Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші

Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші

Сконструйовано комбінаторну бібліотеку кДНК варіабельних генів імуноглобулінів мишей, імунізованих рекомбінантним інтерфероном β1b людини (rhIFN-β1b). Для цього ампліфіковану зі спленоцитів кДНК варіабельних генів важких (VH) і легких (VL) ланцюгів імуноглобулінів об’єднували лінкерною ДНК у складі...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Date:2008
Main Authors: Павлова, М.В., Гільчук, П.В., Похоленко, Я.О., Ніколаєв, Ю.С., Кордюм, В.А.
Format: Article
Language:Ukrainian
Published: Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України 2008
Subjects:
Оригинальные работы
Online Access:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8078
Tags: Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші / М.В. Павлова, П.В. Гільчук, Я.О. Похоленко, Ю.С. Ніколаєв, В.А. Кордюм // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 2. — С. 10-15. — Бібліогр.: 12 назв. — укp.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-8078
record_format dspace
spelling Павлова, М.В.
Гільчук, П.В.
Похоленко, Я.О.
Ніколаєв, Ю.С.
Кордюм, В.А.
2010-04-29T11:06:26Z
2010-04-29T11:06:26Z
2008
Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші / М.В. Павлова, П.В. Гільчук, Я.О. Похоленко, Ю.С. Ніколаєв, В.А. Кордюм // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 2. — С. 10-15. — Бібліогр.: 12 назв. — укp.
0564-3783
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8078
579.69 : 577.12
Сконструйовано комбінаторну бібліотеку кДНК варіабельних генів імуноглобулінів мишей, імунізованих рекомбінантним інтерфероном β1b людини (rhIFN-β1b). Для цього ампліфіковану зі спленоцитів кДНК варіабельних генів важких (VH) і легких (VL) ланцюгів імуноглобулінів об’єднували лінкерною ДНК у складі послідовностей одноланцюгових антитіл – ScFv’s (single chain Fv antibodies). Одержаний пул ScFv-ДНК було клоновано у фагмідному векторі і використано для трансформації Escherichia coli. З використанням методу фагового дисплея відібрано бактеріальні клони, які продукують специфічні до rhIFN-β1b ScFv’s. У роботі встановлено такі характеристики створеної бібліотеки, як представленість, функціональний розмір та вихідне різноманіття послідовностей ScFv-ДНК. Продемонстровано високу специфічність взаємодії виділених фаговим дисплеєм ScFv’s з rhIFN-β1b.
Была сконструирована комбинаторная библиотека кДНК вариабельных генов иммуноглобулинов мышей, иммунизированных рекомбинантным интерфероном β1b человека (rhIFN-β1b). Для этого амплифицированную из спленоцитов кДНК вариабельных генов тяжелых (VH) и легких (VL) цепей иммуноглобулинов объединяли линкерной ДНК в составе последовательностей одноцепочечных антител – ScFv’s (single-chain Fv-antibodies). Полученный пул ScFv-ДНК был заклонирован в фагемидный вектор и использован для трансформации клеток Escherichia coli. С использованием метода фагового дисплея отобраны бактериальные клоны, которые продуцируют специфические к rhIFN-β1b одноцепочечные антитела. В работе определены такие характеристики созданной библиотеки, как представленность, функциональный размер, а также исходное разнообразие последовательностей ScFv-ДНК. Продемонстрирована высокая специфичность взаимодействия ScFv, выделенных с помощью фагового дисплея, с rhIFN-β1b.
A cDNA combinatorial antibody library of mouse variable immunoglobulin fragments has been constructed from mice immunized with rhIFN-β1b. For this purpose, cDNAS of immunoglobulin variable heavy (VH) and variable light (VL) chains genes amplified from splenocytes were joined with linker DNA to form ScFv’s (single-chain Fv-antibodies). The obtained ScFv-DNA pool was cloned into a phagemid vector and used for Escherichia coli transformation. Using the phage display technique, bacterial clones producing single-chain antibodies specific to rhIFN-β1b were selected. The following characteristics of the combinatorial library were determined in this work: abundance, functional size, and the initial ScFv-DNA diversity in the library constructed. High specificity of interaction between phage displayed ScFv’s and rhIFN-β1b has been demonstrated.
uk
Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
Оригинальные работы
Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші
Article
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші
spellingShingle Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші
Павлова, М.В.
Гільчук, П.В.
Похоленко, Я.О.
Ніколаєв, Ю.С.
Кордюм, В.А.
Оригинальные работы
title_short Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші
title_full Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші
title_fullStr Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші
title_full_unstemmed Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші
title_sort створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кднк варіабельних генів імуноглобулінів миші
author Павлова, М.В.
Гільчук, П.В.
Похоленко, Я.О.
Ніколаєв, Ю.С.
Кордюм, В.А.
author_facet Павлова, М.В.
Гільчук, П.В.
Похоленко, Я.О.
Ніколаєв, Ю.С.
Кордюм, В.А.
topic Оригинальные работы
topic_facet Оригинальные работы
publishDate 2008
language Ukrainian
publisher Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
format Article
description Сконструйовано комбінаторну бібліотеку кДНК варіабельних генів імуноглобулінів мишей, імунізованих рекомбінантним інтерфероном β1b людини (rhIFN-β1b). Для цього ампліфіковану зі спленоцитів кДНК варіабельних генів важких (VH) і легких (VL) ланцюгів імуноглобулінів об’єднували лінкерною ДНК у складі послідовностей одноланцюгових антитіл – ScFv’s (single chain Fv antibodies). Одержаний пул ScFv-ДНК було клоновано у фагмідному векторі і використано для трансформації Escherichia coli. З використанням методу фагового дисплея відібрано бактеріальні клони, які продукують специфічні до rhIFN-β1b ScFv’s. У роботі встановлено такі характеристики створеної бібліотеки, як представленість, функціональний розмір та вихідне різноманіття послідовностей ScFv-ДНК. Продемонстровано високу специфічність взаємодії виділених фаговим дисплеєм ScFv’s з rhIFN-β1b. Была сконструирована комбинаторная библиотека кДНК вариабельных генов иммуноглобулинов мышей, иммунизированных рекомбинантным интерфероном β1b человека (rhIFN-β1b). Для этого амплифицированную из спленоцитов кДНК вариабельных генов тяжелых (VH) и легких (VL) цепей иммуноглобулинов объединяли линкерной ДНК в составе последовательностей одноцепочечных антител – ScFv’s (single-chain Fv-antibodies). Полученный пул ScFv-ДНК был заклонирован в фагемидный вектор и использован для трансформации клеток Escherichia coli. С использованием метода фагового дисплея отобраны бактериальные клоны, которые продуцируют специфические к rhIFN-β1b одноцепочечные антитела. В работе определены такие характеристики созданной библиотеки, как представленность, функциональный размер, а также исходное разнообразие последовательностей ScFv-ДНК. Продемонстрирована высокая специфичность взаимодействия ScFv, выделенных с помощью фагового дисплея, с rhIFN-β1b. A cDNA combinatorial antibody library of mouse variable immunoglobulin fragments has been constructed from mice immunized with rhIFN-β1b. For this purpose, cDNAS of immunoglobulin variable heavy (VH) and variable light (VL) chains genes amplified from splenocytes were joined with linker DNA to form ScFv’s (single-chain Fv-antibodies). The obtained ScFv-DNA pool was cloned into a phagemid vector and used for Escherichia coli transformation. Using the phage display technique, bacterial clones producing single-chain antibodies specific to rhIFN-β1b were selected. The following characteristics of the combinatorial library were determined in this work: abundance, functional size, and the initial ScFv-DNA diversity in the library constructed. High specificity of interaction between phage displayed ScFv’s and rhIFN-β1b has been demonstrated.
issn 0564-3783
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8078
citation_txt Створення та характеристика імунної комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші / М.В. Павлова, П.В. Гільчук, Я.О. Похоленко, Ю.С. Ніколаєв, В.А. Кордюм // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 2. — С. 10-15. — Бібліогр.: 12 назв. — укp.
work_keys_str_mv AT pavlovamv stvorennâtaharakteristikaímunnoíkombínatornoíbíblíotekikdnkvaríabelʹnihgenívímunoglobulínívmiší
AT gílʹčukpv stvorennâtaharakteristikaímunnoíkombínatornoíbíblíotekikdnkvaríabelʹnihgenívímunoglobulínívmiší
AT poholenkoâo stvorennâtaharakteristikaímunnoíkombínatornoíbíblíotekikdnkvaríabelʹnihgenívímunoglobulínívmiší
AT níkolaêvûs stvorennâtaharakteristikaímunnoíkombínatornoíbíblíotekikdnkvaríabelʹnihgenívímunoglobulínívmiší
AT kordûmva stvorennâtaharakteristikaímunnoíkombínatornoíbíblíotekikdnkvaríabelʹnihgenívímunoglobulínívmiší
first_indexed 2025-12-01T00:59:24Z
last_indexed 2025-12-01T00:59:24Z
_version_ 1850858862446379008

Similar Items