Phenotypic and Genotypic Criteria for the Screening of Highly Active S-Type Pyocins Pseudomonas aeruginosa Producers

Bacteriocins of Pseudomonas aeruginosa, especially S-type pyocins, show high efficiency as analogs of antimicrobial drugs. Various screening methods can be used to identify producers of highly active pyocins, but there are no clear criteria for selecting perspective strains. The aim of this work was...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Дата:2024
Автори: Balko, O.B., Zelena, L.B., Balko, O.I., Bobyr, N.A., Voitsekhovsky, V.G., Avdeeva, L.V., Балкo, O.Б., Зелена, Л.Б., Балко, О.І., Бобир, Н.А., Войцеховський, В.Г., Авдєєва, Л.В.
Формат: Стаття
Мова:English
Опубліковано: PH "Akademperiodyka" of the NAS of Ukraine 2024
Теми:
Онлайн доступ:https://ojs.microbiolj.org.ua/index.php/mj/article/view/122
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Microbiological Journal

Репозитарії

Microbiological Journal
id oai:ojs2.ojs.microbiolj.org.ua:article-122
record_format ojs
institution Microbiological Journal
collection OJS
language English
topic S-type pyocins
Pseudomonas aeruginosa
producers of highly active bacteriocins
phenotypic and genotypic screening
піоцини S-типу
Pseudomonas aeruginosa
продуценти високоактивних бактеріоцинів
фенотиповий і генотиповий скринінг
spellingShingle S-type pyocins
Pseudomonas aeruginosa
producers of highly active bacteriocins
phenotypic and genotypic screening
піоцини S-типу
Pseudomonas aeruginosa
продуценти високоактивних бактеріоцинів
фенотиповий і генотиповий скринінг
Balko, O.B.
Zelena, L.B.
Balko, O.I.
Bobyr, N.A.
Voitsekhovsky, V.G.
Avdeeva, L.V.
Балкo, O.Б.
Зелена, Л.Б.
Балко, О.І.
Бобир, Н.А.
Войцеховський, В.Г.
Авдєєва, Л.В.
Phenotypic and Genotypic Criteria for the Screening of Highly Active S-Type Pyocins Pseudomonas aeruginosa Producers
topic_facet S-type pyocins
Pseudomonas aeruginosa
producers of highly active bacteriocins
phenotypic and genotypic screening
піоцини S-типу
Pseudomonas aeruginosa
продуценти високоактивних бактеріоцинів
фенотиповий і генотиповий скринінг
format Article
author Balko, O.B.
Zelena, L.B.
Balko, O.I.
Bobyr, N.A.
Voitsekhovsky, V.G.
Avdeeva, L.V.
Балкo, O.Б.
Зелена, Л.Б.
Балко, О.І.
Бобир, Н.А.
Войцеховський, В.Г.
Авдєєва, Л.В.
author_facet Balko, O.B.
Zelena, L.B.
Balko, O.I.
Bobyr, N.A.
Voitsekhovsky, V.G.
Avdeeva, L.V.
Балкo, O.Б.
Зелена, Л.Б.
Балко, О.І.
Бобир, Н.А.
Войцеховський, В.Г.
Авдєєва, Л.В.
author_sort Balko, O.B.
title Phenotypic and Genotypic Criteria for the Screening of Highly Active S-Type Pyocins Pseudomonas aeruginosa Producers
title_short Phenotypic and Genotypic Criteria for the Screening of Highly Active S-Type Pyocins Pseudomonas aeruginosa Producers
title_full Phenotypic and Genotypic Criteria for the Screening of Highly Active S-Type Pyocins Pseudomonas aeruginosa Producers
title_fullStr Phenotypic and Genotypic Criteria for the Screening of Highly Active S-Type Pyocins Pseudomonas aeruginosa Producers
title_full_unstemmed Phenotypic and Genotypic Criteria for the Screening of Highly Active S-Type Pyocins Pseudomonas aeruginosa Producers
title_sort phenotypic and genotypic criteria for the screening of highly active s-type pyocins pseudomonas aeruginosa producers
title_alt Фенотипові і генотипові критерії для скринінгу високоактивних продуцентів піоцинів S-типу Pseudomonas aeruginosa
description Bacteriocins of Pseudomonas aeruginosa, especially S-type pyocins, show high efficiency as analogs of antimicrobial drugs. Various screening methods can be used to identify producers of highly active pyocins, but there are no clear criteria for selecting perspective strains. The aim of this work was to determine criteria that can be used during phenotypic and genotypic screening for the selection of perspective highly active S-type pyocin P. aeruginosa producers. Methods. The objects of investigation were 40 P. aeruginosa strains. Pyocins were obtained from each culture, relative coefficients of activity spectrum and sensitivity were determined for all the strains used. The obtained results of the phenotypic screening were compared with the data of the genotypic screening. Results. The use of the proposed method of activity assessment according to the lysis intensity made it possible to phenotypically assess the expression of pyocin genes. It was established that according to the new criteria, only one strain — P. aeruginosa UCM B-333 — can be included in the group of the most active pyocin producers that inhibit the growth of more than 75% of indicator cultures. The majority of representatives of maximally and highly active producers were characterized by high resistance to the action of other pyocins, which can be considered as an additional criterion for the selection of perspective strains. During genotypic screening, it was established that the quantity of pyocin genes in the genome cannot be interpreted as a clear criterion of the producer’s perspective. However, 50% of representatives of maximally and highly active pyocin producers were characterized by the presence of two pyocin genes, while in 47.7% of moderately active and 54.5% of low active producers, one pyocin gene was detected more often. It was established that with widening the bacteriocin activity spectrum, the detection frequency of pyocin S1 and S5 genes increases, and for pyocin S2 and S3 genes — decreases. Thus, among the producers of maximally and highly active bacteriocins, pyocin S1 and S5 genes were identified with the highest frequency — 42.8% and 78.6%, and pyocin S2 and S3 genes — with the lowest one — 28.6% and 7.1%, respectively. Gene of pyocin S4 with tRNase activity were detected with equally high frequency in all groups of producers. Conclusions. The method of activity assessment by the lysis intensity allows not only to determine the presence of pyocins, but also to phenotypically evaluate the level of their expression, which is an important criterion for the selection of perspective producers. Bacteriocins with a wider activity spectrum are synthesized by P. aeruginosa strains with higher resistance to the action of pyocins from other cultures. The most optimal genotypic criterion for the selection of a highly perspective pyocin producer, detection of genes combination of bacteriocins with different mechanisms of action — with DNase activity (pyocin S1) and the ability to pore formation (pyocin S5) — can be considered.
publisher PH "Akademperiodyka" of the NAS of Ukraine
publishDate 2024
url https://ojs.microbiolj.org.ua/index.php/mj/article/view/122
work_keys_str_mv AT balkoob phenotypicandgenotypiccriteriaforthescreeningofhighlyactivestypepyocinspseudomonasaeruginosaproducers
AT zelenalb phenotypicandgenotypiccriteriaforthescreeningofhighlyactivestypepyocinspseudomonasaeruginosaproducers
AT balkooi phenotypicandgenotypiccriteriaforthescreeningofhighlyactivestypepyocinspseudomonasaeruginosaproducers
AT bobyrna phenotypicandgenotypiccriteriaforthescreeningofhighlyactivestypepyocinspseudomonasaeruginosaproducers
AT voitsekhovskyvg phenotypicandgenotypiccriteriaforthescreeningofhighlyactivestypepyocinspseudomonasaeruginosaproducers
AT avdeevalv phenotypicandgenotypiccriteriaforthescreeningofhighlyactivestypepyocinspseudomonasaeruginosaproducers
AT balkoob phenotypicandgenotypiccriteriaforthescreeningofhighlyactivestypepyocinspseudomonasaeruginosaproducers
AT zelenalb phenotypicandgenotypiccriteriaforthescreeningofhighlyactivestypepyocinspseudomonasaeruginosaproducers
AT balkooí phenotypicandgenotypiccriteriaforthescreeningofhighlyactivestypepyocinspseudomonasaeruginosaproducers
AT bobirna phenotypicandgenotypiccriteriaforthescreeningofhighlyactivestypepyocinspseudomonasaeruginosaproducers
AT vojcehovsʹkijvg phenotypicandgenotypiccriteriaforthescreeningofhighlyactivestypepyocinspseudomonasaeruginosaproducers
AT avdêêvalv phenotypicandgenotypiccriteriaforthescreeningofhighlyactivestypepyocinspseudomonasaeruginosaproducers
AT balkoob fenotipovíígenotipovíkriteríídlâskrinínguvisokoaktivnihproducentívpíocinívstipupseudomonasaeruginosa
AT zelenalb fenotipovíígenotipovíkriteríídlâskrinínguvisokoaktivnihproducentívpíocinívstipupseudomonasaeruginosa
AT balkooi fenotipovíígenotipovíkriteríídlâskrinínguvisokoaktivnihproducentívpíocinívstipupseudomonasaeruginosa
AT bobyrna fenotipovíígenotipovíkriteríídlâskrinínguvisokoaktivnihproducentívpíocinívstipupseudomonasaeruginosa
AT voitsekhovskyvg fenotipovíígenotipovíkriteríídlâskrinínguvisokoaktivnihproducentívpíocinívstipupseudomonasaeruginosa
AT avdeevalv fenotipovíígenotipovíkriteríídlâskrinínguvisokoaktivnihproducentívpíocinívstipupseudomonasaeruginosa
AT balkoob fenotipovíígenotipovíkriteríídlâskrinínguvisokoaktivnihproducentívpíocinívstipupseudomonasaeruginosa
AT zelenalb fenotipovíígenotipovíkriteríídlâskrinínguvisokoaktivnihproducentívpíocinívstipupseudomonasaeruginosa
AT balkooí fenotipovíígenotipovíkriteríídlâskrinínguvisokoaktivnihproducentívpíocinívstipupseudomonasaeruginosa
AT bobirna fenotipovíígenotipovíkriteríídlâskrinínguvisokoaktivnihproducentívpíocinívstipupseudomonasaeruginosa
AT vojcehovsʹkijvg fenotipovíígenotipovíkriteríídlâskrinínguvisokoaktivnihproducentívpíocinívstipupseudomonasaeruginosa
AT avdêêvalv fenotipovíígenotipovíkriteríídlâskrinínguvisokoaktivnihproducentívpíocinívstipupseudomonasaeruginosa
first_indexed 2024-09-01T17:43:21Z
last_indexed 2024-09-01T17:43:21Z
_version_ 1809016528720363520
spelling oai:ojs2.ojs.microbiolj.org.ua:article-1222024-03-22T16:20:36Z Phenotypic and Genotypic Criteria for the Screening of Highly Active S-Type Pyocins Pseudomonas aeruginosa Producers Фенотипові і генотипові критерії для скринінгу високоактивних продуцентів піоцинів S-типу Pseudomonas aeruginosa Balko, O.B. Zelena, L.B. Balko, O.I. Bobyr, N.A. Voitsekhovsky, V.G. Avdeeva, L.V. Балкo, O.Б. Зелена, Л.Б. Балко, О.І. Бобир, Н.А. Войцеховський, В.Г. Авдєєва, Л.В. S-type pyocins Pseudomonas aeruginosa producers of highly active bacteriocins phenotypic and genotypic screening піоцини S-типу Pseudomonas aeruginosa продуценти високоактивних бактеріоцинів фенотиповий і генотиповий скринінг Bacteriocins of Pseudomonas aeruginosa, especially S-type pyocins, show high efficiency as analogs of antimicrobial drugs. Various screening methods can be used to identify producers of highly active pyocins, but there are no clear criteria for selecting perspective strains. The aim of this work was to determine criteria that can be used during phenotypic and genotypic screening for the selection of perspective highly active S-type pyocin P. aeruginosa producers. Methods. The objects of investigation were 40 P. aeruginosa strains. Pyocins were obtained from each culture, relative coefficients of activity spectrum and sensitivity were determined for all the strains used. The obtained results of the phenotypic screening were compared with the data of the genotypic screening. Results. The use of the proposed method of activity assessment according to the lysis intensity made it possible to phenotypically assess the expression of pyocin genes. It was established that according to the new criteria, only one strain — P. aeruginosa UCM B-333 — can be included in the group of the most active pyocin producers that inhibit the growth of more than 75% of indicator cultures. The majority of representatives of maximally and highly active producers were characterized by high resistance to the action of other pyocins, which can be considered as an additional criterion for the selection of perspective strains. During genotypic screening, it was established that the quantity of pyocin genes in the genome cannot be interpreted as a clear criterion of the producer’s perspective. However, 50% of representatives of maximally and highly active pyocin producers were characterized by the presence of two pyocin genes, while in 47.7% of moderately active and 54.5% of low active producers, one pyocin gene was detected more often. It was established that with widening the bacteriocin activity spectrum, the detection frequency of pyocin S1 and S5 genes increases, and for pyocin S2 and S3 genes — decreases. Thus, among the producers of maximally and highly active bacteriocins, pyocin S1 and S5 genes were identified with the highest frequency — 42.8% and 78.6%, and pyocin S2 and S3 genes — with the lowest one — 28.6% and 7.1%, respectively. Gene of pyocin S4 with tRNase activity were detected with equally high frequency in all groups of producers. Conclusions. The method of activity assessment by the lysis intensity allows not only to determine the presence of pyocins, but also to phenotypically evaluate the level of their expression, which is an important criterion for the selection of perspective producers. Bacteriocins with a wider activity spectrum are synthesized by P. aeruginosa strains with higher resistance to the action of pyocins from other cultures. The most optimal genotypic criterion for the selection of a highly perspective pyocin producer, detection of genes combination of bacteriocins with different mechanisms of action — with DNase activity (pyocin S1) and the ability to pore formation (pyocin S5) — can be considered. Бактеріоцини Pseudomonas aeruginosa, особливо піоцини S-типу, демонструють високу ефективність як аналоги антимікробних препаратів. Для виявлення продуцентів високоактивних піоцинів можуть бути застосовані різні методи скринінгу, однак критерії відбору перспективних штамів залишаються невідомими. Метою даної роботи було встановити критерії, які можуть бути використані при проведенні фенотипового і генотипового скринінгу для відбору перспективних продуцентів високоактивних піоцинів S-типу P. aeruginosa. Методи. Об’єктом дослідження були 40 штамів P. aeruginosa. З кожної культури отримували піоцини, визначали відносні показники спектру їх активності і чутливості продуцентів до використаних піоцинів інших штамів. Отримані результати фенотипового скринінгу порівнювали з даними генотипового скринінгу. Результати. Використання запропонованого методу визначення активності за інтенсивністю лізису дозволило фенотипово оцінити експресію генів піоцинів. Встановлено, що за новими критеріями до групи продуцентів максимально активних піоцинів, які пригнічують ріст понад 75% індикаторних культур, можна віднести лише один штам — P. aeruginosa УКМ В-333. Більшість представників максимально- і високоактивних продуцентів характеризувалися високою стійкістю до дії інших піоцинів, що можна розглядати як додатковий критерій для відбору перспективних штамів. За допомогою генетичного скринінгу встановлено, що кількість генів піоцинів в геномі не можна трактувати як чіткий критерій перспективності продуцента. Однак 50% представників продуцентів максимально- і високоактивних бактеріоцинів характеризувалися наявністю генів двох піоцинів, тоді як у 47.7% помірноактивних і 54.5% низькоактивних продуцентів частіше виявляли по одному гену піоцину. Встановлено, що з розширенням спектру активності бактеріоцинів частота виявлення генів піоцинів S1 і S5 зростає, а генів піоцинів S2 і S3 — знижується. Так, серед продуцентів максимально- і високоактивних бактеріоцинів гени піоцину S1 і S5 ідентифікували з найвищою частотою — 42.8% і 78.6%, а піоцинів S2 і S3 — з найнижчою — 28.6% та 7.1%, відповідно. Гени піоцина S4 з тРНКазною активністю виявляли з однаково високою частотою у всіх групах продуцентів. Висновки. Метод врахування інтенсивності лізису дозволяє не лише визначати наявність піоцинів, але й фенотипово оцінювати рівень їх експресії, що є важливим критерієм у відборі перспективних продуцентів. Бактеріоцини із ширшим спектром активності виділяють культури P. aeruginosa, які характеризуються вищою стійкістю до дії піоцинів інших штамів. Найбільш оптимальним генотиповим критерієм відбору високоперспективного продуцента можна вважати виявлення комбінації генів бактеріоцинів з різними механізмами дії — з ДНКазною активністю (піоцин S1) та зі здатністю до пороутворення (піоцин S5). PH "Akademperiodyka" of the NAS of Ukraine 2024-02-23 Article Article application/pdf https://ojs.microbiolj.org.ua/index.php/mj/article/view/122 10.15407/microbiolj86.01.039 Mikrobiolohichnyi Zhurnal; Vol. 86 No. 1 (2024): Mikrobiolohichnyi Zhurnal; 39-50 Мікробіологічний журнал; Том 86 № 1 (2024): Мікробіологічний журнал; 39-50 2616-9258 1028-0987 10.15407/microbiolj86.01 en https://ojs.microbiolj.org.ua/index.php/mj/article/view/122/49 Copyright (c) 2024 Mikrobiolohichnyi Zhurnal https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0