Характеристика панели одноцепочечных антител мыши против рекомбинантного интерферона β1b человека

Характеристика панели одноцепочечных антител мыши против рекомбинантного интерферона β1b человека

Из иммунной и неиммунной комбинаторных библиотек кДНК вариабельных генов иммуноглобулинов мыши получена панель одноцепочечных антител (ScFv’s – single-chain Fv-antibodies) против рекомбинантного интерферона β1b человека (rhIFN-β1b), которые были экспрессированы в клетках Escherichia coli. Для изолир...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Дата:2008
Автори: Павлова, М.В., Николаев, Ю.С., Иродов, Д.М., Окунев, О.В., Кордюм, В.А., Гильчук, П.В.
Формат: Стаття
Мова:Russian
Опубліковано: Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України 2008
Теми:
Оригинальные работы
Онлайн доступ:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8208
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Характеристика панели одноцепочечных антител мыши против рекомбинантного интерферона β1b человека / М.В. Павлова, Ю.С. Николаев, Д.М. Иродов, О.В. Окунев, В.А. Кордюм, П.В. Гильчук // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 4. — С. 3-11. — Бібліогр.: 13 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-8208
record_format dspace
spelling Павлова, М.В.
Николаев, Ю.С.
Иродов, Д.М.
Окунев, О.В.
Кордюм, В.А.
Гильчук, П.В.
2010-05-14T11:07:25Z
2010-05-14T11:07:25Z
2008
Характеристика панели одноцепочечных антител мыши против рекомбинантного интерферона β1b человека / М.В. Павлова, Ю.С. Николаев, Д.М. Иродов, О.В. Окунев, В.А. Кордюм, П.В. Гильчук // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 4. — С. 3-11. — Бібліогр.: 13 назв. — рос.
0564-3783
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8208
579.69: 577.12
Из иммунной и неиммунной комбинаторных библиотек кДНК вариабельных генов иммуноглобулинов мыши получена панель одноцепочечных антител (ScFv’s – single-chain Fv-antibodies) против рекомбинантного интерферона β1b человека (rhIFN-β1b), которые были экспрессированы в клетках Escherichia coli. Для изолированных из иммунной библиотеки продуцентов показана разница в уровнях продукции ScFv’s в периплазму и среду для культивирования, а также стабильность экспрессии при пересевах и хранении. После секвенирования целевой ДНК было проведено множественное выравнивание и структурный анализ последовательностей ScFv’s с разной первичной структурой, в результате чего были выявлены существенные отличия как в антиген-связывающих (CDR), так и в каркасных (FR) участках их вариабельных доменов. Методами ELISA и вестерн-блоттинга показана специфичность взаимодействия полученных из иммунной библиотеки ScFv’s как с нативным, так и с денатурированным rhIFN-β1b, а также их стабильность при хранении. Для каждого представителя панели ScFv’s были определены константы аффинности, которые находились в диапазоне от 1,96•10^-8 до 1,69•10^- 9 М.
З імунної та неімунної комбінаторних бібліотек кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші одержано панель одноланцюгових антитіл (ScFv’s – single-chain Fv-antibodies) проти рекомбінантного інтерферону β1b людини (rhIFN-β1b), які експресовано в клітинах Escherichia coli. Для ізольованих з імунної бібліотеки продуцентів показано різницю у рівнях продукції ScFv’s до периплазми та середовища культивування, а також стабільність експресії при пересівах та зберіганні. Після секвенування цільової ДНК проведено множин не вирівнювання та структурний аналіз послідовностей ScFv’s з різною первинною структурою, в результаті чого було виявлено істотні відмінності як у антигензв’язувальних (CDR), так і у каркасних (FR) ділянках їхніх варіабельних доменів. Методиками ELISA та вестерн-блотингу показано специфічність взаємодії одержаних з імунної бібліотеки ScFv’s як з нативним, так і денатурованим rhIFN-β1b, а також їхню стабільність при зберіганні. Для кожного представника панелі ScFv’s встановлено константи афінності, які знаходились у діапазоні від 1,96 • 10^–8 до 1,69 • 10^–9 М.
A panel of single-chain antibodies (ScFv’s – single-chain Fv-antibodies) against recombinant human interferon beta 1b (rhIFN-β1b) has been obtained from immune and naїve combinatorial cDNA libraries of the mouse variable immunoglobulin genes. ScFv’s were expressed into Escherichia coli cells. For producers isolated from the immune library a difference in production yield of ScFv’s in periplasm and incubation medium as well as their expression stability in passages and storage stability have been demonstrated. After sequencing of target DNA the multiple alignment and structural analysis of ScFv’s sequences with different primary structures were carried out and significant difference in both complementarity-determining (CDR) and framework (FR) regions of their variable domains has been shown. For the ScFv’s isolated from the immune library, specificity of their binding with native and denatured rhIFN-β1b in ELISA and Western-blotting as well as their high storage stability have been shown. The affinity constants for each representatives of the ScFv’s panel were in the range from 1.96 • 10^–8 to 1.69 • 10^–9 M.
Авторы работы выражают благодарность А. Ламану за предоставленную для исследований неиммунную библиотеку ScFv’s мыши, а также сотрудникам отдела функциональной геномики ИМБиГ НАН Украины за секвенирование ДНК.
ru
Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
Оригинальные работы
Характеристика панели одноцепочечных антител мыши против рекомбинантного интерферона β1b человека
Характеристика панелі одноланцюгових антитіл миші проти рекомбінантного інтерферону β1b людини
Characterization of a panel of mouse single-chain antibodies
Article
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title Характеристика панели одноцепочечных антител мыши против рекомбинантного интерферона β1b человека
spellingShingle Характеристика панели одноцепочечных антител мыши против рекомбинантного интерферона β1b человека
Павлова, М.В.
Николаев, Ю.С.
Иродов, Д.М.
Окунев, О.В.
Кордюм, В.А.
Гильчук, П.В.
Оригинальные работы
title_short Характеристика панели одноцепочечных антител мыши против рекомбинантного интерферона β1b человека
title_full Характеристика панели одноцепочечных антител мыши против рекомбинантного интерферона β1b человека
title_fullStr Характеристика панели одноцепочечных антител мыши против рекомбинантного интерферона β1b человека
title_full_unstemmed Характеристика панели одноцепочечных антител мыши против рекомбинантного интерферона β1b человека
title_sort характеристика панели одноцепочечных антител мыши против рекомбинантного интерферона β1b человека
author Павлова, М.В.
Николаев, Ю.С.
Иродов, Д.М.
Окунев, О.В.
Кордюм, В.А.
Гильчук, П.В.
author_facet Павлова, М.В.
Николаев, Ю.С.
Иродов, Д.М.
Окунев, О.В.
Кордюм, В.А.
Гильчук, П.В.
topic Оригинальные работы
topic_facet Оригинальные работы
publishDate 2008
language Russian
publisher Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України
format Article
title_alt Характеристика панелі одноланцюгових антитіл миші проти рекомбінантного інтерферону β1b людини
Characterization of a panel of mouse single-chain antibodies
description Из иммунной и неиммунной комбинаторных библиотек кДНК вариабельных генов иммуноглобулинов мыши получена панель одноцепочечных антител (ScFv’s – single-chain Fv-antibodies) против рекомбинантного интерферона β1b человека (rhIFN-β1b), которые были экспрессированы в клетках Escherichia coli. Для изолированных из иммунной библиотеки продуцентов показана разница в уровнях продукции ScFv’s в периплазму и среду для культивирования, а также стабильность экспрессии при пересевах и хранении. После секвенирования целевой ДНК было проведено множественное выравнивание и структурный анализ последовательностей ScFv’s с разной первичной структурой, в результате чего были выявлены существенные отличия как в антиген-связывающих (CDR), так и в каркасных (FR) участках их вариабельных доменов. Методами ELISA и вестерн-блоттинга показана специфичность взаимодействия полученных из иммунной библиотеки ScFv’s как с нативным, так и с денатурированным rhIFN-β1b, а также их стабильность при хранении. Для каждого представителя панели ScFv’s были определены константы аффинности, которые находились в диапазоне от 1,96•10^-8 до 1,69•10^- 9 М. З імунної та неімунної комбінаторних бібліотек кДНК варіабельних генів імуноглобулінів миші одержано панель одноланцюгових антитіл (ScFv’s – single-chain Fv-antibodies) проти рекомбінантного інтерферону β1b людини (rhIFN-β1b), які експресовано в клітинах Escherichia coli. Для ізольованих з імунної бібліотеки продуцентів показано різницю у рівнях продукції ScFv’s до периплазми та середовища культивування, а також стабільність експресії при пересівах та зберіганні. Після секвенування цільової ДНК проведено множин не вирівнювання та структурний аналіз послідовностей ScFv’s з різною первинною структурою, в результаті чого було виявлено істотні відмінності як у антигензв’язувальних (CDR), так і у каркасних (FR) ділянках їхніх варіабельних доменів. Методиками ELISA та вестерн-блотингу показано специфічність взаємодії одержаних з імунної бібліотеки ScFv’s як з нативним, так і денатурованим rhIFN-β1b, а також їхню стабільність при зберіганні. Для кожного представника панелі ScFv’s встановлено константи афінності, які знаходились у діапазоні від 1,96 • 10^–8 до 1,69 • 10^–9 М. A panel of single-chain antibodies (ScFv’s – single-chain Fv-antibodies) against recombinant human interferon beta 1b (rhIFN-β1b) has been obtained from immune and naїve combinatorial cDNA libraries of the mouse variable immunoglobulin genes. ScFv’s were expressed into Escherichia coli cells. For producers isolated from the immune library a difference in production yield of ScFv’s in periplasm and incubation medium as well as their expression stability in passages and storage stability have been demonstrated. After sequencing of target DNA the multiple alignment and structural analysis of ScFv’s sequences with different primary structures were carried out and significant difference in both complementarity-determining (CDR) and framework (FR) regions of their variable domains has been shown. For the ScFv’s isolated from the immune library, specificity of their binding with native and denatured rhIFN-β1b in ELISA and Western-blotting as well as their high storage stability have been shown. The affinity constants for each representatives of the ScFv’s panel were in the range from 1.96 • 10^–8 to 1.69 • 10^–9 M.
issn 0564-3783
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8208
citation_txt Характеристика панели одноцепочечных антител мыши против рекомбинантного интерферона β1b человека / М.В. Павлова, Ю.С. Николаев, Д.М. Иродов, О.В. Окунев, В.А. Кордюм, П.В. Гильчук // Цитология и генетика. — 2008. — Т. 42, № 4. — С. 3-11. — Бібліогр.: 13 назв. — рос.
work_keys_str_mv AT pavlovamv harakteristikapaneliodnocepočečnyhantitelmyšiprotivrekombinantnogointerferonaβ1bčeloveka
AT nikolaevûs harakteristikapaneliodnocepočečnyhantitelmyšiprotivrekombinantnogointerferonaβ1bčeloveka
AT irodovdm harakteristikapaneliodnocepočečnyhantitelmyšiprotivrekombinantnogointerferonaβ1bčeloveka
AT okunevov harakteristikapaneliodnocepočečnyhantitelmyšiprotivrekombinantnogointerferonaβ1bčeloveka
AT kordûmva harakteristikapaneliodnocepočečnyhantitelmyšiprotivrekombinantnogointerferonaβ1bčeloveka
AT gilʹčukpv harakteristikapaneliodnocepočečnyhantitelmyšiprotivrekombinantnogointerferonaβ1bčeloveka
AT pavlovamv harakteristikapanelíodnolancûgovihantitílmišíprotirekombínantnogoínterferonuβ1blûdini
AT nikolaevûs harakteristikapanelíodnolancûgovihantitílmišíprotirekombínantnogoínterferonuβ1blûdini
AT irodovdm harakteristikapanelíodnolancûgovihantitílmišíprotirekombínantnogoínterferonuβ1blûdini
AT okunevov harakteristikapanelíodnolancûgovihantitílmišíprotirekombínantnogoínterferonuβ1blûdini
AT kordûmva harakteristikapanelíodnolancûgovihantitílmišíprotirekombínantnogoínterferonuβ1blûdini
AT gilʹčukpv harakteristikapanelíodnolancûgovihantitílmišíprotirekombínantnogoínterferonuβ1blûdini
AT pavlovamv characterizationofapanelofmousesinglechainantibodies
AT nikolaevûs characterizationofapanelofmousesinglechainantibodies
AT irodovdm characterizationofapanelofmousesinglechainantibodies
AT okunevov characterizationofapanelofmousesinglechainantibodies
AT kordûmva characterizationofapanelofmousesinglechainantibodies
AT gilʹčukpv characterizationofapanelofmousesinglechainantibodies
first_indexed 2025-11-28T09:01:41Z
last_indexed 2025-11-28T09:01:41Z
_version_ 1850853545660645376

Схожі ресурси