Вирощування та кріоконсервування ксенічних культур Dіеntamoeba fragilis у середовищі RPMI

Dientamoeba fragilis is one of the most common intestinal protozoan parasites in humans and many animals, which can cause acute and chronic lesions of the gastrointestinal tract. Growing and preservation of D. fragilis cultures in vitro allows studying the features of the life cycle of these parasit...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Date:2025
Main Authors: Kyrychenko, Igor, Biriukov, Mykhailo, Pokhil, Sеrgiy, Tymchenko, Olena
Format: Article
Language:English
Published: Publishing House ‘Akademperiodyka’ of the National Academy of Sciences of Ukraine; Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine 2025
Subjects:
Online Access:https://cryo.org.ua/journal/index.php/probl-cryobiol-cryomed/article/view/2067
Tags: Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:Problems of Cryobiology and Cryomedicine

Institution

Problems of Cryobiology and Cryomedicine
_version_ 1859479860819263488
author Kyrychenko, Igor
Biriukov, Mykhailo
Pokhil, Sеrgiy
Tymchenko, Olena
author_facet Kyrychenko, Igor
Biriukov, Mykhailo
Pokhil, Sеrgiy
Tymchenko, Olena
author_sort Kyrychenko, Igor
baseUrl_str
collection OJS
datestamp_date 2025-09-07T14:32:42Z
description Dientamoeba fragilis is one of the most common intestinal protozoan parasites in humans and many animals, which can cause acute and chronic lesions of the gastrointestinal tract. Growing and preservation of D. fragilis cultures in vitro allows studying the features of the life cycle of these parasites, their pathogenic potential, sensitivity to antimicrobial drugs, etc. In this work, the suitability of RPMI nutrient medium for in vitro cultivation and cryopreservation of xenic cultures of D. fragilis was studied for the first time. Based on the results of sowing fresh fecal samples from Ukrainian military personnel (with confirmed monoinvasion of D. fragilis) in RPMI (with 10% heat-inactivated horse serum, without antibiotics), it was established that RPMI is quite suitable for growing both short-term and long-term xenic cultures of D. fragilis. Growth profiles on RPMI (at 37 °C in microaerophilic conditions) of different isolates of D. fragilis are similar. D. fragilis cultures grown on RPMI are highly suitable for studying the morphological structure of these protozoa cells, their division processes, the formation of pseudopodia, pre-cysts and cysts. The most effective cryopreservation of D. fragilis trophozoites is achieved in a composition based on RPMI containing DMSO in a final concentration of 7.0%. The smallest trophozoites (12—15 μm) are the most resistant to freezing and ensure the recovery of growth of D. fragilis cultures after their cryopreservation.   Probl Cryobiol Cryomed 2025; 35(1):33–45
first_indexed 2026-03-12T17:56:22Z
format Article
id oai:ojs.pkp.sfu.ca:article-2067
institution Problems of Cryobiology and Cryomedicine
keywords_txt_mv keywords
language English
last_indexed 2026-03-12T17:56:22Z
publishDate 2025
publisher Publishing House ‘Akademperiodyka’ of the National Academy of Sciences of Ukraine; Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine
record_format ojs
spelling oai:ojs.pkp.sfu.ca:article-20672025-09-07T14:32:42Z Cultivation and cryopreservation of Dientamoeba fragilis xenic cultures in RPMI medium Вирощування та кріоконсервування ксенічних культур Dіеntamoeba fragilis у середовищі RPMI Kyrychenko, Igor Biriukov, Mykhailo Pokhil, Sеrgiy Tymchenko, Olena Dіеntamoeba fragilis xenic cultures cultivation cryopreservation RPMI medium Dіеntamoeba fragilis ксенічні культури вирощування кріоконсервування середовище RPMI Dientamoeba fragilis is one of the most common intestinal protozoan parasites in humans and many animals, which can cause acute and chronic lesions of the gastrointestinal tract. Growing and preservation of D. fragilis cultures in vitro allows studying the features of the life cycle of these parasites, their pathogenic potential, sensitivity to antimicrobial drugs, etc. In this work, the suitability of RPMI nutrient medium for in vitro cultivation and cryopreservation of xenic cultures of D. fragilis was studied for the first time. Based on the results of sowing fresh fecal samples from Ukrainian military personnel (with confirmed monoinvasion of D. fragilis) in RPMI (with 10% heat-inactivated horse serum, without antibiotics), it was established that RPMI is quite suitable for growing both short-term and long-term xenic cultures of D. fragilis. Growth profiles on RPMI (at 37 °C in microaerophilic conditions) of different isolates of D. fragilis are similar. D. fragilis cultures grown on RPMI are highly suitable for studying the morphological structure of these protozoa cells, their division processes, the formation of pseudopodia, pre-cysts and cysts. The most effective cryopreservation of D. fragilis trophozoites is achieved in a composition based on RPMI containing DMSO in a final concentration of 7.0%. The smallest trophozoites (12—15 μm) are the most resistant to freezing and ensure the recovery of growth of D. fragilis cultures after their cryopreservation.   Probl Cryobiol Cryomed 2025; 35(1):33–45 Probl Cryobiol Cryomed 2025; 35(1):33–45 Dientamoeba fragilis — один з найпоширеніших кишкових найпростіших паразитів людини і багатьох тварин, здатний викликати гострі та хронічні ураження шлунково-кишкового тракту. Вирощування та збереження культур D. fragilis in vitro дозволяє вивчити особливості життєвого циклу цих паразитів, їх патогенний потенціал, чутливість до антимікробних препаратів тощо. У роботі вперше вивчено придатність живильного середовища RPMI для вирощування in vitro та кріоконсервування ксенічних культур D. fragilis. За результатами посіву в RPMI (з 10% термоінактивованої сироватки коня, без антибіотиків) свіжих зразків фекалій від українських військовослужбовців (з підтвердженою моноінвазією D. fragilis) встановлено, що RPMI є цілком придатним для вирощування як короткострокових, так довгострокових ксенічних культур D. fragilis. Профілі росту на RPMI (при 37оС в мікроаерофільних умовах) різних ізолятів D. fragilis є подібними. Культури D. fragilis, вирощені на RPMI, є високопридатними для вивчення морфологічної структури клітин цих найпростіших, процесів їх поділу, утворення псевдоподій, формування пре-цист і цист. Найефективніше кріоконсервування трофозоїтів D. fragilis досягається в композиції на основі RPMI, що містить ДМСО в кінцевій концентрації 7,0 %. Трофозоїти найменшого розміру (12—15 мкм) є найбільш стійкими до замороження і забезпечують відновлення росту культур D. fragilis після їх кріоконсервування.   Probl Cryobiol Cryomed 2025; 35(1):33–45 Publishing House ‘Akademperiodyka’ of the National Academy of Sciences of Ukraine; Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine 2025-09-07 Article Article Research article application/pdf https://cryo.org.ua/journal/index.php/probl-cryobiol-cryomed/article/view/2067 10.15407/cryo35.01.033 Problems of Cryobiology and Cryomedicine; Vol. 35 No. 1 (2025): Probl Cryobiol Cryomed; 33–45 Проблемы криобиологии и криомедицины; Том 35 № 1 (2025): Probl Cryobiol Cryomed; 33–45 Проблеми кріобіології і кріомедицини; Том 35 № 1 (2025): Probl Cryobiol Cryomed; 33–45 2518-7376 2307-6143 en https://cryo.org.ua/journal/index.php/probl-cryobiol-cryomed/article/view/2067/2175 https://creativecommons.org/licenses/by/4.0
spellingShingle Dіеntamoeba fragilis
ксенічні культури
вирощування
кріоконсервування
середовище RPMI
Kyrychenko, Igor
Biriukov, Mykhailo
Pokhil, Sеrgiy
Tymchenko, Olena
Вирощування та кріоконсервування ксенічних культур Dіеntamoeba fragilis у середовищі RPMI
title Вирощування та кріоконсервування ксенічних культур Dіеntamoeba fragilis у середовищі RPMI
title_alt Cultivation and cryopreservation of Dientamoeba fragilis xenic cultures in RPMI medium
title_full Вирощування та кріоконсервування ксенічних культур Dіеntamoeba fragilis у середовищі RPMI
title_fullStr Вирощування та кріоконсервування ксенічних культур Dіеntamoeba fragilis у середовищі RPMI
title_full_unstemmed Вирощування та кріоконсервування ксенічних культур Dіеntamoeba fragilis у середовищі RPMI
title_short Вирощування та кріоконсервування ксенічних культур Dіеntamoeba fragilis у середовищі RPMI
title_sort вирощування та кріоконсервування ксенічних культур dіеntamoeba fragilis у середовищі rpmi
topic Dіеntamoeba fragilis
ксенічні культури
вирощування
кріоконсервування
середовище RPMI
topic_facet Dіеntamoeba fragilis
xenic cultures
cultivation
cryopreservation
RPMI medium
Dіеntamoeba fragilis
ксенічні культури
вирощування
кріоконсервування
середовище RPMI
url https://cryo.org.ua/journal/index.php/probl-cryobiol-cryomed/article/view/2067
work_keys_str_mv AT kyrychenkoigor cultivationandcryopreservationofdientamoebafragilisxenicculturesinrpmimedium
AT biriukovmykhailo cultivationandcryopreservationofdientamoebafragilisxenicculturesinrpmimedium
AT pokhilsergiy cultivationandcryopreservationofdientamoebafragilisxenicculturesinrpmimedium
AT tymchenkoolena cultivationandcryopreservationofdientamoebafragilisxenicculturesinrpmimedium
AT kyrychenkoigor viroŝuvannâtakríokonservuvannâkseníčnihkulʹturdíentamoebafragilisuseredoviŝírpmi
AT biriukovmykhailo viroŝuvannâtakríokonservuvannâkseníčnihkulʹturdíentamoebafragilisuseredoviŝírpmi
AT pokhilsergiy viroŝuvannâtakríokonservuvannâkseníčnihkulʹturdíentamoebafragilisuseredoviŝírpmi
AT tymchenkoolena viroŝuvannâtakríokonservuvannâkseníčnihkulʹturdíentamoebafragilisuseredoviŝírpmi