ШТАМ MESORHIZOBIUM CICERІ ND-64 — ЕФЕКТИВНИЙ МІКРОСИМБІОНТ НУТУ СУЧАСНИХ СОРТІВ

Objective. Study the competitiveness, complementarity and symbiotic activity of a new strain of chickpea nodule bacteria Mesorhizobium ciceri ND-64, study the influence of seed inoculation on the productivity and yield of chickpea varieties of Ukrainian selection under their cultivation in different...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Datum:	2021
Hauptverfasser:	Логоша, О. В., Воробей, Ю. О., Волкова, І. В., Усманова, Т. О.
Format:	Artikel
Sprache:	Ukrainisch
Veröffentlicht:	Institute of Agrocultural Microbiology and Agro-industrial Manufacture of NAAS of Ukraine 2021
Schlagworte:	бобово-ризобіальний симбіоз бульбочкові бактерії Mesorhizobium ciceri нут
Online Zugang:	https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/338
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:	Agriciltural microbiology
Завантажити файл:

Institution

Agriciltural microbiology

_version_	1871466012946202624
author	Логоша, О. В. Воробей, Ю. О. Волкова, І. В. Усманова, Т. О.
author_facet	Логоша, О. В. Воробей, Ю. О. Волкова, І. В. Усманова, Т. О.
author_institution_txt_mv	[ { "author": "О. В. Логоша", "institution": "Інститут сільськогосподарської мікробіології та агропромислового виробництва НААН" }, { "author": "Ю. О. Воробей", "institution": "Інститут сільськогосподарської мікробіології та агропромислового виробництва НААН" }, { "author": "І. В. Волкова", "institution": "Інститут сільськогосподарської мікробіології та агропромислового виробництва НААН" }, { "author": "Т. О. Усманова", "institution": "Інститут сільськогосподарської мікробіології та агропромислового виробництва НААН" } ]
author_sort	Логоша, О. В.
baseUrl_str	https://smic.in.ua/index.php/journal/oai
collection	OJS
datestamp_date	2026-07-22T10:10:47Z
description	Objective. Study the competitiveness, complementarity and symbiotic activity of a new strain of chickpea nodule bacteria Mesorhizobium ciceri ND-64, study the influence of seed inoculation on the productivity and yield of chickpea varieties of Ukrainian selection under their cultivation in different soil and climatic zones of Ukraine. Methods. Serological, gas chromatography, field experiment and statistical. Results. The use of a new strain of M. ciceri ND-64 for pre-sowing bacterization of chickpea seeds of varieties Skarb, Admiral, Odysei, Budzhak, Triumf and Pamiat upon growing in field experiments in the Steppe zone against the background of the local population of nodule bacteria contributes to a significant increase in nitrogen-fixing nodules by 5 % to 67 %, an increase in the mass of nodules by 10 % to 67 % and nitrogenase activity 26 % to 150 % compared with the positive control (inoculation with the reference strain of M. ciceri H-12). The use of M. ciceri ND- 64 for pre-sowing bacterization of chickpea seeds under cultivation in the Steppe zone of Ukraine also had a positive effect on increasing the yield of chickpea — by 4 % to 18 % compared to the positive control. Inoculation with a new strain of chickpea seeds of varieties Skarb, Triumf and Pamiat contributed to the formation of higher number of nodules (by 57 % to 89 %), increaseed mass of nodules (2.2–2.9 times) and their nitrogenase activity (2–4 times) compared with the positive control upon cultivation in the Polissia zone on the fields where there is no population of chickpea rhizobia. Under these conditions, an increase in structural parameters of yield, the highest gain in chickpea yield, increase in photosynthetic activity and protein content in grain upon inoculation with M. ciceri ND-64 was shown. Obtaining a specific antisera by immunization of rabbits allowed to detect serological relatedness of M. ciceri ND-64, M. ciceri H-101, Mesorhizobium sp. ND-601 and M. ciceri ND-64, isolated from chickpea nodules of Skarb and Pamiat varieties. The competitiveness of M. ciceri ND-64 was determined using the immunological method in the field experiment. It was found that 100 % of nodules have been formed by the representatives of M. ciceri ND-64 in the variant where this serological group was applied for inoculation in the variant with inoculation of the strain M. ciceri ND-64 100 % of the nodules were formed by representatives of this serogroup. Conclusion. M. ciceri ND-64 strain is an effective microsymbiont of chickpea plants, due to its virulence, competitiveness, nitrogen-fixing properties. According to the results of field experiments, it was shown that the new strain, complementary to all studied varieties differing in seed size and shape, type of bush and average height, forms an effective symbiosis for growing chickpea plants both against the active local population of rhizobia and upon the absence of M. cicerі population in the soil. Symbiotic parameters upon seed treatment with suspension of M. ciceri ND-64 exceed these values in the variants with inoculation using the reference strain of M. ciceri H-12 and strains isolated from the nodules of each study variety. Therefore, M. ciceri ND-64 can be used as a bioagent of a microbial preparation for inoculation of chickpea of different varieties in order to form an effective bean-rhizobial symbiosis, increase the productivity of this culture and improve seed quality.
doi_str_mv	10.35868/1997-3004.32.3-17
first_indexed	2025-07-17T12:25:34Z
format	Article
fulltext	3 ҐРУНТОВА МІКРОБІОЛОГІЯ Сільськогосподарська мікробіологія. 2020. Вип. 32. С. 3–17. ISSN 1997-3004 https://doi.org/10.35868/1997-3004.32.3-17 УДК 579.262:631.847.211:635.657 ШТАМ MESORHIZOBIUM CICERІ ND-64 — ЕФЕКТИВНИЙ МІКРОСИМБІОНТ НУТУ СУЧАСНИХ СОРТІВ О. В. Логоша, Ю. О. Воробей, І. В. Волкова, Т. О. Усманова Інститут сільськогосподарської мікробіології та агропромислового виробництва НААН, вул. Шевченка,97; м. Чернігів, 14035, Україна; e-mail: olga.logosha94@gmail.com Мета. Дослідити конкурентоспроможність, комплементарність нового штаму буль- бочкових бактерій нуту Mesorhizobium cicerі ND-64, вивчити вплив інокуляції насіння на продуктивність та урожайність різних сортів нуту за їх вирощування в різних ґрунтово- кліматичних зонах України. Методи. Серологічний, газохроматографічний, польового дослі- ду та статистичні. Результати. Застосування нового штаму M. ciceri ND-64 для передпо- сівної бактеризації насіння нуту сортів Скарб, Адмірал, Одисей, Буджак, Тріумф та Па- м’ять за вирощування в умовах польових дослідів у Степовій зоні на фоні місцевої популяції бульбочкових бактерій сприяє достовірному збільшенню кількості азотфіксувальних буль- бочок на 5–44 %, збільшенню маси бульбочок на 10–67 % та нітрогеназної активності на 26–150 %, якщо порівняти з позитивним контролем (інокуляція референтним штамом M. ci- ceri Н-12). Використання M. ciceri ND-64 для передпосівної бактеризації насіння нуту за ви- рощування в Степовій зоні України також позитивно впливало на збільшення урожайності нуту — на 4–18 % проти позитивного контролю. Інокуляція новим штамом насіння нуту сортів Скарб, Тріумф та Пам’ять сприяла утворенню більшої кількості бульбочок (на 57–89 %), зростанню маси бульбочок (в 2,2–2,9 раза) та їх нітрогеназної активності (в 2–4 рази) проти позитивного контролю за вирощування в зоні Полісся на полях, де відсут- ня популяція ризобій нуту. За цих умов показано збільшення структурних показників уро- жаю, найвищий приріст урожайності нуту, підвищення фотосинтетичної активності та вмісту білка в зерні за інокуляції M. ciceri ND-64. Отримання шляхом імунізації кролів спе- цифічної антисироватки дозволило виявити серологічну спорідненість штамів M. cice- ri ND-64, M. ciceri Н-101, Mesorhizobium sp. ND-601 та M. ciceri ND-64, виділених із бульбо- чок нуту сортів Скарб та Пам’ять. За використання імунологічного методу в умовах польового досліду визначено конкурентоспроможність M. ciceri ND-64. Встановлено, що у варіанті з інокуляцією штамом M. ciceri ND-64 100 % бульбочок утворено представниками цієї серогрупи. Висновки. Штам M. сicerі ND-64 є ефективним мікросимбіонтом рослин ну- ту, що зумовлено його вірулентністю, конкурентоспроможністю, азотфіксувальними влас- тивостями. За результатами польових дослідів показано, що новий штам, комплементар- ний до всіх досліджуваних сортів, що відрізняються за розміром та формою насіння, типом куща та середньою висотою, формує ефективний симбіоз за вирощування рослин нуту як на фоні активної місцевої популяції ризобій, так і відсутності популяції M. cicerі в ґрунті. Сим- біотичні показники за обробки насіння штамом M. cicerі ND-64 перевищують ці значення у варіантах з інокуляцією референтним штамом M. cicerі Н-12 та штамами, виділеними з бу- льбочок кожного досліджуваного сорту. Отже, M. cicerі ND-64 може використовуватись як біоагент мікробного препарату для інокуляції нуту різних сортів з метою формування ефективного бобово-ризобіального симбіозу, підвищення продуктивності цієї культури та покращення якості насіння Ключові слова: бобово-ризобіальний симбіоз, бульбочкові бактерії, Mesorhizobium ciceri, нут. © О. В. Логоша, Ю. О. Воробей, І. В. Волкова, Т. О. Усманова, 2020 4 Вступ. Кількісний та якісний склад по- пуляцій ризобій, сформованих у ґрунті під час вирощування бобових культур, часто не відповідає вимогам сільськогосподарського виробництва [1–2]. Аборигенні бульбочкові бактерії можуть поступатися за своєю ак- тивністю та ефективністю штамам, які селе- кціоновані за цими ознаками [3–4]. Тому включення в технології вирощування нуту інокуляції насіння високоефективними та конкурентоспроможними штамами M. cicerі є необхідним агрозаходом для отримання стабільних урожаїв культури [5–6]. З літературних джерел відомо явище комплементарності — здатності до форму- вання ефективної симбіотичної системи між визначеними штамами бульбочкових бакте- рій і бобовими рослинами певних сортів [7–8]. Так, деяким видам ризобій притаман- на сортова специфічність, обумовлена від- повідністю їх генотипу до генотипу росли- ни-хазяїна [9–10]. Штам бульбочкових бак- терій може утворювати ефективний симбіоз з рослинами одного сорту, водночас взає- модія з іншими сортами може бути менш ефективною [7; 11]. Зважаючи на активну селекцію нових сортів нуту, яка проводить- ся в Україні та за кордоном [12–13], актуа- льним є пошук ефективних штамів бульбо- чкових бактерій нуту шляхом комплемента- рного добору макро- та мікросимбіонтів, що сприятиме підвищенню врожайності цієї культури. Аналіз останніх досліджень і публіка- цій. Протягом 2007–2014 років в Україні проведено дослідження комплементарності штамів M. cicerі до різних сортів нуту в умо- вах Степової зони. Так, вітчизняними дослі- дниками підібрано ефективні штами M. cicerі до сортів Луганець, Смачний, Колорит, Ро- зана, Олександрит, Пам’ять, Тріумф та Бу- джак [7; 14]. Серед зазначених сортів нуту на момент нашого дослідження в Державному реєстрі сортів рослин, придатних до поши- рення в Україні, були зареєстровані лише со- рти Пам’ять, Буджак та Тріумф, а також нові сорти — Скарб та Одисей [15], до яких ще не підібрано комплементарні штами M. cicerі. У зоні Полісся подібні дослідження взагалі ра- ніше не проводилися. У роботах іноземних вчених показано, що ризобії нуту можуть належати до різних серологічних груп та водночас не виявляють серологічної спорідненості з іншими видами бульбочкових бактерій [10; 16]. Серологічну різноманітність штамів ризобій нуту, поши- рених в агроценозах України, та їхню конку- рентоспроможність майже не досліджено. Матеріали і методи. У серії вегетацій- них дослідів відібрано найефективніші шта- ми ризобій, виділені з бульбочок кожного досліджуваного сорту: M. ciceri ND-64 та M. ciceri ND-601 (з бульбочок нуту сорту Пам’ять), M. ciceri ND-101 (Скарб), Meso- rhizobium sp. ND-25 (Адмірал), Mesorhizo- bium sp. ND-3 (Одисей), Mesorhizobium sp. ND-46 (Буджак), Mesorhizobium sp. ND-50 (Тріумф). Як позитивний контроль вико- ристовували референтний штам — M. ciceri H-12 (виділений з бульбочок нуту сорту Сов- хозний 14). Сорти нуту селекції Селекційно-генетич- ного інституту — Національного центру на- сіннєзнавства та сортовивчення (СГІ-НЦНС) Пам’ять, Тріумф, Буджак, Одисей та Скарб є офіційно зареєстрованими (табл. 1) та прис- тосованими до ґрунтово-кліматичних умов України, придатні до інтенсивної технології вирощування й мають достатній рівень толе- рантності до основних хвороб. Сорт нуту Скарб районований для вирощування в Лісо- степу України [17]. Таблиця 1. Характеристика сортів нуту селекції СГІ-НЦНС Назва сорту Рік реєстрації Районування, зона Маса 1000 насінин, г Характеристика сорту Пам’ять 2002 Степ 315 середньонасінний Тріумф 2005 Степ 405 крупнонасінний Буджак 2008 Степ 410 крупнонасінний Одисей 2014 Степ 415 крупнонасінний Скарб 2017 Лісостеп 420 крупнонасінний Адмірал На випробуванні Степ 380 крупнонасінний ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2020. Вип. 32. 5 Вплив інокуляції бульбочковими бакте- ріями насіння нуту сортів Скарб, Адмірал, Одисей, Буджак, Тріумф і Пам’ять оціню- вали в умовах польового досліду СГІ-НЦНС (Одеська область). Ґрунтовий покрив пред- ставлений південним середньогумусним важкосуглинистим чорноземом на лесових відкладеннях та характеризується такими агрохімічними показниками: товщина гу- мусного шару — 40–50 см, вміст гумусу — 3,5–4,5 %; сума поглинутих основ — 40– 45 мг-екв. на 100 г ґрунту; вміст доступних форм елементів живлення (в мг-екв. на 100 г ґрунту): 3–4 — азоту, 10–15 — Р2О5 та 20– 30 — К2О; реакція ґрунтового розчину нейт- ральна або слаболужна (рН сольової витяж- ки — 6,0–7,2). Польові дослідження також проводили на дослідних ділянках Інституту сільського- сподарської мікробіології та агропромисло- вого виробництва Національної академії аг- рарних наук України (ІСМАВ НААН) в зоні Полісся (Чернігівська область). Ґрунтовий покрив — чорнозем вилугуваний неглибо- кий легкосуглинковий на лесовидних суг- линках, характеризується такими агрохі- мічними показниками: вміст гумусу в ор- ному шарі — 3,6 %, рухомих форм фосфору (за Кірсановим) — 210–240 мг P2O5 на 1 кг ґрунту, обмінного калію (за Кірсановим) — 160–170 мг K2O на 1 кг ґрунту, pH водне — 6,5. Для інокуляції насіння нуту в дослідах використовували рідку культуру бактерій, яку вирощували на качалці за 220 об./хв. протягом 3 діб. Розводили стерильною во- дою із розрахунку 106 клітин/насінину, титр визначали в камері Горяєва [18]. Насіння контрольного варіанту зволожували водою (1–2 % від маси). Для кожного сорту схема досліду вклю- чала інокуляцію суспензією референтного штаму M. ciceri Н-12 (позитивний контроль), варіант з використанням активного штаму, виділеного з бульбочок відповідного сорту, а також бактеризацію M. ciceri ND-64 — найефективнішим штамом за результатами вегетаційних дослідів. Облікова площа ділянок польових дослі- дів складала 10 м2. Повторність дослідів — 4-разова, розміщення варіантів — рендомі- зоване. Попередник — овес ярий. Протруй- ники та гербіциди не застосовували, бур’яни знищували вручну [19]. Нітрогеназну активність бульбочок ви- значали ацетиленовим методом на газовому хроматографі «Chrom-4» з полум’яно-іоніза- ційним детектором [20]. Визначення масової частки хлорофілів а і b проводили спектрофотометричним мето- дом. З метою отримання витяжки зелених пі- гментів свіжі листки розтирали у фарфоровій ступці з етиловим спиртом і кварцовим піс- ком. Після ретельної гомогенізації листків додавали ще 10 мл спирту, отриманий роз- чин відфільтровували за допомогою скляно- го фільтру й колби Бунзена. Доводили об’єм розчину до 25 мл. Мірну пробірку з отрима- ною витяжкою закривали гумовою пробкою, вміст добре перемішували та визначали за допомогою фотоелектроколориметра КФК-3 оптичну густину рідини [21]. Поліклональні імунні О-антисироватки до штаму M. cicerі ND-64 отримували за ме- тодичними рекомендаціями досліджень бу- льбочкових бактерій [22; 23]. Ризобії виро- щували на агаризованому бобовому середо- вищі за 28 °С. У логарифмічній фазі росту бактеріальну масу змивали з агару фізіологі- чним розчином, осаджували центрифугуван- ням. До осаду клітин бульбочкових бактерій додавали 5 мл фізіологічного розчину та 5 мл 2,5 %-го розчину глютарового альдегіду і на добу залишали в холодильній камері. Через добу бактеріальні клітини (антиген) відмивали від глютарового альдегіду фізіо- логічним розчином шляхом центрифугуван- ня. Осад ресуспендували фізіологічним роз- чином і доводили титр антигену до 2·109 клі- тин/мл. Сироватка до штаму була одержана шляхом імунізації кролів за схемою: чергу- вання введення щораз більшої дози антигену підшкірно й внутрішньошкірно спочатку з тижневим інтервалом, а потім — через 3 дні. Відбір крові здійснювали через тиждень піс- ля останньої імунізації (табл. 2). Розроблена схема дозволила одержати високоактивну антисироватку M. cicerі ND-64 з титром у гомологічних реакціях аглютинації 1:10 000. Специфічність антисироватки перевіря- ли в реакції аглютинації за методом Грубеля- Відаля [24]. Як антигени використовували повільно- та швидкорослі бульбочкові бак- терії різних видів, що зберігаються у Ко- лекції корисних ґрунтових мікроорганізмів ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2020. Вип. 32. 6 ІСМАВ НААН. Бактеріальну масу досліджу- ваних штамів змивали з агару фізіологічним розчином, кип’ятили та зберігали в холоди- льнику. Титр антигенів у реакції аглютинації становив 1·106 клітин/мл. Таблиця 2. Схема імунізації кролів шта- мом M. cicerі ND-64 № ін’єкції Кількість антигену, мл Титр антигену, клітин/мл Спосіб введення антигену Імунізація 1 1 106 Підшкірно 2 1 107 Внутріш- ньошкірно 3 1 108 Підшкірно 4 1 109 Внутріш- ньошкірно 5 2 109 Підшкірно Конкурентоспроможність штаму M. cice- rі ND-64 вивчали в умовах польового дослі- ду та визначали за допомогою реакції аглю- тинації. Для цього відбирали бульбочки, які формувалися на контрольних рослинах та на рослинах, інокульованих штамами M. cicerі Н-12 та M. cicerі ND-64. Кожну бульбочку руйнували скляною паличкою в окремому пеніциліновому флаконі з 1–2 мл фізіологіч- ного розчину. Отриманий гомогенат викори- стовували як антиген у реакції аглютинації. З кожного варіанта аналізували 40 бульбо- чок. Негативним контролем у реакції аглю- тинації були фізіологічний розчин + антиген (гомогенат бульбочок), позитивним — анти- сироватка + антиген, отриманий із чистої ку- льтури бульбочкових бактерій M. cicerі ND- 64, проти якої отримана антисироватка [18]. Визначення вмісту азоту та білка в на- сінні нуту проводили в Лабораторії агрохімі- чних, токсиколого-радіологічних досліджень екологічної безпеки ґрунтів та якості проду- кції Львівської філії ДУ «Держґрунтохоро- на» за ДСТУ 7169:2010 [25]. Статистичну обробку експерименталь- них даних здійснювали за допомогою мето- дів математичної статистики та з викорис- танням комп’ютерної програми Statistica 6.0 та ANOVA1. Обговорення результатів. Упродовж 2016–2017 років нами виділено 69 ізолятів Mesorhizobium sp. з бульбочок нуту шести сортів, відібраних у південному регіоні краї- ни (Одеська область), де в ґрунті сформува- лась активна популяція ризобій унаслідок багаторічного (понад 10 років) вирощування нуту, а також у нових районах вирощування цієї культури на полях західного регіону кра- їни (Львівська область) [26]. За результатами серії вегетаційних дос- лідів на стерильному субстраті для кожного досліджуваного сорту відбирали штами — найефективніші мікросимбіонти, виділені з бульбочок рослин відповідного сорту. Най- ефективніший симбіоз формувався за іноку- ляції насіння нуту сорту Пам’ять штамом M. сiceri ND-64, що сприяло утворенню на коренях рослин бульбочок на 82 % більше за позитивний контроль (інокуляцію референт- ним штамом M. сiceri Н-12). Ефективність бактеризації насіння нуту сортів української селекції досліджували в умовах польового досліду в південному регі- оні України. У фазу цвітіння визначали кіль- кість бульбочок, їх масу та нітрогеназну ак- тивність. Аналіз отриманих даних показав, що M. ciceri ND-64 формував найефективні- ший симбіоз з рослинами всіх досліджува- них сортів, якщо порівняти зі штамами, виді- леними з бульбочок цих сортів та референт- ним штамом M. ciceri Н-12. Його застосу- вання сприяло достовірному збільшенню кі- лькості бульбочок на 10–52 % і 5–44 % проти абсолютного й позитивного контролів, збі- льшенню маси бульбочок на 22–130 % і 10– 67 % відповідно, та нітрогеназної активності на 26–150 % проти референтного штаму M. ciceri Н-12 (рис. 1. А, Б, В). Отримані нами дані узгоджуються з ре- зультатами досліджень, проведених в різних країнах [1; 7; 27–29], згідно з якими інокуля- ція насіння нуту ефективними штамами бульбочкових бактерій сприяє збільшенню показників симбіотичної активності, навіть за вирощування рослин на ґрунтах з актив- ними аборигенними популяціями ризобій. З літературних даних відомо, що існує залежність між активністю нітрогенази та масою бульбочок у варіантах з інокуляцією ефективними штамами [3; 6; 30]. За резуль- татами наших досліджень також показано, що нітрогеназна активність бульбочок нуту та їх маса була найвищою у варіантах з іно- куляцією M. ciceri ND-64. ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2020. Вип. 32. 7 А) Б) 0 5 10 15 20 25 30 Кількість бульбочок, одиниць/рослину Контроль (Без інокуляції) Інокуляція M. cicerі Н-12 Інокуляція М. cicerі ND-101 Інокуляція M. сicerі ND-64 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-25 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-3 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-46 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-50 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-601 Сорт Адмірал Сорт Одисей Сорт Буджак Сорт Тріумф Сорт Пам’ятьСорт Скарб 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 Маса бульбочок, г/рослину Контроль (Без інокуляції) Інокуляція M. cicerі Н-12 Інокуляція М. cicerі ND-101 Інокуляція M. сicerі ND-64 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-25 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-3 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-46 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-50 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-601 Сорт Адмірал Сорт Одисей Сорт Буджак Сорт Тріумф Сорт Пам’ятьСорт Скарб ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2020. Вип. 32. 8 В) Рис. 1. Симбіотична активність нових штамів бактерій роду Mesorhizobium за вирощу- вання нуту в зоні Степу (СГІ-НЦНС, Одеська обл., 2018 р.): А) — кількість бульбочок; Б) — маса бульбочок; В) — нітрогеназна активність. Інокуляція насіння нуту ефективними штамами ризобій сприяє зростанню врожай- ності культури [1; 28; 31]. За даними вітчиз- няних та закордонних вчених, окремі штами ризобій можуть формувати ефективний сим- біоз лише з певними сортами нуту [7; 11; 14]. За даними наших досліджень, за вирощуван- ня нуту на ґрунтах з активною популяцією бульбочкових бактерій (Одеська область) найбільш ефективною виявилась обробка на- сіння суспензією M. ciceri ND-64, що сприя- ло підвищенню урожайності на 4–18 % і 13– 39 % проти позитивного й абсолютного кон- тролів для всіх досліджуваних сортів (табл. 3). Це свідчить про комплементарність цього штаму до крупнонасінних сортів нуту: Скарб, Адмірал, Одисей, Буджак та Тріумф і середньонасінного сорту Пам’ять. З літературних джерел відомо, що тип ґрунту та наявність аборигенної популяції бульбочкових бактерій може впливати на ефективність формування симбіозу [4, 27– 29]. У зв’язку з цим ми також досліджували ефективність нових штамів роду Mesorhizo- bium та їхню здатність до утворення ком- плементарних пар з рослинами сортів Скарб, Тріумф та Пам’ять в умовах Полісся на дос- лідному полі, де раніше не вирощували цю культуру, і в ґрунті не сформувалася попу- ляція ризобій нуту. Найвищі показники сим- біотичної активності спостерігали за іноку- ляції насіння бактеріальною суспензією M. cicerі ND-64. Так, кількість бульбочок зростала на 57–89 % до показників позитив- ного контролю, маса бульбочок — у 2,2– 2,9 раза, а їх нітрогеназна активність — у 2–4 рази (рис. 2. А, Б, В). Інокуляція насіння нуту суспензією M. cicerі ND-64 за вирощування в зоні По- лісся також сприяла найбільшому приросту структурних показників та врожайності всіх досліджуваних сортів, що свідчить про їх комплементарність даному штаму. Так, за бактеризації насіння нуту штамом M. cicerі ND-64 спостерігали підвищення висоти рос- лин (на 6–17 %), кількості бобів (на 19–62 %) та насінин (на 25–64 %), маси насінин з рос- лини (на 28–40 %) та збільшення врожайнос- ті на 28–35 % щодо показників контрольного варіанту (табл. 4). 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 Нітрогеназна активність, нмоль С2Н4/росл. за год. Контроль (Без інокуляції) Інокуляція M. cicerі Н-12 Інокуляція М. cicerі ND-101 Інокуляція M. сicerі ND-64 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-25 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-3 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-46 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-50 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-601 Сорт Адмірал Сорт Одисей Сорт Буджак Сорт Тріумф Сорт Пам’ятьСорт Скарб ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2020. Вип. 32. 9 Таблиця 3. Вплив інокуляції на врожайність нуту різних сортів (СГІ-НЦНС, Степова зона, 2018 р.) Сорти Варіанти досліду Урожайність, т/га Приріст (до контролю) т/га % Скарб Контроль (без інокуляції) 1,44 ± 0,11 – – Інокуляція M. cicerі Н-12 1,69 ± 0,07 0,25 17,4 Інокуляція М. cicerі ND-101 1,82 ± 0,04 0,38 26,4 Інокуляція M. сicerі ND-64 2,00 ± 0,09 0,56 38,9 Адмірал Контроль (без інокуляції) 1,56 ± 0,03 – – Інокуляція M. cicerі Н-12 1,71 ± 0,05 0,15 9,6 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-25 1,77 ± 0,08 0,21 13,5 Інокуляція M. сicerі ND-64 1,92 ± 0,04 0,36 23,1 Одисей Контроль (без інокуляції) 1,65 ± 0,03 – – Інокуляція M. cicerі Н-12 1,86 ± 0,06 0,21 12,7 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-3 1,94 ± 0,05 0,29 17,6 Інокуляція M. сicerі ND-64 2,06 ± 0,05 0,41 24,9 Буджак Контроль (без інокуляції) 1,68 ± 0,03 – – Інокуляція M. cicerі Н-12 1,89 ± 0,04 0,21 12,5 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-46 1,92 ± 0,01 0,24 14,3 Інокуляція M. сicerі ND-64 2,04 ± 0,07 0,36 21,4 Тріумф Контроль (без інокуляції) 1,66 ± 0,04 – – Інокуляція M. cicerі Н-12 1,85 ± 0,05 0,19 11,4 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-50 1,77 ± 0,03 0,11 6,6 Інокуляція M. сicerі ND-64 2,15 ± 0,04 0,49 29,5 Пам’ять Контроль (без інокуляції) 1,62 ± 0,04 – – Інокуляція M. cicerі Н-12 1,76 ± 0,05 0,14 8,6 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-601 1,79 ± 0,06 0,17 10,5 Інокуляція M. сicerі ND-64 1,83 ± 0,05 0,21 13,0 Відомо, що існує позитивний зв’язок між показниками інтенсивності процесу фо- тосинтезу в листках інокульованих рослин та здатністю до фіксування молекулярного азо- ту бульбочковими бактеріями [32]. Нами по- казано, що інокуляція насіння нуту M. cicerі ND-64 сприяє підвищенню вмісту хлорофілу а і b в листках на 33 % і 42 % проти абсолю- тного та позитивного контролів (табл. 5). Використання для бактеризації бобових культур мікробних препаратів на основі ефективних штамів ризобій сприяє підви- щенню азотфіксувальної активності буль- бочок, що забезпечує зростання вмісту в на- сінні азоту й білка [27]. Нами показано, що інокуляція насіння нуту сорту Пам’ять сус- пензією M. сicerі ND-64 сприяє зростанню вмісту азоту в насінні на 0,2 % і 0,4 %, масо- вої частки білка — на 1,3 % і 2,5 % щодо по- казників позитивного та абсолютного конт- ролів за фактичної вологості насіння. В пе- рерахунку на суху речовину цей показник становив 1,6 % і 2,8 % (табл. 6). Раніше нами встановлено, що штами ри- зобій нуту, виділені з місцевих популяцій Степової та Лісостепової зон України, істот- но розрізняються за морфолого-культураль- ними та фізіолого-біохімічними ознаками [26], що зумовило проведення серологічних досліджень за використання отриманої нами імунної антисироватки до найбільш ефек- тивного штаму M. ciceri ND-64. ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2020. Вип. 32. 10 А) Б) В) Рис. 2. Симбіотична активність нових штамів бактерій роду Mesorhizobium за вирощу- вання нуту в зоні Полісся (ІСМАВ НААН, Чернігівська обл., 2018 р.): А) — кількість бульбочок; Б) — маса бульбочок; В) — нітрогеназна активність. 0 5 10 15 20 25 30 35 Кількість бульбочок, одиниць/рослину Інокуляція M.cicerі Н-12 Інокуляція M. cicerі ND-101 Інокуляція M. cicerі ND-64 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-50 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-601 Сорт Скарб Сорт Тріумф Сорт Пам’ять 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800 Маса бульбочок, мг/рослину Інокуляція M.cicerі Н-12 Інокуляція M. cicerі ND-101 Інокуляція M. cicerі ND-64 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-50 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-601 Сорт Скарб Сорт Тріумф Сорт Пам’ять 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000 НАА, нмоль С2Н4/ /(рослину·год.) Інокуляція M.cicerі Н-12 Інокуляція M. cicerі ND-101 Інокуляція M. cicerі ND-64 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-50 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-601 Сорт Скарб Сорт Тріумф Сорт Пам’ять ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2020. Вип. 32. 11 Таблиця 4. Вплив інокуляції на структурні показники урожаю нуту (ІСМАВ НААН, зо- на Полісся, 2018 р.) Варіанти досліду Висота рослин, см Кількість бобів, од./рослину Кількість насінин, од./рослину Маса насінин, г/рослину Урожай- ність, т/га Сорт Скарб Контроль (без інокуляції) 52,5 ± 0,7 25,1 ± 0,9 13,4 ± 0,7 4,0 ± 0,2 1,21 ± 0,02 Інокуляція M. cicerі Н-12 56,0 ± 0,7 30,4 ± 1,4 15,1 ± 0,7 4,3 ± 0,2 1,39 ± 0,06 Інокуляція М. cicerі ND-101 57,6 ± 0,7 31,7 ± 1,1 17,6 ± 1,0 4,8 ± 0,2 1,45 ± 0,04 Інокуляція M. сicerі ND-64 61,6 ± 1,0 39,0 ± 3,0 19,2 ± 2,0 5,4 ± 0,6 1,63 ± 0,07 Сорт Тріумф Контроль (без інокуляції) 54,5 ± 0,7 24,1 ± 0,9 11,4 ± 0,7 3,0 ± 0,2 1,19 ± 0,02 Інокуляція M. cicerі Н-12 55,1 ± 1,0 30,8 ± 1,5 13,3 ± 0,7 3,6 ± 0,3 1,38 ± 0,02 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-50 55,9 ± 2,0 29,8 ± 1,7 12,9 ± 1,1 3,9 ± 0,4 1,42 ± 0,05 Інокуляція M. сicerі ND-64 56,2 ± 1,6 31,4 ± 1,8 16,8 ± 1,0 4,4 ± 0,3 1,64 ± 0,04 Сорт Пам’ять Контроль (без інокуляції) 102,3 ± 0,8 26,4 ± 0,7 16,1 ± 0,6 4,1 ± 0,2 1,24 ± 0,03 Інокуляція M. cicerі Н-12 108,2 ± 1,0 32,3 ± 1,0 17,5 ± 0,9 4,8 ± 0,3 1,45 ± 0,04 Інокуляція Mesorhizobium sp. ND-601 108,4 ± 1,3 35,5 ± 1,9 18,5 ± 1,3 4,9 ± 0,4 1,50 ± 0,02 Інокуляція M. сicerі ND-64 108,8 ± 1,1 42,9 ± 2,3 20,2 ± 2,0 5,3 ± 0,5 1,59 ± 0,05 Таблиця 5. Вміст хлорофілу в листках рослин нуту сорту Пам’ять Варіанти досліду Сума хлорофілів а + b, мг/100 г Контроль (без інокуляції) 149,4 ± 2,1 Інокуляція M. ciceri H-12 159,6 ± 1,5 Інокуляція M. ciceri ND-64 212,3 ± 3,4 Для серологічної ідентифікації бульбоч- кових бактерій використовують їхню влас- тивість утворювати не лише видоспецифічні антигени, а й ізоантигени, характерні для шта- мів одного виду, що впливає на формування специфічної антигенної структури у деяких штамів або груп штамів ризобій [10; 33]. Вивчення серологічних ознак мікросимбіон- тів нуту дає можливість здійснювати їх серо- логічне типування та дослідити конкуренто- спроможність ефективного штаму у різних ґрунтово-кліматичних умовах [34]. Встановлено, що отримана нами антиси- роватка не реагує зі штамами, які належать до повільнорослих ризобій видів Bradyrhizo- bium japonicum та Bradyrhizobium lupini, ін- тенсивнорослих бульбочкових бактерій родів Rhizobium та Ensifer, а також з більшістю штамів роду Mesorhizobium (табл. 7). Варто зазначити, що штами M. ciceri ND-101, Meso- rhizobium sp. ND-601, виділені з бульбочок нуту сортів Скарб та Пам’ять, виявилися се- рологічно спорідненими до штаму M. ciceri ND-64, до якого отримано антисироватку. Штами M. ciceri 065, M. ciceri НС-6 виявляли Таблиця 6. Вплив інокуляції насіння штамами M. cicerі на якість насіння нуту Варіанти досліду Вологість, % Вміст азоту за фактичної вологості, % Масова частка білка за фактич- ної вологості, % Масова частка білка в перерахунку на суху речовину, % Контроль (без інокуляції) 10,5 2,20 13,7 15,3 Інокуляція M. cicerі Н-12 9,7 2,38 14,9 16,5 Інокуляція M. cicerі ND-64 10,5 2,59 16,2 18,1 НІР05 0,01 0,10 0,09 0,05 ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2020. Вип. 32. 12 Таблиця 7. Результати реакції аглютинації бульбочкових бактерій різних видів з антисироваткою до M. ciceri ND-64 Штами мікроорганізмів Рослина-господар Антисироватка до M. ciceri ND-64 M. ciceri ND-64 Нут +++ M. ciceri ND-101 ++ M. ciceri Н-12 – M. ciceri Н-18 – M. ciceri 065 + M. ciceri НС-6 + M. ciceri 522 – Mesorhizobium sp. ND-25 – Mesorhizobium sp. ND-3 – Mesorhizobium sp. ND-46 – Mesorhizobium sp. ND-50 – Mesorhizobium sp. ND-601 +++ Mesorhizobium sp. NZ-11 – Mesorhizobium sp. NZ-25 – M. loti ЛД-1-2 Лядвенець – M. loti ЛД-8 – Mesorhizobium sp. АКЦ-4 Акація – Mesorhizobium sp. АКЦ-2 – Bradyrhizobium japonicum B-1967 Соя – Rhizobium leguminosarum B-1964 Горох – Ensifer meliloti ДН-15 Буркун – Ensifer meliloti 425a Люцерна – Bradyrhizobium lupini 367а Люпин – Примітка: +, ++, +++ — ступені аглютинації. слабку позитивну реакцію з отриманою ан- тисироваткою. Отже, ризобії M. ciceri ND- 101, Mesorhizobium sp. ND-601, M. ciceri 065, M. ciceri НС-6, які характеризуються помір- ною швидкістю росту на бобовому агарі (колонії з’являються на 4–6-у добу культи- вування), належать до однієї серогрупи зі штамом M. ciceri ND-64. Водночас штами з помірною швидкістю росту M. ciceri Н-12, M. ciceri Н-18, M. ciceri 522 та швидкорослі штами роду Mesorhizobium (колонії з’явля- ються на 2–3-ю добу) належать до інших се- рологічних груп. Тривале вирощування бобової культури в ґрунтах сприяє формуванню місцевої по- пуляції ризобій. Однак мікросимбіонти мо- жуть втрачати свою активність та ефектив- ність унаслідок мутаційних процесів [3; 6]. Тому для формування ефективного симбіо- тичного апарату необхідно проводити іноку- ляцію насіння високоефективними та конку- рентоспроможними штамами. Для визначення конкурентоспроможнос- ті нового штаму бульбочкових бактерій нуту нами проведено аналіз гомогенатів бульбо- чок (відібраних з дослідного поля ІСМАВ НААН, де почала формуватися популяція ризобій нуту завдяки 3-річному вирощуван- ню цієї культури) в реакції аглютинації. Показано, що в контрольному варіанті переважна кількість бульбочок (78,2 %) ут- ворена бактеріями — представниками серо- групи M. ciceri ND-64 (табл. 8). Всі бульбоч- ки, утворені внаслідок інокуляції M. ciceri ND-64, на 100 % належали до серогрупи цьо- го ж штаму. ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2020. Вип. 32. 13 Таблиця 8. Конкурентоспроможність штаму M. ciceri ND-64 в умовах польового досліду (ІСМАВ НААН, чорнозем вилугува- ний, 2019 р.) Варіанти досліду Частка бульбочок, утворе- них представниками серо- групи M. ciceri ND-64, % Без інокуляції (контроль) 78,2 Інокуляція M. ciceri Н-12 12,4 Інокуляція M. ciceri ND-64 100 НІР05 5 Отже, селекціоновано ефективний висо- ковірулентний конкурентоспроможний штам M. cicerі ND-64, комплементарний до біль- шості сортів нуту української селекції, який характеризується високою нітрогеназною ак- тивністю в симбіозі та сприяє підвищенню продуктивності, урожайності та якості на- сіння нуту. Висновки. Штам M. сicerі ND-64 є ефе- ктивним мікросимбіонтом рослин нуту, що зумовлено його вірулентністю, конкуренто- спроможністю, симбіотичними властивостя- ми. За результатами польових дослідів пока- зано, що новий штам характеризується здат- ністю до формування активного симбіозу з рослинами всіх досліджуваних сортів, що ві- дрізняються за розміром та формою насіння, типом куща та середньою висотою. Варто зазначити, що ефективний симбіоз формується за вирощування рослин нуту як на фоні активної місцевої популяції ризобій цієї культури, так і за відсутності популяції M. cicerі в ґрунті. Симбіотичні показники за обробки насіння штамом M. cicerі ND-64 пе- ревищують відповідні значення у варіантах з інокуляцією референтним штамом M. cicerі Н-12 та штамами, виділеними з бульбочок кожного досліджуваного сорту. З огляду на вищезазначене, ми рекомен- дуємо цей штам як біоагент мікробного пре- парату для інокуляції нуту різних сортів з метою формування ефективного бобово- ризобіального симбіозу, підвищення продук- тивності цієї культури та покращення якості насіння. ЦИТОВАНА ЛІТЕРАТУРА 1. Дідович С. В., Толкачов М. З., Бутвіна О. Ю. Ефективність симбіотичної азотфіксації в агро- ценозах України. Сільськогосподарська мікробі- ологія. 2008. Вип. 8. С. 117–125. 2. Lori M., Symnaczik S., Mader P., De Deyn G., Gattinger A. Organic farming enhances soil micro- bial abundance and activity — a metaanalysis and meta-regression. PLOS One. 2017. Vol. 12. № 7. e0180442. 3. Sadowsky M. J., Graham P. H. Soil Biology of the Rhizobiaceae. In: Spaink H. P., Kondorosi A., Hooykaas P. J. J. (eds). The Rhizobiaceae. Springer, Dordrecht. 1998. https://doi.org/10.1007/978-94- 011-5060-6 4. Elias N. V., Herridge D. F. Naturalised popu- lations of mesorhizobia in chickpea (Cicer arietinum L.) cropping soils: effects on nodule occupancy and productivity of commercial chickpea. Plant and soil. 2014. Vol. 387. №1–2. P. 233–249. https://doi.org/ 10.1007/s11104-014-2298-z 5. Santos M. S., Nogueira M. A., Hungria M. Microbial inoculants: reviewing the past, discussing the present and previewing an outstanding future for the use of beneficial bacteria in agriculture. AMB Express. 2019. Vol. 9. № 205. 6. Andrews M., Andrews M. E. Specificity in Legume-Rhizobia Symbioses. International journal of molecular sciences. 2017. Vol. 18(4). № 705. https://doi.org/10.3390/ijms18040705 7. Січкар В. І., Хухлаєв І. І., Бушулян О. В., Дідович С. В., Коблай С. В., Лаврова Г. Д., Ган- жело О. І. Інтенсифікація азотфіксувального по- тенціалу зернобобових культур шляхом компле- ментарного добору макро- і мікросимбіонтів. Наукові записки Тернопільського національного педагогічного університету. Серія: Біологія. 2014. Вип. 3(60). С. 165–169. 8. Duchene O., Vian J.-F., Celette F. Intercrop- ping with legume for agroecological cropping sys- tems: Complementarity and facilitation processes and the importance of soil microorganisms. A re- view. Agriculture, ecosystems & Environment. 2017. Vol. 240. P. 148–161. https://doi.org/10.1016/j.agee. 2017.02.019 9. Проворов И. А. Взаимосвязь между так- сономией бобовых и специфичностью их взаи- модействия с клубеньковыми бактериями. Бота- нический журнал. 1992. Т. 77. № 8. С. 21–32. 10. Suneja P., Dudeja S. S., Dahiya P. Deci- phering the phylogenetic relationships among rhizo- bia nodulating chickpea: A Review. Journal of ap- plied biology & Biotechnology. 2016. Vol. 4(03). P. 061–070. https://doi.org/10.7324/JABB.2016. 40310 ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2020. Вип. 32. 14 11. Pandey R. P., Srivastava A. K., Gupta V. K., O’Donovan A., Ramteke P. W. Enhanced yield of diverse varieties of chickpea (Cicer arietinum L.) by different isolates of Mesorhizobium ciceri. Environ- mental sustainability. 2018. Vol. 1(4). P. 425–435. https://doi.org/10.1007/s42398-018-00039-9 12. Бушулян О. В., Сичкарь В. И., Бушу- лян М. А., Пасичник С. М. Результаты перспек- тивы селекции нута в Украине. Зернобобовые и крупяные культуры. 2015. В. 4 (16). С. 49–54. 13. Gangola M. P., Båga M., Gaur P. M., Chib- bar R. N. Chickpea — nutritional quality and role in alleviation of global malnourishment. Legume Per- spectives. 2014. Vol. 3. P. 33–35. https://doi.org/ 10.1111/j.1757-837x.2012.00143.x 14. Дідович С. В. Формування та функціону- вання симбіозу Mesorhizobium ciceri – Cicer ari- etinum в агроценозах південного Степу України: автореф. дис. … канд. с.-г. наук / Інститут сіль- ськогосподарської мікробіології УААН, Чернігів, 2007. 15. Державний реєстр сортів рослин, прида- тних для поширення в Україні на 2018 р. 16. Gaur Y. D., Sen A. N. Cross inoculation group specificity in Cicer-Rhizobium symbiosis. New phytologist. 1979. Vol. 83. P. 745–754. https://doi.org/10.1111/j.1469-8137.1979.tb02305.x 17. Бушулян О. В. Селекція нуту — історія та перспективи. Збірник наукових праць СГІ-НЦНС. 2012. Вип. 20(60). С. 126–131. 18. Берестецкий О. А. Методические реко- мендации по получению новых штаммов клу- беньковых бактерий и оценке их эффективности. Л. : 1979. 33 с. 19. Доспехов Б. А. Методика полевого опыта с основами статистической обработки результа- тов исследований. М. : Агропромиздат, 1985. 352 с. 20. Hardy R. W. F., Holsten R. D., Jackson E. K., Burns R. C. The acetylene-ethylene assay for nitrogen fixation: laboratory and field evaluation. Plant Physiology. 1968. Vol. 43(8). P. 1185–1207. https://doi.org/10.1104/pp.43.8.1185 21. Грицаєнко З. М., Грицаєнко А. О., Кар- пенко В. П. Методи біологічних та агрохімічних досліджень рослин і ґрунтів. К. : НІЧЛАВА, 2003. 320 с. 22. Методи культивування та тривалого збе- рігання бульбочкових бактерій у колекціях: ме- тодичні рекомендації. Чернігів : ІСМАВ НААН, 2015. 36 с. 23. Методы исследований клубеньковых бактерий. Методические рекомендации для кур- сов повышения квалификации научных сотруд- ников по сельськохозяйственной микробиологии. Л., 1981. 48 с. 24. Кэбот Э., Мейер Б. Экспериментальная иммунология. М.: Медицина, 1968. 677 с. 25. ДСТУ 7169:2010. Корми, комбікорми, комбікормова сировина. Методи визначення вмі- сту азоту і сирого протеїну. К. : Держспоживста- ндарт України, 2010. 16 с. 26. Логоша О. В., Воробей Ю. О., Усмано- ва Т. О., Стрекалов В. М. Характеристика влас- тивостей бульбочкових бактерій нуту, пошире- них в агроценозах Лісостепової та Степової зон України. Сільськогосподарська мікробіологія. 2019. Вип. 29. С. 21–28. https://doi.org/10.35868/ 1997-3004.29.21-28 27. Zaman S., Abdul Mazid M., Kabir G. Effect of Rhizobium inoculant on nodulation, yield and yield traits of chickpea (Cicer arietinum L.) in four different soils of Greater Rajshahi. Journal of life and earth science. 2011. Vol. 6. P. 45–50. https://doi.org/10.3329/jles.v6i0.9720 28. Imran A., Mirza M. S., Shah T. M., Ma- lik K. A., Hafeez F. Y. Differential response of kabuli and desi chickpea genotypes toward inocu- lation with PGPR in different soils. Frontiers in microbiology. 2015. Vol. 6. https://doi.org/10.3389/ fmicb.2015.00859 29. Khaitov B., Kurbonov A., Abdiev A., Adi- lov M. Effect of chickpea in association with Rhizo- bium to crop productivity and soil fertility. Eurasian journal of soil science. 2016. Vol. 5(2). P. 105–112. https://doi.org/10.18393/ejss.2016.2.105-112 30. Rupela O. P. A visual rating system for nodulation of chickpea. International chickpea newsletter. 1990. Vol. 22. P. 22–25. 31. Gul R., Khan H., Khan N., Khan F. U. Characterization of chickpea germplasm for nodula- tion and effect of rhizobium inoculation on nodules number and seed yield. Journal of animal and plant sciences. 2014. Vol. 24(5). P. 1421–1429. 32. Bidyarani N., Prasanna R., Babu S., Hossa- in F., Saxena A. K. Enhancement of plant growth and yields in Chickpea (Cicer arietinum L.) through novel cyanobacterial and biofilmed inoculants. Mi- crobiological research. 2016. Vol. 188–189. P. 97– 105. https://doi.org/10.1016/j.micres.2016.04.005 33. Крутило Д. В., Волкова І. В. Серологічне різноманіття бульбочкових бактерій сої у ґрун- тах України. Агроекологічний журнал. 2012. № 4. C. 66–71. 34. Крутило Д. В. Конкурентоспроможність штамів бульбочкових бактерій сої з повільним та інтенсивним ростом. Сільськогосподарська мік- робіологія. 2011. Вип. 14. С. 64–76. Отримано 02.09.2020 ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2020. Вип. 32. 15 https://doi.org/10.35868/1997-3004.32.3-17 UDC 579.262:631.847.211:635.657 MESORHIZOBIUM CICERІ ND-64 STRAIN — EFFECTIVE MICROSYMBIONT OF MODERN CHICKPEA VARIETIES О. V. Lohosha, Yu. O. Vorobei, I. V. Volkova, T. O. Usmanova Institute of Agricultural Microbiology and Agroindustrial Manufacture, NAAS, Chernihiv е-mail: olga.logosha94@gmail.com Objective. Study the competitiveness, complementarity and symbiotic activity of a new strain of chickpea nodule bacteria Mesorhizobium ciceri ND-64, study the influence of seed inoculation on the productivity and yield of chickpea varieties of Ukrainian selection under their cultivation in dif- ferent soil and climatic zones of Ukraine. Methods. Serological, gas chromatography, field experi- ment and statistical. Results. The use of a new strain of M. ciceri ND-64 for pre-sowing bacteriza- tion of chickpea seeds of varieties Skarb, Admiral, Odysei, Budzhak, Triumf and Pamiat upon grow- ing in field experiments in the Steppe zone against the background of the local population of nodule bacteria contributes to a significant increase in nitrogen-fixing nodules by 5 % to 67 %, an increase in the mass of nodules by 10 % to 67 % and nitrogenase activity 26 % to 150 % compared with the positive control (inoculation with the reference strain of M. ciceri H-12). The use of M. ciceri ND- 64 for pre-sowing bacterization of chickpea seeds under cultivation in the Steppe zone of Ukraine also had a positive effect on increasing the yield of chickpea — by 4 % to 18 % compared to the positive control. Inoculation with a new strain of chickpea seeds of varieties Skarb, Triumf and Pamiat contributed to the formation of higher number of nodules (by 57 % to 89 %), increaseed mass of nodules (2.2–2.9 times) and their nitrogenase activity (2–4 times) compared with the posi- tive control upon cultivation in the Polissia zone on the fields where there is no population of chickpea rhizobia. Under these conditions, an increase in structural parameters of yield, the high- est gain in chickpea yield, increase in photosynthetic activity and protein content in grain upon in- oculation with M. ciceri ND-64 was shown. Obtaining a specific antisera by immunization of rab- bits allowed to detect serological relatedness of M. ciceri ND-64, M. ciceri H-101, Mesorhizobium sp. ND-601 and M. ciceri ND-64, isolated from chickpea nodules of Skarb and Pamiat varieties. The competitiveness of M. ciceri ND-64 was determined using the immunological method in the field experiment. It was found that 100 % of nodules have been formed by the representatives of M. ciceri ND-64 in the variant where this serological group was applied for inoculation in the vari- ant with inoculation of the strain M. ciceri ND-64 100 % of the nodules were formed by representa- tives of this serogroup. Conclusion. M. ciceri ND-64 strain is an effective microsymbiont of chick- pea plants, due to its virulence, competitiveness, nitrogen-fixing properties. According to the results of field experiments, it was shown that the new strain, complementary to all studied varieties differ- ing in seed size and shape, type of bush and average height, forms an effective symbiosis for grow- ing chickpea plants both against the active local population of rhizobia and upon the absence of M. cicerі population in the soil. Symbiotic parameters upon seed treatment with suspension of M. ciceri ND-64 exceed these values in the variants with inoculation using the reference strain of M. ciceri H-12 and strains isolated from the nodules of each study variety. Therefore, M. ciceri ND-64 can be used as a bioagent of a microbial preparation for inoculation of chickpea of different varieties in order to form an effective bean-rhizobial symbiosis, increase the productivity of this culture and improve seed quality. Keywords: bean-rhizobial symbiosis, nodular bacteria, Mesorhizobium ciceri, chickpea. REFERENCES 1. Didovych, S. V., Tolkachov, M. Z., & But- vina, O. Ju. (2008). Efektyvnist’ symbiotychnoi’ azotfiksacii’ v agrocenozah Ukrai’ny [Efficiency of symbiotic nitrogen fixation in agrocenoses of Uk- raine]. Silskogospodarska mikrobiologia — Agricul- tural Microbiology, 8, 117–125 [in Ukrainian]. 2. Lori, M., Symnaczik, S., Mäder, P., De De- yn, G., & Gattinger, A. (2017). Organic farming en- hances soil microbial abundance and activity — ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2020. Вип. 32. 16 A meta-analysis and meta-regression. PLOS One, 12(7), e0180442. https://doi.org/10.1371/journal. pone.0180442 3. Sadowsky, M. J., & Graham, P. H. (1998) Soil Biology of the Rhizobiaceae. In: Spaink H. P., Kondorosi A., Hooykaas, P. J. J. (Eds.) The Rhi- zobiaceae. Springer, Dordrecht. https://doi.org/ 10.1007/978-94-011-5060-6 4. Elias, N. V., & Herridge, D. F. (2014). Natu- ralised populations of mesorhizobia in chickpea (Cicer arietinum L.) cropping soils: effects on nod- ule occupancy and productivity of commercial chickpea. Plant and Soil, 387(1–2), 233–249. https://doi.org/10.1007/s11104-014-2298-z 5. Santos, M. S., Nogueira, M. A., & Hung- ria, M. Microbial inoculants: reviewing the past, dis- cussing the present and previewing an outstanding future for the use of beneficial bacteria in agricul- ture. AMB Express. 2019. Vol. 9. № 205. 6. Andrews, M., & Andrews, M. E. Specificity in Legume-Rhizobia Symbioses. (2017). Interna- tional Journal of Molecular Sciences, 18(4), 705. https://doi.org/10.3390/ijms18040705 7. Sіchkar, V. І., Huhlajev, І. І., Bushuljan, O. V. Dіdovich, S. V., Koblaj, S. V., Lavrova, G. D., & Ganzhelo, O. І. (2014). Іntensifіkacіja azotfіk- suval’nogo potencіalu zernobobovih kul’tur shlja- hom komplementarnogo doboru makro- і mіkrosim- bіontіv [Intensification of nitrogen-fixing potential of legumes by complementary selection of macro- and microsymbionts]. Naukovі zapiski Terno- pіl’s’kogo nacіonal’nogo pedagogіchnogo unіversi- tetu. Serіja: Bіologіja — Scientific Notes of Ternopil National Pedagogical University. Series: Biology, 3(60), 165–169 [in Ukrainian]. 8. Duchene, O., Vian, J.-F., & Celette, F. (2017). Intercropping with legume for agroecological crop- ping systems: Complementarity and facilitation pro- cesses and the importance of soil microorganisms. A review. Agriculture, Ecosystems & Environment, 240, 148–161. https://doi.org/10.1016/j.agee.2017. 02.019 9. Provorov, I. A. (1992). Vzaimosvyaz’ mezh- du taksonomiey bobovykh ispetsifichnost’yu ikh vzaimodeystviya s kluben’kovymi bakteriyami. [The relationship between the taxonomy of legumes and the specificity of their interaction with nodule bacte- ria]. Botanicheskiy zhurnal — Botanical journal, 77(8), 21–32 [in Russian]. 10. Suneja, P., Dudeja, S. S., & Dahiya, P. (2016). Deciphering the phylogenetic relationships among rhizobia nodulating chickpea: A Review. Journal of Applied Biology & Biotechnology, 4(03), 61–70. https://doi.org/10.7324/JABB.2016.40310 11. Pandey, R. P., Srivastava, A. K., Gupta, V. K., O’Donovan, A., & Ramteke, P. W. (2018). En- hanced yield of diverse varieties of chickpea (Cicer arietinum L.) by different isolates of Mesorhizobium ciceri. Environmental Sustainability, 1(4), 425–435. https://doi.org/10.1007/s42398-018-00039-9 12. Bushuljan, O. V., Sichkar’, V. I., Bushuljan, M. A., & Pasichnik, S. M. (2015). Rezul’taty per- spektivy selekcii nuta v Ukraine [Results of the per- spective of chickpea breeding in Ukraine]. Zerno- bobovye i krupjanye kul’tury — Legumes and Cere- als, 4(16), 49–54 [in Ukrainian]. 13. Gangola, M., Khedikar, Y., Gaur, P., Bå- ga, M., Varshney, R., & Chibbar, R. (2012). Varia- tion in important seed constituents among various chickpea genotypes. Quality Assurance and Safety of Crops & Foods, 4(3), 139–139. https://doi.org/ 10.1111/j.1757-837x.2012.00143.x 14. Didovych, S. V. (2007). Formation and functioning of symbiosis of Mesorhizobium ciceri — Cicer arietinum in agrocenoses of the southern steppe of Ukraine (Unpublished candidate thesis). Institute of Agricultural Microbiology and Agro- industrial Manufacture, NAAS, Chernihiv [in Ukrainian]. 15. Derzhavnij reiestr sortіv roslin, pridatnih dlja poshirennja v Ukrainy na 2018 r. [State register of plant varieties suitable for dissemination in Ukraine in 2018]. 16. Gaur, Y. D., Sen, A. N. (1979). Cross in- oculation group specificity in Cicer-Rhizobium symbiosis. New Phytologist, 83(3), 745–754. https://doi.org/10.1111/j.1469-8137.1979.tb02305.x 17. Bushuljan, O. V. (2012). Selekcija nutu — istorija ta perspektyvy [Chickpea breeding — histo- ry and prospects]. Zbirnyk naukovyh prac’ SGI- NCNS — Collection of scientific works of PBGI- NCSCI, 20(60), 126–131 [in Ukrainian]. 18. Berestetskiy O. A. (1979). Metodicheskie rekomendatsii po polucheniyu novykh shtammov kluben’kovykh bakteriy i otsenke ikh effektivnosti [Methodological recommendations for obtaining new strains of nodule bacteria and assessing their effectiveness]. Leningrad [in Russian]. 19. Dospehov, B. A. (1985). Metodika polevogo opyta s osnovami statisticheskoj obrabotki re- zul’tatov issledovanij [Methods of field experience with the basics of statistical processing of research results]. Moskva: Agropromizdat [in Russian]. 20. Hardy, R. W. F., Holsten, R. D., Jack- son, E. K., & Burns, R. C. (1968). The Acetylene- Ethylene Assay for N2 Fixation: Laboratory and Field Evaluation. Plant Physiology, 43(8), 1185– 1207. https://doi.org/10.1104/pp.43.8.1185 21. Gricayenko, Z. M., Gricayenko, A. O., & Karpenko, V. P. (2003). Metodi bіologіchnih ta agrohіmіchnih doslіdzhen’ roslin і gruntіv [Methods of biological and agrochemical studies of plants and soils]. Kiyv: NІChLAVA [in Ukrainian]. 22. Metodi kul’tivuvannja ta trivalogo zberі- gannja bul’bochkovih bakterіj u kolekcіjah: meto- dichnі rekomendacіyi [Methods of cultivation and ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2020. Вип. 32. 17 long-term storage of nodule bacteria in collections: guidelines]. Chernіgіv: IAMAM NAAS, 2015. 23. Metody issledovanij kluben’kovyh bakterij. Metodicheskie rekomendacii dlja kursov povyshnija kvalifikacii nauchnyh sotrudnikov po sel’s’kohozjaj- stvennoj mikrobiologii [Methods of research of nod- ule bacteria. Methodical recommendations for ad- vanced training courses for researchers in agricultur- al microbiology]. Leningrad, 1981. 48 р. [in Rus- sian]. 24. Kebot, E., Meyer, B. (1968). Jeksperi- mental’naya immunologiya [Experimental immu- nology]. Moskva: Medicina [in Russian]. 25. DSTU 7169:2010. (2010). Kormi, kombі- kormi, kombіkormova sirovina. Metodi viznachennja vmіstu azotu і sirogo proteinu [Feeds, compound feeds, compound feed raw materials. Methods for determining the content of nitrogen and crude pro- tein] Kyiv: Derzhspozhivstandart Ukraini [in Ukra- inian]. 26. Logosha, O. V., Vorobej, Ju. O., Usmano- va, T. O., & Strekalov V. M. (2019). Harakteristika vlastivostej bul’bochkovih bakterіj nutu, poshirenih v agrocenozah Lіsostepovoi ta Stepovoi zon Ukraini [Characteristics of properties of chickpea nodule bacteria common in agrocenoses of the Forest- Steppe and Steppe zones of Ukraine]. Sіl’s’kogospo- dars’ka mіkrobіologіja — Agricultural Microbiolo- gy, 29, 21–28. https://doi.org/10.35868/1997-3004. 29.21-28 [in Ukrainian]. 27. Zaman, S., Mazid, M. A., & Kabir, G. (1970). Effect of rhizobium inoculant on nodulation, yield and yield traits of chickpea (Cicer arietinum L.) in four different soils of greater rajshahi. Journal of Life and Earth Science, 6, 45–50. https://doi.org/ 10.3329/jles.v6i0.9720 28. Imran, A., Mirza, M. S., Shah, T. M., Ma- lik, K. A., & Hafeez, F. Y. (2015). Differential re- sponse of kabuli and desi chickpea genotypes toward inoculation with PGPR in different soils. Frontiers in Microbiology, 6. https://doi.org/10.3389/fmicb. 2015.00859 29. Khaitov, B., Kurbonov, A., Abdiev, A., & Adilov, M. (2016). Effect of chickpea in association with Rhizobium to crop productivity and soil fertili- ty. Eurasian Journal of Soil Science (EJSS), 5(2), 105. https://doi.org/10.18393/ejss.2016.2.105-112 30. Rupela, O. P. (1990). A visual rating system for nodulation of chickpea. International Chickpea Newsletter, 22, 22–25. 31. Gul, R., Khan, H., Khan, N., & Khan, F. U. (2014). Characterization of chickpea germplasm for nodulation and effect of rhizobium inoculation on nodules number and seed yield. Journal of Animal and Plant Sciences, 24(5), 1421–1429. 32. Bidyarani, N., Prasanna, R., Babu, S., Hoss- ain, F., & Saxena, A. K. (2016). Enhancement of plant growth and yields in Chickpea (Cicer ari- etinum L.) through novel cyanobacterial and bio- filmed inoculants. Microbiological Research, 188– 189, 97–105. https://doi.org/10.1016/j.micres.2016. 04.005 33. Krutilo, D. V., Volkova, І. V. (2012). Se- rologіchne rіznomanіttja bul’bochkovih bakterіj soi u gruntah Ukraini [Serological diversity of soybean nodule bacteriain the soil sof Ukraine]. Agroekolo gіchnij zhurnal — Agroecological journal, 4, 66–71 [in Ukrainian]. 34. Krutilo, D. V. (2011). Konkurentospromo- zhnіst’ shtamіv bul’bochkovih bakterіj soi z pov- іl’nim ta іntensivnim rostom [Competitiveness of strains of soybean nodule bacteria with slow and in- tensive growth]. Sіl’s’kogospodars’ka mіkrobіo- logіja — Agricultural Microbiology, 14, 64–76 [in Ukrainian]. Received 02.09.2020 ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2020. Вип. 32.
id	oai:ojs2.smic.in.ua:article-338
institution	Agriciltural microbiology
keywords_txt_mv	keywords
language	Ukrainian
last_indexed	2026-07-23T01:11:10Z
publishDate	2021
publisher	Institute of Agrocultural Microbiology and Agro-industrial Manufacture of NAAS of Ukraine
record_format	ojs
resource_txt_mv	smicinua/c9/40900a1563c04177ef261230fe2f0ec9.pdf
spelling	oai:ojs2.smic.in.ua:article-3382026-07-22T10:10:47Z MESORHIZOBIUM CICERІ ND-64 STRAIN — EFFECTIVE MICROSYMBIONT OF MODERN CHICKPEA VARIETIES ШТАМ MESORHIZOBIUM CICERІ ND-64 — ЕФЕКТИВНИЙ МІКРОСИМБІОНТ НУТУ СУЧАСНИХ СОРТІВ Логоша, О. В. Воробей, Ю. О. Волкова, І. В. Усманова, Т. О. bean-rhizobial symbiosis, nodular bacteria, Mesorhizobium ciceri, chickpea бобово-ризобіальний симбіоз, бульбочкові бактерії, Mesorhizobium ciceri, нут Objective. Study the competitiveness, complementarity and symbiotic activity of a new strain of chickpea nodule bacteria Mesorhizobium ciceri ND-64, study the influence of seed inoculation on the productivity and yield of chickpea varieties of Ukrainian selection under their cultivation in different soil and climatic zones of Ukraine. Methods. Serological, gas chromatography, field experiment and statistical. Results. The use of a new strain of M. ciceri ND-64 for pre-sowing bacterization of chickpea seeds of varieties Skarb, Admiral, Odysei, Budzhak, Triumf and Pamiat upon growing in field experiments in the Steppe zone against the background of the local population of nodule bacteria contributes to a significant increase in nitrogen-fixing nodules by 5 % to 67 %, an increase in the mass of nodules by 10 % to 67 % and nitrogenase activity 26 % to 150 % compared with the positive control (inoculation with the reference strain of M. ciceri H-12). The use of M. ciceri ND- 64 for pre-sowing bacterization of chickpea seeds under cultivation in the Steppe zone of Ukraine also had a positive effect on increasing the yield of chickpea — by 4 % to 18 % compared to the positive control. Inoculation with a new strain of chickpea seeds of varieties Skarb, Triumf and Pamiat contributed to the formation of higher number of nodules (by 57 % to 89 %), increaseed mass of nodules (2.2–2.9 times) and their nitrogenase activity (2–4 times) compared with the positive control upon cultivation in the Polissia zone on the fields where there is no population of chickpea rhizobia. Under these conditions, an increase in structural parameters of yield, the highest gain in chickpea yield, increase in photosynthetic activity and protein content in grain upon inoculation with M. ciceri ND-64 was shown. Obtaining a specific antisera by immunization of rabbits allowed to detect serological relatedness of M. ciceri ND-64, M. ciceri H-101, Mesorhizobium sp. ND-601 and M. ciceri ND-64, isolated from chickpea nodules of Skarb and Pamiat varieties. The competitiveness of M. ciceri ND-64 was determined using the immunological method in the field experiment. It was found that 100 % of nodules have been formed by the representatives of M. ciceri ND-64 in the variant where this serological group was applied for inoculation in the variant with inoculation of the strain M. ciceri ND-64 100 % of the nodules were formed by representatives of this serogroup. Conclusion. M. ciceri ND-64 strain is an effective microsymbiont of chickpea plants, due to its virulence, competitiveness, nitrogen-fixing properties. According to the results of field experiments, it was shown that the new strain, complementary to all studied varieties differing in seed size and shape, type of bush and average height, forms an effective symbiosis for growing chickpea plants both against the active local population of rhizobia and upon the absence of M. cicerі population in the soil. Symbiotic parameters upon seed treatment with suspension of M. ciceri ND-64 exceed these values in the variants with inoculation using the reference strain of M. ciceri H-12 and strains isolated from the nodules of each study variety. Therefore, M. ciceri ND-64 can be used as a bioagent of a microbial preparation for inoculation of chickpea of different varieties in order to form an effective bean-rhizobial symbiosis, increase the productivity of this culture and improve seed quality. Мета. Дослідити конкурентоспроможність, комплементарність нового штаму бульбочкових бактерій нуту Mesorhizobium cicerі ND-64, вивчити вплив інокуляції насіння на продуктивність та урожайність різних сортів нуту за їх вирощування в різних ґрунтовокліматичних зонах України. Методи. Серологічний, газохроматографічний, польового досліду та статистичні. Результати. Застосування нового штаму M. ciceri ND-64 для передпосівної бактеризації насіння нуту сортів Скарб, Адмірал, Одисей, Буджак, Тріумф та Пам’ять за вирощування в умовах польових дослідів у Степовій зоні на фоні місцевої популяції бульбочкових бактерій сприяє достовірному збільшенню кількості азотфіксувальних бульбочок на 5–44 %, збільшенню маси бульбочок на 10–67 % та нітрогеназної активності на 26–150 %, якщо порівняти з позитивним контролем (інокуляція референтним штамом M. ciceri Н-12). Використання M. ciceri ND-64 для передпосівної бактеризації насіння нуту за вирощування в Степовій зоні України також позитивно впливало на збільшення урожайності нуту — на 4–18 % проти позитивного контролю. Інокуляція новим штамом насіння нуту сортів Скарб, Тріумф та Пам’ять сприяла утворенню більшої кількості бульбочок (на 57–89 %), зростанню маси бульбочок (в 2,2–2,9 раза) та їх нітрогеназної активності (в 2–4 рази) проти позитивного контролю за вирощування в зоні Полісся на полях, де відсутня популяція ризобій нуту. За цих умов показано збільшення структурних показників урожаю, найвищий приріст урожайності нуту, підвищення фотосинтетичної активності та вмісту білка в зерні за інокуляції M. ciceri ND-64. Отримання шляхом імунізації кролів специфічної антисироватки дозволило виявити серологічну спорідненість штамів M. ciceri ND-64, M. ciceri Н-101, Mesorhizobium sp. ND-601 та M. ciceri ND-64, виділених із бульбочок нуту сортів Скарб та Пам’ять. За використання імунологічного методу в умовах польового досліду визначено конкурентоспроможність M. ciceri ND-64. Встановлено, що у варіанті з інокуляцією штамом M. ciceri ND-64 100 % бульбочок утворено представниками цієї серогрупи. Висновки. Штам M. сicerі ND-64 є ефективним мікросимбіонтом рослин нуту, що зумовлено його вірулентністю, конкурентоспроможністю, азотфіксувальними властивостями. За результатами польових дослідів показано, що новий штам, комплементарний до всіх досліджуваних сортів, що відрізняються за розміром та формою насіння, типом куща та середньою висотою, формує ефективний симбіоз за вирощування рослин нуту як на фоні активної місцевої популяції ризобій, так і відсутності популяції M. cicerі в ґрунті. Симбіотичні показники за обробки насіння штамом M. cicerі ND-64 перевищують ці значення у варіантах з інокуляцією референтним штамом M. cicerі Н-12 та штамами, виділеними з бульбочок кожного досліджуваного сорту. Отже, M. cicerі ND-64 може використовуватись як біоагент мікробного препарату для інокуляції нуту різних сортів з метою формування ефективного бобово-ризобіального симбіозу, підвищення продуктивності цієї культури та покращення якості насіння. Institute of Agrocultural Microbiology and Agro-industrial Manufacture of NAAS of Ukraine 2021-01-04 Article Article Рецензована Стаття application/pdf https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/338 10.35868/1997-3004.32.3-17 Agricultural microbiology; Vol. 32 (2021): Agriciltural microbiology; 3-17 Сільськогосподарська мікробіологія; Том 32 (2021): Сільськогосподарська мікробіологія; 3-17 1997-3004 10.35868/1997-3004.32 uk https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/338/423 Авторське право (c) 2021 О. V. Lohosha, Yu. O. Vorobei, I. V. Volkova, T. O. Usmanova https://creativecommons.org/licenses/by/4.0
spellingShingle	бобово-ризобіальний симбіоз бульбочкові бактерії Mesorhizobium ciceri нут Логоша, О. В. Воробей, Ю. О. Волкова, І. В. Усманова, Т. О. ШТАМ MESORHIZOBIUM CICERІ ND-64 — ЕФЕКТИВНИЙ МІКРОСИМБІОНТ НУТУ СУЧАСНИХ СОРТІВ
title	ШТАМ MESORHIZOBIUM CICERІ ND-64 — ЕФЕКТИВНИЙ МІКРОСИМБІОНТ НУТУ СУЧАСНИХ СОРТІВ
title_alt	MESORHIZOBIUM CICERІ ND-64 STRAIN — EFFECTIVE MICROSYMBIONT OF MODERN CHICKPEA VARIETIES
title_full	ШТАМ MESORHIZOBIUM CICERІ ND-64 — ЕФЕКТИВНИЙ МІКРОСИМБІОНТ НУТУ СУЧАСНИХ СОРТІВ
title_fullStr	ШТАМ MESORHIZOBIUM CICERІ ND-64 — ЕФЕКТИВНИЙ МІКРОСИМБІОНТ НУТУ СУЧАСНИХ СОРТІВ
title_full_unstemmed	ШТАМ MESORHIZOBIUM CICERІ ND-64 — ЕФЕКТИВНИЙ МІКРОСИМБІОНТ НУТУ СУЧАСНИХ СОРТІВ
title_short	ШТАМ MESORHIZOBIUM CICERІ ND-64 — ЕФЕКТИВНИЙ МІКРОСИМБІОНТ НУТУ СУЧАСНИХ СОРТІВ
title_sort	штам mesorhizobium cicerі nd-64 — ефективний мікросимбіонт нуту сучасних сортів
topic	бобово-ризобіальний симбіоз бульбочкові бактерії Mesorhizobium ciceri нут
topic_facet	bean-rhizobial symbiosis nodular bacteria Mesorhizobium ciceri chickpea бобово-ризобіальний симбіоз бульбочкові бактерії Mesorhizobium ciceri нут
url	https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/338
work_keys_str_mv	AT logošaov mesorhizobiumcicerínd64straineffectivemicrosymbiontofmodernchickpeavarieties AT vorobejûo mesorhizobiumcicerínd64straineffectivemicrosymbiontofmodernchickpeavarieties AT volkovaív mesorhizobiumcicerínd64straineffectivemicrosymbiontofmodernchickpeavarieties AT usmanovato mesorhizobiumcicerínd64straineffectivemicrosymbiontofmodernchickpeavarieties AT logošaov štammesorhizobiumcicerínd64efektivnijmíkrosimbíontnutusučasnihsortív AT vorobejûo štammesorhizobiumcicerínd64efektivnijmíkrosimbíontnutusučasnihsortív AT volkovaív štammesorhizobiumcicerínd64efektivnijmíkrosimbíontnutusučasnihsortív AT usmanovato štammesorhizobiumcicerínd64efektivnijmíkrosimbíontnutusučasnihsortív

ШТАМ MESORHIZOBIUM CICERІ ND-64 — ЕФЕКТИВНИЙ МІКРОСИМБІОНТ НУТУ СУЧАСНИХ СОРТІВ

Institution

Ähnliche Einträge