Влияние актовегина на пролиферацию клеток перевиваемых линий

Изучено влияние препарата "Актовегин" на пролиферативную активность и митотический режим клеток перевиваемых линий PK-15-IEKVM и ВНК-21 clone 13/04. Показано стимулирующее действие препарата на пролиферацию клеток при его добавлении в ростовую среду, содержащую различные по своему составу...

Full description

Saved in:

Bibliographic Details
Date:	2008
Main Authors:	Гулевский, А.К., Трифонова, А.В., Лаврик, А.А.
Format:	Article
Language:	Russian
Published:	Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України 2008
Subjects:	Оригинальные работы
Online Access:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8049
Tags:	Add Tag No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:	Влияние актовегина на пролиферацию клеток перевиваемых линий / А.К. Гулевский, А.В. Трифонова, А.А. Лаврик // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 1. — С. 53-57. — Бібліогр.: 17 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

_version_	1859813521155424256
author	Гулевский, А.К. Трифонова, А.В. Лаврик, А.А.
author_facet	Гулевский, А.К. Трифонова, А.В. Лаврик, А.А.
citation_txt	Влияние актовегина на пролиферацию клеток перевиваемых линий / А.К. Гулевский, А.В. Трифонова, А.А. Лаврик // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 1. — С. 53-57. — Бібліогр.: 17 назв. — рос.
collection	DSpace DC
description	Изучено влияние препарата "Актовегин" на пролиферативную активность и митотический режим клеток перевиваемых линий PK-15-IEKVM и ВНК-21 clone 13/04. Показано стимулирующее действие препарата на пролиферацию клеток при его добавлении в ростовую среду, содержащую различные по своему составу сыворотки крови крупного рогатого скота в разных концентрациях. Сделан вывод о перспективности использования актовегина в биотехнологии культур клеток. Вивчено вплив актовегіну на проліферативну активність та мітотичний режим клітин перещеплюваних ліній PK-15-IEKVM та BHK-21 clone 13/04. Показана стимулююча дія препарату на проліферацію клітин при його додаванні до ростових середовищ, які містять різні за складом та за концентрацією сироватки крові крупної рогатої худоби. Зроблено висновок про перспективність використання актовегіну в біотехнології культур клітин. The influence of Actоvegin on proliferation activity and mitotic regimen of cells of permanent lines PK-15-IEKVM and BHK-21 clone 13/04 was investigated. Addition of Actоvegin into growth media containing bovine serums of different components and concentrations stimulates cell proliferation. Conclusion has been made that Actоvegin can be used in cell culture biotechnology.
first_indexed	2025-12-07T15:20:41Z
format	Article
fulltext	Изучено влияние препарата «Актовегин» на проли� феративную активность и митотический режим кле� ток перевиваемых линий PK�15�IEKVM и BHK�21 clone 13/04. Показано стимулирующее действие препарата на пролиферацию клеток при его добавлении в ростовую среду, содержащую различные по своему составу сыво� ротки крови крупного рогатого скота в разных концент� рациях. Сделан вывод о перспективности использования актовегина в биотехнологии культур клеток. Введение. В мировой медицинской практи� ке широко применяются препараты, создан� ные на основе крови животных и человека [1, 2]. Одним из таких препаратов является акто� вегин, который получен методом ультрафильт� рации из дефибринированной крови молоч� ных телят, подвергнутой гемолизу. В его сос� тав входят вещества, имеющие молекулярную массу до 5 кДа. К таким веществам относятся пептиды, аминокислоты, нуклеозиды, глико� липиды и олигосахариды, а также электроли� ты и микроэлементы. Основой действия актовегина является его способность влиять на процессы внутриклеточ� ного метаболизма. Под влиянием этого препа� рата улучшается транспорт глюкозы в клетки и поглощение кислорода в тканях. Увеличение транспорта глюкозы в клетку происходит бла� годаря прямой активации переносчика глюко� зы в мембране гликолипидной фракцией, со� держащейся в актовегине [3–8]. На сегодняш� ний день идентифицированы составляющие этой фракции – инозитолфосфат�олигосаха� риды (ИФО), обладающие структурным сход� ством с медиаторами действия инсулина [6, 9]. Одновременное повышение обоих показате� лей – накопления кислорода и глюкозы – свидетельствует о том, что поглощенная глю� коза потребляется путем окисления. Этот эф� фект приводит к повышению энергетического статуса клетки, что влияет на ее функциональ� ный метаболизм [4]. В современной клеточной биотехнологии одной из главных задач является разработка универсальной питательной среды для культи� вирования клеток, которая не содержит сыво� ротки крови или имеет пониженное ее содер� жание, поскольку известно, что использование нативной сыворотки крови в качестве росто� вого фактора имеет ряд недостатков. Сущест� вующие прописи бессывороточных сред или сред с низким содержанием сыворотки, как правило, обеспечивают рост ограниченного числа клеточных культур [10–12]. Актуальным является также повышение эффективности использования культур клеток в области био� технологии за счет увеличения как прироста клеток за единицу времени, так и физиологи� ческой активности клеток in vitro. На сегодняшний день влияние актовегина на процессы пролиферации клеток подробно исследовано не было. Кроме того, в нашей ра� 53ІSSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2008. № 1 © А.К. ГУЛЕВСКИЙ, А.В. ТРИФОНОВА, А.А. ЛАВРИК, 2008 УДК 615.324:576–353:576.535 А.К. ГУЛЕВСКИЙ 1, А.В. ТРИФОНОВА 1, А.А. ЛАВРИК 2 1 Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины Харьков, ул. Переяславская, 23 E%mail: trifonova�ann@rambler.ru 2 Национальный научный центр «Институт экспериментальной и клинической ветеринарной медицины» Харьков, ул. Пушкинская, 83 E%mail: alexbiogen@rambler.ru ВЛИЯНИЕ АКТОВЕГИНА НА ПРОЛИФЕРАЦИЮ КЛЕТОК ПЕРЕВИВАЕМЫХ ЛИНИЙ боте впервые изучена возможность его приме� нения в биотехнологии культур клеток как компонента питательной среды. Материалы и методы. В работе были исполь� зованы клеточные линии, полученные из Кол� лекции клеточных культур лаборатории био� технологии Национального научного центра «Институт экспериментальной и клинической ветеринарной медицины» (ННЦ «ИЭКВМ»): PK�15�IEKVM и BHK�21 clone 13/04. Клеточ� ная линия PK�15�IEKVM адаптирована к рос� ту в смеси питательных сред Игла DMEM и 199 (1 : 1) с добавлением 10 % сыворотки крови крупного рогатого скота (КРС), обрабо� танной полиэтиленгликолем (ПЭГ) с молеку� лярной массой 6000, по протоколу, позволяю� щему на фоне преципитации высокомолеку� лярных фракций белка максимально удалять остатки ПЭГ [13]. Культивирование клеток линии BHK�21 clone 13/04 проводили в смеси питательных сред Игла DMEM и 199 (1 : 1) с добавлением 10 % нативной сыворотки кро� ви КРС. Для диспергирования клеточного пласта при пассировании использовали смесь 0,02%�ного раствора Версена (90 %) и 0,25%� ного раствора трипсина (10 %). Воздействие актовегина на пролифератив� ную активность клеток линии PK�15�IEKVM исследовали на протяжении трех пассажей, линии BHK�21 clone 13/04 – на одном пассаже. Культивирование клеток проводили в стеклян� ных сосудах емкостью 250 см3. Актовегин до� бавляли в питательную среду во время переноса клеток в новые культуральные емкости. Проли� феративную активность определяли по прирос� ту клеток, которые подсчитывали в камере Го� ряева на 4�е сутки роста культуры [14]. Оценку митотического режима проводили в препаратах клеток, выращенных на покров� ных стеклах. Клетки фиксировали в спирт�ук� сусном фиксаторе каждые 24 ч роста культуры в течение 3 сут, затем окрашивали гематокси� лином Каррачи. Митотическую активность определяли по числу делящихся клеток, отне� сенных к общему количеству посчитанных из расчета на 1000 клеток. Показатель митоти� ческой активности выражали в промилле (‰). Патологические митозы подсчитывали одно� временно с проведением анализа митотичес� кой активности. Процент патологических де� лений определяли по отношению к среднему количеству выявленных митозов [14, 15]. Результаты исследований и их обсуждение. Изучение воздействия актовегина на пролифе� ративную активность клеточных культур про� водили при его добавлении в ростовые среды, содержащие минимальные концентрации сыво� роток крови КРС, которые обеспечивали жиз� недеятельность клеточных линий. Для линии PK�15�IEKVM такая концентрация сыворотки составила 2 % от объема питательной среды, для линии BHK�21 clone 13/04 – 1 %. Актовегин добавляли в ростовую среду клеток в конечной концентрации 0,14 % от ее объема. Выбранная концентрация препарата приблизительно соот� ветствует эффективной дозе для животных in vivo. Изучение пролиферативной активности клеток линии PK�15�IEKVM показало, что уменьшение концентрации сыворотки крови в питательной среде до 2 % приводит к сниже� нию прироста клеток линии PK�15�IEKVM на первом пассаже – на 20 %, на третьем пассаже – на 43,5 % по сравнению с аналогичным пока� зателем при росте клеток в среде с 10 % сыво� ротки крови. При этом добавление актовегина стимулировало прирост клеток на этих пасса� жах на 21 ± 3 %. Отмечено, что на первом пас� саже рост клеточной культуры PK�15�IEKVM в среде с пониженной концентрацией сыво� ротки крови и добавлением актовегина не от� личался от роста в среде с 10 % сыворотки крови КРС (рис. 1). При культивировании линии BHK�21 clone 13/04 уменьшение концентрации сыворотки в питательной среде до 1 % привело к снижению прироста клеток на первом пассаже на 30 % по сравнению с их ростом в среде с 10 % сыворот� ки крови. Добавление актовегина стимулиро� вало прирост клеток на 36 ± 3 %. Таким обра� зом, пролиферативная активность линии BHK�21 clone 13/04 на первом пассаже в среде с пониженной концентрацией сыворотки кро� ви и добавлением актовегина также соответст� вовала активности в среде с 10 % сыворотки крови КРС. При понижении концентрации препарата в ростовой среде в 2 раза, т.е. до 0,07 %, достоверного стимулирующего эффекта не обнаружено (рис. 2). Как видно на рис. 1 и 2, при добавлении актовегина увеличение пролиферативной ак� 54 А.К. Гулевский, А.В. Трифонова, А.А. Лаврик ISSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2008. № 1 тивности обеих исследованных линий было различным. Для выяснения причины этого было произведено культивирование клеток линии BHK�21 clone 13/04 с добавлением ак� товегина в ростовую среду, содержащую 10 % сыворотки крови КРС. В указанном варианте отмечена стимуляция актовегином пролифе� ративной активности на ту же величину, что и при пониженной концентрации сыворотки в питательной среде. Таким образом, установле� но, что различия в стимуляции пролифера� тивной активности актовегином линии PK� 15�IEKVM и линии BHK�21 clone 13/04 не связаны со снижением концентрации сыворот� ки крови в ростовой среде. Также не являлось причиной различий в стимуляции пролифера� тивной активности клеток влияние разных сывороток крови КРС, которые использовали для культивирования линии PK�15�IEKVM и линии BHK�21 clone 13/04. Ранее было пока� зано [13], что рост клеточной линии PK�15� IEKVM при культивировании в среде с сыво� роткой, обработанной ПЭГ�6000, не отличался от роста в среде, содержащей нативную сыво� ротку. Исходя из этого, можно предположить, что причиной различной стимуляции проли� феративной активности актовегином у разных клеточных линий являлись их собственные физиологические особенности. Культивирование клеток в средах, не содер� жащих сыворотки крови как при добавлении актовегина в концентрации 0,14 %, так и без него, привело к гибели культуры уже на первом пассаже. На 1�е сутки роста в среде с актовеги� ном клетки прикреплялись к стеклу в отличие от клеток, культивировавшихся в среде без рос� товых факторов, что свидетельствует о стимуля� ции актовегином адгезивных свойств клеток. Однако ввиду отсутствия ростовых факторов клетки к делению не приступали, а на 4�е сутки после прикрепления отслаивались от поверх� ности культурального сосуда. В литературе имеются данные о возмож� ности культивирования клеток линии BHK�21 в среде, содержащей различные низкомолеку� лярные фракции сыворотки крови КРС в кон� центрации 10 %. При добавлении фракции с молекулярной массой до 10 кДа отмечено не� которое понижение пролиферативной актив� ности клеток и их жизнеспособности, при до� 55 Влияние актовегина на пролиферацию клеток перевиваемых линий ІSSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2008. № 1 Рис. 1. Пролиферативная активность клеток линии PK� 15�IEKVM на 4�е сутки (по вертикали, %) при сниже� нии концентрации сыворотки крови КРС в среде и при добавлении актовегина; по горизонтали: а – 10 % сыво� ротки крови КРС; б – 2 % сыворотки крови КРС; в – 2 % сыворотки крови КРС + 0,14 % актовегина Рис. 2. Пролиферативная активность клеток линии BHK�21 clone 13/04 на 4�е сутки роста (по вертика� ли, %) при культивировании в средах с различными концентрациями сыворотки крови КРС (по горизон� тали) и актовегина. Концентрация актовегина в рос� товой среде: а – нет, б – 0,07 %, в – 0,14 % бавлении фракции до 1 кДа наблюдалась ги� бель культуры на втором�третьем пассажах [16]. Суммируя полученные данные, можно сде� лать вывод о том, что низкомолекулярные ве� щества, содержащиеся в актовегине, не могут выступать в роли факторов роста, обеспечиваю� щих жизнедеятельность клеток in vitro. Однако добавление малых доз препарата в питательную среду, содержащую ростостимулирующие фак� торы, приводит к включению механизмов, обес� печивающих повышение биоэнергетического состояния клеток, по�видимому, за счет усиле� ния потребления кислорода и глюкозы [4, 5], что приводит к усилению их метаболизма и пролиферативной активности. Для более детального изучения воздейст� вия препарата актовегина на рост культур кле� ток нами был исследован митотический ре� жим клеток перевиваемой линии PK�15� IEKVM. Культивирование клеток в среде с по� ниженной до 2 % концентрацией сыворотки крови КРС приводит по сравнению с 10%� ной ее концентрацией: на 1�е сутки роста – к увеличению количества делящихся клеток, на 2�е сутки – к сопоставимому их количеству, на 3�и сутки – к резкому снижению количества митозов. Таким образом, было показано, что клетки для вступления в стадию деления тре� буют пороговое значение концентрации рос� товых факторов в питательной среде. По� скольку сыворотка крови КРС имеет в своем составе как ростостимулирующие, так и инги� бирующие факторы, повышенная ее концент� рация (в данном случае – 10 %) в питательной среде, по сравнению с пороговым значением (в данном случае – 2 %), угнетает пролифера� тивные свойства клеток PK�15�IEKVM, что было показано на 1�е сутки их роста. Стимуляция митотической активности при добавлении актовегина в ростовую среду с 2 % сыворотки крови также наблюдается нами только на 1�е и 2�е сутки роста культуры. На 1�е сутки она составляет 36 %, на 2�е – 48 % относительно митотической активности клеток в среде, содержащей 2 % сыворотки (рис. 3). Учет патологических митозов показал, что при культивировании клеток в среде с добавлени� ем актовегина на 2�е сутки роста культуры происходит увеличение их количества с 7 до 13 % от общего количества митозов. Среди па� тологических митозов преобладают «микрояд� ра», К�митоз и трехполюсный митоз, которые являются следствием как хромосомных нару� шений, так и нарушений веретена деления клеток. Факт повышения количества нарушений митозов позволяет предполагать возможность адаптивных перестроек клеток культуры в от� вет на новый фактор ростовой среды [15, 17], в данном случае – препарат актовегин. Выводы. В наших исследованиях показано, что добавление актовегина в концентрации 0,14 % к объему ростовой среды стимулирует пролиферативную активность культур клеток. Эффект стимуляции актовегином пролифера� ции клеток показан для перевиваемых линий PK�15�IEKVM и BHK�21 clone 13/04 при культивировании с использованием разных по своему составу сывороток крови КРС и при различной концентрации этих сывороток в ростовой среде. Применение актовегина в об� ласти клеточной биотехнологии может быть полезным для увеличения скорости роста культур. Возможен также эффект повышения физиологической активности клеток in vitro, однако это предположение требует дальней� шей проверки. 56 А.К. Гулевский, А.В. Трифонова, А.А. Лаврик ISSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2008. № 1 Рис. 3. Митотический режим линии PK�15�IEKVM при снижении концентрации сыворотки крови КРС в среде и добавлении актовегина (по вертикали – ‰, по гори� зонтали – сутки роста): а – 10 % сыворотки крови КРС; б – 2 % сыворотки крови КРС; в – 2 % сыворотки кро� ви КРС + 0,14 % актовегина SUMMARY. The influence of Actоvegin on proliferation activity and mitotic regimen of cells of permanent lines PK� 15�IEKVM and BHK�21 clone 13/04 was investigated. Addition of Actоvegin into growth media containing bovine serums of different components and concentrations stimu� lates cell proliferation. Conclusion has been made that Actоvegin can be used in cell culture biotechnology. РЕЗЮМЕ. Вивчено вплив актовегіну на проліфе� ративну активність та мітотичний режим клітин пере� щеплюваних ліній PK�15�IEKVM та BHK�21 clone 13/04. Показана стимулююча дія препарату на пролі� ферацію клітин при його додаванні до ростових сере� довищ, які містять різні за складом та за концентра� цією сироватки крові крупної рогатої худоби. Зробле� но висновок про перспективність використання акто� вегіну в біотехнології культур клітин. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Колосков А.В. Современное представление о пока� заниях для трансфузии эритроцитарных компо� нентов крови // Гематология и трансфузиология. – 2004. – № 6. – С. 38–42. 2. Колосков А.В. Современное представление о пока� заниях к трансфузии свежезамороженной плазмы // Гематология и трансфузиология. – 2005. – № 6. – С. 41–42 3. Нордвик Б. Актовегин. Новые аспекты клиничес� кого применения. – М., 2002. – С. 18–24. 4. Parade D. Untersuchungen Liber die insulinahnliche Wirkung eines niedermolekLilaren Blutextraktes auf den Glucosestoffwechsel des isolierten Fettgewebes der Ratte in vitro // Arzneim.�Forsch. – 1968. – 18. – P. 1019. 5. M hlbacher C., Haring H. Glycolipide imitieren in Rattenfettzellen den Insulineffekt auf den Glucosetran� sport // Akt. Endokrin. Stoffw. – 1987. – 2. 6. Saltiel A. R., Cuatrecasas P. Insulin stimulates the gen� eration from hepatic plasma membranes of modulators derived from an inositol glycolipid // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. – 1986. – 83 – P. 5793. 7. Obermaier�Kusser B., Muehlbacher C., Mushack J. et al. Regulation of glucose carrier activity by AlCl3 and phospholipase C in fat�cells // Biochem. J. – 1988 – 256 – P. 515–520. 8. Machicao F., Mushack J., Seffer E. et al. Mannose, glu� cosamine and inositol monophosphat inhibit the effects of insulin on lipogenesis. Further evidence for a role for inositolphosphat�oligosaccharides in insulin action // Biochem J. – 1990 – 266. – P. 909–916. 9. Mato J.M. Insulin mediators revisited // Cell. Signal. – 1989. – 1. – P. 143–146. 10. Дьяконов Л.П., Ситько В.И. Животная клетка в культуре. – М.: Спутник, 2000. – 400 с. 11. Богрянцева М.П., Фролова И.В., Трошкова Г.П. и др. Питательные среды и другие препараты для куль� тур клеток млекопитающих // Цитология. – 1996. – 38, № 2. – С. 182–183. 12. Нариманов А.А. Бессывороточная среда для культи� вирования лимфоидных клеток человека и миелом� ных клеток мышей // Биотехнология. – 1991. – № 1. – С. 49–52. 13. Деклараційний патент на винахід 4432, МКИ С12N5/00. Стегній Б.Т., Білоконь В.С., Кіпріч В.В., Лаврік О.А., Кучерявенко Р.О., Кучерявенко В.В. Спосіб очищення сироватки великої рогатої худо� би № 20040503502; Заявлено 11.05.2004; Опубл. 17.01.2005. Бюл. № 4. 14. Методические рекомендации по криоконсервиро� ванию и цитологическому контролю качества культур клеток и фрагментов ткани. – Харьков, 1993. – 20 с. 15. Блюмкин В.Н., Жданов В.М. Влияние вирусов на хромосомный аппарат и деление клетки. – М.: Медицина, 1973. – 267 с. 16. Пригода А.С., Коренева А.И. и др. Конструирова� ние бессывороточных питательных сред для куль� тивирования клеток млекопитающих. 2. Изуче� ние ростостимулирующей активности ультра� фильтрационных фракций панкреатического гидролизата казеина // Биотехнология. – 1991. – № 4. – С. 38–40. 17. Алов И.А. и др. Основы функциональной морфо� логии клетки. – М.: Медицина, 1966. – 415 с. Поступила 28.08.06 57 Влияние актовегина на пролиферацию клеток перевиваемых линий ІSSN 0564–3783. Цитология и генетика. 2008. № 1
id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-8049
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
issn	0564-3783
language	Russian
last_indexed	2025-12-07T15:20:41Z
publishDate	2008
publisher	Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
record_format	dspace
spelling	Гулевский, А.К. Трифонова, А.В. Лаврик, А.А. 2010-04-26T17:21:14Z 2010-04-26T17:21:14Z 2008 Влияние актовегина на пролиферацию клеток перевиваемых линий / А.К. Гулевский, А.В. Трифонова, А.А. Лаврик // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 1. — С. 53-57. — Бібліогр.: 17 назв. — рос. 0564-3783 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8049 615.324:576–353:576.535 Изучено влияние препарата "Актовегин" на пролиферативную активность и митотический режим клеток перевиваемых линий PK-15-IEKVM и ВНК-21 clone 13/04. Показано стимулирующее действие препарата на пролиферацию клеток при его добавлении в ростовую среду, содержащую различные по своему составу сыворотки крови крупного рогатого скота в разных концентрациях. Сделан вывод о перспективности использования актовегина в биотехнологии культур клеток. Вивчено вплив актовегіну на проліферативну активність та мітотичний режим клітин перещеплюваних ліній PK-15-IEKVM та BHK-21 clone 13/04. Показана стимулююча дія препарату на проліферацію клітин при його додаванні до ростових середовищ, які містять різні за складом та за концентрацією сироватки крові крупної рогатої худоби. Зроблено висновок про перспективність використання актовегіну в біотехнології культур клітин. The influence of Actоvegin on proliferation activity and mitotic regimen of cells of permanent lines PK-15-IEKVM and BHK-21 clone 13/04 was investigated. Addition of Actоvegin into growth media containing bovine serums of different components and concentrations stimulates cell proliferation. Conclusion has been made that Actоvegin can be used in cell culture biotechnology. ru Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України Оригинальные работы Влияние актовегина на пролиферацию клеток перевиваемых линий Article published earlier
spellingShingle	Влияние актовегина на пролиферацию клеток перевиваемых линий Гулевский, А.К. Трифонова, А.В. Лаврик, А.А. Оригинальные работы
title	Влияние актовегина на пролиферацию клеток перевиваемых линий
title_full	Влияние актовегина на пролиферацию клеток перевиваемых линий
title_fullStr	Влияние актовегина на пролиферацию клеток перевиваемых линий
title_full_unstemmed	Влияние актовегина на пролиферацию клеток перевиваемых линий
title_short	Влияние актовегина на пролиферацию клеток перевиваемых линий
title_sort	влияние актовегина на пролиферацию клеток перевиваемых линий
topic	Оригинальные работы
topic_facet	Оригинальные работы
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8049
work_keys_str_mv	AT gulevskiiak vliânieaktoveginanaproliferaciûkletokperevivaemyhlinii AT trifonovaav vliânieaktoveginanaproliferaciûkletokperevivaemyhlinii AT lavrikaa vliânieaktoveginanaproliferaciûkletokperevivaemyhlinii

Влияние актовегина на пролиферацию клеток перевиваемых линий

Institution

Similar Items