АДАПТЕРНИЙ ПРОТЕЇН Ruk/CIN85 РЕГУЛЮЄ РЕДОКС-БАЛАНС У КЛІТИНАХ РАКУ ГРУДНОЇ ЗАЛОЗИ МИШІ ЛІНІЇ 4Т1
Background: Cell surface plasmin is involved in tumor growth and metastatic dissemination by regulating cancer cells adhesion, migration and invasion. Plasmin-induced cell detachment is accompanied by an increased rate of reactive oxygen species (ROS) generation and cell death. However, cancer cells...
Gespeichert in:
| Datum: | 2023 |
|---|---|
| Hauptverfasser: | , , , , , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | English |
| Veröffentlicht: |
PH Akademperiodyka
2023
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://exp-oncology.com.ua/index.php/Exp/article/view/2022-1-11 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Experimental Oncology |
Institution
Experimental Oncology| id |
oai:ojs2.ex.aqua-time.com.ua:article-65 |
|---|---|
| record_format |
ojs |
| institution |
Experimental Oncology |
| baseUrl_str |
|
| datestamp_date |
2023-10-11T16:45:51Z |
| collection |
OJS |
| language |
English |
| topic |
рак грудної залози аденокарциномні клітини грудної залози миші лінії 4Т1 плазміноген/плазмін Ruk/CIN85 активні форми оксигену (АФО) ензими системи глутатіону. |
| spellingShingle |
рак грудної залози аденокарциномні клітини грудної залози миші лінії 4Т1 плазміноген/плазмін Ruk/CIN85 активні форми оксигену (АФО) ензими системи глутатіону. Horak, I.R. Latyshko, N.V. Hudkova, O.O. Tokarchuk, K.O. Kishko, T.O. Yusova, O.I. Drobot, L.B. Tykhomyrov, A.A. АДАПТЕРНИЙ ПРОТЕЇН Ruk/CIN85 РЕГУЛЮЄ РЕДОКС-БАЛАНС У КЛІТИНАХ РАКУ ГРУДНОЇ ЗАЛОЗИ МИШІ ЛІНІЇ 4Т1 |
| topic_facet |
рак грудної залози аденокарциномні клітини грудної залози миші лінії 4Т1 плазміноген/плазмін Ruk/CIN85 активні форми оксигену (АФО) ензими системи глутатіону. adenocarcinoma 4T1 cells breast cancer glutathione-related enzyme system plasminogen/plasmin reactive oxygen species (ROS) Ruk/CIN85 |
| format |
Article |
| author |
Horak, I.R. Latyshko, N.V. Hudkova, O.O. Tokarchuk, K.O. Kishko, T.O. Yusova, O.I. Drobot, L.B. Tykhomyrov, A.A. |
| author_facet |
Horak, I.R. Latyshko, N.V. Hudkova, O.O. Tokarchuk, K.O. Kishko, T.O. Yusova, O.I. Drobot, L.B. Tykhomyrov, A.A. |
| author_sort |
Horak, I.R. |
| title |
АДАПТЕРНИЙ ПРОТЕЇН Ruk/CIN85 РЕГУЛЮЄ РЕДОКС-БАЛАНС У КЛІТИНАХ РАКУ ГРУДНОЇ ЗАЛОЗИ МИШІ ЛІНІЇ 4Т1 |
| title_short |
АДАПТЕРНИЙ ПРОТЕЇН Ruk/CIN85 РЕГУЛЮЄ РЕДОКС-БАЛАНС У КЛІТИНАХ РАКУ ГРУДНОЇ ЗАЛОЗИ МИШІ ЛІНІЇ 4Т1 |
| title_full |
АДАПТЕРНИЙ ПРОТЕЇН Ruk/CIN85 РЕГУЛЮЄ РЕДОКС-БАЛАНС У КЛІТИНАХ РАКУ ГРУДНОЇ ЗАЛОЗИ МИШІ ЛІНІЇ 4Т1 |
| title_fullStr |
АДАПТЕРНИЙ ПРОТЕЇН Ruk/CIN85 РЕГУЛЮЄ РЕДОКС-БАЛАНС У КЛІТИНАХ РАКУ ГРУДНОЇ ЗАЛОЗИ МИШІ ЛІНІЇ 4Т1 |
| title_full_unstemmed |
АДАПТЕРНИЙ ПРОТЕЇН Ruk/CIN85 РЕГУЛЮЄ РЕДОКС-БАЛАНС У КЛІТИНАХ РАКУ ГРУДНОЇ ЗАЛОЗИ МИШІ ЛІНІЇ 4Т1 |
| title_sort |
адаптерний протеїн ruk/cin85 регулює редокс-баланс у клітинах раку грудної залози миші лінії 4т1 |
| title_alt |
ADAPTOR PROTEIN Ruk/CIN85REGULATES REDOX BALANCE IN 4T1MOUSE BREAST CANCER CELLS EXPOSED TO PLASMIN(OGEN) |
| description |
Background: Cell surface plasmin is involved in tumor growth and metastatic dissemination by regulating cancer cells adhesion, migration and invasion. Plasmin-induced cell detachment is accompanied by an increased rate of reactive oxygen species (ROS) generation and cell death. However, cancer cells acquire the ability to develop adaptive mechanisms to resist ROS-mediated apoptosis. Aim: To establish the role of adaptor protein Ruk/CIN85 in the control of viability and redox balance in breast adenocarcinoma cells exposed to plasmin(ogen). Materials and Methods: Mouse 4T1 cells with the stable overexpression of adaptor protein Ruk/CIN85 (RukUp subline) and corresponding control (Mock subline) were treated with Glu-plasminogen (1–100 nM). Plasminogen to plasmin conversion was monitored spectrophotometrically by cleavage of the specific chromogenic substrate S2251. Specific uPA inhibitor BC11 was used to verify the uPA-mediated mechanism of plasminogen pericellular activation by 4T1 cells. Cell survival rate was assessed by MTT-test and cell proliferation was estimated by colony formation assay. Enzymatic activities of catalase, glutathione peroxidase, superoxide dismutase, as well as hydrogen peroxide (H2O2) levels were measured by spectrophotomertric and fluorometric assays. The intracellular ROS generation was monitored by flow cytometry using H2DCF-DA fluorescent probe. Results: Plasminogen was shown to be converted into an active proteinase plasmin on the surface of carcinoma cells in uPA-dependent manner. Plasmin(ogen) suppressed proliferation and affected survival of both studied 4T1 sublines. However, RukUp cells displayed higher resistance to plasmin(ogen)-induced cytotoxicity than Mock cells. Plasmin(ogen) promoted significant elevation in ROS generation rate in cells with the basal level of Ruk/CIN85 expression. In contrast, RukUp cells appear to be more effective in counteracting prooxidant changes due to the activation of some enzymes of the glutathione system, in particular glutathione peroxidase, and a concomitant decrease of H2O2 accumulation. Conclusion: Adaptor protein Ruk/CIN85 is involved in the regulation of redox homeostasis in cancer cells to maintain levels of ROS, thus promoting redox adaptation in cancer cells exposed to plasmin(ogen). Thus, Ruk/CIN85 may represent one of the relevant targets in order to diminish the resistance of cancer cells to ROS-mediated apoptosis. |
| publisher |
PH Akademperiodyka |
| publishDate |
2023 |
| url |
https://exp-oncology.com.ua/index.php/Exp/article/view/2022-1-11 |
| work_keys_str_mv |
AT horakir adaptorproteinrukcin85regulatesredoxbalancein4t1mousebreastcancercellsexposedtoplasminogen AT latyshkonv adaptorproteinrukcin85regulatesredoxbalancein4t1mousebreastcancercellsexposedtoplasminogen AT hudkovaoo adaptorproteinrukcin85regulatesredoxbalancein4t1mousebreastcancercellsexposedtoplasminogen AT tokarchukko adaptorproteinrukcin85regulatesredoxbalancein4t1mousebreastcancercellsexposedtoplasminogen AT kishkoto adaptorproteinrukcin85regulatesredoxbalancein4t1mousebreastcancercellsexposedtoplasminogen AT yusovaoi adaptorproteinrukcin85regulatesredoxbalancein4t1mousebreastcancercellsexposedtoplasminogen AT drobotlb adaptorproteinrukcin85regulatesredoxbalancein4t1mousebreastcancercellsexposedtoplasminogen AT tykhomyrovaa adaptorproteinrukcin85regulatesredoxbalancein4t1mousebreastcancercellsexposedtoplasminogen AT horakir adapternijproteínrukcin85regulûêredoksbalansuklítinahrakugrudnoízalozimišílíníí4t1 AT latyshkonv adapternijproteínrukcin85regulûêredoksbalansuklítinahrakugrudnoízalozimišílíníí4t1 AT hudkovaoo adapternijproteínrukcin85regulûêredoksbalansuklítinahrakugrudnoízalozimišílíníí4t1 AT tokarchukko adapternijproteínrukcin85regulûêredoksbalansuklítinahrakugrudnoízalozimišílíníí4t1 AT kishkoto adapternijproteínrukcin85regulûêredoksbalansuklítinahrakugrudnoízalozimišílíníí4t1 AT yusovaoi adapternijproteínrukcin85regulûêredoksbalansuklítinahrakugrudnoízalozimišílíníí4t1 AT drobotlb adapternijproteínrukcin85regulûêredoksbalansuklítinahrakugrudnoízalozimišílíníí4t1 AT tykhomyrovaa adapternijproteínrukcin85regulûêredoksbalansuklítinahrakugrudnoízalozimišílíníí4t1 |
| first_indexed |
2025-07-17T12:14:57Z |
| last_indexed |
2025-07-17T12:14:57Z |
| _version_ |
1850410799761195008 |
| spelling |
oai:ojs2.ex.aqua-time.com.ua:article-652023-10-11T16:45:51Z ADAPTOR PROTEIN Ruk/CIN85REGULATES REDOX BALANCE IN 4T1MOUSE BREAST CANCER CELLS EXPOSED TO PLASMIN(OGEN) АДАПТЕРНИЙ ПРОТЕЇН Ruk/CIN85 РЕГУЛЮЄ РЕДОКС-БАЛАНС У КЛІТИНАХ РАКУ ГРУДНОЇ ЗАЛОЗИ МИШІ ЛІНІЇ 4Т1 Horak, I.R. Latyshko, N.V. Hudkova, O.O. Tokarchuk, K.O. Kishko, T.O. Yusova, O.I. Drobot, L.B. Tykhomyrov, A.A. рак грудної залози, аденокарциномні клітини грудної залози миші лінії 4Т1, плазміноген/плазмін, Ruk/CIN85, активні форми оксигену (АФО), ензими системи глутатіону. adenocarcinoma 4T1 cells, breast cancer, glutathione-related enzyme system, plasminogen/plasmin, reactive oxygen species (ROS), Ruk/CIN85 Background: Cell surface plasmin is involved in tumor growth and metastatic dissemination by regulating cancer cells adhesion, migration and invasion. Plasmin-induced cell detachment is accompanied by an increased rate of reactive oxygen species (ROS) generation and cell death. However, cancer cells acquire the ability to develop adaptive mechanisms to resist ROS-mediated apoptosis. Aim: To establish the role of adaptor protein Ruk/CIN85 in the control of viability and redox balance in breast adenocarcinoma cells exposed to plasmin(ogen). Materials and Methods: Mouse 4T1 cells with the stable overexpression of adaptor protein Ruk/CIN85 (RukUp subline) and corresponding control (Mock subline) were treated with Glu-plasminogen (1–100 nM). Plasminogen to plasmin conversion was monitored spectrophotometrically by cleavage of the specific chromogenic substrate S2251. Specific uPA inhibitor BC11 was used to verify the uPA-mediated mechanism of plasminogen pericellular activation by 4T1 cells. Cell survival rate was assessed by MTT-test and cell proliferation was estimated by colony formation assay. Enzymatic activities of catalase, glutathione peroxidase, superoxide dismutase, as well as hydrogen peroxide (H2O2) levels were measured by spectrophotomertric and fluorometric assays. The intracellular ROS generation was monitored by flow cytometry using H2DCF-DA fluorescent probe. Results: Plasminogen was shown to be converted into an active proteinase plasmin on the surface of carcinoma cells in uPA-dependent manner. Plasmin(ogen) suppressed proliferation and affected survival of both studied 4T1 sublines. However, RukUp cells displayed higher resistance to plasmin(ogen)-induced cytotoxicity than Mock cells. Plasmin(ogen) promoted significant elevation in ROS generation rate in cells with the basal level of Ruk/CIN85 expression. In contrast, RukUp cells appear to be more effective in counteracting prooxidant changes due to the activation of some enzymes of the glutathione system, in particular glutathione peroxidase, and a concomitant decrease of H2O2 accumulation. Conclusion: Adaptor protein Ruk/CIN85 is involved in the regulation of redox homeostasis in cancer cells to maintain levels of ROS, thus promoting redox adaptation in cancer cells exposed to plasmin(ogen). Thus, Ruk/CIN85 may represent one of the relevant targets in order to diminish the resistance of cancer cells to ROS-mediated apoptosis. Стан питання: Плазмін, що утворюється на клітинній поверхні, залучається до контролю пухлинного росту та метастазування через регулювання адгезії, міграції та інвазії ракових клітин. Зниження адгезивності клітин, індуковане плазміном, супроводжується посиленням генерування активних форм оксигену (АФО) та клітинною загибеллю. Водночас для ракових клітин характерним є набуття механізмів протидії апоптозу, опосередкованому АФО. Мета: З’ясувати роль адаптерного протеїну Ruk/CIN85 у контролі окисно-відновного балансу та виживання клітин аденокарциноми грудної залози за умови впливу плазмін(оген)у. Матеріали та методи: Мишачі клітини лінії 4Т1 зі стабільною надекспресією адаптерного протеїну Ruk/CIN85 (сублінія RukUp) та відповідні контрольні клітини (сублінія Mock) культивували за наявності плазміногену (1–100 нМ). Перетворення плазміногену на плазмін визначали спектрофотометрично за швидкістю розщеплення специфічного хромогенного субстрату S2251. Специфічний інгібітор uPA ВС11 використовували для дослідження uPA-опосередкованого механізму перицелюлярної активації плазміногену клітинами 4Т1. Рівень виживання клітин оцінювали за допомогою МТТ-тесту, проліферативну активність клітин аналізували методом формування колоній. Ензиматичні активності каталази, глутатіонпероксидази, супероксиддисмутази, а також рівні пероксиду гідрогену (H2O2) вимірювали флюорометрично. Внутрішньоклітинне генерування АФО досліджували за допомогою протокової цитометрії з використанням флуоресцентного зонду H2DCF-DA. Результати: Було показано, що плазміноген перетворюється на активну протеїназу плазмін на поверхні аденокарциномних клітин у uPA-залежний спосіб. Плазмін(оген) пригнічував проліферацію та виживання обох досліджуваних субліній клітин. Однак, клітини RukUp демонстрували більшу резистентність до плазмін(оген)-індукованої цитотоксичності у порівнянні з клітинами Mock. Плазмін(оген) спричиняв значне посилення генерування АФО в клітинах з базальним рівнем експресії Ruk/CIN85. На відміну від контролю, клітини RukUp виявилися здатними більш ефективно протидіяти прооксидантним змінам через активацію деяких ензимів системи глутатіону, головним чином глутатіонпероксидази, та зниження рівня акумуляції H2O2. Висновки: Адаптерний протеїн Ruk/CIN85 залучений до контролю окисно-відновного гомеостазу в ракових клітинах завдяки підтриманню утворення АФО на рівні, необхідному для адаптації клітин до впливу плазмін(оген)у. Таким чином, скерований вплив на рівень експресії Ruk/CIN85 може бути ефективним підходом, спрямованим на зниження резистентності ракових клітин до АФО-опосередкованого апоптозу. PH Akademperiodyka 2023-05-26 Article Article application/pdf https://exp-oncology.com.ua/index.php/Exp/article/view/2022-1-11 10.32471/exp-oncology.2312-8852.vol-44-no-1.17241 Experimental Oncology; Vol. 44 No. 1 (2022): Experimental Oncology ; 31-38 Експериментальна онкологія; Том 44 № 1 (2022): Експериментальна онкологія ; 31-38 2312-8852 1812-9269 10.32471/exp-oncology.2312-8852.vol-44-no-1 en https://exp-oncology.com.ua/index.php/Exp/article/view/2022-1-11/2022-1-11 Copyright (c) 2023 Experimental Oncology https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/ |