Изучение влияния lox-сайтов Cre-lox системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного bar гена в трансгенных растениях

Показано, что при размещении lox-сайта в генетических конструкциях в непосредственной близости от правой границы Т-ДНК (RB – lox – bar –) происходит стабильная экспрессия следующего за lox-сайтом беспромоторного bar гена. Генетические конструкции, которые были использованы в работе, содержали также...

Повний опис

Збережено в:

Бібліографічні деталі
Дата:	2006
Автори:	Щербак, Н.Л., Белокурова, В.Б., Гецко, И.О., Комарницкий, И.К., Кучук, Н.В.
Формат:	Стаття
Мова:	Russian
Опубліковано:	Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України 2006
Назва видання:	Цитология и генетика
Теми:	Оригинальные работы
Онлайн доступ:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/82000
Теги:	Додати тег Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:	Изучение влияния lox-сайтов Cre-lox системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного bar гена в трансгенных растениях / Н.Л. Щербак, В.Б. Белокурова, И.О. Гецко, И.К. Комарницкий, Н.В. Кучук // Цитология и генетика. — 2006. — Т. 40, № 1. — С. 3-9. — Бібліогр.: 22 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-82000
record_format	dspace
fulltext
spelling	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-820002025-02-09T11:14:12Z Изучение влияния lox-сайтов Cre-lox системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного bar гена в трансгенных растениях The influence of lox-sites of the Cre lox recombination system on promoterless bar gene expression in transgenic plants Щербак, Н.Л. Белокурова, В.Б. Гецко, И.О. Комарницкий, И.К. Кучук, Н.В. Оригинальные работы Показано, что при размещении lox-сайта в генетических конструкциях в непосредственной близости от правой границы Т-ДНК (RB – lox – bar –) происходит стабильная экспрессия следующего за lox-сайтом беспромоторного bar гена. Генетические конструкции, которые были использованы в работе, содержали также ген неомицинфосфотрансферазы II (npt II) под контролем nos промотора. Трансформированные растения Nicotiana tabacum и N. africana были отобраны по способности расти на среде, содержащей канамицин, а затем протестированы на селективной среде, содержащей фосфинотрицин. У 80 % трансгенных растений, отобранных по устойчивости к канамицину, экспрессия bar гена происходила на таком же уровне, как и у растений, трансформированных конструкциями, в которых bar ген находится под сильным конститутивным промотором. При использовании конструкции без lox-сайта, в которой беспромоторный bar ген находится возле правой границы Т-ДНК (RB – bar –), либо конструкций, в которых lox-сайт и беспромоторный bar ген расположены в середине конструкции (– lox – bar –), частота РРТ-устойчивых растений составила не более 4,5 %. Анализ с помощью ПЦР не выявил возможных тандемных повторов или рекомбинации, в результате которых беспромоторный bar ген мог оказаться под контролем промотора, находящегося в плазмиде. При встраивании nos-терминатора в вектор между lox-сайтом и правым бордером частота РРТ-устойчивых трансгенных растений не изменилась. We demonstrate that localization of lox site between the right border of T-DNA and promoterless bar gene (RB - lox - bar -) led to its highly efficient expression in transgenic plants of Nicotiana tabacum and N. africana.. Plasmid vectors used in gene integration experiments contained neomycin phosphotransferase II (npt II) gene under nos promoter as well. Transgenic plants were selected according to their capacity to grow on the medium with kanamycin and then they were tested on the selective medium containing phosphinothricin. 80 % of transgenic plants expressed bar gene at the level similar to that in plants transformed with the bar gene under widely used constitutive promoter. Transformation of plants with the plasmid vector containing only promoterless bar gene near T-DNA right border (RB– bar -) and with the vector containing lox site and promoterless bar gene in the middle of the construction (-lox-bar-) led to obtaining no more than 4,5 % of transgenic plants resistant to phosphinothricin. PCR analyses confirmed both the absence of tandem repeats and of plasmid recombination resulting in transference of bar gene under promoter in plasmid vector.. Nos-terminator situated between the lox site and the right border of T-DNA did not decrease bar gene expression. 2006 Article Изучение влияния lox-сайтов Cre-lox системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного bar гена в трансгенных растениях / Н.Л. Щербак, В.Б. Белокурова, И.О. Гецко, И.К. Комарницкий, Н.В. Кучук // Цитология и генетика. — 2006. — Т. 40, № 1. — С. 3-9. — Бібліогр.: 22 назв. — рос. 0564-3783 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/82000 577.21:582.926.2 ru Цитология и генетика application/pdf Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Оригинальные работы Оригинальные работы
spellingShingle	Оригинальные работы Оригинальные работы Щербак, Н.Л. Белокурова, В.Б. Гецко, И.О. Комарницкий, И.К. Кучук, Н.В. Изучение влияния lox-сайтов Cre-lox системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного bar гена в трансгенных растениях Цитология и генетика
description	Показано, что при размещении lox-сайта в генетических конструкциях в непосредственной близости от правой границы Т-ДНК (RB – lox – bar –) происходит стабильная экспрессия следующего за lox-сайтом беспромоторного bar гена. Генетические конструкции, которые были использованы в работе, содержали также ген неомицинфосфотрансферазы II (npt II) под контролем nos промотора. Трансформированные растения Nicotiana tabacum и N. africana были отобраны по способности расти на среде, содержащей канамицин, а затем протестированы на селективной среде, содержащей фосфинотрицин. У 80 % трансгенных растений, отобранных по устойчивости к канамицину, экспрессия bar гена происходила на таком же уровне, как и у растений, трансформированных конструкциями, в которых bar ген находится под сильным конститутивным промотором. При использовании конструкции без lox-сайта, в которой беспромоторный bar ген находится возле правой границы Т-ДНК (RB – bar –), либо конструкций, в которых lox-сайт и беспромоторный bar ген расположены в середине конструкции (– lox – bar –), частота РРТ-устойчивых растений составила не более 4,5 %. Анализ с помощью ПЦР не выявил возможных тандемных повторов или рекомбинации, в результате которых беспромоторный bar ген мог оказаться под контролем промотора, находящегося в плазмиде. При встраивании nos-терминатора в вектор между lox-сайтом и правым бордером частота РРТ-устойчивых трансгенных растений не изменилась.
format	Article
author	Щербак, Н.Л. Белокурова, В.Б. Гецко, И.О. Комарницкий, И.К. Кучук, Н.В.
author_facet	Щербак, Н.Л. Белокурова, В.Б. Гецко, И.О. Комарницкий, И.К. Кучук, Н.В.
author_sort	Щербак, Н.Л.
title	Изучение влияния lox-сайтов Cre-lox системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного bar гена в трансгенных растениях
title_short	Изучение влияния lox-сайтов Cre-lox системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного bar гена в трансгенных растениях
title_full	Изучение влияния lox-сайтов Cre-lox системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного bar гена в трансгенных растениях
title_fullStr	Изучение влияния lox-сайтов Cre-lox системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного bar гена в трансгенных растениях
title_full_unstemmed	Изучение влияния lox-сайтов Cre-lox системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного bar гена в трансгенных растениях
title_sort	изучение влияния lox-сайтов cre-lox системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного bar гена в трансгенных растениях
publisher	Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
publishDate	2006
topic_facet	Оригинальные работы
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/82000
citation_txt	Изучение влияния lox-сайтов Cre-lox системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного bar гена в трансгенных растениях / Н.Л. Щербак, В.Б. Белокурова, И.О. Гецко, И.К. Комарницкий, Н.В. Кучук // Цитология и генетика. — 2006. — Т. 40, № 1. — С. 3-9. — Бібліогр.: 22 назв. — рос.
series	Цитология и генетика
work_keys_str_mv	AT ŝerbaknl izučenievliâniâloxsajtovcreloxsistemyrekombinaciinaékspressiûbespromotornogobargenavtransgennyhrasteniâh AT belokurovavb izučenievliâniâloxsajtovcreloxsistemyrekombinaciinaékspressiûbespromotornogobargenavtransgennyhrasteniâh AT geckoio izučenievliâniâloxsajtovcreloxsistemyrekombinaciinaékspressiûbespromotornogobargenavtransgennyhrasteniâh AT komarnickijik izučenievliâniâloxsajtovcreloxsistemyrekombinaciinaékspressiûbespromotornogobargenavtransgennyhrasteniâh AT kučuknv izučenievliâniâloxsajtovcreloxsistemyrekombinaciinaékspressiûbespromotornogobargenavtransgennyhrasteniâh AT ŝerbaknl theinfluenceofloxsitesofthecreloxrecombinationsystemonpromoterlessbargeneexpressionintransgenicplants AT belokurovavb theinfluenceofloxsitesofthecreloxrecombinationsystemonpromoterlessbargeneexpressionintransgenicplants AT geckoio theinfluenceofloxsitesofthecreloxrecombinationsystemonpromoterlessbargeneexpressionintransgenicplants AT komarnickijik theinfluenceofloxsitesofthecreloxrecombinationsystemonpromoterlessbargeneexpressionintransgenicplants AT kučuknv theinfluenceofloxsitesofthecreloxrecombinationsystemonpromoterlessbargeneexpressionintransgenicplants
first_indexed	2025-11-25T21:07:15Z
last_indexed	2025-11-25T21:07:15Z
_version_	1849797992463204352

Изучение влияния lox-сайтов Cre-lox системы рекомбинации на экспрессию беспромоторного bar гена в трансгенных растениях

Репозитарії

Схожі ресурси