Морфологічна характеристика мікроінкапсульованої тканини аденоми прищитоподібної залози людини в умовах in vitro
Показана висока життєздатнiсть i морфофункцiональна активнiсть мiкроiнкапсульованої тканини аденоми прищитоподiбної залози людини в умовах in vitro, що свiдчить про можливiсть її використання як трансплантата при компенсацiї гiпофункцiонального стану паратиреоїдної системи в експериментi на тваринах...
Saved in:
| Date: | 2009 |
|---|---|
| Main Authors: | , , |
| Format: | Article |
| Language: | Ukrainian |
| Published: |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
2009
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8535 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Морфологічна характеристика мікроінкапсульованої тканини аденоми прищитоподібної залози людини в умовах in vitro / М.Д. Тронько, I.А. Балла, I.П. Пастер // Доп. НАН України. — 2009. — № 5. — С. 205-208. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-8535 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Тронько, М.Д. Балла, І.А. Пастер, І.П. 2010-06-08T09:55:56Z 2010-06-08T09:55:56Z 2009 Морфологічна характеристика мікроінкапсульованої тканини аденоми прищитоподібної залози людини в умовах in vitro / М.Д. Тронько, I.А. Балла, I.П. Пастер // Доп. НАН України. — 2009. — № 5. — С. 205-208. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. 1025-6415 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8535 577.34:611.018.72:616.447 Показана висока життєздатнiсть i морфофункцiональна активнiсть мiкроiнкапсульованої тканини аденоми прищитоподiбної залози людини в умовах in vitro, що свiдчить про можливiсть її використання як трансплантата при компенсацiї гiпофункцiонального стану паратиреоїдної системи в експериментi на тваринах. A high viability and a morphofunctional activity of microencapsulated human adenoma parathyroid tissue are shown under in vitro conditions, which suggests its possible use as a graft in the presence of a compensated hypofunctional state of the parathyroid system experimentally on animals. uk Видавничий дім "Академперіодика" НАН України Біологія Морфологічна характеристика мікроінкапсульованої тканини аденоми прищитоподібної залози людини в умовах in vitro Morphological characteristic of microencapsulated human adenoma parathyroid tissue in vitro Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Морфологічна характеристика мікроінкапсульованої тканини аденоми прищитоподібної залози людини в умовах in vitro |
| spellingShingle |
Морфологічна характеристика мікроінкапсульованої тканини аденоми прищитоподібної залози людини в умовах in vitro Тронько, М.Д. Балла, І.А. Пастер, І.П. Біологія |
| title_short |
Морфологічна характеристика мікроінкапсульованої тканини аденоми прищитоподібної залози людини в умовах in vitro |
| title_full |
Морфологічна характеристика мікроінкапсульованої тканини аденоми прищитоподібної залози людини в умовах in vitro |
| title_fullStr |
Морфологічна характеристика мікроінкапсульованої тканини аденоми прищитоподібної залози людини в умовах in vitro |
| title_full_unstemmed |
Морфологічна характеристика мікроінкапсульованої тканини аденоми прищитоподібної залози людини в умовах in vitro |
| title_sort |
морфологічна характеристика мікроінкапсульованої тканини аденоми прищитоподібної залози людини в умовах in vitro |
| author |
Тронько, М.Д. Балла, І.А. Пастер, І.П. |
| author_facet |
Тронько, М.Д. Балла, І.А. Пастер, І.П. |
| topic |
Біологія |
| topic_facet |
Біологія |
| publishDate |
2009 |
| language |
Ukrainian |
| publisher |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Morphological characteristic of microencapsulated human adenoma parathyroid tissue in vitro |
| description |
Показана висока життєздатнiсть i морфофункцiональна активнiсть мiкроiнкапсульованої тканини аденоми прищитоподiбної залози людини в умовах in vitro, що свiдчить про можливiсть її використання як трансплантата при компенсацiї гiпофункцiонального стану паратиреоїдної системи в експериментi на тваринах.
A high viability and a morphofunctional activity of microencapsulated human adenoma parathyroid tissue are shown under in vitro conditions, which suggests its possible use as a graft in the presence of a compensated hypofunctional state of the parathyroid system experimentally on animals.
|
| issn |
1025-6415 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8535 |
| citation_txt |
Морфологічна характеристика мікроінкапсульованої тканини аденоми прищитоподібної залози людини в умовах in vitro / М.Д. Тронько, I.А. Балла, I.П. Пастер // Доп. НАН України. — 2009. — № 5. — С. 205-208. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. |
| work_keys_str_mv |
AT tronʹkomd morfologíčnaharakteristikamíkroínkapsulʹovanoítkaniniadenomipriŝitopodíbnoízalozilûdinivumovahinvitro AT ballaía morfologíčnaharakteristikamíkroínkapsulʹovanoítkaniniadenomipriŝitopodíbnoízalozilûdinivumovahinvitro AT pasteríp morfologíčnaharakteristikamíkroínkapsulʹovanoítkaniniadenomipriŝitopodíbnoízalozilûdinivumovahinvitro AT tronʹkomd morphologicalcharacteristicofmicroencapsulatedhumanadenomaparathyroidtissueinvitro AT ballaía morphologicalcharacteristicofmicroencapsulatedhumanadenomaparathyroidtissueinvitro AT pasteríp morphologicalcharacteristicofmicroencapsulatedhumanadenomaparathyroidtissueinvitro |
| first_indexed |
2025-11-26T02:45:07Z |
| last_indexed |
2025-11-26T02:45:07Z |
| _version_ |
1850609205143142400 |
| fulltext |
УДК 577.34:611.018.72:616.447
© 2009
Член-кореспондент НАН України М. Д. Тронько, I.А. Балла,
I.П. Пастер
Морфологiчна характеристика мiкроiнкапсульованої
тканини аденоми прищитоподiбної залози людини
в умовах in vitro
Показана висока життєздатнiсть i морфофункцiональна активнiсть мiкроiнкапсульо-
ваної тканини аденоми прищитоподiбної залози людини в умовах in vitro, що свiдчить
про можливiсть її використання як трансплантата при компенсацiї гiпофункцiональ-
ного стану паратиреоїдної системи в експериментi на тваринах.
Однiєю з найбiльш важливих проблем трансплантологiї є запобiгання реакцiї вiдторгнення
трансплантата органiзмом реципiєнта, для чого застосовують як супресивну терапiю, так
i метод мiкроiнкапсуляцiї фрагментiв тканини або суспензiї клiтин в альгiнатнi мiкрокапсу-
ли з напiвпроникними мембранами [1, 2]. Такi капсули проникнi для гормонiв, поживних
речовин, метаболiтiв i кисню, але не проникнi для основних компонентiв iмунної системи [3].
У роботi наведено морфологiчну характеристику мiкроiнкапсульованої тканини аденоми
прищитоподiбної залози людини в умовах in vitro.
Аденома прищитоподiбної залози людини була отримана в хiрургiчному вiддiленнi клi-
нiки Державної установи “Iнститут ендокринологiї та обмiну речовин iм. В.П. Комiсаренка
АМН України”. Паратиреоїдну тканину промивали декiлька разiв стерильним 0,9%-м роз-
чином хлориду натрiю з антибiотиками (з розрахунку 100 ОД бензилпенiцилiну натрiєвої
солi та 100 мкг стрептомiцину сульфату на 1 мл розчину), очищали вiд жирової та сполу-
чної тканин, пiсля чого сiкли на шматочки розмiром до 1 мм3 та знову промивали декiлька
разiв стерильним 0,9%-м розчином хлориду натрiю з антибiотиками.
Шматочки тканини прищитоподiбної залози людини переносили в робочий розчин аль-
гiнату, який попередньо готували за розробленим нами методом [4]. Мiкроiнкапсуляцiю
паратиреоїдної тканини в альгiнатнi мiкрокапсули проводили за стандартним методом, роз-
робленим для мiкроiнкапсуляцiї ендокринних тканин (зокрема, пiдшлункової та прищито-
подiбної залоз) [5], у нашiй модифiкацiї [6]. Пiсля завершення процедури мiкроiнкапсуляцiї
альгiнатнi мiкрокапсули з шматочками паратиреоїдної тканини людини повторно промива-
ли кiлька разiв 0,9%-м розчином хлориду натрiю i культивували по 5 мiкрокапсул в куль-
туральних флакончиках з 2 мл середовища RPMI-1640 (“Sigma”, США), яке мiстило 10%
iнактивованої нагрiванням сироватки новонародженого теляти (“INC Biomedicals GmbH”,
Нiмеччина) i антибiотики, при постiйному обертаннi з частотою 10–12 об/год i температурi
37 ◦С. Змiну середовища культивування проводили через добу.
На 1-шу, 3-тю, 5-ту, 7-му i 9-ту добу культивування для гiстологiчного дослiдження вiд-
бирали альгiнатнi мiкрокапсули з паратиреоїдною тканиною людини, якi фiксували в рiдинi
Буена протягом 18 год, двiчi вiдмивали в 40◦ етиловому спиртi, зневоднювали в спиртах
зростаючої концентрацiї (40◦, 50◦, 60◦, 70◦, 80◦, 90◦, 96◦), двiчi просвiтлювали в ксилолi по
5 хв та заливали в Paraplast X-tra (“Sigma”, США) при 55 ◦С. Мiкротомнi зрiзи завтовшки
5 мкм забарвлювали гематоксилiном-еозином, пiсля чого проводили стандартнi гiстологiчнi
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2009, №5 205
Рис. 1. Мiкроiнкапсульована тканина аденоми прищитоподiбної залози людини на 1-шу (а), 3-тю (б ),
7-му (в) та 9-ту (г) добу культивування. Забарвлення гематоксилiном-еозином. Об. 20, ок. 10
дослiдження, вимiрювали товщину альгiнатних мiкрокапсул та оцiнювали вiдносний розмiр
життєздатної залозистої паренхiми тканини прищитоподiбної залози за допомогою гвинто-
вого окуляр-мiкрометра i окулярної вставки-сiтки вiдповiдно.
Результати наших дослiджень показали, що альгiнатнi мiкрокапсули, всереденi яких мi-
стяться шматочки тканини аденоми прищитоподiбної залози людини, мають досить пружну
консистенцiю, переважно сферичну (iнодi краплиноподiбну) форму та розмiри 1–2 мм у дi-
аметрi. Товщина стiнки мiкрокапсули, як правило, рiвномiрна i не перевищує 0,2 мм з усiх
сторiн вiд шматочка паратиреоїдної тканини. Гелеподiбна мiкрокапсула щiльно прилягає
до тканини прищитоподiбної залози i заповнює заглибини, утворенi за рахунок нерiвностей
країв шматочкiв тканини.
Мiкроiнкапсульована тканина аденоми прищитоподiбної залози людини складається зде-
бiльшого з паратиреоцитiв полiгональної та округлої форми, в яких свiтла дрiбнозерниста
та еозинофiльна цитоплазма мiстить кулеподiбнi нормохромнi та свiтлi ядра. Також зустрi-
чаються безядернi клiтини з нечiткими межами, гомогенно забарвленою еозинофiльною
цитоплазмою та пiкнотичними ядрами.
Гiстологiчнi дослiдження свiдчать про те, що пiсля 1-ї доби культивування однорiдна
альгiнатна мiкрокапсула з рiвним краєм i пологими iнвагiнацiями щiльно прилягає до па-
ратиреоїдної тканини. Паратиреоцити полiгональної та округлої форми зi свiтлою дрiбно-
зернистою та еозинофiльною цитоплазмою з кулеподiбними нормохромними та свiтлими
ядрами. Розшарування клiтин всерединi шматочкiв тканини свiдчить про незначний на-
бряк. По периферiї шматочка спостерiгається тонкий шар клiтинного детриту (рис. 1, а).
206 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2009, №5
У 3-добовiй культурi альгiнатнi мiкрокапсули не зазнають iстотних змiн, однак поверх-
невий шар бiополiмеру подекуди має розшарування. Мiкрокапсули мають чiткi хвилястi
зовнiшнi межi, а їх внутрiшнiй шар щiльно прилягає до паратиреоїдної тканини людини,
яка починає зазнавати деяких змiн. Так, паратиреоцити щiльно прилягають один до одного,
а їх межi стають бiльш чiткими i хвилястими. Всерединi великих шматочкiв тканини помi-
тнi групи клiтин з нечiткими межами та карiолiзисом, має мiсце еозинофiлiя цитоплазми,
що свiдчить про звичайну для культивованої тканини iшемiю. Однак бiльша частина пара-
тиреоїдної тканини залишається життєздатною (див. рис. 1, б ).
На 5-ту добу культивування в переважнiй частинi мiкрокапсул альгiнат щiльно при-
лягає до тканини та має щiльний поверхневий шар. Однак в одиничних мiкрокапсулах
утворюються незначнi щiлини мiж бiополiмером та фрагментом тканини. У цей термiн
спостерiгається подальше зростання кiлькостi клiтин з еозинофiльною гомогенною цито-
плазмою та пiкнотичними ядрами. Проте близько 2/3 площi зрiзу шматочкiв ендокринної
тканини представленi паратиреоцитами з круглими нормохромними ядрами та свiтлою ци-
топлазмою, об’єм якої дещо зменшується порiвняно з попереднiми строками.
На 7-му добу культивування будова стiнки альгiнатних мiкрокапсул видимих змiн порiв-
няно з попереднiм строком не зазнає. Мiкроiнкапсульована паратиреоїдна тканина людини
на 1/3 складається зi свiтлих полiгональних паратиреоцитiв з мозаїчно розташованими
деструктивно змiненими клiтинами. У всiх тканинних фрагментах зустрiчаються зони цен-
трального некрозу, так само як i в неiнкапсульованiй тканинi (див. рис. 1, в).
9-добова культура мiкроiнкапсульованої тканини аденоми прищитоподiбної залози лю-
дини представлена розташованими досить широкою смугою по зовнiшньому краю фраг-
ментами життєздатної паренхiми зi свiтлими паратиреоцитами та нормохромними ядрами
(див. рис. 1, г). Для внутрiшньої частини шматочкiв паратиреоїдної тканини характернi
еозинофiлiя цитоплазми та пiкнотизацiя ядер паратиреоцитiв без чiтких меж. Незначний
набряк у цiй частинi паратиреоїдної тканини свiдчить про її початкове iшемiчне ураження,
яке, однак, iстотно не вiдрiзняється вiд аналогiчного процесу в неiнкапсульованих фрагмен-
тах контрольних зразкiв цiєї ж тканини i цього ж строку культивування.
Вiдомо, що нативна та мiкроiнкапсульована тканина прищитоподiбної залози людини
мають близький рiвень життєздатностi в умовах in vitro [7]. Результати наших попереднiх
дослiджень показали високу функцiональну активнiсть (зокрема, здатнiсть iнтенсивно про-
дукувати паратгормон та адекватно реагувати на вплив позаклiтинного кальцiю) мiкроiн-
капсульованої тканини аденоми прищитоподiбної залози людини в умовах in vitro [8], що
робить її придатною для використання як трансплантата при компенсацiї гiпофункцiональ-
ного стану паратиреоїдної системи.
Деформацiя альгiнатних мiкрокапсул, яка спостерiгається в рiзнi строки культивування
(див. рис. 1), є наслiдком нерiвномiрного видалення води в процесi гiстологiчної обробки
препаратiв [9]. За допомогою розроблених нами способiв дослiдження фiзичних власти-
востей альгiнатних мiкрокапсул [10, 11] була показана пряма залежнiсть їх механiчної та
осмотичної стiйкостi вiд концентрацiї бiополiмеру [12]. Вiдомо, що найбiльш механiчно ре-
зистентними є бiополiмернi мiкрокапсули, якi виготовленi з альгiнату з високим вмiстом
гулуронової кислоти [13] та мають суцiльну структуру [14, 15].
Таким чином, показана висока життєздатнiсть i морфофункцiональна активнiсть мi-
кроiнкапсульованої тканини аденоми прищитоподiбної залози людини в умовах in vitro, що
свiдчить про можливiсть її використання як трансплантата при компенсацiї гiпофункцiо-
нального стану паратиреоїдної системи в експериментi на тваринах.
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2009, №5 207
1. Smidsrød O., Skj̊ak-Bræk G. Alginate as immobilization matrix for cells // Trends Biotechnol. – 1990. –
8, No 3. – P. 71–78.
2. Zimmermann U., Mimietz S., Zimmermann H. et al. Hydrogel-based non-autologous cell and tissue the-
rapy // BioTechniques. – 2000. – 29, No 3. – P. 564–581.
3. Zimmermann U., Cramer H., Jork A. et al. Microencapsulation-based cell therapy // Biotechnology / Ed.
by H.-J. Rehm, G. Reed. – Weinheim: Wiley-VCH, 2001. – P. 548–571.
4. Пат. 20265 Україна, МПК7 C 12 N 11/10. Процес приготування водного розчину альгiнату, при-
значеного для виготовлення мiкрокапсул / I.П. Пастер, М.Д. Тронько. – Опубл. 15.01.2007, Бюл.
№ 1.
5. Zimmermann U., Hasse C., Rothmund M., Kühtreiber W. Biocompatible encapsulation materials: funda-
mentals and application // Cell encapsulation technology and therapeutics / Eds. by W.M. Kühtreiber,
R.P. Lanza, W.L. Chick. – Boston: Birkhäuser, 1999. – P. 40–52.
6. Пат. 27283 Україна, МПК7 C 12 N 1/00, C 12 N 5/00. Процес мiкроiнкапсуляцiї клiтин i тканини
прищитоподiбної залози в альгiнатнi мiкрокапсули / I.П. Пастер, М. Д. Тронько. – Опубл. 25.10.2007,
Бюл. № 17.
7. Lee C.H., Wang Y. J., Kuo S.M., Chang S. J. Microencapsulation of parathyroid tissue with photosensitive
poly(L-lysine) and short chain alginate-co-MPEG // Artif. Organs. – 2004. – 28, No 6. – P. 537–542.
8. Пастер I.П. Функцiональна характеристика мiкроiнкапсульованої тканини аденоми паращитовидної
залози людини в умовах in vitro // Доп. НАН України. – 2007. – № 9. – С. 174–179.
9. de Vos P., Hamel A.F., Tatarkiewicz K. Considerations for successful transplantation of encapsulated
pancreatic islets // Diabetologia. – 2002. – 45, No 2. – P. 159–173.
10. Пат. 15729 Україна, МПК 7 G 01 N 33/15, C 12 N 5/00, A 61 B 10/00. Процес визначення механiчної
стiйкостi альгiнатних капсул, призначених для мiкроiнкапсуляцiї тканин або клiтин / I.П. Пастер,
М.Д. Тронько. – Опубл. 17.07.2006, Бюл. № 7.
11. Пат. 15730 Україна, МПК 7 G 01 N 33/15, C 12 N 5/00, A 61 B 10/00. Процес визначення осмотичної
стiйкостi альгiнатних капсул, призначених для мiкроiнкапсуляцiї тканин або клiтин / I.П. Пастер,
М.Д. Тронько. – Опубл. 17.07.2006, Бюл. № 7.
12. Тронько М.Д., Пастер I.П. Залежнiсть механiчної та осмотичної стабiльностi альгiнатних капсул
вiд концентрацiї полiмеру // Доп. НАН України. – 2006. – № 11. – С. 167–171.
13. Martinsen A., Skj̊ak-Bræk G., Smidsrød O. Alginate as immobilization material: I. Correlation between
chemical and physical properties of alginate gel beads // Biotechnol. and Bioeng. – 1989. – 33, No 1. –
P. 79–89.
14. Orive G., Hernández R.M., Gascón A.R. et al. Survival of different cell lines in alginate-agarose mi-
crocapsules // Eur. J. Pharmaceutical Sci. – 2003. – 18, No 1. – P. 23–30.
15. Van Raamsdonk J.M., Chang P. L. Osmotic pressure test: a simple, quantitative method to assess the
mechanical stability of alginate microcapsules // J. Biomed. Mater. Res. – 2001. – 54, No 2. – P. 264–271.
Надiйшло до редакцiї 23.12.2008Державна установа “Iнститут ендокринологiї
та обмiну речовин iм. В.П. Комiсаренка
АМН України”, Київ
Corresponding Member of the NAS of Ukraine M. D. Tronko, I. A. Balla,
I. P. Pasteur
Morphological characteristic of microencapsulated human adenoma
parathyroid tissue in vitro
A high viability and a morphofunctional activity of microencapsulated human adenoma parathyroid
tissue are shown under in vitro conditions, which suggests its possible use as a graft in the presence
of a compensated hypofunctional state of the parathyroid system experimentally on animals.
208 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2009, №5
|