Вплив онкогенів на експресію рецепторних тирозинкіназ у пухлинах щитоподібної залози
Проведено порiвняльний аналiз злоякiсних та доброякiсних пухлин щитоподiбної залози вiдносно експресiї трансформованих та незмiнених рецепторних тирозинкiназ (TRK, RET/PTC, RET, MET, EGFR). Дослiджено 35 папiлярних карцином та 24 фолiкулярнi аденоми. Встановлено, що рiвень експресiї реаранжованих он...
Збережено в:
| Дата: | 2009 |
|---|---|
| Автори: | , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Ukrainian |
| Опубліковано: |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України
2009
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8668 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Вплив онкогенів на експресію рецепторних тирозинкіназ у пухлинах щитоподібної залози / Л. Г. Воскобойник, Т. I. Богданова, М.Д. Тронько // Доп. НАН України. — 2009. — № 6. — С. 179-185. — Бібліогр.: 13 назв. — укр. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-8668 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Воскобойник, Л.Г. Богданова, Т.І. Тронько, М.Д. 2010-06-14T10:50:06Z 2010-06-14T10:50:06Z 2009 Вплив онкогенів на експресію рецепторних тирозинкіназ у пухлинах щитоподібної залози / Л. Г. Воскобойник, Т. I. Богданова, М.Д. Тронько // Доп. НАН України. — 2009. — № 6. — С. 179-185. — Бібліогр.: 13 назв. — укр. 1025-6415 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8668 616.441-006:616-076:575.191:614.876 Проведено порiвняльний аналiз злоякiсних та доброякiсних пухлин щитоподiбної залози вiдносно експресiї трансформованих та незмiнених рецепторних тирозинкiназ (TRK, RET/PTC, RET, MET, EGFR). Дослiджено 35 папiлярних карцином та 24 фолiкулярнi аденоми. Встановлено, що рiвень експресiї реаранжованих онкогенiв у злоякiсних пухлинах щитоподiбної залози вiрогiдно вищий, нiж у доброякiсних новоутвореннях. Крiм того, наявнiсть генетичних порушень у папiлярних карциномах щитоподiбної залози була асоцiйована з посиленням експресiї генiв, що кодують рецепторнi тирозинкiнази. Для фолiкулярних аденом такої залежностi не виявлено. The comparative analysis of benign and malignant thyroid tumors regarding the expression of receptor tyrosine kinases both transformed and intact (TRK, RET/PTC, RET, MET, EGFR) was carried out. 35 papillary carcinomas and 24 follicular adenomas of thyroid were studied. It was shown that the frequency of rearranged oncogenes was significantly higher in malignant thyroid tumors as compared to benign thyroid tumors. We note that the presence of genetic abnormalities in papillary thyroid carcinomas were associated with increasing the expression levels of genes which encode the receptor tyrosine kinases. In follicular thyroid adenomas, such features were absent. uk Видавничий дім "Академперіодика" НАН України Біологія Вплив онкогенів на експресію рецепторних тирозинкіназ у пухлинах щитоподібної залози Effects of oncogenes on the expression of receptor tyrosine kinase in thyroid tumors Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Вплив онкогенів на експресію рецепторних тирозинкіназ у пухлинах щитоподібної залози |
| spellingShingle |
Вплив онкогенів на експресію рецепторних тирозинкіназ у пухлинах щитоподібної залози Воскобойник, Л.Г. Богданова, Т.І. Тронько, М.Д. Біологія |
| title_short |
Вплив онкогенів на експресію рецепторних тирозинкіназ у пухлинах щитоподібної залози |
| title_full |
Вплив онкогенів на експресію рецепторних тирозинкіназ у пухлинах щитоподібної залози |
| title_fullStr |
Вплив онкогенів на експресію рецепторних тирозинкіназ у пухлинах щитоподібної залози |
| title_full_unstemmed |
Вплив онкогенів на експресію рецепторних тирозинкіназ у пухлинах щитоподібної залози |
| title_sort |
вплив онкогенів на експресію рецепторних тирозинкіназ у пухлинах щитоподібної залози |
| author |
Воскобойник, Л.Г. Богданова, Т.І. Тронько, М.Д. |
| author_facet |
Воскобойник, Л.Г. Богданова, Т.І. Тронько, М.Д. |
| topic |
Біологія |
| topic_facet |
Біологія |
| publishDate |
2009 |
| language |
Ukrainian |
| publisher |
Видавничий дім "Академперіодика" НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Effects of oncogenes on the expression of receptor tyrosine kinase in thyroid tumors |
| description |
Проведено порiвняльний аналiз злоякiсних та доброякiсних пухлин щитоподiбної залози вiдносно експресiї трансформованих та незмiнених рецепторних тирозинкiназ (TRK, RET/PTC, RET, MET, EGFR). Дослiджено 35 папiлярних карцином та 24 фолiкулярнi аденоми. Встановлено, що рiвень експресiї реаранжованих онкогенiв у злоякiсних пухлинах щитоподiбної залози вiрогiдно вищий, нiж у доброякiсних новоутвореннях. Крiм того, наявнiсть генетичних порушень у папiлярних карциномах щитоподiбної залози була асоцiйована з посиленням експресiї генiв, що кодують рецепторнi тирозинкiнази. Для фолiкулярних аденом такої залежностi не виявлено.
The comparative analysis of benign and malignant thyroid tumors regarding the expression of receptor tyrosine kinases both transformed and intact (TRK, RET/PTC, RET, MET, EGFR) was carried out. 35 papillary carcinomas and 24 follicular adenomas of thyroid were studied. It was shown that the frequency of rearranged oncogenes was significantly higher in malignant thyroid tumors as compared to benign thyroid tumors. We note that the presence of genetic abnormalities in papillary thyroid carcinomas were associated with increasing the expression levels of genes which encode the receptor tyrosine kinases. In follicular thyroid adenomas, such features were absent.
|
| issn |
1025-6415 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/8668 |
| citation_txt |
Вплив онкогенів на експресію рецепторних тирозинкіназ у пухлинах щитоподібної залози / Л. Г. Воскобойник, Т. I. Богданова, М.Д. Тронько // Доп. НАН України. — 2009. — № 6. — С. 179-185. — Бібліогр.: 13 назв. — укр. |
| work_keys_str_mv |
AT voskoboiniklg vplivonkogenívnaekspresíûreceptornihtirozinkínazupuhlinahŝitopodíbnoízalozi AT bogdanovatí vplivonkogenívnaekspresíûreceptornihtirozinkínazupuhlinahŝitopodíbnoízalozi AT tronʹkomd vplivonkogenívnaekspresíûreceptornihtirozinkínazupuhlinahŝitopodíbnoízalozi AT voskoboiniklg effectsofoncogenesontheexpressionofreceptortyrosinekinaseinthyroidtumors AT bogdanovatí effectsofoncogenesontheexpressionofreceptortyrosinekinaseinthyroidtumors AT tronʹkomd effectsofoncogenesontheexpressionofreceptortyrosinekinaseinthyroidtumors |
| first_indexed |
2025-11-27T08:22:56Z |
| last_indexed |
2025-11-27T08:22:56Z |
| _version_ |
1850805714858016768 |
| fulltext |
УДК 616.441-006:616-076:575.191:614.876
© 2009
Л.Г. Воскобойник, Т. I. Богданова,
член-кореспондент НАН України М. Д. Тронько
Вплив онкогенiв на експресiю рецепторних
тирозинкiназ у пухлинах щитоподiбної залози
Проведено порiвняльний аналiз злоякiсних та доброякiсних пухлин щитоподiбної залози
вiдносно експресiї трансформованих та незмiнених рецепторних тирозинкiназ (TRK,
RET/PTC, RET, MET, EGFR). Дослiджено 35 папiлярних карцином та 24 фолiкулярнi
аденоми. Встановлено, що рiвень експресiї реаранжованих онкогенiв у злоякiсних пухли-
нах щитоподiбної залози вiрогiдно вищий, нiж у доброякiсних новоутвореннях. Крiм
того, наявнiсть генетичних порушень у папiлярних карциномах щитоподiбної залози
була асоцiйована з посиленням експресiї генiв, що кодують рецепторнi тирозинкiнази.
Для фолiкулярних аденом такої залежностi не виявлено.
Вiдомо, що рецепторнi тирозинкiнази (РТК) вiдiграють важливу роль у тиреоїдному канце-
рогенезi. Розрiзняють два механiзми активацiї тирозинкiназ: один з них реалiзується шля-
хом формування нових, так званих химерних, онкогенiв, iнший — внаслiдок посилення екс-
пресiї незмiнених генiв [1]. Процес утворення онкогенiв вiдбувається таким чином. Окремi
гени, що кодують РТК i мають класичну будову — екстраклiтинний (ЕК), трансмембранний
(ТМ) та внутрiшньоклiтинний тирозинкiназний (ТК) фрагменти, здатнi до реаранжуван-
ня. Внаслiдок iнверсiї чи транслокацiї нуклеотидна послiдовнiсть ТК може сполучатися
з фрагментом iншого гена, що й призводить до формування онкогена.
Прикладом зазначених онкогенiв є TRK. Шляхом iнверсiї ТК послiдовнiсть гена NTRK1
(рецептор фактору росту нервiв) з’єднується з часткою iншого гена, що розташований на
тiй самiй хромосомi [2]. Iснують декiлька рiзних форм онкогенiв TRK, спiльною озна-
кою яких є наявнiсть ТК послiдовностi гена NTRK1. Вiдрiзняються зазначенi онкогени
так званими генами-партнерами, що беруть участь у їх формуваннi (TPM, TPR, TFG).
Оскiльки експресiя NTRK1 не вiдбувається в клiтинах щитоподiбної залози (ЩЗ), ме-
тод виявлення онкогенiв TRK є вiдносно простим. Проводять полiмеразну ланцюгову ре-
акцiю (ПЛР) з праймерами до ТК послiдовностi гена NTRK1 та пiдтверджують резуль-
тати за допомогою блотингу за Саузерном. За даними лiтератури, експресiя TRK вiд-
бувається в 0–12% папiлярних карцином (ПК) ЩЗ [1, 2]. На українських пiслячорно-
бильських пухлинах подiбнi дослiдження не проводилися. Крiм того, у лiтературi вiд-
сутнi данi про можливiсть чи неможливiсть виникнення TRK у доброякiсних пухли-
нах ЩЗ.
Iнший приклад онкогенiв — RET/PTC. Механiзм їх утворення аналогiчний, змiнюються
лише субстрати. Джерелом ТК є RET (трансмембранний рецептор фактору росту клiтин
глiального походження). У лiтературi описанi 16 рiзних форм онкогенiв RET/PTC, якi,
як i TRK, вiдрiзняються генами-партнерами [3]. На вiдмiну вiд NTRK1, експресiя RET
властива нейросекреторним С-клiтинам ЩЗ. Крiм того, деякi дослiдники вважають, що
невисокий рiвень експресiї RET вiдбувається i в клiтинах ПК ЩЗ [4]. Тому методичнi
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2009, №6 179
пiдходи щодо виявлення онкогенiв RET/PTC вiдрiзняються вiд тих, що використовують
для TRK. Наявнiсть RET/PTC визначають за допомогою численних ПЛР з праймерами
до рiзних онкогенiв. Альтернативним є метод кiлькiсної ПЛР у реальному часi (real-time
PCR) — визначають рiвень експресiї ТК та ЕК фрагментiв та оцiнюють їх спiввiдношен-
ня [4, 5]. Наявнiсть RET/PTC встановлено в 20–85% ПК ЩЗ [3, 6–7]. У той же час данi
лiтератури про експресiю зазначених онкогенiв у доброякiсних пухлинах ЩЗ є суперечли-
вими [3, 8].
Вiдомо, що онкогени RET/PTC та TRK обумовлюють появу химерних бiлкiв з тиро-
зинкiназною активнiстю, якi через RAS i далi RAF кiнази активують МАРК каскад, що й
призводить до пролiферацiї та дедиференцiювання тиреоїдного епiтелiю [3].
Необхiдно зауважити, що в клiтинах ЩЗ присутнi iншi не трансформованi РТК, зокре-
ма EGFR та MET (рецептори епiтелiального фактору росту та фактору росту гепатоцитiв
вiдповiдно). Доведено, що в деяких ПК ЩЗ їх кiлькiсть зростає [9, 10]. Iснує думка, що
активацiя МАРК каскаду призводить до посилення експресiї гена MET [10]. Можливо,
що аналогiчний механiзм регуляцiї також властивий i для EGFR та iнших генiв, що коду-
ють РТК. У зв’язку з цим становить iнтерес дослiдження пiслячорнобильських ПК, якi,
як вiдомо, характеризуються високим вiдсотком перебудов RET/PTC [6]. Саме тому мета
наших дослiджень полягала в проведеннi порiвняльного аналiзу доброякiсних та злоякiс-
них пухлин ЩЗ щодо експресiї генiв РТК, як трансформованих, так i незмiнених (TRK,
RET/PTC, RET, MET, EGFR).
Дослiджено 35 ПК та 24 фолiкулярнi аденоми (ФА) ЩЗ. В усiх випадках дослiджено
також вiдносно незмiнену (НТ) тканину ЩЗ (59 випадкiв). Екстракцiю РНК проведено iз
заморожених зразкiв з реагентом TRIzol (“Sigma”, США) згiдно з рекомендацiями виро-
бника. Адекватнiсть матерiалу оцiнено на заморожених зрiзах, що були виготовленi перед
екстракцiєю. Патогiстологiчний дiагноз встановлено в лабораторiї морфологiї ендокринної
системи ДУ “Iнститут ендокринологiї та обмiну речовин iм. В. П. Комiсаренка АМН Украї-
ни” i додатково верифiковано мiжнародною групою експертiв-патологiв [11]. Середнiй вiк
пацiєнтiв на момент операцiї був майже однаковим в обох дослiджених групах (21±5 рокiв
для ПК i 23 ± 7 рокiв для ФА).
Реакцiю зворотної транскрипцiї для отримання кДНК та оцiнку її якостi проводили за
методами, що описанi ранiше [12]. Наявнiсть онкогенiв TRK визначали за допомогою ПЛР
з наступним пiдтвердженням результатiв блотингом за Саузерном. Послiдовнiсть прай-
мерiв i зондiв, умови проведення ПЛР та блотингу описанi в роботi [12]. Для визначен-
ня онкогенiв RET/PTC та гена RET використовували кiлькiсну ПЛР в реальному часi.
Умови її проведення описанi ранiше [5]. Рiвень експресiї генiв MET та EGFR визнача-
ли також за допомогою кiлькiсної ПЛР. Метод виконання дослiджень та оцiнки даних
наведено в роботi [13]. Статистичний аналiз отриманих даних проведений за допомогою
комп’ютерної програми EXEL за χ2-критерiєм, парним t-критерiєм та критерiєм Стью-
дента.
За результатами дослiдження, експресiю TRK встановлено в невеликiй кiлькостi пу-
хлин ЩЗ, як злоякiсних, так й доброякiсних, без статистично вiрогiдної рiзницi (табл. 1).
На вiдмiну вiд TRK, онкогени RET/PTC виявлялися вiрогiдно частiше в злоякiсних пухли-
нах ЩЗ. Зауважимо, що в однiй ФА спостерiгалася одночасна експресiя онкогенiв TRK та
RET/PTC. В ПК ЩЗ така ситуацiя була вiдсутньою. Однак незначна кiлькiсть спостере-
жень не дозволяє зробити об’єктивних висновкiв з цього приводу. У жодному з дослiджених
зразкiв НТ наявностi реаранжованих генiв не зафiксовано.
180 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2009, №6
Експресiю незмiненого гена RET виявлено в переважнiй бiльшостi пухлин ЩЗ (як зло-
якiсних, так i доброякiсних) та зразкiв НТ. Статистично вiрогiдної рiзницi мiж групами
не встановлено (ПК порiвняно з ФА — P = 0,1510; ПК порiвняно з НТ — P= 0,1986;
ФА порiвняно з НТ — P = 0,9128 за χ2-критерiєм). У групах пухлин без наявностi он-
когенiв (як ПК, так i ФА) експресiя гена RET також не вiдрiзнялася статистично вiд
такої в групi НТ (табл. 2). У той же час пухлини з наявнiстю онкогенiв (знов-таки, як
ПК, так i ФА) вiрогiдно вiдрiзнялися за вiдповiдними новоутвореннями без перебудов.
Так, у групi ПК з наявнiстю онкогенiв виявлено найбiльшу кiлькiсть випадкiв з експре-
сiєю гена RET. Для доброякiсних пухлин з перебудовами TRK та RET/PTC мала мiсце
протилежна ситуацiя — у групi ФА з наявнiстю реаранжованих онкогенiв кiлькiсть RET -по-
зитивних пухлин була найменшою. Вiрогiдною була i рiзниця в порiвняннi зi зразками НТ
(див. табл. 2).
Таким чином, отриманi данi свiдчать про те, що онкогени TRK та RET/PTC в ПК
ЩЗ активують ген RET. У той же час у доброякiсних ФА ЩЗ його експресiя гальму-
ється. Оскiльки за молекулярно-бiологiчними методами неможливо остаточно встанови-
ти належнiсть гена RET до пухлинних чи нейросекреторних С-клiтин, пояснити наве-
денi факти можна двома рiзними припущеннями. Вiдповiдно до думки переважної бiль-
шостi дослiдникiв, експресiя гена RET вiдбувається виключно в С-клiтинах ЩЗ, а не
в тироцитах [3]. Наявнiсть RET в екстрактах нуклеїнових кислот, що отриманi зi зраз-
кiв тканини ЩЗ (як пухлинної, так i НТ), можливо, обумовлена присутнiстю С-клi-
тин, якi у невеликiй кiлькостi знаходяться в тканинi i не можуть бути вибiрково вилу-
ченi з дослiджуваних зразкiв напередоднi екстракцiї. Це пiдтверджують данi про екс-
пресiю гена RET у НТ ЩЗ. Вiдносно пухлин ЩЗ можна припустити, що в процесi
їх росту частка таких клiтин зберiгається, що й обумовлює експресiю гена RET у пу-
хлинних зразках. Цiлком iмовiрно, що в ПК ЩЗ, якi характеризуються наявнiстю он-
когенiв, С-клiтини присутнi вiрогiдно частiше порiвняно з доброякiсними новоутворен-
нями та ПК без онкогенiв. У той же час у ФА ЩЗ спостерiгається протилежна си-
туацiя.
Таблиця 1. Наявнiсть онкогенiв у доброякiсних та злоякiсних пухлинах щитоподiбної залози
Онкогени ПК (n = 35) ФА (n = 24) НТ (n = 59)
TRK 2 (5,7%) 0 0
TRK + RET/PTC 0 1 (4,2%) 0
RET/PTC 18 (51,4%)∗ 6 (25,0%) 0
∗Рiзниця є вiрогiдною порiвняно з ФА, P = 0,0423 за χ
2-критерiєм.
Таблиця 2. Експресiя незмiненого гена RET у доброякiсних та злоякiсних пухлинах щитоподiбної залози
Тип пухлин
Пухлини з експресiєю
онкогенiв
Пухлини без
експресiї онкогенiв Усього
ПК (n = 35) 19/20 (95,0%)∗/∗∗∗ 10/15 (66,6%) 29/35 (82,9%)
ФА (n = 24) 1/6 (16,7%)∗∗/∗∗∗∗ 15/18 (83,3%) 16/24 (66,7%)
НТ (n = 22) — — 15/22 (68,2%)
∗Рiзниця є вiрогiдною порiвняно з ПК без експресiї онкогенiв, P= 0,0277 за χ
2-критерiєм.
∗∗Рiзниця є вiрогiдною порiвняно з ФА без експресiї онкогенiв, P = 0,0027 за χ
2-критерiєм.
∗∗∗Рiзниця є вiрогiдною порiвняно з НТ, P = 0,0271 за χ
2-критерiєм.
∗∗∗∗Рiзниця є вiрогiдною порiвняно з НТ, P = 0,0238 за χ
2-критерiєм.
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2009, №6 181
Iнше пояснення полягає в можливiй здатностi безпосередньо пухлинних клiтин до екс-
пресiї гена RET, про що свiдчать данi окремих дослiдникiв [4]. У зв’язку з цим можна
припустити, що в клiтинах ПК онкогени безпосередньо активують експресiю гена RET. То-
дi виникає питання: чому в ФА зазначенi генетичнi змiни не призводять до аналогiчного
ефекту? Можливо, це обумовлено рiзноманiтнiстю онкогенiв. Як вже згадувалось вище,
iснують 16 рiзних форм RET/PTC, якi вiдрiзняються за структурою i, можливо, як на-
слiдок, спектром дiї. Вiдомо, що в ПК найчастiше виявляються онкогени RET/PTC1 та
RET/PTC3 [3, 5–7]. У той же час для ФА характерна експресiя iнших представникiв ро-
дини RET/PTC [5].
На наступному етапi ми дослiджували експресiю генiв, що кодують iншi РТК — MET
та EGFR. Встановлено, що рiвень експресiї мРНК гена MET в ПК був вiрогiдно вищим,
нiж у вiдповiднiй НТ (P < 0,0001 за парним t-критерiєм). Для ФА мала мiсце протилежна
тенденцiя — зниження рiвня експресiї мРНК гена порiвняно з таким у НТ (P = 0,0091 за
парним t-критерiєм). Чи впливають онкогени на рiвень експресiї гена MET у доброякiсних
та злоякiсних пухлинах ЩЗ? Оскiльки ефект онкогенiв на експресiю РТК, за даними лi-
тератури, здiйснюється через МАРК каскад, уявляється доцiльним проаналiзувати, поряд
з онкогенами, вплив iнших генетичних порушень, зокрема мутацiй гена BRAF, якi також
призводять до активацiї МАРК [7].
Визначення точкових мутацiй BRAFV 600E здiйснювали за допомогою методу секвену-
вання продуктiв ПЛР, яку проводили з вiдповiдними праймерами. Умови виконання дослi-
джень описанi в попереднiх публiкацiях [12]. Наявнiсть точкових мутацiй BRAFV 600E вста-
новлено в шести ПК ЩЗ. Зауважимо, що одна ПК характеризувалася наявнiстю одночасно
мутацiї BRAFV 600E та онкогена RET/PTC3. У жодному випадку ФА та НТ зазначених
генетичних змiн не виявлено.
Для визначення впливу генетичних порушень на експресiю гена MET усi ПК було по-
дiлено на три групи: пухлини з мутацiями BRAFV 600E , пухлини з онкогенами та пухлини
без генетичних змiн. Виявлено, що в ПК, якi характеризувалися генетичними змiнами (як
мутацiями, так i перебудовами), рiвень експресiї мРНК гена MET був вiрогiдно вищим,
нiж у вiдповiднiй НТ (рис. 1). У ПК без генетичних порушень вiрогiдної рiзницi мiж рiв-
нем експресiї мРНК гена MET у пухлиннiй та вiдносно незмiненiй тканинi не вiдмiчено.
Отриманi данi пiдтверджують думку дослiдникiв про роль онкогенiв та мутацiй у процесах
активацiї генiв, що кодують РТК.
У доброякiсних пухлинах ЩЗ, що характеризувалися вiдсутнiстю онкогенiв, рiвень екс-
пресiї мРНК гена MET був вiрогiдно нижчим, нiж у вiдповiднiй НТ (рис. 2). У ФА без
генетичних змiн зазначена рiзниця нiвелювалася.
Вiдносно EGFR встановлено, що в цiлому по групi рiвень експресiї мРНК гена EGFR
в ПК не вiдрiзнявся вiрогiдно вiд показникiв у НТ (P = 0,0644 за парним t-критерiєм).
Аналогiчна ситуацiя простежувалася i в групi ПК без генетичних порушень (див. рис. 1).
Однак у пухлинах, що характеризувалися наявнiстю мутацiй чи перебудов, рiвень експресiї
мРНК гена EGFR був вiрогiдно вищим, нiж у вiдповiднiй НТ (див. рис. 1). У ФА результати
дослiджень виявилися аналогiчними до тих, що отриманi при вивченнi експресiї мРНК гена
MET (див. рис. 2).
Виникає логiчне питання, чи є взаємозв’язок мiж рiвнем експресiї мРНК генiв MET та
EGFR у пухлинах ЩЗ? Встановлено, що в усiх групах ПК (незалежно вiд наявностi генети-
чних порушень) рiвень експресiї мРНК MET вiрогiдно перевищує рiвень експресiї мРНК ге-
на EGFR (табл. 3). У доброякiсних пухлинах ЩЗ вiрогiдної рiзницi мiж даними не виявлено.
182 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2009, №6
Рис. 1. Рiвень експресiї мРНК генiв MET (а) та EGFR (б ) у тканинах ПК вiдносно вiдповiдної НТ залежно
вiд генетичних змiн. Рiвень експресiї мРНК генiв МЕТ i EGFR (нормалiзацiя даних за геном GAPDH )
визначали як ∆Ct (∆Ct = CtДГ − CtGAPDH , ДГ — дослiджуваний ген). Вiрогiднiсть визначена за парним
t-критерiєм
Таким чином, результати проведених дослiджень свiдчать про те, що ПК ЩЗ характе-
ризуються онкогенною активацiєю РТК, яка вiдбувається як внаслiдок формування онко-
генiв, так i шляхом посилення експресiї нетрансформованих генiв. Крiм того, у злоякiсних
пухлинах ЩЗ генетичнi порушення (онкогени та мутацiї), якi сприяють активацiї МАРК
каскаду, посилюють експресiю генiв, що кодують РТК. У доброякiсних пухлинах ЩЗ також
має мiсце експресiя онкогенiв, що, однак, не асоцiйовано з експресiєю iнших РТК.
Автори висловлюють подяку спiвробiтникам вiддiлiв ендокринологiї та молекулярної бiологiї
Унiверситету м. Пiзи (Iталiя) за можливiсть проведення дослiджень (керiвники: проф. А. Пiн-
кейра i проф. Р. Елiзеi) та Мiжнароднiй органiзацiї боротьби з раком (UICC) за надання наукового
гранту для виконання роботи.
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2009, №6 183
Рис. 2. Рiвень експресiї мРНК генiв MET (а) та EGFR (б ) у тканинах ФА вiдносно вiдповiдної НТ залежно
вiд генетичних змiн. Рiвень експресiї мРНК генiв МЕТ i EGFR (нормалiзацiя даних за геном GAPDH )
визначали як ∆Ct (∆Ct = CtДГ − CtGAPDH , ДГ — дослiджуваний ген). Вiрогiднiсть визначена за парним
t-критерiєм
Таблиця 3. Експресiя мРНК генiв MET та EGFR у доброякiсних та злоякiсних пухлинах щитоподiбної
залози
Група пухлин
ПК ФА
MET EGFR MET EGFR
Пухлини з мутацiями BRAFV 600E 17,90 ± 3,70∗∗ 1,95 ± 0,18 — —
Пухлини з наявнiстю онкогенiв 8,59 ± 1,70∗∗ 2,3 ± 0,35 1,89 ± 1,10 2,21 ± 1,29
Пухлини без генетичних змiн 2,73 ± 0,53∗ 0,84 ± 0,21 0,80 ± 0,23 0,94 ± 0,50
Пр и м i т ка . Показник експресiї мРНК зазначених генiв у зразках пухлини порiвняно з таким у вiдповiднiй
нормальнiй тканинi пiдраховували як 2−∆∆Ct (∆∆Ct = ∆CtП − ∆CtНТ, П — в пухлиннiй тканинi, НТ —
в умовно нормальнiй тканинi).
∗Рiзниця є вiрогiдною порiвняно з EGFR, P < 0,01 за критерiєм Стьюдента.
∗∗Рiзниця є вiрогiдною порiвняно з EGFR, P < 0,001 за критерiєм Стьюдента.
184 ISSN 1025-6415 Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine, 2009, №6
1. Musholt T. J., Brehm C., Hanack J. et al. Identification of differentially expressed genes in papillary thyroid
carcinomas with and without rearrangements of tyrosine kinase receptor RET and/or NTRK1 // J. Surg.
Res. – 2006. – 131. – P. 15–25.
2. Pierotti M., Greco A. Oncogenic rearrangements of the NTRK1/NGF receptor // Cancer Lancet. – 2006. –
232. – P. 90–98.
3. Arighi E., Borello M.G., Sariola H. RET tyrosine kinase signaling in development and cancer // Cytokine
and Growth Factor Rev. – 2005. – 16. – P. 441–467.
4. Rhoden K. J., Johnson G., Brandao G. et al. Real-time quantitative RT-PCR identifies distinct c-RET,
RET/PTC1 and RET/PTC3 expression pattern in papillary thyroid carcinoma // Lab. Invest. – 2004. –
No 84. – P. 1557–1570.
5. Воскобойник Л.Г. Виявлення гена RET та онкогенiв RET/РТС в пухлинах щитовидної залози за
методом кiлькiсної полiмеразної ланцюгової реакцiї // Ендокринологiя. – 2008. – 13, № 1. – С. 45–57.
6. Santoro M., Thomas G.A., Vecchio G. et al. Gene rearrangement and Chernobyl related thyroid cancer //
Brit. J. Cancer. – 2000. – 82, No 2. – P. 315–322.
7. Lima J., Trovisco V., Soares P. et al. BRAF Mutations are not a major event in post-Chernobyl childhood
thyroid carcinomas // J. Clin. Endocrinol. – 2004. – 89, No 9. – P. 4267–4271.
8. Elisei R., Romei C., Vorontsova T. et al. RET/PTC fearrangements in thyroid nodules: studies in irradi-
ated and not irradiated, malignant and benign thyroid lesions in children and adults // Ibid. – 2001. – 86,
No 7. – P. 3211–3216.
9. Mineo R., Costantino A., Frasca F. et al. Activation of the hepatocyte growth factor (HGF) – Met system
in papillary thyroid cancer: biological effects of HGF in thyroid cancer cells depend on Met expression
levels // Endocrinologie. – 2004. – 145, No 9. – P. 4355–4365.
10. Wasenius V.-M., Hemmer S., Karjalainen-Lindsberg M. L. et al. MET receptor tyrosine kinase sequence
alterations in differentiated thyroid carcinoma // Amer. J. Surg. Pathol. – 2005. – 29, No 4. – P. 544–549.
11. Thomas G.A., Williams E.D., Becker D.V. et al. Thyroid tumor banks // Science. – 2000. – 289, No 29. –
P. 2945–2948.
12. Воскобойник Л. Г. Онкогенна активацiя генiв RET, BRAF та NTRK1 в доброякiсних та злоякiсних
пухлинах щитовидної залози // Ендокринологiя. – 2007. – 12, № 1. – С. 33–47.
13. Воскобойник Л.Г. Експресiя MET та EGFR в пiслячорнобильських пухлинах щитовидної залози //
Там само. – 2007. – 12, № 2. – С. 227–239.
Надiйшло до редакцiї 11.11.2008Державна установа “Iнститут ендокринологiї
та обмiну речовин iм. В.П. Комiсаренка
АМН України”, Київ
L.G. Voskoboynyk, T. I. Bogdanova,
Corresponding Member of the NAS of Ukraine M. D. Tronko
Effects of oncogenes on the expression of receptor tyrosine kinase in
thyroid tumors
The comparative analysis of benign and malignant thyroid tumors regarding the expression of
receptor tyrosine kinases both transformed and intact (TRK, RET/PTC, RET, MET, EGFR)
was carried out. 35 papillary carcinomas and 24 follicular adenomas of thyroid were studied. It
was shown that the frequency of rearranged oncogenes was significantly higher in malignant thyroid
tumors as compared to benign thyroid tumors. We note that the presence of genetic abnormalities
in papillary thyroid carcinomas were associated with increasing the expression levels of genes which
encode the receptor tyrosine kinases. In follicular thyroid adenomas, such features were absent.
ISSN 1025-6415 Доповiдi Нацiональної академiї наук України, 2009, №6 185
|