Влияние острого рентгеновского облучения на эпигеном в ходе онтогенеза Linum usitatissimum
Исследованы изменения эпигенома в онтогенезе Linum usitatissimum, подверженного действию разных доз острого рентгеновского облучения. Статус метилирования определен методом метилчувствительной полимеразной цепной реакции. Обнаружена зависимость повышения уровня метилирования от дозы облучения, уста...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Доповіді НАН України |
|---|---|
| Datum: | 2013 |
| 1. Verfasser: | |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russian |
| Veröffentlicht: |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
2013
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/85908 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Влияние острого рентгеновского облучения на эпигеном в ходе онтогенеза Linum usitatissimum / А.Н. Берестяная // Доповiдi Нацiональної академiї наук України. — 2013. — № 9. — С. 157–163. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-85908 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Берестяная, А.Н. 2015-08-31T16:21:16Z 2015-08-31T16:21:16Z 2013 Влияние острого рентгеновского облучения на эпигеном в ходе онтогенеза Linum usitatissimum / А.Н. Берестяная // Доповiдi Нацiональної академiї наук України. — 2013. — № 9. — С. 157–163. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. 1025-6415 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/85908 577.24:577.2.043 Исследованы изменения эпигенома в онтогенезе Linum usitatissimum, подверженного действию разных доз острого рентгеновского облучения. Статус метилирования определен методом метилчувствительной полимеразной цепной реакции. Обнаружена зависимость повышения уровня метилирования от дозы облучения, установлены эпигенетические изменения в процессе старения листьев Linum usitatissimum. Дослiджено змiни епiгеному в онтогенезi Linum usitatissimum, що зазнав дiї рiзних доз гострого рентгенiвського опромiнення. Статус метилування визначено методом метилчутливої полiмеразної ланцюгової реакцiї. Виявлено залежнiсть пiдвищення рiвня метилування вiд дози опромiнення, встановлено епiгенетичнi змiни в процесi старiння листкiв Linum usitatissimum. The ontogenesis changes of the epigenome of Linum usitatissimum are investigated. This object was subjected to the action of different irradiation doses. Methylation status was determined by methylsensitive PCR. The study found the increasing dependence on the dose of methylation, and the epigenetic changes during the aging leaves of Linum usitatissimum are established. ru Видавничий дім "Академперіодика" НАН України Доповіді НАН України Біологія Влияние острого рентгеновского облучения на эпигеном в ходе онтогенеза Linum usitatissimum Вплив гострого рентгенiвського опромiнення на епiгеном у ходi онтогенезу Linum usitatissimum Effects of hard X-ray radiation on the epigenome during ontogenesis of Linum usitatissimum Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Влияние острого рентгеновского облучения на эпигеном в ходе онтогенеза Linum usitatissimum |
| spellingShingle |
Влияние острого рентгеновского облучения на эпигеном в ходе онтогенеза Linum usitatissimum Берестяная, А.Н. Біологія |
| title_short |
Влияние острого рентгеновского облучения на эпигеном в ходе онтогенеза Linum usitatissimum |
| title_full |
Влияние острого рентгеновского облучения на эпигеном в ходе онтогенеза Linum usitatissimum |
| title_fullStr |
Влияние острого рентгеновского облучения на эпигеном в ходе онтогенеза Linum usitatissimum |
| title_full_unstemmed |
Влияние острого рентгеновского облучения на эпигеном в ходе онтогенеза Linum usitatissimum |
| title_sort |
влияние острого рентгеновского облучения на эпигеном в ходе онтогенеза linum usitatissimum |
| author |
Берестяная, А.Н. |
| author_facet |
Берестяная, А.Н. |
| topic |
Біологія |
| topic_facet |
Біологія |
| publishDate |
2013 |
| language |
Russian |
| container_title |
Доповіді НАН України |
| publisher |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Вплив гострого рентгенiвського опромiнення на епiгеном у ходi онтогенезу Linum usitatissimum Effects of hard X-ray radiation on the epigenome during ontogenesis of Linum usitatissimum |
| description |
Исследованы изменения эпигенома в онтогенезе Linum usitatissimum, подверженного
действию разных доз острого рентгеновского облучения. Статус метилирования определен методом метилчувствительной полимеразной цепной реакции. Обнаружена зависимость повышения уровня метилирования от дозы облучения, установлены эпигенетические изменения в процессе старения листьев Linum usitatissimum.
Дослiджено змiни епiгеному в онтогенезi Linum usitatissimum, що зазнав дiї рiзних доз гострого рентгенiвського опромiнення. Статус метилування визначено методом метилчутливої полiмеразної ланцюгової реакцiї. Виявлено залежнiсть пiдвищення рiвня метилування вiд дози опромiнення, встановлено епiгенетичнi змiни в процесi старiння листкiв Linum usitatissimum.
The ontogenesis changes of the epigenome of Linum usitatissimum are investigated. This object
was subjected to the action of different irradiation doses. Methylation status was determined by
methylsensitive PCR. The study found the increasing dependence on the dose of methylation, and
the epigenetic changes during the aging leaves of Linum usitatissimum are established.
|
| issn |
1025-6415 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/85908 |
| citation_txt |
Влияние острого рентгеновского облучения на эпигеном в ходе онтогенеза Linum usitatissimum / А.Н. Берестяная // Доповiдi Нацiональної академiї наук України. — 2013. — № 9. — С. 157–163. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT berestânaâan vliânieostrogorentgenovskogooblučeniânaépigenomvhodeontogenezalinumusitatissimum AT berestânaâan vplivgostrogorentgenivsʹkogooprominennânaepigenomuhodiontogenezulinumusitatissimum AT berestânaâan effectsofhardxrayradiationontheepigenomeduringontogenesisoflinumusitatissimum |
| first_indexed |
2025-11-24T11:42:42Z |
| last_indexed |
2025-11-24T11:42:42Z |
| _version_ |
1850845437803626496 |
| fulltext |
оповiдi
НАЦIОНАЛЬНОЇ
АКАДЕМIЇ НАУК
УКРАЇНИ
9 • 2013
БIОЛОГIЯ
УДК 577.24:577.2.043
А.Н. Берестяная
Влияние острого рентгеновского облучения на эпигеном
в ходе онтогенеза Linum usitatissimum
(Представлено академиком НАН Украины Д. М. Гродзинским)
Исследованы изменения эпигенома в онтогенезе Linum usitatissimum, подверженного
действию разных доз острого рентгеновского облучения. Статус метилирования опре-
делен методом метилчувствительной полимеразной цепной реакции. Обнаружена за-
висимость повышения уровня метилирования от дозы облучения, установлены эпиге-
нетические изменения в процессе старения листьев Linum usitatissimum.
Старение как запрограммированный процесс возрастания деградационных изменений ор-
ганизма в ходе онтогенеза обусловлено комплексным взаимодействием генетического аппа-
рата и повреждающих факторов различной природы. Связующим звеном в данном взаимо-
действии выступает эпигеном, как динамическая система контроля экспрессии генов. Она
может как ослаблять, так и усиливать действие повреждающих факторов на геном и вы-
ступать в роли регулятора реализации генетической программы возрастной деградации.
В процессе старения cнижается общий уровень метилирования генома, параллельно ослаб-
ляются механизмы репарации, увеличивается число мутаций и хромосомных аномалий,
осуществляется экспрессия ряда гидролитических ферментов, все это усиливает негатив-
ное действие таких повреждающих факторов, как радиация. Известно, что рентгеновская
радиация индуцирует изменения в эпигеноме растений. Биологическая эффективность дан-
ного вида радиации во многих случаях выше эффективности других видов радиоактивных
излучений и химических мутагенов [1, 2].
На сегодня является актуальным выяснение эпигенетической компоненты в механизмах
регуляции старения, обусловленного реализацией генетической программы и действием пов-
реждающих факторов. Исходя из этого, целью исследования было установление влияния
радиационного облучения на эпигеном в ходе старения вегетативных органов растения Li-
num usitatissimum.
Материалы и методы. Семена L. usitatissimum подвергали воздействию острого рент-
геновского облучения в четырех дозах: 10, 20, 50 и 100 Гр. В качестве источника излучения
© А.Н. Берестяная, 2013
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2013, №9 157
использовали рентгеновский аппарат “РУМ-17”. Растения выращивали в условиях вегета-
ционного опыта. Объектом исследования была ДНК семядольных листьев.
Геномную ДНК семядольных листьев L. usitatissimum выделяли модифицированным
СТАБ-методом, очищали путем фенольной экстракции, осаждали этанолом, растворя-
ли в TE-буфере (10 мM трис-HCl, pH 8,0; 1 мM ЭДТА), концентрацию доводили до
0,2 мкг/мкл [3, 4]. Исследовали эпигеном методом метилчувствительной полимеразной це-
пной реакции (МЧ-ПЦР). В основе метода МЧ-ПЦР лежит принцип взаимодействия ме-
тилчувствительных рестриктаз со специфическими сайтами узнавания ДНК [5, 6]. Каждый
из образцов ДНК в количестве 1 мкг подвергали гидролизу в 20 мкл реакционной смеси,
содержащей 10 ед. акт. метилчувствительной рестриктазы HpaII в реакционном буфере,
рекомендованном производителем, при 37 ◦С в течение 2 ч. Аналогично рестрикцию осу-
ществляли с рестриктазой SmaI. По окончании инкубации 1 мкл каждой реакционной сме-
си использовали для последующей амплификации с соответствующими праймерами. Для
тотального скрининга статуса метилирования CG-динуклеотидов в геноме использовали
CG-богатые праймеры. Метилирование регуляторного фрагмента гена rrn5, продуктом ко-
торого является 5S рРНК, определяли методом специфической МЧ-ПЦР с праймерами,
фланкирующими сайт узнавания фермента в исследуемом участке ДНК. Дизайн прайме-
ров, использованных в работе, был выполнен с помощью программ Primer3 (v.0.4.0) на
основании нуклеотидных последовательностей, зарегистрированных в GenBank (табл. 1).
Контролем полноты прохождения гидролитической реакции служила ПЦР рестриктов, по-
лученных при идентичных условиях после гидролиза эндонуклеазой рестрикции MspI, не
чувствительной к метилированию цитозинов. Амплификацию проводили в 25 мкл реак-
ционной смеси на приборе “Терцик” (“ДНК-Технология”, Россия) с использованием набора
для ПЦР (“MBI Fermentas”). Условия термоциклирования были оптимизированы для каж-
дого из амплифицируемых фрагментов.
ПЦР-продукты разделяли электрофорезом в 1,7% агарозном геле (“Sigma”, США).
В лунку геля наносили по 10 мкл ПЦР-смеси. Для электрофореза применяли 0,5хТБЕ-бу-
фер (0,09 Трис, 0,09 М борной кислоты, 2 мМ ЭДТА, pH 8,0). Продукты реакции в ге-
ле визуализировали с помощью трансиллюминатора Vilber Lourmat ECX-15M (Франция)
с длиной волны 312 нм, фотографировали в УФ-свете фотокамерой Sony DSC-W320.
Результаты и обсуждения. Метод МЧ-ПЦР позволяет анализировать статус мети-
лирования как отдельных фрагментов генов, так и проводить тотальный скрининг диф-
ференциально метилированных CG-динуклеотидов в геноме. На первом этапе МЧ-ПЦР
происходит гидролиз ДНК метилчувствительными рестриктазами, на втором — амплифи-
кация исследуемых участков путем ПЦР. Присутствие метилированного цитозина в сайте
узнавания метилчувствительной рестриктазы блокирует ферментативную реакцию, рас-
щепления по сайту не происходит, следовательно, дальнейшая ПЦР с праймеров, соответст-
Таблица 1. Структура праймеров, использованных в МЧ-ПЦР
Праймеры Структура праймеров
К регуляторному фрагменту гена rrn5 5′-GCA TGA AGA CGA AGG CGG СС-3′
5′-ACG AGG ACT TCC CAC GCC GG-3′
Для тотального скрининга 5′-AAC CCT CAC CCT AAC CGC GG-3′
CG-богатых участков генома 5′-AAC CCT CAC CCT AAC CCG CG-3′
5′-GCA CCT GGG TTG ATG GCC GG-3′
5′-TTA GGG AAT AGT GGT CGG CC-3′
158 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2013, №9
вующих участкам ДНК, вокруг сайта узнавания амплифицирует те фрагменты, в которых
есть метилированный цитозин. Если в исследуемом сайте неметилирован цитозин, то ме-
тиличувствительная рестриктаза расщепляет его и при последующей ПЦР не образуются
продукты амплификации [7, 8]. С помощью метода МЧ-ПЦР мы провели полногеномный
анализ CG-участков, а также скрининг метилирования сайтов метилчувствительных рес-
тритаз HpaII и SmaI в регуляторном участке гена rrn5 с целью обнаружения изменений
эпигенетического статуса под действием облучения в ходе онтогенеза L. usitatissimum [9].
Полногеномный анализ CG-участков и отдельного гена позволяет определить статус
метилирования в динамике и проследить характер его изменения. Так как задачей ис-
следования было определение эпигенетических изменений в образцах, облученных дозами
ионизирующего облучения в ходе онтогенеза, мы строили исследование таким образом, что-
бы фиксировать параметры на разных стадиях. Стадии онтогенеза семядольных листьев
условно обозначили как: С1, С2, С3, С4, каждая из которых соответствует этапам морфо-
логически и биохимически значимых изменений.
В ходе тотального скрининга CG-богатых участков генома методом МЧ-ПЦР мы уста-
новили наличие дозовой зависимости. С увеличением дозы облучения возникали дополни-
тельные продукты реакции, что указывало на появление новых сайтов метилирования под
действием облучения острой рентгеновской радиацией (рис. 1, а).
Наличие дополнительных ампликонов в облученных образцах свидетельствует о том,
что радиация спровоцировала метилирование сайта метилчувствительной рестриктазы
HpaII. Для рестриктазы SmaI картина была аналогичной. Именно данные продукты
ПЦР и представляют главный предмет наших поисков. Вероятно, гиперметилированные
HpaII-сайты могут выступать в роли эпигенетических маркеров радиационного облучения.
Исследование метилирования фрагмента гена rrn5 также показало наличие дозозависимых
изменений, выраженных в появлении дополнительных сайтов метилирования в облученных
образцах (см. рис. 1, б ).
В процессе старения листьев L. usitatissimum наблюдалось снижение уровня метилиро-
вания CG-динуклеотидов генома, а также изменение статуса метилирования во фрагменте
гена rrn5 в облученных образцах (см. рис. 1, в, г). Статус метилирования фрагмента ге-
на rrn5 изменился в сторону уменьшения модифицированных сайтов. Та картина дозовой
зависимости повышения уровня метилирования, которая наблюдалась на начальной ста-
дии отногенеза (см. рис. 1, а, б ), нивелировалась в процессе перехода к поздним стадиям
онтогенеза.
Скрининг сайтов метилирования с помощью МЧ-ПЦР показал дозозависимое увели-
чение метилированных последовательностей преимущественно на начальных стадиях он-
тогенеза, однако на более поздних этапах запускаются процессы возрастного гипомети-
лирования CG-динуклеотидов и в опытных образцах наблюдается картина значительного
уменьшения метилированных HpaII-сайтов. Реакция с ферментом MspI не позволила выя-
вить различия в профиле метилирования ДНК на разных стадиях онтогенеза по сайтам
узнавания этой рестриктазы в контролях и облученных вариантах, так как с продуктами
гидролиза этой рестриктазы, расщепляющей метилированные и неметилированные после-
довательности, не происходит амплификации в ходе МЧ-ПЦР.
Живые организмы постоянно находятся под воздействием ионизирующего излучения
из природных источников. Растения, в отличие от животных, обладают большей устойчи-
востью к ионизирующей радиации. Тем не менее за счет того, что энергия заряженных
частиц значительно превышает энергию внутримолекулярных связей, ионизирующее излу-
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2013, №9 159
Рис. 1. Результаты скрининга CG-участков генома (а, в) и фрагмента гена rrn5 (б, г) путем МЧ-ПЦР
в образцах, облученных разными дозами рентгеновской радиации
чение способно проникать внутрь объекта и вызывать изменения его структур, повреж-
дать химические связи молекул, входящих в состав клеток, нарушать клеточные струк-
туры, процессы обмена веществ и физиологические функции целостного организма. Все
это, в свою очередь, способствует активации деградационных механизмов, сопровождаю-
щих старение [10].
Радиация может вызывать гипо- и гиперметилирование сайт-специфических участков
ДНК, что отражается на работе генов. Эпигеномные эффекты напрямую зависят от доз,
видов и способов облучения и специфики объектов, подвергшихся воздействию [11]. Так, на-
пример, повышение уровня радиации вызывает у Arabidopsis и у других монокарпических
растений увеличение тотального метилирования генома и гетерохроматиновых гистонов,
что может рассматриваться как реакция стрессоустойчивости, необходимая для адапта-
ции растений. Происходит это за счет активации процесса de novo метилирования ДНК,
160 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2013, №9
обусловленного ответной реакцией на рост стресс-индуцированной транспозонной актив-
ности [12]. Существует гипотеза, что метилирование обеспечивает стабилизацию генома,
поддерживая его постоянство в изменяющихся условиях. Это подтверждается тем, что
искусственное снижение метилирования ДНК вызывает повышение уровня транспозонной
активности и хромосомных перестроек. Под действием абиотического стресса также мо-
жет происходить деацетилирование гистонов и деметилирование сайт-специфических по-
следовательностей, что ведет к тотальному гипометилированию, сопряженному с ростом
геномной нестабильности [13].
Обнаруженное в нашем опыте дозозависимое повышение уровня метилирования под
действием рентгеновского облучения может быть обусловлено транспозонной активацией,
вызывающей дополнительное метилирование. Вместе с тем картина возрастного снижения
числа модифицированных сайтов облученных образцов объясняется процессами гипомети-
лирования, происходящими в геноме стареющих клеток.
Существует предположение, что снижение уровня метилирования с возрастом являет-
ся общебиологическим процессом, присущим как животным, так и некоторым монокар-
пическим растениям, у которых можно наблюдать в динамике четкую картину возраст-
ной деградации. Множество экспериментов свидетельствуют о том, что старение живот-
ных клеток и уменьшение метилирования являются взаимосвязанными процессами [14].
Однако результаты опытов, проведенных на растительных организмах, не столь однознач-
ны касательно возрастного падения уровня метилирования суммарной ДНК и отдельных
функциональных последовательностей. На примере некоторых генов наблюдается обрат-
ный возрастному гипометилированию эффект. В процессе старения происходит вариабель-
ное метилирование цитозина в палиндромах, наблюдается как понижение и повышение,
так и поддержание стабильного уровня метилирования в зависимости от специфики изу-
чаемых последовательностей [15]. Тем не менее изучение возрастной динамики метилиро-
вания ДНК может служить биологическим маркером определения темпов старения орга-
низма.
Метилирование ДНК растений варьирует в ходе онтогенеза, с момента прорастания
семян до терминальных стадий развития, как отдельных органов, так и целостного расти-
тельного организма. Существуют четкие возрастные изменения паттернов метилирования
ДНК у растений. Переход к каждой новой стадии онтогенеза характеризуется изменением
эпигенетического статуса, обеспечивающего активацию или репрессию специфического на-
бора генов. Одни гены метилируются по мере старения организма, другие, напротив, теря-
ют метилированные сайты, вследствие деметилирования или вырезания модифицирован-
ных участков. При старении происходят изменения метилирования CpG-динуклеотидов.
Образование неактивных участков хроматина приводит к инактивации генов в процессе
старения [12].
Гипометилирование осуществляется путем уменьшения активности поддерживающих
ДНК-метилаз либо посредством ферментативного удаления метильных групп из ДНК. По-
следнее играет важную роль в реакциях поддержания эпигеномной пластичности в усло-
виях действия стрессовых факторов. Происходящая в результате деметилирования актива-
ция генов супрессорных белков приводит к подавлению гена ДНК-метилазы. Таким обра-
зом, возрастное деметилирование запускает каскад реакций дополнительного деметилиро-
вания [11]. С возрастом падает метилирование промоторов регуляторных генов, таких как
группы SAG (senescence associated genes), в результате чего происходит активация этих
генов, ведущая к репрессии клеточных функций.
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2013, №9 161
Вариабельная экспрессия генов в онтогенезе растений обусловлена как генетическими,
так и эпигенетическими процессами. Стрессовые факторы окружающей среды посредством
эпигенома оказывают влияние на реализацию генетических программ растений [14].
В эксперименте получены данные, свидетельствующие о различии профилей метилиро-
вания ДНК семядольных листьев L. usitatissimum по сайтам узнавания метилчувствитель-
ных рестриктаз HpaII и SmaI на начальной и конечной стадиях онтогенеза. В конце онто-
генеза листьев наблюдалось более низкое содержание сайтов узнавания этих эндонуклеаз,
чем в начале. Воздействие нескольких доз острого рентгеновского облучения вызвало про-
цессы дополнительного метилирования, т. е. повышение числа сайтов узнавания метилчув-
ствительных рестриктаз в органе облученного растения. Это свидетельствует о способности
эпигенома изменяться под действием повреждающих факторов внешней среды. Возрастное
снижение числа модифицированных HpaII-сайтов во всех образцах объясняется процесса-
ми гипометилирования, происходящими в геноме стареющих клеток. Эпигеномный эффект,
вызванный облучением на ранней стадии онтогенеза листа, в процессе старения нивелиро-
вался под влиянием внутренних деградационных процессов. Хотя особенности изменения
эпигенома в процессе старения тканей и органов L. usitatissimum еще не выяснены пол-
ностью, анализ дифференциального метилирования ДНК на разных стадиях онтогенеза
растения под влиянием такого стрессового фактора, как радиация, может привести к бо-
лее полному пониманию механизмов регуляции старения и поможет определить, какая из
компонент — средовая или генетическая — вносит больший вклад в процессы возрастной
деградации.
1. Берестяна А.М., Гродзинський Д.М. Роль мутагенних факторiв в процесi старiння живих органi-
змiв // Наук. вiсн. Ужгород. ун-ту. Серiя Бiологiя. – 2011. – № 30. – С. 118–127.
2. Галицкий В.А. Эпигенетическая природа старения // Цитология. – 2009. – 51, № 5. – С. 388–397.
3. Остроумов Л.А., Просеков А.Ю., Мудрикова О.В. Метод выделения растительной ДНК из растений
и продуктов питания на их основе // Изв. Самар. науч. центра РАН. – 2010. – 12, № 4. – С. 722–724.
4. Azmi K., Schonian G., Abdeen Z. Methods incorporating a polymerase chain reaction and restriction
fragment length polymorphism and their use as a gold standard in diagnosing Old World cutaneous lei-
shmaniasis // Diagn. Microbiol. Infect. Dis. – 2011. – 71, No 2. – P. 151–155.
5. Benhattar J., Clement G. Methylation-sensitive. Single-strand conformation analysis: a rapid method to
screen for and analyze DNA methylation. Methods // Mol.-Biol. – 2004. – 287. – P. 181–193.
6. Keyte A. L., Percifield R., Liu B. et al. Infraspecific DNA Methylation Polymorphism in Cotton (Gossy-
pium hirsutum L.) // J. Heredity. – 2006. – 97, No 5. – P. 444–450.
7. Guo W.L., Wu R., Zhang Y.F. et al. Tissue culture-induced locus-specific alteration in DNA methylation
and its correlation with genetic variation in Codonopsis lanceolata Benth. et Hook. f // Plant Cell Rep. –
2007. – 26, No 8. – P. 1297–1307.
8. Кузнецова Е. Б., Стрельников В.В. Методы анализа метилирования ДНК // Мед. генетика. – 2006. –
11. – С. 3–11.
9. Берестяна А.М., Гродзинський Д.М., Крiпка Г.В. Вiковi змiни метилування ДНК сiм’ядольних
листкiв Linum usitatissimum за умови УФ-В опромiнення // Доп. НАН України. – 2011. – № 7. –
С. 143–147.
10. Косаковская И.В. Стрессовые белки растений. – Киев: Вид-во фiтосоцiол. центру, 2008. – 154 с.
11. Viswanathan C., Zhu J. RNA-directed DNA methylation and demethylation in plants // Sci. China. Ser.
C: Life Sci. – 2009. – 52, No 4. – P. 331–343.
12. Kalisz S., Purugganan M. Epialleles via DNA methylation: consequences for plant evolution // Trends
Ecol. and Evolut. – 2004. – 19. – P. 309–314.
13. Kapazoglou A., Tsaftaris A. Epigenetic Chromatin Regulators as Mediators of Abiotic Stress Responses in
Cereals // Agricultural and Biological Sciences. Abiotic Stress in Plants – Mechanisms and Adaptations. –
2011. – Ch. 17. – P. 395–414.
14. Vanyushin B. F., Ashapkin V.V. DNA Methylation in Plants. – New York: Nova Science, 2011. – 152 p.
162 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2013, №9
15. Brown J. C., Decker M.M., Fieldes M.A. A comparative analysis of developmental profiles for DNA
methylation in 5-azacytidine-induced early-flowering flax lines and their control // Plant Sci. – 2008. –
175. – P. 217–225.
Поступило в редакцию 21.02.2013Институт клеточной биологии и генетической
инженерии НАН Украины, Киев
А.М. Берестяна
Вплив гострого рентгенiвського опромiнення на епiгеном у ходi
онтогенезу Linum usitatissimum
Дослiджено змiни епiгеному в онтогенезi Linum usitatissimum, що зазнав дiї рiзних доз го-
строго рентгенiвського опромiнення. Статус метилування визначено методом метилчут-
ливої полiмеразної ланцюгової реакцiї. Виявлено залежнiсть пiдвищення рiвня метилуван-
ня вiд дози опромiнення, встановлено епiгенетичнi змiни в процесi старiння листкiв Linum
usitatissimum.
A.N. Berestyanaya
Effects of hard X-ray radiation on the epigenome during ontogenesis of
Linum usitatissimum
The ontogenesis changes of the epigenome of Linum usitatissimum are investigated. This object
was subjected to the action of different irradiation doses. Methylation status was determined by
methylsensitive PCR. The study found the increasing dependence on the dose of methylation, and
the epigenetic changes during the aging leaves of Linum usitatissimum are established.
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2013, №9 163
|