Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші
Сконструйовано комбінаторну бібліотеку кДНК варіабельних генів імуноглобулінів мишей, імунізованих рекомбінантним інтерфероном β1b людини (rhIFN-β1b). Для цього ампліфіковану зі спленоцитів кДНК варіабельних генів важких (VH) і легких (VL) ланцюгів імуноглобулінів об’єднували лінкерною ДНК у складі...
Збережено в:
| Дата: | 2008 |
|---|---|
| Автори: | , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Українська |
| Опубліковано: |
Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
2008
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8078 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші / М.В. Павлова, П.В. Гільчук, Я.О. Похоленко, Ю.С. Ніколаєв, В.А. Кордюм // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 2. — С. 10-15. — Бібліогр.: 12 назв. — укp. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1862638953059844096 |
|---|---|
| author | Павлова, М.В. Гільчук, П.В. Похоленко, Я.О. Ніколаєв, Ю.С. Кордюм, В.А. |
| author_facet | Павлова, М.В. Гільчук, П.В. Похоленко, Я.О. Ніколаєв, Ю.С. Кордюм, В.А. |
| citation_txt | Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші / М.В. Павлова, П.В. Гільчук, Я.О. Похоленко, Ю.С. Ніколаєв, В.А. Кордюм // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 2. — С. 10-15. — Бібліогр.: 12 назв. — укp. |
| collection | DSpace DC |
| description | Сконструйовано комбінаторну бібліотеку кДНК варіабельних генів імуноглобулінів мишей, імунізованих рекомбінантним інтерфероном β1b людини (rhIFN-β1b). Для цього ампліфіковану зі спленоцитів кДНК варіабельних генів важких (VH) і легких (VL) ланцюгів імуноглобулінів об’єднували лінкерною ДНК у складі послідовностей одноланцюгових антитіл – ScFv’s (single chain Fv antibodies). Одержаний пул ScFv-ДНК було клоновано у фагмідному векторі і використано для трансформації Escherichia coli. З використанням методу фагового дисплея відібрано бактеріальні клони, які продукують специфічні до rhIFN-β1b ScFv’s. У роботі встановлено такі характеристики створеної бібліотеки, як представленість, функціональний розмір та вихідне різноманіття послідовностей ScFv-ДНК. Продемонстровано високу специфічність взаємодії виділених фаговим дисплеєм ScFv’s з rhIFN-β1b.
Была сконструирована комбинаторная библиотека кДНК вариабельных генов иммуноглобулинов мышей, иммунизированных рекомбинантным интерфероном β1b человека (rhIFN-β1b). Для этого амплифицированную из спленоцитов кДНК вариабельных генов тяжелых (VH) и легких (VL) цепей иммуноглобулинов объединяли линкерной ДНК в составе последовательностей одноцепочечных антител – ScFv’s (single-chain Fv-antibodies). Полученный пул ScFv-ДНК был заклонирован в фагемидный вектор и использован для трансформации клеток Escherichia coli. С использованием метода фагового дисплея отобраны бактериальные клоны, которые продуцируют специфические к rhIFN-β1b одноцепочечные антитела. В работе определены такие характеристики созданной библиотеки, как представленность, функциональный размер, а также исходное разнообразие последовательностей ScFv-ДНК. Продемонстрирована высокая специфичность взаимодействия ScFv, выделенных с помощью фагового дисплея, с rhIFN-β1b.
A cDNA combinatorial antibody library of mouse variable immunoglobulin fragments has been constructed from mice immunized with rhIFN-β1b. For this purpose, cDNAS of immunoglobulin variable heavy (VH) and variable light (VL) chains genes amplified from splenocytes were joined with linker DNA to form ScFv’s (single-chain Fv-antibodies). The obtained ScFv-DNA pool was cloned into a phagemid vector and used for Escherichia coli transformation. Using the phage display technique, bacterial clones producing single-chain antibodies specific to rhIFN-β1b were selected. The following characteristics of the combinatorial library were determined in this work: abundance, functional size, and the initial ScFv-DNA diversity in the library constructed. High specificity of interaction between phage displayed ScFv’s and rhIFN-β1b has been demonstrated.
|
| first_indexed | 2025-12-01T00:59:24Z |
| format | Article |
| fulltext | |
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-8078 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0564-3783 |
| language | Ukrainian |
| last_indexed | 2025-12-01T00:59:24Z |
| publishDate | 2008 |
| publisher | Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Павлова, М.В. Гільчук, П.В. Похоленко, Я.О. Ніколаєв, Ю.С. Кордюм, В.А. 2010-04-29T11:06:26Z 2010-04-29T11:06:26Z 2008 Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші / М.В. Павлова, П.В. Гільчук, Я.О. Похоленко, Ю.С. Ніколаєв, В.А. Кордюм // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 2. — С. 10-15. — Бібліогр.: 12 назв. — укp. 0564-3783 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8078 579.69 : 577.12 Сконструйовано комбінаторну бібліотеку кДНК варіабельних генів імуноглобулінів мишей, імунізованих рекомбінантним інтерфероном β1b людини (rhIFN-β1b). Для цього ампліфіковану зі спленоцитів кДНК варіабельних генів важких (VH) і легких (VL) ланцюгів імуноглобулінів об’єднували лінкерною ДНК у складі послідовностей одноланцюгових антитіл – ScFv’s (single chain Fv antibodies). Одержаний пул ScFv-ДНК було клоновано у фагмідному векторі і використано для трансформації Escherichia coli. З використанням методу фагового дисплея відібрано бактеріальні клони, які продукують специфічні до rhIFN-β1b ScFv’s. У роботі встановлено такі характеристики створеної бібліотеки, як представленість, функціональний розмір та вихідне різноманіття послідовностей ScFv-ДНК. Продемонстровано високу специфічність взаємодії виділених фаговим дисплеєм ScFv’s з rhIFN-β1b. Была сконструирована комбинаторная библиотека кДНК вариабельных генов иммуноглобулинов мышей, иммунизированных рекомбинантным интерфероном β1b человека (rhIFN-β1b). Для этого амплифицированную из спленоцитов кДНК вариабельных генов тяжелых (VH) и легких (VL) цепей иммуноглобулинов объединяли линкерной ДНК в составе последовательностей одноцепочечных антител – ScFv’s (single-chain Fv-antibodies). Полученный пул ScFv-ДНК был заклонирован в фагемидный вектор и использован для трансформации клеток Escherichia coli. С использованием метода фагового дисплея отобраны бактериальные клоны, которые продуцируют специфические к rhIFN-β1b одноцепочечные антитела. В работе определены такие характеристики созданной библиотеки, как представленность, функциональный размер, а также исходное разнообразие последовательностей ScFv-ДНК. Продемонстрирована высокая специфичность взаимодействия ScFv, выделенных с помощью фагового дисплея, с rhIFN-β1b. A cDNA combinatorial antibody library of mouse variable immunoglobulin fragments has been constructed from mice immunized with rhIFN-β1b. For this purpose, cDNAS of immunoglobulin variable heavy (VH) and variable light (VL) chains genes amplified from splenocytes were joined with linker DNA to form ScFv’s (single-chain Fv-antibodies). The obtained ScFv-DNA pool was cloned into a phagemid vector and used for Escherichia coli transformation. Using the phage display technique, bacterial clones producing single-chain antibodies specific to rhIFN-β1b were selected. The following characteristics of the combinatorial library were determined in this work: abundance, functional size, and the initial ScFv-DNA diversity in the library constructed. High specificity of interaction between phage displayed ScFv’s and rhIFN-β1b has been demonstrated. uk Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України Оригинальные работы Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші Article published earlier |
| spellingShingle | Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші Павлова, М.В. Гільчук, П.В. Похоленко, Я.О. Ніколаєв, Ю.С. Кордюм, В.А. Оригинальные работы |
| title | Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші |
| title_full | Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші |
| title_fullStr | Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші |
| title_full_unstemmed | Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші |
| title_short | Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші |
| title_sort | створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кднк варіабельних генів імуноглобулінів миші |
| topic | Оригинальные работы |
| topic_facet | Оригинальные работы |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8078 |
| work_keys_str_mv | AT pavlovamv stvorennâtaharakteristikaímunnoíkombínatornoíbíblíotekikdnkvaríabelʹnihgenívímunoglobulínívmiší AT gílʹčukpv stvorennâtaharakteristikaímunnoíkombínatornoíbíblíotekikdnkvaríabelʹnihgenívímunoglobulínívmiší AT poholenkoâo stvorennâtaharakteristikaímunnoíkombínatornoíbíblíotekikdnkvaríabelʹnihgenívímunoglobulínívmiší AT níkolaêvûs stvorennâtaharakteristikaímunnoíkombínatornoíbíblíotekikdnkvaríabelʹnihgenívímunoglobulínívmiší AT kordûmva stvorennâtaharakteristikaímunnoíkombínatornoíbíblíotekikdnkvaríabelʹnihgenívímunoglobulínívmiší |