ВЛАСТИВОСТІ МОНОЦИТАРНИХ ДЕНДРИТНИХ КЛІТИН, НАВАНТАЖЕНИХ ЛІЗАТAМИ ПУХЛИННИХ КЛІТИН, ОБРОБЛЕНИХ ЦИТОТОКСИЧНИМИ ПЕПТИДАМИ
Background. This study is based on the idea of using tumor cell membrane lysis induced by diarylethene-containing analog of cytotoxic peptides (CPs) — gramicidin S to create a new approach for obtaining dendritic cells (DCs)-based anticancer vaccine. It is supposed that cancer cells undergoing immun...
Saved in:
| Date: | 2024 |
|---|---|
| Main Authors: | , , , , , , , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | English |
| Published: |
PH Akademperiodyka
2024
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://exp-oncology.com.ua/index.php/Exp/article/view/436 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Experimental Oncology |
Institution
Experimental Oncology| id |
oai:ojs2.ex.aqua-time.com.ua:article-436 |
|---|---|
| record_format |
ojs |
| institution |
Experimental Oncology |
| baseUrl_str |
|
| datestamp_date |
2025-07-10T07:10:13Z |
| collection |
OJS |
| language |
English |
| topic |
цитотоксичні пептиди дендритні клітини дозрівання експресія нРНК лізат пухлинних клітин |
| spellingShingle |
цитотоксичні пептиди дендритні клітини дозрівання експресія нРНК лізат пухлинних клітин KHRANOVSKA, N. SKACHKOVA, O. GORBACH, O. SEMCHUK, I. SHYMON, D. RIPA, O. LUTSII, O. SHVETS, Yu. HORBATOK, K. AFONIN, S. KOMAROV, I. ВЛАСТИВОСТІ МОНОЦИТАРНИХ ДЕНДРИТНИХ КЛІТИН, НАВАНТАЖЕНИХ ЛІЗАТAМИ ПУХЛИННИХ КЛІТИН, ОБРОБЛЕНИХ ЦИТОТОКСИЧНИМИ ПЕПТИДАМИ |
| topic_facet |
цитотоксичні пептиди дендритні клітини дозрівання експресія нРНК лізат пухлинних клітин cytotoxic peptides dendritic cells maturation mRNA expression tumor cells lysate |
| format |
Article |
| author |
KHRANOVSKA, N. SKACHKOVA, O. GORBACH, O. SEMCHUK, I. SHYMON, D. RIPA, O. LUTSII, O. SHVETS, Yu. HORBATOK, K. AFONIN, S. KOMAROV, I. |
| author_facet |
KHRANOVSKA, N. SKACHKOVA, O. GORBACH, O. SEMCHUK, I. SHYMON, D. RIPA, O. LUTSII, O. SHVETS, Yu. HORBATOK, K. AFONIN, S. KOMAROV, I. |
| author_sort |
KHRANOVSKA, N. |
| title |
ВЛАСТИВОСТІ МОНОЦИТАРНИХ ДЕНДРИТНИХ КЛІТИН, НАВАНТАЖЕНИХ ЛІЗАТAМИ ПУХЛИННИХ КЛІТИН, ОБРОБЛЕНИХ ЦИТОТОКСИЧНИМИ ПЕПТИДАМИ |
| title_short |
ВЛАСТИВОСТІ МОНОЦИТАРНИХ ДЕНДРИТНИХ КЛІТИН, НАВАНТАЖЕНИХ ЛІЗАТAМИ ПУХЛИННИХ КЛІТИН, ОБРОБЛЕНИХ ЦИТОТОКСИЧНИМИ ПЕПТИДАМИ |
| title_full |
ВЛАСТИВОСТІ МОНОЦИТАРНИХ ДЕНДРИТНИХ КЛІТИН, НАВАНТАЖЕНИХ ЛІЗАТAМИ ПУХЛИННИХ КЛІТИН, ОБРОБЛЕНИХ ЦИТОТОКСИЧНИМИ ПЕПТИДАМИ |
| title_fullStr |
ВЛАСТИВОСТІ МОНОЦИТАРНИХ ДЕНДРИТНИХ КЛІТИН, НАВАНТАЖЕНИХ ЛІЗАТAМИ ПУХЛИННИХ КЛІТИН, ОБРОБЛЕНИХ ЦИТОТОКСИЧНИМИ ПЕПТИДАМИ |
| title_full_unstemmed |
ВЛАСТИВОСТІ МОНОЦИТАРНИХ ДЕНДРИТНИХ КЛІТИН, НАВАНТАЖЕНИХ ЛІЗАТAМИ ПУХЛИННИХ КЛІТИН, ОБРОБЛЕНИХ ЦИТОТОКСИЧНИМИ ПЕПТИДАМИ |
| title_sort |
властивості моноцитарних дендритних клітин, навантажених лізатaми пухлинних клітин, оброблених цитотоксичними пептидами |
| title_alt |
Properties of Monocyte-Derived Dendritic Cells Loaded With Lysates of Cancer Cells Exposed to Cytotoxic Peptides |
| description |
Background. This study is based on the idea of using tumor cell membrane lysis induced by diarylethene-containing analog of cytotoxic peptides (CPs) — gramicidin S to create a new approach for obtaining dendritic cells (DCs)-based anticancer vaccine. It is supposed that cancer cells undergoing immunogenic cell death release the damage-associated molecular patterns (DAMPs), and thus enhance immunogenic maturation and activation of DCs. The aim of this study is to analyze the phenotypic and functional characteristics of the generated monocyte-derived DCs loaded with CPs-treated lysates of tumor cells. Materials and Methods. The triple-negative human breast cancer cell line MDA-MB-231 was used in the study. DCs were generated from peripheral blood monocytes using a recombinant human granulocytemacrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) and interleukin-4 (IL-4). Tumor cells were treated with LMB033 CPs containing a diarylethene fragment (photoswitch) in two ring forms — “closed” with low activity and toxicity and “open” with high activity. The obtained lysates of tumor cells were co-incubated with human monocyte-derived DCs. The analysis of the phenotypic characteristics of DCs was performed by a flow cytometry using monoclonal antibodies to CD83, CD86, CD11c, HLA-DR, and HLA-ABC. The expression level of mRNA of cytokine genes and indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) gene was determined using the quantitative real-time PCR. Results. The highest cytotoxic effect on MDA-MB-231 cells was detected after 6-h incubation with the open form of LMB033 at concentrations of 16 and 32 μM. The studied CPs even at the lower of the tested concentrations caused externalization of phosphatidylserine in almost 100% of apoptotic cells of MB-MDA-231 cells following 6-h incubation. Loading monocyte-derived DCs with lysate of MDA-MB-231 cells treated with LMB033 peptide in open or closed forms caused a different effect on the antigen-presenting properties of cells depending on the form of the peptide. Compared to DCs loaded with untreated lysate, a significant increase in the number of mature activated CD83+ DCs was found after loading with lysates of cells treated with open (16 μM) or closed (32 μM) forms of LMB033. CPs-induced lysates of MDA-MB-231 cells did not cause significant changes in the expression of mRNA of Th1 polarizing cytokines TNF-α, IL-12, neither did these lysates activate the transcription of the genes of immunosuppressive cytokines and IL-10, TGF-β, and the IDO gene. This indicates the absence of the activation of the immunosuppressive properties of the generated DCs. Conclusion. The presented data open the prospects for developing an effective antitumor immunotherapeutic vaccine based on DCs using CPs LMB033. |
| publisher |
PH Akademperiodyka |
| publishDate |
2024 |
| url |
https://exp-oncology.com.ua/index.php/Exp/article/view/436 |
| work_keys_str_mv |
AT khranovskan propertiesofmonocytederiveddendriticcellsloadedwithlysatesofcancercellsexposedtocytotoxicpeptides AT skachkovao propertiesofmonocytederiveddendriticcellsloadedwithlysatesofcancercellsexposedtocytotoxicpeptides AT gorbacho propertiesofmonocytederiveddendriticcellsloadedwithlysatesofcancercellsexposedtocytotoxicpeptides AT semchuki propertiesofmonocytederiveddendriticcellsloadedwithlysatesofcancercellsexposedtocytotoxicpeptides AT shymond propertiesofmonocytederiveddendriticcellsloadedwithlysatesofcancercellsexposedtocytotoxicpeptides AT ripao propertiesofmonocytederiveddendriticcellsloadedwithlysatesofcancercellsexposedtocytotoxicpeptides AT lutsiio propertiesofmonocytederiveddendriticcellsloadedwithlysatesofcancercellsexposedtocytotoxicpeptides AT shvetsyu propertiesofmonocytederiveddendriticcellsloadedwithlysatesofcancercellsexposedtocytotoxicpeptides AT horbatokk propertiesofmonocytederiveddendriticcellsloadedwithlysatesofcancercellsexposedtocytotoxicpeptides AT afonins propertiesofmonocytederiveddendriticcellsloadedwithlysatesofcancercellsexposedtocytotoxicpeptides AT komarovi propertiesofmonocytederiveddendriticcellsloadedwithlysatesofcancercellsexposedtocytotoxicpeptides AT khranovskan vlastivostímonocitarnihdendritnihklítinnavantaženihlízatamipuhlinnihklítinobroblenihcitotoksičnimipeptidami AT skachkovao vlastivostímonocitarnihdendritnihklítinnavantaženihlízatamipuhlinnihklítinobroblenihcitotoksičnimipeptidami AT gorbacho vlastivostímonocitarnihdendritnihklítinnavantaženihlízatamipuhlinnihklítinobroblenihcitotoksičnimipeptidami AT semchuki vlastivostímonocitarnihdendritnihklítinnavantaženihlízatamipuhlinnihklítinobroblenihcitotoksičnimipeptidami AT shymond vlastivostímonocitarnihdendritnihklítinnavantaženihlízatamipuhlinnihklítinobroblenihcitotoksičnimipeptidami AT ripao vlastivostímonocitarnihdendritnihklítinnavantaženihlízatamipuhlinnihklítinobroblenihcitotoksičnimipeptidami AT lutsiio vlastivostímonocitarnihdendritnihklítinnavantaženihlízatamipuhlinnihklítinobroblenihcitotoksičnimipeptidami AT shvetsyu vlastivostímonocitarnihdendritnihklítinnavantaženihlízatamipuhlinnihklítinobroblenihcitotoksičnimipeptidami AT horbatokk vlastivostímonocitarnihdendritnihklítinnavantaženihlízatamipuhlinnihklítinobroblenihcitotoksičnimipeptidami AT afonins vlastivostímonocitarnihdendritnihklítinnavantaženihlízatamipuhlinnihklítinobroblenihcitotoksičnimipeptidami AT komarovi vlastivostímonocitarnihdendritnihklítinnavantaženihlízatamipuhlinnihklítinobroblenihcitotoksičnimipeptidami |
| first_indexed |
2025-07-17T12:18:37Z |
| last_indexed |
2025-07-17T12:18:37Z |
| _version_ |
1850411669349466112 |
| spelling |
oai:ojs2.ex.aqua-time.com.ua:article-4362025-07-10T07:10:13Z Properties of Monocyte-Derived Dendritic Cells Loaded With Lysates of Cancer Cells Exposed to Cytotoxic Peptides ВЛАСТИВОСТІ МОНОЦИТАРНИХ ДЕНДРИТНИХ КЛІТИН, НАВАНТАЖЕНИХ ЛІЗАТAМИ ПУХЛИННИХ КЛІТИН, ОБРОБЛЕНИХ ЦИТОТОКСИЧНИМИ ПЕПТИДАМИ KHRANOVSKA, N. SKACHKOVA, O. GORBACH, O. SEMCHUK, I. SHYMON, D. RIPA, O. LUTSII, O. SHVETS, Yu. HORBATOK, K. AFONIN, S. KOMAROV, I. цитотоксичні пептиди, дендритні клітини, дозрівання, експресія нРНК, лізат пухлинних клітин cytotoxic peptides, dendritic cells, maturation, mRNA expression, tumor cells lysate Background. This study is based on the idea of using tumor cell membrane lysis induced by diarylethene-containing analog of cytotoxic peptides (CPs) — gramicidin S to create a new approach for obtaining dendritic cells (DCs)-based anticancer vaccine. It is supposed that cancer cells undergoing immunogenic cell death release the damage-associated molecular patterns (DAMPs), and thus enhance immunogenic maturation and activation of DCs. The aim of this study is to analyze the phenotypic and functional characteristics of the generated monocyte-derived DCs loaded with CPs-treated lysates of tumor cells. Materials and Methods. The triple-negative human breast cancer cell line MDA-MB-231 was used in the study. DCs were generated from peripheral blood monocytes using a recombinant human granulocytemacrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) and interleukin-4 (IL-4). Tumor cells were treated with LMB033 CPs containing a diarylethene fragment (photoswitch) in two ring forms — “closed” with low activity and toxicity and “open” with high activity. The obtained lysates of tumor cells were co-incubated with human monocyte-derived DCs. The analysis of the phenotypic characteristics of DCs was performed by a flow cytometry using monoclonal antibodies to CD83, CD86, CD11c, HLA-DR, and HLA-ABC. The expression level of mRNA of cytokine genes and indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) gene was determined using the quantitative real-time PCR. Results. The highest cytotoxic effect on MDA-MB-231 cells was detected after 6-h incubation with the open form of LMB033 at concentrations of 16 and 32 μM. The studied CPs even at the lower of the tested concentrations caused externalization of phosphatidylserine in almost 100% of apoptotic cells of MB-MDA-231 cells following 6-h incubation. Loading monocyte-derived DCs with lysate of MDA-MB-231 cells treated with LMB033 peptide in open or closed forms caused a different effect on the antigen-presenting properties of cells depending on the form of the peptide. Compared to DCs loaded with untreated lysate, a significant increase in the number of mature activated CD83+ DCs was found after loading with lysates of cells treated with open (16 μM) or closed (32 μM) forms of LMB033. CPs-induced lysates of MDA-MB-231 cells did not cause significant changes in the expression of mRNA of Th1 polarizing cytokines TNF-α, IL-12, neither did these lysates activate the transcription of the genes of immunosuppressive cytokines and IL-10, TGF-β, and the IDO gene. This indicates the absence of the activation of the immunosuppressive properties of the generated DCs. Conclusion. The presented data open the prospects for developing an effective antitumor immunotherapeutic vaccine based on DCs using CPs LMB033. Стан питання. В основу цього дослідження покладено ідею використання мембранолізу пухлинних клітин, індукованого діарилетенвмісним аналогом цитотоксичних пептидів (ЦП) — Граміцидину S, для створення нового підходу до отримання протипухлинної вакцини на основі дендритних клітин (ДК). Передбачається, що ракові клітини, які піддаються ICD, вивільняють молекулярні структури, пов’язані з пошкодженням (DAMPs), і таким чином посилюють імуногенне дозрівання та активацію ДК. Метою цього дослідження є аналіз фенотипових і функціональних характеристик генерованих моноцитарних ДК, навантажених лізатами пухлинних клітин, індукованими ЦП. Матеріали та методи. Для дослідження була використана лінія клітин потрійно негативного раку грудної залози людини MDA-MB-231. ДК були генеровані з моноцитів периферичної крові з використанням рекомбінантного гранулоцитарно-макрофагального колонієстимулюючого фактора людини (ГМ-КСФ) та інтерлейкіну-4 (ІЛ-4). Пухлинні клітини обробляли цитоксичними пептидами LMB033, що містять діарилетеновий фрагмент (фотоперемикач) у двох кільцевих формах — «закритій» з низькою активністю та токсичністю та «відкритій», що характеризується високою активністю. Отримані лізати пухлинних клітин використовували для коінкубації з ДК. Аналіз фенотипових характеристик ДК людини проводили методом проточної цитометрії з використанням моноклональних антитіл до маркерів CD83, CD86, CD11c, HLA-DR та HLA-ABC. Рівень експресії мРНК генів цитокінів та ферменту IDO визначали за допомогою кількісної ПЛР у реальному часі. Результати. Виявлено найвищу цитотоксичну дію на клітини MDA-MB-231 при використанні відкритої форми LMB033 у концентраціях 16 і 32 мкМ після 6 годин інкубації. Досліджувані ЦП навіть при нижчій із досліджуваних концентрацій за 6-годинного культивування спричиняли екстерналізацію фосфатидилсерину майже в 100% апоптичних клітин лінії MB-MDA-231. Встановлено, що навантаження ДК, генерованих з моноцитів периферичної крові in vitro, лізатом лінії пухлинних клітин MDA-MB-231, оброблених пептидом LMB033 у відкритій або закритій формах, викликає різноспрямований вплив на антиген-презентуючі властивості клітин залежно від форми пептиду. Порівняно з ДК, завантаженим необробленим лізатом, виявлено статистично значуще збільшення кількості зрілих, активованих CD83+ ДК під впливом лізатів, оброблених відкритою та закритою формами LMB033 у концентрації 16 мкМ та відкритою формою ЦП у концентрації 32 мкМ. Отримані результати свідчать про успішне дозрівання та активацію ДК під впливом лізатів MDA- MB-231, оброблених відкритою та закритою формами LMB033 in vitro. Статистично значущих змін рівнів експресії мРНК Th поляризуючих цитокінів TNF-α, IL-12 під впливом ЦП-індукованих лізатів клітин MDA-MB-231 не виявлено. При цьому активація транскрипції генів імуносупресивних цитокінів та IL-10, TGF-β і ферменту IDO також не відбулася, що свідчить про відсутність активації імуносупресивних властивостей генерованих ДК. Висновок. Представлені дані відкривають перспективу для створення ефективної протипухлинної імунотерапевтичної вакцини на основі ДК з використанням ЦП LMB033. PH Akademperiodyka 2024-12-12 Article Article application/pdf https://exp-oncology.com.ua/index.php/Exp/article/view/436 10.15407/exp-oncology.2024.04.375 Experimental Oncology; Vol. 46 No. 4 (2024): Experimental Oncology; 375-386 Експериментальна онкологія; Том 46 № 4 (2024): Експериментальна онкологія; 375-386 2312-8852 1812-9269 10.15407/exp-oncology.2024.04 en https://exp-oncology.com.ua/index.php/Exp/article/view/436/391 Copyright (c) 2025 Experimental Oncology https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/ |