Оптимізація методів виділення, електрофоретична характеристика та протипухлинна ефективність цитотоксичних метаболітів із фільтрату культуральної рідини Bacillus subtilis В-7025
Проведено оптимiзацiю видiлення бiлкiв iз фiльтрару культуральної рiдини Bacillus subtilis В-7025 шляхом об’єднання методiв осадження бiлкiв солями сульфату амонiю рiзної концентрацiї з подальшою термообробкою. Виявлено три компоненти з рiзною молекулярною масою, якi характеризуються вираженою цито...
Saved in:
| Published in: | Доповіді НАН України |
|---|---|
| Date: | 2012 |
| Main Authors: | , , , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Ukrainian |
| Published: |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
2012
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/84319 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Оптимізація методів виділення, електрофоретична характеристика та протипухлинна ефективність цитотоксичних метаболітів із фільтрату культуральної рідини Bacillus subtilis В-7025 / Г.В. Дiденко, О.П. Кузьменко, Є. Г. Шпак, I.А. Тавровська, М.А. Надiрашвiлi, I.О. Блюм, Г.П. Потебня // Доп. НАН України. — 2012. — № 7. — С. 185-190. — Бібліогр.: 13 назв. — укр. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859778221543784448 |
|---|---|
| author | Діденко, Г.В. Кузьменко, О.П. Шпак, Є.Г. Тавровська, І.А. Надірашвілі, М.А. Блюм, І.О. Потебня, Г.П. |
| author_facet | Діденко, Г.В. Кузьменко, О.П. Шпак, Є.Г. Тавровська, І.А. Надірашвілі, М.А. Блюм, І.О. Потебня, Г.П. |
| citation_txt | Оптимізація методів виділення, електрофоретична характеристика та протипухлинна ефективність цитотоксичних метаболітів із фільтрату культуральної рідини Bacillus subtilis В-7025 / Г.В. Дiденко, О.П. Кузьменко, Є. Г. Шпак, I.А. Тавровська, М.А. Надiрашвiлi, I.О. Блюм, Г.П. Потебня // Доп. НАН України. — 2012. — № 7. — С. 185-190. — Бібліогр.: 13 назв. — укр. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Доповіді НАН України |
| description | Проведено оптимiзацiю видiлення бiлкiв iз фiльтрару культуральної рiдини Bacillus subtilis В-7025 шляхом об’єднання методiв осадження бiлкiв солями сульфату амонiю рiзної
концентрацiї з подальшою термообробкою. Виявлено три компоненти з рiзною молекулярною масою, якi характеризуються вираженою цитотоксичнiстю щодо пухлинних клiтин (18 кДа, 70 кДа та лектин 7 кДа) не тiльки в умовах in vitro, але i in vivo.
Оптимизирован процесс выделения белков из фильтрата культуральной жидкости Bacillus subtilis В-7025 путем объединения методов осаждения белков солями сульфата аммония
разной концентрации с дальнейшей термообработкой. Выявлены три компонента с разной
молекулярной массой, обладающие выраженной цитотоксичностью в отношении опухолевых клеток (18 кДа, 70 кДа и лектин 7 кДа) не только in vitro, но и in vivo.
The separation of proteins from the culture filtrate Bacillus subtilis B-7025 by combining the
methods of protein precipitation by ammonium sulfate salt at various concentrations with a further
heat treatment is optimized. Three components with different molecular weights and a strong cytotoxicity against tumor cells (18 kDa, 70 kDa, and 7 kDa (lectin)) not only in vitro, but in vivo, are identified.
|
| first_indexed | 2025-12-02T09:01:32Z |
| format | Article |
| fulltext |
оповiдi
НАЦIОНАЛЬНОЇ
АКАДЕМIЇ НАУК
УКРАЇНИ
7 • 2012
МЕДИЦИНА
УДК 616-006.04:577.121:616-08
© 2012
Г.В. Дiденко, О. П. Кузьменко, Є. Г. Шпак, I. А. Тавровська,
М. А. Надiрашвiлi, I.О. Блюм, Г. П. Потебня
Оптимiзацiя методiв видiлення, електрофоретична
характеристика та протипухлинна ефективнiсть
цитотоксичних метаболiтiв iз фiльтрату культуральної
рiдини Bacillus subtilis В-7025
(Представлено членом-кореспондентом НАН України В.Л. Ганулом)
Проведено оптимiзацiю видiлення бiлкiв iз фiльтрару культуральної рiдини Bacillus sub-
tilis В-7025 шляхом об’єднання методiв осадження бiлкiв солями сульфату амонiю рiзної
концентрацiї з подальшою термообробкою. Виявлено три компоненти з рiзною молеку-
лярною масою, якi характеризуються вираженою цитотоксичнiстю щодо пухлинних
клiтин (18 кДа, 70 кДа та лектин 7 кДа) не тiльки в умовах in vitro, але i in vivo.
В останнi роки зростає iнтерес дослiдникiв до методiв бiотерапiї, зокрема iмунотерапiї хво-
рих онкологiчного профiлю [1, 2]. Одним iз перспективних пiдходiв є застосування проти-
пухлинних вакцин, виготовлених на основi пухлиноасоцiйованих антигенiв, дiя яких грун-
тується на формуваннi специфiчних реакцiй протипухлинного iмунiтету [3, 4]. Але бiльшiсть
пухлиноасоцiйованих антигенiв мають низьку iмуногеннiсть, що зумовлює необхiднiсть по-
шуку рiзноманiтних шляхiв пiдвищення ефективностi протипухлинних вакцин. Одним iз
них є посилення iмунної вiдповiдi на пухлиноасоцiйованi антигени за рахунок їх модифiкацiї
продуктами мiкробного синтезу [5]. Ефективними виявились, зокрема, метаболiти мiкроор-
ганiзму Bacillus subtilis В-7025, який є продуктом селекцiї штаму B. mesentericus АБ-56 [6].
Використання вакцин, виготовлених з аутологiчних пухлинних клiтин та фiльтрату куль-
туральної рiдини (ФКР) B. subtilis В-7025, дозволило збiльшити виживанiсть хворих на рак
шлунка, легенi, молочної залози, ободової та прямої кишки [7, 8]. Водночас електрофоре-
тична характеристика окремих складових ФКР B. subtilis В-7025 недостатньо дослiджена,
що гальмує їх подальше застосування при конструюваннi протипухлинних вакцин.
У зв’язку з вищесказаним актуальним i перспективним напрямком дослiджень стало
видiлення, характеристика та оцiнка протипухлинного ефекту компонентiв мiкробного син-
тезу B. subtilis В-7025. Це дасть можливiсть вдосконалити та стандартизувати технологiї
конструювання протипухлинних вакцин.
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2012, №7 185
Рис. 1. Електрофореграма компонентiв, отриманих за рахунок насичення розчину ФКР B. subtilis В-7025
солями сульфату амонiю в таких концентрацiях: 1 — 20%, 2 — 30%, 3 — 40%, 4 — 50%, 5 — 60%, 6 — 80%
Матерiали та методи. Для видiлення цитотоксичних компонентiв з ФКР B. subti-
lis В-7025 (10-та доба культивування) були використанi такi методи: етанольна преци-
пiтацiя [9], iонообмiнна хроматографiя на ДЕАЕ-целюлозi [10], колонкова хроматографiя
з ТOY0PEARL G10 та осадження бiлкiв сульфатом амонiю [11]. Бiлковий склад отрима-
них фракцiй контролювали за допомогою SDS-електрофорезу; їх цитотоксичну активнiсть
визначали in vitro за забарвленням пухлинних клiтин 0,4% розчином трипанового синього.
Морфологiчнi змiни в пухлинних клiтинах, викликанi цитотоксичною дiєю фракцiй, визна-
чали у фiксованих цитопрепаратах, забарвлених за методом Романовського–Гiмза. У дослi-
дах також використовували лiофiлiзований лектин, який входить до складу ФКР B. subti-
lis В-7025. Протипухлинний ефект застосування компонентiв мiкробного синтезу B. subtilis
В-7025 оцiнювали за середньою тривалiстю життя 37 мишей лiнiї С57Bl з перещепленою
карциномою легенi Льюїс та 33 мишей лiнiї Balb/с iз солiдною формою карциноми Ерлiха
(самцi вiком 2,5–3,5 мiс., масою 19–22 г). Тварини одержанi з розплiдника вiварiю Iнституту
експериментальної патологiї, онкологiї та радiобiологiї iм. Р.Є. Кавецького НАН України.
Перещеплення пухлин здiйснювали внутрiшньом’язово (1 · 106 кл/тварину). На другу добу
пiсля перещеплення проводили iн’єкцiї видiлених фракцiй у мiжлопаткову дiлянку тулуба
пiдшкiрно в об’ємi 0,3 мл/тварину раз на тиждень, протягом трьох тижнiв. Утримання ми-
шей та робота з ними здiйснювались у вiдповiдностi до загальноприйнятих мiжнародних
правил проведення робiт з експериментальними тваринами. Дослiдження виконанi з вико-
ристанням стандартних штамiв експериментальних пухлин, одержаних з клiтинного банку
тканин людини i тварин IЕПОР iм. Р.Є. Кавецького НАН України. Вiрогiднiсть рiзницi
мiж контрольними та дослiдними вимiрами оцiнювали, використовуючи t-критерiй Стью-
дента.
Результати дослiдження. Пiсля апробацiї ряду методiв, що перелiченi вище, нами
було обрано метод осадження бiлкiв сульфатом амонiю, оскiльки отриманi при цьому фрак-
цiї були насиченi окремими протеїдами в кiлькостi, достатнiй для приготування протипу-
хлинної вакцини i проведення експериментiв. Iншi апробованi методи мали певнi недолiки
(низький вихiд бiлоквмiсних компонентiв, недостатнiй рiвень подiлу на окремi компоненти).
Видiленi компоненти були бiльш чистими, їх осаджували в кiлькостi, достатнiй для про-
ведення подальших експериментiв (рис. 1). При насиченнi розчину ФКР B. subtilis В-7025
сульфатом амонiю до 40% було отримано фракцiю, збагачену протеїдом з молекулярною
масою близько 18,5 кДа — компонент 18,5 кДа. При насиченнi розчину ФКР сульфатом
амонiю вiд 40 до 70% утворювалася лише сумiш бiлкiв з рiзною молекулярною масою. При
186 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2012, №7
Рис. 2. Електрофореграма пептидiв, отриманих з ФКР B. subtilis В-7025 шляхом висолювання сульфа-
том амонiю при насиченнi в межах вiд 50% (1 ) до 90% (2 ) i pH = 4,4 (а — до термообробки, б — пiсля
термообробки) та лектину (в)
подальшому насиченнi розчину до 80% — видiлено високомолекулярнi бiлки майже в чис-
тому виглядi з молекулярною масою близько 70 кДа — компонент 70 кДа.
Ми спробували оптимiзувати процес видiлення високомолекулярних бiлкiв. Для цього
було поєднано метод осадження бiлкiв солями сульфату амонiю з подальшою термооброб-
кою (рис. 2). Досягнувши насичення ФКР сульфатом амонiю до 50% та вiдiбравши всi
попереднi фракцiї, ми знижували pH розчину до 4,4 (1 М розчином НСl) i доводили на-
сичення розчину ФКР сульфатом амонiю до 90%. Збирали останню фракцiю i пiддавали
її термообробцi (доводили до кипiння). Таким чином, незалежно вiд середовища, на якому
вирощували B. subtilis В-7025, за допомогою даного методу ми позбавлялися вiд бiльшостi
низькомолекулярних бiлкiв та майже вдвiчi збiльшували вихiд високомолекулярних проте-
їдiв, якi мали молекулярну масу близько 70 кДа.
Як видно з рис. 3, фракцiя, отримана при насиченнi ФКР солями сульфату амонiю
до 40%, мiстила в переважнiй кiлькостi протеїд з молекулярною масою 18,5 кДа та протя-
гом 1 год iнкубацiї з пухлинними клiтинами викликала загибель майже 100% клiтин. При
цьому пухлиннi клiтини збiльшувались в розмiрах, вiдбувалося полярне змiщення ядра
вiдносно цитоплазми, мембрана пухлинних клiтин залишалась гладкою. Фракцiя, видiлена
при насиченнi розчину ФКР B. subtilis В-7025 солями сульфату амонiю до 70%, майже не
виявляла цитотоксичного впливу на пухлиннi клiтини протягом 4 год iнкубацiї. Фракцiя,
отримана при насиченнi розчину ФКР B. subtilis В-7025 солями амонiю в межах вiд 70
до 90% та пiддана термообробцi (компонент 70 кДа), протягом годинної iнкубацiї з пух-
линними клiтинами викликала утворення на їх поверхнi кулеподiбних структур. Клiтини
тривалий час залишалися живими (до 3 год iнкубацiї). Загибель 100% пухлинних клiтин
спостерiгали при їх iнкубацiї з препаратом протягом 4 год. Третiм компонентом iз ци-
тотоксичною дiєю, видiленим iз ФКР B. subtilis В-7025, був лектин. Його цитотоксичну
та протипухлинну дiю детально проаналiзовано в рядi робiт [12, 13]. Важливим, на нашу
думку, було охарактеризувати видiлений лектин. Як видно з одержаної електрофореграми
(див. рис. 2), молекулярна маса лектину становила приблизно 7 кДа, що значно вiдрiзняло
його за цим показником вiд видiлених iз фiльтрату культуральної рiдини B. subtilis В-7025
компонентiв 18 та 70 кДа.
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2012, №7 187
Рис. 3. Цитотоксична дiя компонентiв, отриманих при насиченнi розчину фiльтрату культуральної рiдини
B. subtilis В-7025 рiзними концентрацiями сульфату амонiю (КПК — контроль пухлинних клiтин)
Оцiнка протипухлинної ефективностi видiлених фракцiй показала (табл. 1), що iмунiза-
цiя тварин сприяє збiльшенню середньої тривалостi життя, особливо у випадку карциноми
легенi Льюїс (P < 0,05).
Таким чином, проведенi дослiдження вказують на те, що у фiльтратi культуральної
рiдини B. subtilis В-7025 iснує три компоненти з вираженим цитотоксичним ефектом. Це
Таблиця 1. Середня тривалiсть життя (СТЖ) та iндекс збiльшення тривалостi життя (ЗТЖ) мишей з
пухлинами за умов iмунiзацiї цитотоксичними компонентами ФКР B. subtilis B-7025
Пухлина
Варiант
дослiду
Кiлькiсть
тварин СТЖ, доба ЗТЖ, %
Карцинома Контроль 10 28,7± 1,6 —
Ерлiха 18,5 кДа 12 32,2± 2,6 12,19
70 кДа 11 32,7± 4,7 13,93
Карцинома Контроль 13 27,2± 0,7 —
легенi 18,5 кДа 13 35,8± 0,8
∗ 31,44
Льюїс 70 кДа 11 40,5± 2,3
∗ 48,78
∗
P < 0,05 порiвняно з контролем.
188 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2012, №7
компоненти з молекулярною масою 18, 70 та 7 кДа (лектин). Дослiджуванi компоненти
мають не тiльки прямий цитотоксичний вплив на пухлиннi клiтини in vitro, але й дають
можливiсть збiльшити тривалiсть життя мишей з карциномою Ерлiха та карциномою легенi
Льюїс. Ймовiрно, що протипухлинний ефект дослiджених компонентiв фiльтрату культу-
ральної рiдини B. subtilis В-7025 in vivo обумовлений впливом на систему клiтинного та
гуморального iмунiтету тварин. Одержанi результати вказують на перспективнiсть засто-
сування цитотоксичних компонентiв iз фiльтрату культуральної рiдини B. subtilis В-7025
для вдосконалення i стандартизацiї технологiї конструювання протипухлинних вакцин.
1. Van de Velde A. L., Berneman Z.N., Van Tendeloo V. F. Immunotherapy of hematological malignancies
using dendritic cells // Bull. Cancer. – 2008. – 95. – P. 320–326.
2. Cheever M. A. Twelve immunotherapy drugs that could cure cancers // Immunol. Rev. – 2008. – 222. –
P. 357–368.
3. Sundstedt A., Celander M., Hedlund G. Combining tumor-targeted superantigens with interferon-alpha
results in synergistic anti-tumor effects // Int. Immunopharmacol. – 2008. – 8, No 3. – P. 442–452.
4. Galsky M., Eisenberger M., Moore-Cooper S. et al. Phase I trial of the prostate-specific membrane anti-
gen-directed immunoconjugate MLNo 2704. – in patients with progressive metastatic castration-resistant
prostate cancer // J. Clin. Oncol. – 2008. – 26, No 13. – P. 2147–2154.
5. Potebnya G. P. Cancer autovaccine (CAV) – new specific active antitumor agent // Science and innovati-
on. – 2006. – 4. – P. 26–27.
6. Ялкут С.И., Потебня Г.П. Биотерапия опухолей. – Киев: Книга Плюс, 2010. – 472 с.
7. Чехун В.Ф., Щепотiн I. Б., Потебня Г.П. та iн. Застосування протипухлинної аутовакцини в ком-
плексному лiкуваннi онкологiчних хворих: Метод. рекомендацiї. – Київ, 2008. – 23 с.
8. Lisovenko G. S., Potebnya G. P., Kolesnik E.A. et al. Application of tumor marker antigens on immuno-
therapy of patients with colorectal cancer // Exp. Oncol. – 2002. – 24, No 4. – P. 258–264.
9. Пастер Е.У., Овод В. В., Позур В.К. и др. Иммунология. Практикум. – Київ: Вища шк., 1989. –
304 с.
10. Barnard E.A. Hexokinase from yeast // Meth. Еnzymol. – 1975. – 42. – P. 6–20.
11. Скоупс Р. Методы очистки белков. – Москва: Мир, 1985. – 358 с.
12. Potebnya G., Cheremshenko N., Lisovenko G. et al. Tumor efficacy of vaccines prepared from chemoresi-
stant tumor cells with the use of lectin of B. subtilis B-7025 // Exp. oncol. – 2007. – 29, No 4. – P. 277–280.
13. Агеенко А.И. Новая диагностика рака: теория, диагностика, лечение, реабилитация. – Москва: Ме-
дицина XXI, 2004. – 408 с.
Надiйшло до редакцiї 27.01.2012Iнститут експериментальної патологiї,
онкологiї та радiобiологiї iм. Р.Є. Кавецького
НАН України, Київ
Луганський обласний онкологiчний диспансер
Г. В. Диденко, А. П. Кузьменко, Е. Г. Шпак, И. А. Тавровская,
Н.А Надирашвили, И. О. Блюм, Г. П. Потебня
Оптимизация методов выделения, електрофоретическая
характеристика и противоопухолевая эффективность
цитотоксических метаболитов из фильтрата культуральной
жидкости Bacillus subtilis В-7025
Оптимизирован процесс выделения белков из фильтрата культуральной жидкости Baci-
llus subtilis В-7025 путем объединения методов осаждения белков солями сульфата аммония
разной концентрации с дальнейшей термообработкой. Выявлены три компонента с разной
молекулярной массой, обладающие выраженной цитотоксичностью в отношении опухоле-
вых клеток (18 кДа, 70 кДа и лектин 7 кДа) не только in vitro, но и in vivo.
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2012, №7 189
G.V. Didenko, A. P. Kuzmenko, E.G. Shpak, I. A. Tawrovska,
N.A. Nadirashvili, I. O. Blum, G.P. Potebnya
Optimization of the methods of isolation, electrophoretic
characterization, and antitumor efficacy of cytotoxic metabolites from
the culture filtrate Bacillus subtilis B-7025
The separation of proteins from the culture filtrate Bacillus subtilis B-7025 by combining the
methods of protein precipitation by ammonium sulfate salt at various concentrations with a further
heat treatment is optimized. Three components with different molecular weights and a strong cyto-
toxicity against tumor cells (18 kDa, 70 kDa, and 7 kDa (lectin)) not only in vitro, but in vivo,
are identified.
190 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2012, №7
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-84319 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 1025-6415 |
| language | Ukrainian |
| last_indexed | 2025-12-02T09:01:32Z |
| publishDate | 2012 |
| publisher | Видавничий дім "Академперіодика" НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Діденко, Г.В. Кузьменко, О.П. Шпак, Є.Г. Тавровська, І.А. Надірашвілі, М.А. Блюм, І.О. Потебня, Г.П. 2015-07-06T11:31:33Z 2015-07-06T11:31:33Z 2012 Оптимізація методів виділення, електрофоретична характеристика та протипухлинна ефективність цитотоксичних метаболітів із фільтрату культуральної рідини Bacillus subtilis В-7025 / Г.В. Дiденко, О.П. Кузьменко, Є. Г. Шпак, I.А. Тавровська, М.А. Надiрашвiлi, I.О. Блюм, Г.П. Потебня // Доп. НАН України. — 2012. — № 7. — С. 185-190. — Бібліогр.: 13 назв. — укр. 1025-6415 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/84319 616-006.04:577.121:616-08 Проведено оптимiзацiю видiлення бiлкiв iз фiльтрару культуральної рiдини Bacillus subtilis В-7025 шляхом об’єднання методiв осадження бiлкiв солями сульфату амонiю рiзної концентрацiї з подальшою термообробкою. Виявлено три компоненти з рiзною молекулярною масою, якi характеризуються вираженою цитотоксичнiстю щодо пухлинних клiтин (18 кДа, 70 кДа та лектин 7 кДа) не тiльки в умовах in vitro, але i in vivo. Оптимизирован процесс выделения белков из фильтрата культуральной жидкости Bacillus subtilis В-7025 путем объединения методов осаждения белков солями сульфата аммония разной концентрации с дальнейшей термообработкой. Выявлены три компонента с разной молекулярной массой, обладающие выраженной цитотоксичностью в отношении опухолевых клеток (18 кДа, 70 кДа и лектин 7 кДа) не только in vitro, но и in vivo. The separation of proteins from the culture filtrate Bacillus subtilis B-7025 by combining the methods of protein precipitation by ammonium sulfate salt at various concentrations with a further heat treatment is optimized. Three components with different molecular weights and a strong cytotoxicity against tumor cells (18 kDa, 70 kDa, and 7 kDa (lectin)) not only in vitro, but in vivo, are identified. uk Видавничий дім "Академперіодика" НАН України Доповіді НАН України Медицина Оптимізація методів виділення, електрофоретична характеристика та протипухлинна ефективність цитотоксичних метаболітів із фільтрату культуральної рідини Bacillus subtilis В-7025 Оптимизация методов выделения, електрофоретическая характеристика и противоопухолевая эффективность цитотоксических метаболитов из фильтрата культуральной жидкости Bacillus subtilis В-7025 Optimization of the methods of isolation, electrophoretic characterization, and antitumor efficacy of cytotoxic metabolites from the culture filtrate Bacillus subtilis B-7025 Article published earlier |
| spellingShingle | Оптимізація методів виділення, електрофоретична характеристика та протипухлинна ефективність цитотоксичних метаболітів із фільтрату культуральної рідини Bacillus subtilis В-7025 Діденко, Г.В. Кузьменко, О.П. Шпак, Є.Г. Тавровська, І.А. Надірашвілі, М.А. Блюм, І.О. Потебня, Г.П. Медицина |
| title | Оптимізація методів виділення, електрофоретична характеристика та протипухлинна ефективність цитотоксичних метаболітів із фільтрату культуральної рідини Bacillus subtilis В-7025 |
| title_alt | Оптимизация методов выделения, електрофоретическая характеристика и противоопухолевая эффективность цитотоксических метаболитов из фильтрата культуральной жидкости Bacillus subtilis В-7025 Optimization of the methods of isolation, electrophoretic characterization, and antitumor efficacy of cytotoxic metabolites from the culture filtrate Bacillus subtilis B-7025 |
| title_full | Оптимізація методів виділення, електрофоретична характеристика та протипухлинна ефективність цитотоксичних метаболітів із фільтрату культуральної рідини Bacillus subtilis В-7025 |
| title_fullStr | Оптимізація методів виділення, електрофоретична характеристика та протипухлинна ефективність цитотоксичних метаболітів із фільтрату культуральної рідини Bacillus subtilis В-7025 |
| title_full_unstemmed | Оптимізація методів виділення, електрофоретична характеристика та протипухлинна ефективність цитотоксичних метаболітів із фільтрату культуральної рідини Bacillus subtilis В-7025 |
| title_short | Оптимізація методів виділення, електрофоретична характеристика та протипухлинна ефективність цитотоксичних метаболітів із фільтрату культуральної рідини Bacillus subtilis В-7025 |
| title_sort | оптимізація методів виділення, електрофоретична характеристика та протипухлинна ефективність цитотоксичних метаболітів із фільтрату культуральної рідини bacillus subtilis в-7025 |
| topic | Медицина |
| topic_facet | Медицина |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/84319 |
| work_keys_str_mv | AT dídenkogv optimízacíâmetodívvidílennâelektroforetičnaharakteristikataprotipuhlinnaefektivnístʹcitotoksičnihmetabolítívízfílʹtratukulʹturalʹnoírídinibacillussubtilisv7025 AT kuzʹmenkoop optimízacíâmetodívvidílennâelektroforetičnaharakteristikataprotipuhlinnaefektivnístʹcitotoksičnihmetabolítívízfílʹtratukulʹturalʹnoírídinibacillussubtilisv7025 AT špakêg optimízacíâmetodívvidílennâelektroforetičnaharakteristikataprotipuhlinnaefektivnístʹcitotoksičnihmetabolítívízfílʹtratukulʹturalʹnoírídinibacillussubtilisv7025 AT tavrovsʹkaía optimízacíâmetodívvidílennâelektroforetičnaharakteristikataprotipuhlinnaefektivnístʹcitotoksičnihmetabolítívízfílʹtratukulʹturalʹnoírídinibacillussubtilisv7025 AT nadírašvílíma optimízacíâmetodívvidílennâelektroforetičnaharakteristikataprotipuhlinnaefektivnístʹcitotoksičnihmetabolítívízfílʹtratukulʹturalʹnoírídinibacillussubtilisv7025 AT blûmío optimízacíâmetodívvidílennâelektroforetičnaharakteristikataprotipuhlinnaefektivnístʹcitotoksičnihmetabolítívízfílʹtratukulʹturalʹnoírídinibacillussubtilisv7025 AT potebnâgp optimízacíâmetodívvidílennâelektroforetičnaharakteristikataprotipuhlinnaefektivnístʹcitotoksičnihmetabolítívízfílʹtratukulʹturalʹnoírídinibacillussubtilisv7025 AT dídenkogv optimizaciâmetodovvydeleniâelektroforetičeskaâharakteristikaiprotivoopuholevaâéffektivnostʹcitotoksičeskihmetabolitovizfilʹtratakulʹturalʹnoižidkostibacillussubtilisv7025 AT kuzʹmenkoop optimizaciâmetodovvydeleniâelektroforetičeskaâharakteristikaiprotivoopuholevaâéffektivnostʹcitotoksičeskihmetabolitovizfilʹtratakulʹturalʹnoižidkostibacillussubtilisv7025 AT špakêg optimizaciâmetodovvydeleniâelektroforetičeskaâharakteristikaiprotivoopuholevaâéffektivnostʹcitotoksičeskihmetabolitovizfilʹtratakulʹturalʹnoižidkostibacillussubtilisv7025 AT tavrovsʹkaía optimizaciâmetodovvydeleniâelektroforetičeskaâharakteristikaiprotivoopuholevaâéffektivnostʹcitotoksičeskihmetabolitovizfilʹtratakulʹturalʹnoižidkostibacillussubtilisv7025 AT nadírašvílíma optimizaciâmetodovvydeleniâelektroforetičeskaâharakteristikaiprotivoopuholevaâéffektivnostʹcitotoksičeskihmetabolitovizfilʹtratakulʹturalʹnoižidkostibacillussubtilisv7025 AT blûmío optimizaciâmetodovvydeleniâelektroforetičeskaâharakteristikaiprotivoopuholevaâéffektivnostʹcitotoksičeskihmetabolitovizfilʹtratakulʹturalʹnoižidkostibacillussubtilisv7025 AT potebnâgp optimizaciâmetodovvydeleniâelektroforetičeskaâharakteristikaiprotivoopuholevaâéffektivnostʹcitotoksičeskihmetabolitovizfilʹtratakulʹturalʹnoižidkostibacillussubtilisv7025 AT dídenkogv optimizationofthemethodsofisolationelectrophoreticcharacterizationandantitumorefficacyofcytotoxicmetabolitesfromtheculturefiltratebacillussubtilisb7025 AT kuzʹmenkoop optimizationofthemethodsofisolationelectrophoreticcharacterizationandantitumorefficacyofcytotoxicmetabolitesfromtheculturefiltratebacillussubtilisb7025 AT špakêg optimizationofthemethodsofisolationelectrophoreticcharacterizationandantitumorefficacyofcytotoxicmetabolitesfromtheculturefiltratebacillussubtilisb7025 AT tavrovsʹkaía optimizationofthemethodsofisolationelectrophoreticcharacterizationandantitumorefficacyofcytotoxicmetabolitesfromtheculturefiltratebacillussubtilisb7025 AT nadírašvílíma optimizationofthemethodsofisolationelectrophoreticcharacterizationandantitumorefficacyofcytotoxicmetabolitesfromtheculturefiltratebacillussubtilisb7025 AT blûmío optimizationofthemethodsofisolationelectrophoreticcharacterizationandantitumorefficacyofcytotoxicmetabolitesfromtheculturefiltratebacillussubtilisb7025 AT potebnâgp optimizationofthemethodsofisolationelectrophoreticcharacterizationandantitumorefficacyofcytotoxicmetabolitesfromtheculturefiltratebacillussubtilisb7025 |