Болтен� ков Е.В. Анализ генетической изменчивости кал� лусных культур некоторых видов рода Iris L. // Био� технология. – 2002. – № 4.– С. 38–48. 12. Mishiba K., Tawada K., Mii M. Ploidy distribution in the explant tissue and the calluses induced during the initial stage of internode segment culture of Asparagus officinalis L. // In Vitro Cell. and Dev. Biol. – 2006. – 42, № 1. – P. 83–88. 13. Fourre J.L., Berger P., Niquet L., Andre P. Somatic embryo� genesis and somaclonal variation in Norway spruce: mor� phogenetic, cytogenetic and molecular approaches // Theor. Appl. Genet. – 1997. – 94. – Р. 159–169. 14. Aderkas P., Pattanavibool R., Hristoforoglu K., Ma Y. Embryogenesis and genetic stability in long term megagametophytederived cultures of larch // Plant Cell, Tissue and Organ Cult. – 2003. – 75. – Р. 27–34. 15. Чугункова Т.В., Дубровная О.В. Цитогенетический анализ каллусных культур и растений�регенеран� тов, полученных из эксплантов сахарной свеклы различной плоидности // Цитология и генетика. – 1998. – 32, № 4. – С. 9–15. 16. Mishiba K., Okamoto T., Mii M. Increasing ploidy level in cell suspension cultures of Doritaenopsis by exoge� nous application of 2,4�dichlorophenoxyacetic acid // Physiol. Plant. – 2001. – 112. – P. 142–148. 17. Mangolin C., Ottoboni L, Machado M. RAPD markers to evaluate callus tissue of Cereus peruvianus Mill. (Сас� taceae) maintained in different growth regulator combi� nations // Biochem. Genet. – 2002. – 40, № 9/10. – P. 351–358. 18. Camacho J.P.M., Sharbel T.F., Beukeboom L.W. B� chromosome evolution // Phil. Trans. R. Soc. Lond. B. – 2000. – 355. – Р. 163–178. Поступила 25.10.06 ISSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2008. № 136 Е.Н. Бублик, В.И. Адонин, В.А. Кунах
id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-8046
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
issn	0564-3783
language	Russian
last_indexed	2025-12-07T13:15:34Z
publishDate	2008
publisher	Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
record_format	dspace
spelling	Бублик, Е.Н. Адонин, В.И. Кунах, В.А. 2010-04-26T17:17:28Z 2010-04-26T17:17:28Z 2008 Цитогенетическая изменчивость клеточных линий Ungernia victoris при выращивании на питательных средах различного состава / Е.Н. Бублик, В.И. Адонин, В.А. Кунах // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 1. — С. 29-36. — Бібліогр.: 18 назв. — рос. 0564-3783 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8046 (575.22 + 576.5) 582.573.21 Клеточные линии U. victoris, полученные от одной луковицы и длительное время выращиваемые на различных по составу агаризованyых и жидких средах, значительно отличались по числу хромосом. Не обнаружено влияния компонентов питательных сред, в том числе фитогормонов, на формирование определенных соотношений клеток разной плоидности. При этом установлено увеличение доли метафаз с диплоидным набором хромосом при переведении каллуса в жидкую среду. Отримані від однієї цибулини клітинні лінії U. victoris, які тривалий час вирощували на різних за складом агаризованих і рідких середовищах, значно відрізнялися за числом хромосом. Не виявлено впливу компонентів живильних середовищ, у тому числі регуляторів росту, на формування певних співвідношень клітин різної плоїдності, проте встановлено збільшення частки метафаз із диплоїдним набором хромосом при переведенні калюсу в рідке середовище. Chromosome numbers of U. victoris cell lines obtained from the same bulb and cultured for a long time on different agar-solidified and liquid nutrient media differed significantly. The components of the nutrient media including phytohormones did not influence the ratio of cells with different ploidy levels in various lines while transfer of the calluses to the liquid media resulted in the increase of diploid metaphase frequencies. Авторы выражают признательность канд. биол. наук И.О. Андрееву и канд. биол. наук Е.В. Спиридоновой за критические замечания при подготовке статьи, а также Л.П. Можилевской за предоставление для исследования коллекционных клеточных линий U. victoris. ru Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України Оригинальные работы Цитогенетическая изменчивость клеточных линий Ungernia victoris при выращивании на питательных средах различного состава Article published earlier
spellingShingle	Цитогенетическая изменчивость клеточных линий Ungernia victoris при выращивании на питательных средах различного состава Бублик, Е.Н. Адонин, В.И. Кунах, В.А. Оригинальные работы
title	Цитогенетическая изменчивость клеточных линий Ungernia victoris при выращивании на питательных средах различного состава
title_full	Цитогенетическая изменчивость клеточных линий Ungernia victoris при выращивании на питательных средах различного состава
title_fullStr	Цитогенетическая изменчивость клеточных линий Ungernia victoris при выращивании на питательных средах различного состава
title_full_unstemmed	Цитогенетическая изменчивость клеточных линий Ungernia victoris при выращивании на питательных средах различного состава
title_short	Цитогенетическая изменчивость клеточных линий Ungernia victoris при выращивании на питательных средах различного состава
title_sort	цитогенетическая изменчивость клеточных линий ungernia victoris при выращивании на питательных средах различного состава
topic	Оригинальные работы
topic_facet	Оригинальные работы
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8046
work_keys_str_mv	AT bubliken citogenetičeskaâizmenčivostʹkletočnyhliniiungerniavictorisprivyraŝivaniinapitatelʹnyhsredahrazličnogosostava AT adoninvi citogenetičeskaâizmenčivostʹkletočnyhliniiungerniavictorisprivyraŝivaniinapitatelʹnyhsredahrazličnogosostava AT kunahva citogenetičeskaâizmenčivostʹkletočnyhliniiungerniavictorisprivyraŝivaniinapitatelʹnyhsredahrazličnogosostava

Цитогенетическая изменчивость клеточных линий Ungernia victoris при выращивании на питательных средах различного состава

Institution

Similar Items