КОЛЕКЦІЯ ШТАМІВ TESCHOVIRUS A, SAPELOVIRUS A, ENTEROVIRUS G ІНСТИТУТУ СІЛЬСЬКОГОСПОДАРСЬКОЇ МІКРОБІОЛОГІЇ ТА АГРОПРОМИСЛОВОГО ВИРОБНИЦТВА НААН
Objective. Arrangement of the collection of porcine enteroviruses (PEV) strains isolated on the territory of Ukraine in accordance with the requirements of the International Committee on Virus Taxonomy and supplementing it with new strains Teschovirus A (TV-A), Sapelovirus A (SV-A), Enterovirus G (E...
Збережено в:
| Дата: | 2021 |
|---|---|
| Автор: | |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Українська |
| Опубліковано: |
Institute of Agrocultural Microbiology and Agro-industrial Manufacture of NAAS of Ukraine
2021
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/459 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Agriciltural microbiology |
| Завантажити файл: |  |
Репозитарії
Agriciltural microbiology| _version_ | 1871466255479734272 |
|---|---|
| author | С. В. , Дерев’янко |
| author_facet | С. В. , Дерев’янко |
| author_institution_txt_mv | [
{
"author": "Дерев’янко С. В. ",
"institution": "Інститут сільськогосподарської мікробіології та агропромислового виробництва НААН"
}
] |
| author_sort | С. В. , Дерев’янко |
| baseUrl_str | https://smic.in.ua/index.php/journal/oai |
| collection | OJS |
| datestamp_date | 2026-07-22T10:10:50Z |
| description | Objective. Arrangement of the collection of porcine enteroviruses (PEV) strains isolated on the territory of Ukraine in accordance with the requirements of the International Committee on Virus Taxonomy and supplementing it with new strains Teschovirus A (TV-A), Sapelovirus A (SV-A), Enterovirus G (EV-G). Methods. Virological, serological, molecular genetic, instrumental and statistical. Isolation, cultivation of viruses and determination of their biological activity were performed in passaged culture of porcine embryonic kidney cells (СНЕВ). The viral titre was calculated by the method of Reed and Muench. The typical affiliation of viruses was determined in the virus neutralization reaction in СНЕВ cell culture. Species affiliation was determined by reverse transcription polymerase chain reaction (RT PCR) using species-specific primers for TV-A, SV-A and EV-G, developed by us. Electron microscopy of viruses was performed on a transmission electron microscope by negative contrast enhancement method. Statistical processing was performed in Microsoft Office Excel and StatSoft STATISTICA 12. Results. As a result of the epizootic survey during 2002– 2019, 1,216 samples for virological testing were selected. Successive passages of СНЕВ cell culture resulted in obtaining 274 viral isolates. According to the results of studying physicochemical, morphological, biological properties of these isolated, they are classified as PEV. In connection with the change of taxonomy and nomenclature of PEV, serological and genetic reclassification of 30 strains of viruses isolated in Ukraine, including 14 reference strains according to the classification of V. P. Romanenko, 7 production strains, 9 strains with polyantigenic properties and 4 strains that did not have antigenic affinity with viruses of known PEV serotypes according to the classification of V. P. Romanenko was performed. It has been established that the reference strains of PEV according to the trivial classification of V. P. Romanenko belong to the species TV-A of the genus Teschovirus. As a result of conducted serological testing, PEV-10 M 2323, PEV-12 K 22, PEV-13 L 90, PEV-14 M 116, PEV-16 G 95, PEV-17 V 111, PEV-18 Ch 184, PEV-19 D 227, PEV-20 I 249, PEV-23 I 393 were classified as TV-A1; PEV-11 K 9, PEV-15 Ch 73 — as TV-A3, PEV-22 V 151 — as TV-A6. PEV-21 P 142 did not have antigen affinity with reference strains TV-A, SV-A and EV-G and belongs to a new serotype. Production strains of PEV-1 Perechynskyi 642, Bereznianskyi 652, Chernihivskyi 2372 were reclassified as TV-A1. PEV strains with polyantigenic properties such as G 31 and L 2661 have intertypic antigens with TV-A 1, 10, 11 and TV-A 3, 6, 10 serotypes, respectively. PEV strain of a new serotype Ch 881 was reclassified as SV-A. PEV strains Т 3, Ch 863, Ch 878 are the new serotypes of TV-A. Conclusion. As a result of studies, 274 viral isolates were isolated from 1,216 samples of material. The collection was supplemented with 20 reference strains of Teschovirus A, Sapelovirus A and Enterovirus G. Genetic and serological reclassification of 30 PEV strains isolated in Ukraine was performed. The collection of viral strains has been arranged in accordance with modern taxonomy and nomenclature. Seven viral strains were deposited. The collection of viruses has been supplemented with 4 strains of new serotypes of Teschovirus A. |
| doi_str_mv | 10.35868/1997-3004.34.69-85 |
| first_indexed | 2025-07-17T12:26:29Z |
| format | Article |
| fulltext |
69
ВІРУСОЛОГІЯ
Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34. С. 69–85.
ISSN 1997-3004
https://doi.org/10.35868/1997-3004.34.69-85
УДК 578.835
КОЛЕКЦІЯ ШТАМІВ TESCHOVIRUS A, SAPELOVIRUS A,
ENTEROVIRUS G ІНСТИТУТУ СІЛЬСЬКОГОСПОДАРСЬКОЇ
МІКРОБІОЛОГІЇ ТА АГРОПРОМИСЛОВОГО
ВИРОБНИЦТВА НААН
С. В. Дерев’янко
Інститут сільськогосподарської мікробіології та агропромислового виробництва НААН
вул. Шевченка, 97; м. Чернігів, 14035, Україна; e-mail: biopreparat@i.ua
Мета. Упорядкування колекції штамів ентеровірусів свиней (ЕВС), виділених на тери-
торії України, відповідно до вимог Міжнародного комітету з таксономії вірусів і доповнен-
ня її новими штамами Teschovirus A (TV-A), Sapelovirus A (SV-A), Enterovirus G (EV-G). Ме-
тоди. Вірусологічні, серологічні, молекулярно-генетичні, інструментальні та статистичні.
Виділення, культивування вірусів та визначення їхньої біологічної активності проводили у
перещеплюваній культурі клітин нирки ембріону свині (СНЕВ). Титр вірусу розраховували за
методом Ріда і Менча. Типову належність вірусів визначали в реакції нейтралізації вірусу в
культурі клітин СНЕВ. Видову належність — у полімеразній ланцюговій реакції зі зворот-
ною транскрипцією (ЗТ ПЛР) за використання видоспецифічних праймерів до TV-A, SV-A та
EV-G, розроблених нами. Електронну мікроскопію вірусів проводили на трансмісійному елек-
тронному мікроскопі методом негативного контрастування. Статистичну обробку прово-
дили в програмах Microsoft Office Excel та StatSoft STATISTICA 12. Результати. У підсумку
епізоотичного обстеження впродовж 2002–2019 років відібрано 1216 зразків матеріалів для
вірусологічних досліджень. Із застосуванням послідовних пасажів у культурі клітин СНЕВ
виділено 274 ізоляти вірусів. За результатами вивчення їхніх фізико-хімічних, морфологіч-
них, біологічних властивостей їх зараховано до ЕВС. У зв’язку зі зміною таксономії та но-
менклатури ЕВС проведено серологічну та генетичну рекласифікацію 30 штамів вірусів, ви-
ділених на території України, серед яких 14 еталонних штамів за класифікацією Романен-
ка В. П., 7 виробничих штамів, 9 штамів з поліантигенними властивостями та 4 штами, які
не мали антигенної спорідненості з вірусами відомих серотипів ЕВС за класифікацією Ро-
маненка В. П. Встановлено, що еталонні штами ЕВС за тривіальною класифікацією Рома-
ненка В. П. належать до виду TV-A роду Teschovirus. У підсумку проведених серологічних до-
сліджень ЕВС-10 M 2323, ЕВС-12 K 22, ЕВС-13 Л 90, ЕВС-14 M 116, ЕВС-16 Г 95, ЕВС-17 B
111, ЕВС-18 Ч 184, ЕВС-19 Д 227, ЕВС-20 И 249, ЕВС-23 И 393 зараховано до TV-A1; ЕВС-11
K 9, ЕВС-15 Ч 73 — до TV-A3; ЕВС-22 B 151 — до TV-A6. ЕВС-21 П 142 не має антигенної
спорідненості з еталонними штамами TV-A, SV-A та EV-G і належить до нового серотипу.
Виробничі штами ЕВС-1 Перечинський 642, Березнянський 652, Чернігівський 2372 рекласи-
фіковано як TV-A1. Штами ЕВС з поліантигенними властивостями Г 31 та Л 2661 мають
міжтипові антигенні з TV-A 1, 10, 11-го та TV-A 3, 6, 10-го серотипів відповідно. Штам
ЕВС нового серотипу Ч 881 рекласифіковано як SV-A. Штами ЕВС Т 3, Ч 863, Ч 878 є нови-
ми серотипами TV-A. Висновки. У підсумку проведених досліджень з 1216 проб матеріалу
виділено 274 ізоляти вірусів. Доповнено колекцію 20 еталонними штамами Teschovirus A,
Sapelovirus A та Enterovirus G. Проведено генетичну та серологічну рекласифікацію
30 штамів ЕВС, виділених в Україні. Упорядковано колекцію штамів вірусів відповідно до
© С. В. Дерев’янко, 2021
70
сучасної таксономії й номенклатури. Депоновано 7 штамів вірусів. Доповнено колекцію віру-
сів 4 штамами Teschovirus A нових серотипів.
Ключові слова: Teschovirus A, Sapelovirus A, Enterovirus G, колекція штамів вірусів, так-
сономія, номенклатура.
Вступ. Ентеровіруси свиней (ЕВС) є
збудниками багатьох хвороб. Ензоотичний
енцефаломієліт є однією з найнебезпечніших
хвороб свиней і характеризується негнійним
запаленням мозку, паралічами і парезами.
Trefny L. [1] вперше у 1930 роцi спостерiгав
цю хворобу в мiстечку Тешенi (Чехія), звiдки
й походить друга її назва — хвороба Тешена
свиней, або Тешенська хвороба. Кlobouk A.
у 1933 роцi описав хворобу й зробив припу-
щення, що її етіологічним агентом є вiрус
[2].
У 60-х роках ХХ століття встановлено
основнi морфологічні, бiологiчнi, фiзико-
хiмiчнi та антигенні властивості ЕВС, які ля-
гли в основу їх міжнародної класифікації. У
1971 р. за результатами вивчення антигенних
властивостей 72 європейських, американсь-
ких та японських штамів ЕВС, Dunne Н. et al.
[3] встановили 8 серотипiв (ЕВС 1–8). Кла-
сифікацію ЕВС було продовжено і в наступні
роки: Knowles N. et al. [4] доповнили класи-
фікацію Dunne H. et al. трьома (ЕВС 9–11), а
Auerbach J. et al. — двома (ЕВС 12 і 13) но-
вими серотипами [5; 6]. Крім того, Honda E.
et al. [7] встановили 4 нові серотипи ЕВС.
Вивчення ЕВС в нашій державі розпоча-
лося в 1961 р. в Інституті сільськогосподар-
ської мікробіології та агропромислового ви-
робництва НААН (ІСМАВ) з ініціативи ака-
деміка М. В. Рево та доктора В. А. Рождест-
венського [8]. Академік В. П. Романенко [9]
на теренах України в 1971 р. вперше діагнос-
тував ензоотичний енцефаломієліт свиней в
Закарпатській області. Згодом колективом
лабораторії вірусології Інституту сільського-
сподарської мікробіології НААН була роз-
роблена система заходів боротьби з цією
хворобою, що передбачала живу вакцину
(1984 р.) проти хвороби Тешена свиней [10]
на основі вітчизняного авірулентного штаму,
яка і на сьогоднішній день використовується
в господарствах України, набір діагностику-
мів (1982 р.) для реакції нейтралізації в куль-
турі клітин та прямої імунофлюоресценції
[11; 12] та імуноферментного аналізу [13], а
також інструкцію з заходів боротьби з ензо-
отичним енцефаломієлітом (хворобою Те-
шена) свиней (1979) [14].
Розроблено i впроваджено у практику
ветеринарної медицини набори дiагности-
кумiв ентеровiрусної пневмонії, ентеровiру-
сного гастроентериту та ентеровірусних пне-
вмоентеритів свиней [15–18].
За цей час співробітниками Інституту
ідентифіковано сотні штамів, які зараховано
до відомих і нових серотипів [19; 20]. Для
класифікації виділених вірусів у 1970 від
професора Derbyshire H. W. (Велика Брита-
нія) було отримано еталонні на той час шта-
ми ЕВС. У підсумку проведеної серологічної
класифікації Романенко В. П з спiвавт. [21]
встановили 14 нових серотипів ЕВС, які по-
ки що не увійшли до міжнародної класифі-
кації.
Крім того, нами та іншими дослідниками
виділено ентеровіруси свиней, які в реакції
нейтралізації вірусу мають міжтипові анти-
генні властивості, що ускладнює встанов-
лення їхнього таксономічного положення на
рівні серотипу [22; 23]. Усі ці штами зберіга-
лися в колекції вірусів ІСМАВ.
У міру накопичення даних щодо генети-
чної структури вірусів на 11 Міжнародному
конгресі з вірусології, який відбувся у 1999
році у Сіднеї, було прийнято низку змін що-
до таксономії й номенклатури пікорнавірусів
[24]. За рішенням Міжнародного комітету з
таксономії вірусів (ICTV — The International
Committee on Taxonomy of Viruses) скасова-
но всі наявні види (до цього вид був еквіва-
лентом серотипу). Введено новий критерій
виду. За рішенням ICTV, вид — це група по-
дібних за своїми властивостями серотипів чи
штамів вірусів. Таксони формуються за та-
кими критеріями: властивості віріону, орга-
нізація і реплікація геному, антигенні та біо-
логічні властивості.
Найбільш суттєвих змін зазнав рід
Enterovirus, зокрема ентеровіруси свиней. На
основі генетичних досліджень, проведених
Zell, R. et al., [25], Kaku Y. et al. [26] та Do-
herty M. et al. [27], ICTV рекласифікував ен-
теровіруси свиней на 3 види, які розподілено
на 2 роди. ЕВС 1–7, 11–13-го серотипів зара-
ховано до виду Porcine teschovirus (PTV),
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
71
який нараховував 11 серотипів і винесено в
окремий рід Teschovirus. Назва роду похо-
дить від назви найнебезпечнішої хвороби
свиней — хвороби Тешена, яку можуть зу-
мовлювати представники цього роду. Енте-
ровіруси свиней 8-го серотипу рекласифіко-
вані як Porcine enterovirus A, а 9, 10-го —
Porcine enterovirus В, які було зараховано до
роду Enterovirus.
Згодом PTV рекласифіковано як вид
Teschovirus А (TV-A) і віднесено до роду
Teschovirus, який на цей час нараховує 14 се-
ротипів (табл. 1). Porcine enterovirus A рекла-
сифіковано в окремий рід Sapelovirus, вид Sa-
pelovirus A (SV-A), а Porcine enterovirus В —
у вид Enterovirus G (EV-G) у межах роду
Enterovirus і нараховує 20 серотипів [28; 29].
У 2020 році до роду Teschovirus включе-
но новий вид Teschovirus В (TV-B), який на-
раховує 3 нових серотипи. У 2018 році були
виділені віруси, які спочатку іменували
Teschovirus А. Після вивчення геному віру-
сів, їх біологічних та фізикохімічних власти-
востей, ці віруси були віднесені до окремого
виду Teschovirus В у межах роду Teschovirus
[30–33].
Класифікація та номенклатура вірусів є
одним із найбільш динамічних розділів віру-
сології й постійно зазнає змін. На сьогодні
сукупність усіх вірусів не має таксономічно-
го рангу та не входить до трьохдоменного
дерева життя. Вірусам не надається статусу
домена або імперії. Натомість вони входять
до так званого неклітинного життя [34]. Су-
часна класифікація універсальна для всіх ві-
русів. Вона розробляється ICTV та поряд з
вірусами містить інші форми неклітинного
життя: сателіти, віроїди та агенти губчастих
Таблиця 1. Колекційні штами ентеровірусів свиней, використані у роботі
Серотип Штами
1 Konratice, Talfan, Ч 2372, Б 652, П 642
2 T 80, F 59, И 47, К 419
3 F 34, Ж 53, В 617
4 F 78, И 57, К 423, В 173
5 F 12, Б 547, Р 190
6 F 7, В 620
7 F 43
8 V 13, И 54, Д 2600
10 М 2323, Г 676
11 К 9, Р 100
12 К 22, М 2603
13 Л 90, Н 602, И 52
14 М 116, М 2607, Ж 75
15 Ч 73, Ч 72
16 Г 95, В 161
17 Б 111, Р 221
18 Ч 184
19 Д 227
20 И 249
21 П 142
22 В 151
23 И 393
Штами нових серотипів Г241, Г 242, С 246, Ч 881, Ч 863, Ч 878
Штами з міжтиповими
антигенними властивостями
И 57, И 59, К 422, Р 501, Ч 756, Г 676, Л 2661, Р 507, Р 218, Г 680,
И 23, И 397, Т 745, Б 695, Т 794, И 23, 706, Л 2661
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
72
енфалопатій (пріони) людини та деяких ви-
дів тварин. За даними ICTV, віруси містять у
собі 6 світів (англ. realms), 10 царств, 17 філ
(англ. phyla), 2 підфіли (англ. subphyla), 39
класів, 59 порядків, 8 підпорядків, 189 ро-
дин, 136 підродин, 2224 роди, 70 підродів та
9110 видів вірусів [35].
Згідно з рішеннями ICTV родина Picor-
naviridae містить 68 родів: Aalivirus, Ailurivi-
rus, Ampivirus, Anativirus, Aphthovirus, Aqua-
mavirus, Avihepatovirus, Avisivirus, Boosepivi-
rus, Bopivirus, Caecilivirus, Cardiovirus, Cosa-
virus, Crahelivirus, Crohivirus, Danipivirus,
Dicipivirus, Diresapivirus, Enterovirus, Erbovi-
rus, Felipivirus, Fipivirus, Gallivirus, Gruheli-
virus, Grusopivirus, Harkavirus, Hemipivirus,
Hepatovirus, Hunnivirus, Kobuvirus, Kunsagi-
virus, Limnipivirus, Livupivirus, Ludopivirus,
Malagasivirus, Marsupivirus, Megrivirus, Mi-
schivirus, Mosavirus, Mupivirus, Myrropivirus,
Orivirus, Oscivirus, Parabovirus, Parechovirus,
Pasivirus, Passerivirus, Pemapivirus, Poecivi-
rus, Potamipivirus, Pygoscepivirus, Rabovirus,
Rafivirus, Rajidapivirus, Rohelivirus, Rosavirus,
Sakobuvirus, Salivirus, Sapelovirus, Senecavi-
rus, Shanbavirus, Sicinivirus, Symapivirus, Te-
schovirus, Torchivirus, Tottorivirus, Tremovi-
rus, Tropivirus та охоплює 158 видів вірусів
[36].
Згідно з останніми даними ICTV, ЕВС
розподілено на 3 роди (Teschovirus, Sapelovi-
rus, Enterovirus), які містять 4 види: Tescho-
virus A (14 серотипів), Teschovirus B (3 серо-
типи), Sapelovirus A (1 серотип), Enterovi-
rus G (20 серотипів) [32; 37–40].
У зв’язку зі змінами, внесеними ICTV,
виникла необхідність у проведенні генетич-
ної та серологічної рекласифікації ЕВС, які
виділено в Україні, в упорядкуванні колекції
штамів ІСМАВ відповідно до нової класифі-
кації та номенклатури пікорнавірусів.
Враховуючи вищенаведене, метою на-
ших досліджень було упорядкування колек-
ції штамів вірусів свиней, виділених на тери-
торії України, відповідно до вимог Міжна-
родного комітету з таксономії вірусів і
доповнення її новими штамами Teschovi-
rus A, Sapelovirus A, Enterovirus G.
Матеріали й методи досліджень. У до-
слідах використано штами ЕВС 21 серотипу
згідно з тривіальною класифікацією Романе-
нка В. П. [21; 41] із яких 7 штамів (Konratice,
Talfan, T 80, F59, F34, F78, F12, F7, V13, 1–6
та 8-го серотипiв) класифіковано Dunne H. W.
зі спiвавт. [3] i 14 штамів (М2323, К9, К22,
Л90, М116, Ч73, Г95, Б111, Ч184, Д227,
И249, П142, В151, И393, відповідно 10–23-го
серотипiв) виділено та класифіковані Рома-
ненко В. П. зі співавт. [21, 41].
Для досліджень використали штами
ентеровірусів свиней, виділені в Україні,
Ч 2372, Б 652, П 642, И 59, К 422, Р 501,
Ч 756, В-15, Ч 881, Ч 863, Ч 878, И 47, К 419,
Ж 53, В 617, 57, К 423, В 173, Б 547, Р 190,
В 620, И 54, Д 2600, Г 676 , Р 100, М 2603,
Н 602, И 52, М 2607, Ж 75, Ч 72, В 161,
Р 221, Г 241, Г 242, С 246, Г 676, Л 2661,
Р 507, Р 218, Г 680, И 23, И 397, Т 745, Б 695,
Т 794, И 23, 706, Л 2661. Ці штами виділені
від поросят співробітниками лабораторії ві-
русології ІСМАВ і зберігаються в колекції
штамів ЕВС (табл. 1).
Дослідження вірусів проводили в пере-
щеплюваній культурі клітин нирки ембріону
свині (СНЕВ). Для вирощування культур
клітин використовували живильні середови-
ща 199 та Iгла (ТОВ НВП «Біо-тест-лабо-
раторія» та НМЦ «Інститут експерименталь-
ної і клінічної ветеринарної медицини»
НААН, Україна), сироватку крові великої ро-
гатої худоби (АТ «Конотопм’ясо», Україна)
та ембріональну сироватку крові великої ро-
гатої худоби (Sigma-Aldrich, USU).
Для визначення біологічної активності
штамів вірусів готували 10-кратнi розведен-
ня вірусу на фізіологічному розчині. Віруси
інкубували за температури 37 °С. Облік ре-
зультатів цитопатичної дії (ЦПД) проводили
на 3–7-у добу. Титр вірусів вираховували за
методом Reed L. J. i Muench H. [42].
Фізико-хімічні властивості (стійкість до
ліпідорозчинників, різних рН середовищ, ін-
гібіторів синтезу ДНК, терморезистентність)
досліджували загальновживаними методами
[43–46].
Електронну мікроскопію проводили на
трансмісійних електронних мікроскопах Tes-
la (Чехословаччина), ЕМ-125 К (Україна),
JEOL JEM-1400 (Японія) методом негатив-
ного контрастування.
Гіперімунні кролячі сироватки крові до
штамів вірусів отримані за модифікованою
нами схемою, за допомогою почергового
введення антигену внутрішньошкірно без
ад’юванту та підшкірно з ад’ювантом Monta-
nide ISA 25 (SEPPIC, Франція) [47].
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
73
Типову належність вірусів визначали в
реакції нейтралізації (РН) в культурі клітин
за використання 100 ТЦД50 вірусу та 10 ней-
тралізуючих доз гіперімунних кролячих си-
роваток крові до еталонних штамів TV-A,
SV-A, EV-G та ЕВС [48].
Для видової ідентифікації вірусів у по-
лімеразній ланцюговій реакції зі зворотною
транскрипцією (ЗТ ПЛР) використовували
розроблені нами праймери [49]. Підбір прай-
мерів здійснювали за результатами аналізу
геномів TV-A, EV-G та SV-A з використан-
ням програми «Align X (Vector NTI Suite)» і
баз даних GenBank, EMBL, DDBJ.
Праймери для ідентифікації TV-A мають
таку послідовність:
Sense Primer: TeschoF51 5’-CCAGCAG
CCTCTGTTCAGAAAG
Antisense Primer: TeschoR51 5’-GC(A/G)
TACTTGTATGAGGCCCATC
Вони фланкують ділянку гену поліпро-
теїну TV-A 11-го серотипу штаму Dresden
(AF296096, Gene Bank) довжиною 650 нук-
леотидних залишків, починаючи з 5271 по
5920 нуклеотид.
Для ідентифікації SV-A було отримано
праймери, які фланкують ділянку гену полі-
протеїну («2A protein») SV-A штаму V13
(AF406813, Gene Bank) з 3141 по 3598 нук-
леотиди, довжиною 458 нуклеотидних зали-
шків:
Sense Primer: Pev8F6 5’-TGCCAAACTA
AGAACGCCACTG
Antisense Primer: Pev8R6 5’-TCACCTT
CTGCCATCCACAATC
Видоспецифічні праймери для геному
EV-G мають таку послідовність:
Sense Primer: Pev9F1 5’-GGATTGCGG
TCAAGCACTTCTGTT
Antisense Primer: Pev9R1 5’-CGTGGTT
AGGATTAGCCGCATTC
Вони підібрані до ділянки гена поліпро-
теїну EV-G штаму UKG/410/73 (AF363453,
Gene Bank) у межах 187–513 нуклеотидів,
розмір ПЛР-фрагменту складає 327 нуклео-
тидних залишків.
Рибонуклеїнову кислоту (РНК) вірусів
виділяли з досліджуваних зразків за допомо-
гою набору «РНК-сорб-В» (Центральний на-
уково-дослідний інститут епідеміології, РФ).
З виділеної РНК отримували кДНК за допо-
могою реакції зворотної транскрипції. Полі-
меразну ланцюгову реакцію проводили на
чотирьохканальному ампліфікаторі «Терцик»
(НВФ «ДНК-Технологія», РФ). Реакційна су-
міш об’ємом 0,025 см3 вміщувала: 67 ммоль
трис-HCl (pH 8,8), 16,6 ммоль (NH4)2SO4,
2,0 ммоль MgCl2, 0,01 % твін-20, по 100
мкмоль дАТФ, дГТФ, дТТФ, дЦТФ, 2 нмоль
(НВФ «ДНК Технологія») кожного з пари
специфічних праймерів, 2 од. Taq-полімера-
зи, 0,005 см3 зразків кДНК.
Ампліфікацію специфічних ділянок кДНК
інфекційних агентів проводили за парамет-
рами, представленими в табл. 2.
Детекцію продуктів реакції проводили
методом електрофорезу у 1,5 % агарозному
гелі, забарвленому бромідом етидію з ви-
користанням трис-боратного буфера (НВФ
«ДНК-Технологія», РФ) за градієнту напруги
10 В/см. Результати оцінювали візуально пе-
реглядом гелю після електрофорезу на тран-
сілюмінаторі під УФ світлом за наявністю
(або відсутністю) червоно-помаранчевих фра-
гментів ДНК певного розміру. Специфіч-
ність ампліфікованого фрагмента ДНК ви-
значали за його розміром щодо фрагментів
стандартних маркерів.
Таблиця 2. Температурні та часові параметри ампліфікації специфічної ділянки кДНК
№ циклу
Температура ампліфікації, °С
Час, хв. Кількість циклів
TV-A SV-A EV-G
1 95 95 95 5 1
2
94 94 94 1
5 58 58 60 1
74 74 74 1
3
94 94 94 0,5
35 58 58 60 0,5
73 73 73 0,5
4 72 72 72 5 1
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
74
Результати та їх обговорення. Для по-
повнення колекції ЕВС ІСМАВ у період з
2002 по 2019 роки проведено епізоотичне
обстеження 5 свинарських господарств, 257
присадибних господарств 15 населених пун-
ктів Україні. Для досліджень відібрано 1216
зразків матеріалів, взятих у клінічно здоро-
вих свиней та тих, у яких виявлено симптоми
енцефаломієліту, гастроентериту, пневмонії
та пневмоентериту; свиней, які одужали від
згаданих хвороб; зразки м’яса та сала, які
продавались на ринках, інструментів, які ви-
користовувались у роботі з тваринами, зраз-
ки корму, води та ґрунту з прилеглих тери-
торій; а також зразки від синантропних та
диких тварин і птахів. Методом послідовних
пасажів у культурі клітин СНЕВ виділено
274 ізоляти вірусів, що становить 22,5 % від
загальної кількості зразків, і які було вико-
ристано в подальших дослідженнях.
До 2005 року для встановлення сероти-
пової належності в реакції нейтралізації в
культурі клітин СНЕВ проводили типування
виділених ізолятів вірусів з гіперімунними
сироватками крові до 21 референтного шта-
му ЕВС за класифікацією Романенка В. П. зі
співавт. [21]. Усі досліджувані ізоляти віру-
сів, виділені від свиней та синантропних тва-
рин, мали антигенну спорідненість з ЕВС від
3 до 15-го серотипами, 5 із них мали анти-
генну спорідненість з ЕВС першого серо-
типу. Встановлено, що ізоляти вірусів мають
біологічні, фізико-хімічні, морфологічні та
антигенні властивості, притаманні ЕВС.
Для проведення серологічної та генетич-
ної рекласифікації ЕВС, виділених в Україні,
відповідно до вимог ICTV у 2002–2003 роках
нами проведено роботу з отримання еталон-
них штамів Teschovirus A, Sapelovirus A,
Enterovirus G. У 2003 році від професора
Мальте Даубера з Інституту вірусної діаг-
ностики ім. Ф. Леффлера Федерального цен-
тру вірусних хвороб тварин (Німеччина) на-
ми було отримано 20 еталонних штамів
(табл. 3): Teschovirus A 11 серотипів згідно з
чинною міжнародною класифікацією [35]
(Teschen 199, Talfan, Tirol, DS1520/93, T 80,
O 3b, O 2b, PS 36, F 26, PS 37, F 43, UKG
173/74, DS 805/92, VIR 2899/84, VIR 460/88,
Dresden), штами Sapelovirus A V 13 та
Potsdam 5116, штами Enterovirus G UKG
410/73 та LP 54.
За рішенням Державного департаменту
ветеринарної медицини місцем зберігання
еталонних штамів було визначено колекції
ЕВС ІСМАВ. Отже, було доповнено колек-
цію вірусів 20 еталонними штамами.
Для проведення серологічної рекласифі-
кації ЕВС, виділених на території України,
до еталонних штамів TV-A, SV-A, EV-G
отримано гіперімунні сироватки крові кро-
лів. Встановлено, що титри віруснейтралі-
зувальних антитіл у гіперімунних сироват-
ках крові кролів, одержаних до еталонних
штамів, коливаються в межах 1:128–1:512
(табл. 4).
Таблиця 3. Еталонні штами TV-A, SV-A та EV-G
Рід Вид Серотип Еталонні штами вірусів
Teschovirus Teschovirus A
1 Talfan, Teschen 199, Tirol, DS1520/93
2 T 80, O 3b
3 O 2b
4 PS 36
5 F 26
6 PS 37
7 F 43
8 UKG 173/74, DS 805/92
9 VIR 2899/84
10 VIR 460/88
11 Dresden
Sapelovirus Sapelovirus A 1 V13, Potsdam 5116
Enterovirus Enterovirus G
1 UKG 410/73
2 LP 54
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
75
Таблиця 4. Титри віруснейтралізувальних антитіл в кролячих гіперімунних сироват-
ках крові до еталонних штамів TV-A, SV-A та EV-G
Штам Серотип тешо-, ентеровірусів Титр вірусу
lg ТЦД50/см3 Титр сироватки крові
Teschen 199 TV-A1 7,5 1:256
O 3b TV-A2 6,5 1:512
O 2b TV-A3 7,0 1:128
PS 36 TV-A4 6,5 1:256
F 26 TV-A5 6,5 1:512
PS 37 TV-A6 6,0 1:128
F 43 TV-A7 8,0 1:128
UKG 173/74 TV-A8 6,5 1:256
VIR 2899/84 TV-A9 6,0 1:512
VIR 460/88 TV-A10 8,0 1:512
Dresden TV-A11 6,5 1:512
V 13 SV-A 7,5 1:256
UKG 410/79 ЕV-G1 7,0 1:256
LP 54 ЕV-G2 6,0 1:128
За використання отриманих гіперімун-
них сироваток крові до еталонних штамів
TV-A, SV-A та EV-G у реакції нейтралізації
вірусу проведено серологічну рекласифіка-
цію референтних штамів ЕВС за тривіаль-
ною класифікацією Романенка В. П. та вста-
новлено таксономічне положення інших
штамів ЕВС, виділених в Україні. Паралель-
но, за використання розроблених нами видо-
специфічних праймерів, в ЗТ ПЛР проведено
генетичну класифікацію цих штамів. Резуль-
тати досліджень представлено в таблиці 5.
У підсумку проведених молекулярно-
генетичних досліджень встановлено, що всі
референтні штами ЕВС за тривіальною кла-
сифікацією Романенка В. П. належать до ви-
ду TV-A роду Teschovirus. Щодо типової на-
лежності, то у підсумку проведених сероло-
гічних досліджень ЕВС-10 M 2323, ЕВС-12
K 22, ЕВС-13 Л 90, ЕВС-14 M 116, ЕВС-16
Г 95, ЕВС-17 B 111, ЕВС-18 Ч 184, ЕВС-19
Д 227, ЕВС-20 И 249, ЕВС-23 И 393 зарахо-
вано до TV-A1; ЕВС-11 K 9, ЕВС-15 Ч 73 —
до TV-A3; ЕВС-22 B 151 — до TV-A6.
ЕВС-21 П 142 не має антигенної споріднено-
сті з еталонними штамами TV-A, SV-A та
EV-G і належить до нового серотипу. От-
же, референтні штами, за винятком штаму
П 142, розподілилися в межах наявних серо-
типів згідно з міжнародною класифікацією
(табл. 5).
Виробничі штами ЕВС-1 Перечинський
642, Березнянськи 652, Чернігівський 2372
рекласифіковано як Teschovirus-A першого
серотипу (табл. 5).
Штами ЕВС з поліантигенними власти-
востями Р 501, И 59, Д 32, Д 33, Д 34 рекла-
сифіковано як TV-A1. Штам ЕВС Ч 756 з
поліантигенними властивостями згідно з се-
рологічною класифікацією зараховано до Te-
schovirus A першого серотипу, проте за ре-
зультатами генетичної рекласифікації цей
штам не належить до жодного виду, тобто
він є генетично відмінним від TV-A, SV-A та
EV-G. Штами ЕВС з поліантигенними влас-
тивостями Г 31 та Л 2661 після генетичної
рекласифікації зараховано до Teschovirus A,
за результатами серологічних досліджень
штам Г 31 має антигенну спорідненість з
еталонними штамами TV-A 1, 10 та 11-го се-
ротипів, а штам Л 2661 — з TV-A 3, 6 та
10-го серотипів, тобто вони мають міжтипові
антигенні властивості згідно з новою міжна-
родною класифікацією (табл. 5).
Штам ентеровірусів свиней Ч 881, який
не мав антигенної спорідненості з референт-
ними штамами ЕВС за класифікацією Рома-
ненка В. П., у серологічних дослідженнях
було зараховано до SV-A, а у молекулярно-
генетичних дослідженнях з праймерами до
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
76
Таблиця 5. Типова та видова належність ЕВС, виділених в Україні, відповідно до ви-
мог ICTV
Штам вірусу Типова належність
за результатами РН
Видова належність
за результатами ПЛР
ЕВС-1 П 642 TV-A1 TV-A
ЕВС-1 Б 652 TV-A1 TV-A
ЕВС-1 Ч 2372 TV-A1 TV-A
ЕВС-10 M 2323 TV-A1 TV-A
ЕВС-11 K9 TV-A3 TV-A
ЕВС-12 K 22 TV-A1 TV-A
ЕВС-13 Л 90 TV-A1 TV-A
ЕВС-14 M 116 TV-A1 TV-A
ЕВС-15 Ч 73 TV-A3 TV-A
ЕВС-16 Г 95 TV-A1 TV-A
ЕВС-17 B 111 TV-A1 TV-A
ЕВС-18 Ч 184 TV-A1 TV-A
ЕВС-19 Д 227 TV-A1 TV-A
ЕВС-20 И 249 TV-A1 TV-A
ЕВС-21 П 142 Новий серотип TV-A
ЕВС-22 B 151 TV-A6 TV-A
ЕВС-23 И 393 TV-A1 TV-A
ЕВС ПА Р 501 TV-A1 TV-A
ЕВС ПА К 422 TV-A3 TV-A
ЕВС ПА Ч 756 TV-A1 Генетично відмінний
ЕВС ПА И 59 TV-A1 TV-A
ЕВС ПА Г 31 TV-A1, 10, 11 TV-A
ЕВС ПА Д 32 TV-A1 TV-A
ЕВС ПА Д 33 TV-A1 TV-A
ЕВС ПА Д 34 TV-A1 TV-A
ЕВС ПА Л 2661 TV-A3, 6, 10 TV-A
ЕВС НС Ч 881 SV-A Генетично відмінний
ЕВС НС Ч 878 Новий серотип TV-A
ЕВС НС Ч 863 Новий серотип TV-A
ЕВС НС Т 3 Новий серотип TV-A
Примітка: НС — новий серотип; ПА — поліантигенні штами (штами вірусів, які міжтипові ан-
тигенні зв’язки з еталонними штамами декількох серотипів).
TV-A, SV-A та EV-G — не зараховано до
жодної з цих таксономічних груп, що потре-
бує додаткових досліджень. Штами ЕВС Т 3,
Ч 863, Ч 878, які не мали антигенної спорід-
неності з референтними штамами ЕВС за
класифікацією Романенка В. П., у підсумку
генетичних досліджень зараховано до TV-A;
у серологічних дослідженнях з сироватками
крові до еталонних штамів TV-A, SV-A та
EV-G — не належать до жодного серотипу
цих таксономічних груп, тобто є новими се-
ротипами TV-A (табл. 5).
Отже, відповідно до вимог ICTV прове-
дено генетичну та серологічну класифікацію
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
77
14 референтних штамів ЕВС згідно з класи-
фікацією Романенка В. П., підтверджено так-
сономічне положення 3 виробничих штамів
ЕВС, визначено таксономічне положення 9
штамів ЕВС з поліантигенними властивос-
тями та 4 штамів ЕВС нових серотипів, виді-
лених в Україні, які зберігаються в колекції
вірусів ІСМАВ. Упорядковано таксономію
та номенклатуру колекційних штамів вірусів
відповідно до вимог ICTV.
У зв’язку зі зміною номенклатури та
проведеною рекласифікацією ЕВС, виділе-
них на території України, виникла необхід-
ність у депонуванні виробничих штамів та
прототипних штамів тешовірусів свиней но-
вих серотипів.
Штами тешовірусів свиней Т 3, Ч 878,
які антигенно відрізняються від тешовірусів
відомих серотипів, депоновано в Державно-
му науково-контрольному інституті біотех-
нології і штамів мікроорганізмів (ДНКІБШ).
За фізико-хімічними властивостями (стій-
кість до ліпідорозчинників, різних рН сере-
довищ, інгібіторів синтезу ДНК, терморезис-
тентність) та морфологічними властивостями
досліджувані штами належать до тешовіру-
сів свиней.
Встановлення типової належності віру-
сів проводили в реакції віруснейтралізації з
кролячими робочими типоспецифічними си-
роватками до еталонних штамів TV-A, SV-A
та EV-G.
У проведених дослідженнях підтвердже-
но, що штами Т 3 та Ч 878 тешовірусів сви-
ней за антигенними властивостями відрізня-
ються від еталонних штамів TV-A, SV-A та
EV-G свиней відомих серотипів.
У підсумку комісійних випробувань під-
тверджено паспортні характеристики цих
штамів та одержано на них свідоцтва про де-
понування (реєстраційні номери, надані
штаму тешовірусу Ч 878 — 487, Т 3 — 488)
На штам Т 3 отримано патент України [50].
Проведено комісійну виробничу перевір-
ку та підтверджено паспортні дані щодо біо-
логічних та фізико-хімічних характеристик
одного контрольного — Чернігівський 2372,
одного вакцинного — Перечинський 642 та
трьох діагностичних — Березнянський 652,
Р 501, И 59 штамів. На штами в ДНКІБШМ
одержано свідоцтва про депонування з номе-
рами 121, 122, 313, 314, 315 відповідно.
Крім того, для виробництва ветеринар-
них імунобіологічних препаратів за резуль-
татами вивчення біологічних, фізико-хіміч-
них, морфологічних, молекулярно-генетич-
них, імуногенних та антигенних властивос-
тей відібрано штами тешовірусів свиней 1-го
серотипу Дніпровський 34 та штам Городня-
нський 31, який має антигенні зв’язки з ета-
лонними штамами 1-го, 10-го, 11-го сероти-
пів. У депозитарії ДНКІБШМ проведено їх
депонування та одержано реєстраційні сві-
доцтва за номерами 486 і 489. На штам Дніп-
ровський 34 отримано патент України на ко-
рисну модель [51].
Отже, поповнено колекцію штамів віру-
сів ІСМАВ 20 еталонними штамами TV-A,
SV-A та EV-G. Проведено генетичну та се-
рологічну рекласифікацію 30 штамів ЕВС,
виділених в Україні. За результатами прове-
деної роботи змінено таксономічне поло-
ження та номенклатуру 30 колекційних шта-
мів. Геном штаму Ч 881, який рекласифіко-
вано як SV-A, та штамів Т 3, Ч 863, Ч 878,
які є новими серотипами TV-A, необхідно
секвенувати та рекомендувати їх ICTV як
прототипні.
За даними Міжнародного епізоотичного
бюро (МЕБ), помірні або безсимптомні інфе-
кції, зумовлені Teschovirus А (TV-A), реєст-
руються в усьому світі [52]. На противагу
цьому, тешовірусний енцефаломієліт (хворо-
ба Тешена) свиней на сьогодні є рідкісним
захворюванням. За останні два десятиліття
стало відомо про спалахи хвороби Тешена на
Мадагаскарі і в Центральній та Східній Єв-
ропі. За період 1971–2005 рр. хворобу Теше-
на було зареєстровано в усіх областях Украї-
ни [52]. Останні роки завдяки проведеним
протиепізоотичним заходам спостерігається
стійке благополуччя щодо цієї хвороби. Про-
те в деяких областях України і сьогодні
проводять вакцинопрофілактику. Щодо по-
ширення Enterovirus G (EV-G) та Sapelovi-
rus A (SV-A) як у світі, так і в Україні даних
існує недостатньо. Інформація щодо поши-
рення Teschovirus В взагалі відсутня, оскіль-
ки дані про цей вид опубліковано на сайті
ICTV лише у 2020 році [30].
Пікорнавіруси різних родів відіграють
значну етіологічну роль у захворюванні сви-
ней, що призводить до великих економічних
збитків у сільському господарстві різних
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
78
країн світу. Однією із найнебезпечніших
хвороб є ензоотичний енцефаломієліт свиней
[9]. Пневмонія, гастроентерит та пневмоен-
терит належать до найбільш поширених хво-
роб [31; 53; 54]. Повідомляється й про зумо-
влені пікорнавірусами порушення репродук-
ційних функцій у свиней [55; 56].
Етіологічними агентами цих хвороб можуть
бути TV-A, TV-B, SV-G та EV-A різних се-
ротипів.
Співробітники ІСМАВ починаючи з
1961 року із різних біологічних матеріалів
виділили десятки штамів (вакцинні, вірулен-
тні, діагностичні, референтні, прототипні),
які було ідентифіковано як ентеровіруси
свиней, рекласифіковані згідно з вимогами
ICTV і зберігаються в колекції штамів віру-
сів ІСМАВ, яка на сьогодні налічує 92 шта-
ми. На основі штамів, які зберігаються в ко-
лекції, розроблено 2 вакцини та 10 діагнос-
тичних тест-систем та наборів. Прототипні
та еталонні штами використовуються у різ-
них наукових установах для контролю спе-
цифічності діагностичних тест-систем, на-
пруженості імунітету вакцин, інших науко-
вих дослідженнях.
Незважаючи на стійке епізоотичне бла-
гополуччя в Україні щодо хвороб свиней
зумовлених тешовірусами, на нашу думку,
необхідно відновити дослідження щодо цир-
куляції TV-A, SV-A та EV-G на території Ук-
раїни.
У зв’язку з доповненням міжнародної
класифікації 3 новими серотипами Tescho-
virus В, 18 новими серотипами Enterovirus G
необхідно розпочати роботу з отримання
еталонних штамів вірусів цих серотипів, ро-
зробку праймерів для видової ідентифікації
Teschovirus В. Зважаючи на те, що TV-A зда-
тні до репродукції в культурах клітин люди-
ни [57], ці віруси становлять потенційну не-
безпеку для людини. Зважаючи на масштаби
збитків, заподіяних вірусом SARS-CoV-2,
який мігрував від тварин до людини, необхі-
дно проводити постійний моніторинг вірус-
них інфекцій серед тварин, зокрема і Te-
schovirus A, Teschovirus В, Sapelovirus A та
Enterovirus G, що дозволить запобігти мож-
ливим соціальним та економічним наслідкам
і сприятиме біобезпеці держави.
Висновки. У період із 2002 по 2019 рік
у підсумку проведених досліджень з 1216
проб матеріалу виділено 274 ізолятів вірусів.
Доповнено колекцію 20 еталонними штама-
ми Teschovirus A, Sapelovirus A та Enterovirus
G. Проведено генетичну та серологічну рек-
ласифікацію 30 штамів ЕВС, виділених в
Україні. Упорядковано колекцію штамів ві-
русів відповідно до сучасної таксономії й
номенклатури. Депоновано 7 штамів вірусів.
Доповнено колекцію вірусів 4 штамами Te-
schovirus A нових серотипів.
ЦИТОВАНА ЛІТЕРАТУРА
1. Trefny L. Massenerkangungen von Sweinen
in Teschener Lend. Zverolek. Obzor. 1930. № 23.
С. 253–236.
2. Klоbouk A. Encephalomyelitis enzootica su-
um. Immunisation activa. Zverolek. Rozpravy. 1935.
№ 9. С. 73–85.
3. Dunne H. W., Wang T. J., Ammermann E. H.
Classification of North American porcine Entero-
viruses: a comparison with Europian and Japanese
strains. Infect.Immunol. 1971. Т. 4, № 5. С. 619–
631. https://doi.org/10.1128/iai.4.5.619-631.1971
4. Knowless N. J., Buckley L. S., Pereira H. G.
Classification of porcine enteroviruses by antigenic
analysis and cytopathic effects in tissue culture:
desciption of 3 new serotypes. Arch. Virol. 1979.
Vol. 62. № 3. С. 201–208. https://doi.org/10.1007/
BF01317552
5. Auerbach J. Serologische Klassifizierung
porziner Enterovirus Feldisolate aus Schweinen mit
zentralnervosen Storungen mittels Neutralisations-
test und indirekter Immunfluoreszenz und Beschrei-
bung von zwei neuen Serotypen (PEV12 und
PEV13) / Giessen: Fachbereich Veterinar medizin,
Justus-Liebig-Universitat (Germany), 1993.
6. Auerbach J., Prager D., Neuhaus S., Loss U.,
Witte K. H. Grouping of porcine enteroviruses by
indirect immunofluorescence and description of two
new serotypes. Journal of Veterinary Medicine. Se-
ries B. 1994. Vol. 41. № 4. P. 277–282. https://
doi.org/10.1111/j.1439-0450.1994.tb00228.x
7. Honda E., Kimata, A., Hattori I., Kuma-
gai T., Tsuda T., Tokui T. A serological comparison
of 4 Japanese isolates of porcine enteroviruses with
the International Reference strains. Japanese Jour-
nal of Veterinary Science. 1990. Vol. 52. № 1.
P. 49–54. https://doi.org/ 10.1292/jvms1939.52.49
8. Рождественский В. А. Эпизоотологичес-
кое значение энтеровирусов свиней. Научно-тех-
ническая конференция «Сельськохозяйственная
наука — производству». Тез. Докл. Чернигов,
1967. С. 137–140.
9. Романенко В. П. Хвороба Тешена: моно-
графія. К. : Урожай, 1974. 80 с.
10. Вакцина против болезни Тешена свиней:
пат. 931 Украинa. МПК A61K 39/125, В. П. Ро-
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
79
маненко, О. Г. Прус; заявитель и патентооблада-
тель: Украинский головной научно-исследова-
тельский институт сельскохозяйственной мик-
робиологии. № 2838704/30-15, заявл. 15.11.79;
опубл. 15.12.1993.
11. Романенко В. Ф., Прусс О. Г., Поле-
вик Е. И. Диагностики болезни Тешена свиней.
Ветеринария. 1988. № 11. С. 65.
12. Романенко В. Ф., Прусс О. Г., Купневс-
кая Л. В. Иммунофлуоресцентный метод диагно-
стики энзоотического энцефаломиелита свиней.
Ветеринария. 1982. № 4. С. 69–70.
13. Бова Т. О., Дерев’янко С. В., Сорока В. І.
Прискорений метод діагностики ензоотичного
енцефаломієліту (хвороби Тешена) свиней. Мік-
робіологічний журнал. 2005. Т. 67. № 9. С. 49–56.
14. Романенко В. Ф. Инструкция о меропри-
ятиях по борьбе с энзоотическим энцефаломие-
литом (болезнью Тешена) свиней. Ветеринария.
1979. № 2. С. 35–37.
15. Набор для диагностики энтеровирусного
гастроэнтерита свиней: пат. 2006179 РФ. МКИ G
01 N 33/533, В. Ф. Романенко, Е. И. Полевик; за-
яв. Украинский научно-исследовательский ин-
ститут сельскохозяйственной микробиологии,
заявл. 02.02.1991; опубл. 29.12.1994.
16. Набір діагностикумів етеровірусного га-
строентериту свиней: пат. 25055 Україна. МПК
A61K 39/225, В. П. Романенко, О. І. Полевік; за-
яв. Інститут сільськогосподарської мікробіології
УААН, № 93007062, заявл. 20.05.1993; опубл.
25.12.1998, Бюл. № 6.
17. Набор для диагностики энтеровирусной
пневмонии свиней: пат. 2006037 РФ. МКИ G
01 N 33/533, В. Ф. Романенко, И. Н. Пинчук,
А. А. Бокун, Н. В. Бабич; заяв. Украинский
научно-исследовательский институт сельскохо-
зяйственной микробиологии, № 5016275, заявл.
02.12.1991; опубл. 15.01.1994.
18. Романенко В. П., Прусс О. Г., Поле-
вiк О. I., Бабiч Н. В., Дерев’янко С. В. Компакт-
ний набiр препаратiв для дiагностики ентеро-
вiрусних пневмоентеритiв свиней. Аграрна наука
виробництву. 1998. № 4. С. 20.
19. Derevianko S., Golovko A. Properties of
strains Teschovirus A of new serotypes isolated in
Ukraine. V. Blikhar et al. (Eds.) New stages of
development of modern science in Ukraine and EU
countries. Riga, Latvia : Baltija Publishing, 2019.
P. 187–204. https://doi.org/10.30525/978-9934-588-
15-0-76
20. Романенко В. Ф., Деревянко С. В. Анти-
генные свойства циркулирующих штаммов эн-
теровирусов свиней. Ветеринария. 2002. № 5.
С. 18–22.
21. Романенко В. Ф., Полевик Е. И.,
Прусс О. Г., Бабич Н. В., Бокун А. А., Пин-
чук И. Н. Таксономия энтеровирусов свиней.
Ветеринария. 1993. № 5. С. 26–29.
22. Дерев’янко С. В., Полевiк О. I., Соро-
ка В. I. Рекомбінація i її значення в еволюції ен-
теровiрусiв свиней. Наукове обґрунтування ста-
лого розвитку агроекологічних систем Чернігів-
щини в ринкових умовах i обмеженого ресурсно-
го забезпечення: матерiали Науково-практичної
конференції молодих вчених-аграріїв Чернігів-
щини (м. Чернігів, 5–6 квітня). Чернігів, 1999.
С. 32–35.
23. Дерев’янко С. В. Антигенна характерис-
тика ізолятів ентеровiрусiв свиней, видiлених в
господарствах України. Вчимося господарювати:
матерiали Науково-практичного семiнару моло-
дих вчених та спецiалiстiв (м. Чернігів, 22–23 ли-
стопада). Чернігів, 1999. С. 292–293.
24. Pringle C. R. Virus taxonomy at the XIth
international congress of virology, Sydney, Aust-
ralia, 1999. Archives of virology. 1999. Т. 144.
№ 10. С. 2065–2070. https://doi.org/10.1007/
s007050050728
25. Zell R., Dauber M., Krumbholz A., Hen-
ke A., Birch-Hirschfeld E., Stelzner A., Prager D.,
Wurm R. Porcine Teschovirus comprise at least
eleven distinct serotypes: molecular and evolutio-
nary aspects. J. Virol. 2001. Т. 75. № 4. С. 1620–
1631. https://doi.org/10.1128/JVI.75.4.1620-1631.
2001
26. Kaku Y., Sarai A., Murakami Y. Genetic
reclassification of porcine enteroviruses. J. Gen.
Virol. 2001. Т. 82. № 2. P. 417–424. https://doi.org/
10.1099/0022-1317-82-2-417
27. Doherty M., Todd D., McFerran N.,
Hoey E. M. Sequence analysis of a porcine ente-
rovirus serotype 1 isolate: relationships with other
picornaviruses. J. Gen. Vir. 1999. Т. 80. С. 1929–
1941. https://doi.org/10.1099/0022-1317-80-8-1929
28. Adams M. J., Lefkowitz E. J., King A. M.,
Harrach B., Harrison R. L., Knowles N. J. et al.
Changes to taxonomy and the International Code of
Virus Classification and Nomenclature ratified by
the International Committee on Taxonomy of
Viruses. Arch Virol. 2017. Т. 162. № 8. С. 2505–
2538. https://doi.org/10.1007/s00705-017-3358-5
29. Zell R., Delwart E., Gorbalenya A. E., Ho-
vi T., King A. M. Q., Knowles N. J. et al. ICTV
Virus Taxonomy Profile: Picornaviridae. J. Gen.
Virol. 2017. Т. 98. № 1. С. 2421–2422. https://
doi.org/10.1099/jgv.0.000911
30. Genus: Teschovirus – Picornaviridae – Po-
sitive-sense RNA Viruses – ICTV: веб-сайт ICTV.
URL: https://talk.ictvonline.org/ictv-reports/ictv_onl
ine_report/positive-sense-rna-viruses/picornavirales/
w/picornaviridae/704/genus-teschovirus (дата звер-
нення: 02.12.2021).
31. Oba M., Naoi Y., Ito M., Masuda T.,
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
80
Katayama, Y., Sakaguchi, S. et al. Metagenomic
identification and sequence analysis of a Tescho-
virus A — related virus in porcine feces in Japan,
2014–2016. Infection, Genetics and Evolution. 2018.
Т. 66. С. 210–216. https://doi.org/10.1016/j.meegid.
2018.10.004
32. Yang T., Li R., Yao Q., Zhou X., Liao H.,
Ge M., Yu X. Prevalence of porcine teschovirus
genotypes in Hunan, China: identification of novel
viral species and genotypes. Journal of General
Virology. 2018. Т. 99. № 9. С. 1261–1267.
https://doi.org/10.1099/jgv.0.001129
33. Yang T., Lu Y., Zhang L., Li X., Chang Y.
Novel species of Teschovirus B comprises at least
three distinct evolutionary genotypes. Transboun-
dary and Emerging Diseases. 2020. Т. 67. № 2.
С. 1015–1018. https://doi.org/10.1111/tbed.13400
34. Witzany G. Crucial steps to life: From che-
mical reactions to code using agents. Biosystems.
2016. Т. 140. С. 49–57. https://doi.org/10.1016/
j.biosystems.2015.12.007
35. ICTV: веб-сайт. URL: https://talk.ictvon
line.org/taxonomy/ (дата звернення: 02.12.2021).
36. Picornaviridae – Picornaviridae – Positive-
sense RNA Viruses – ICTV: веб-сайт. URL: https://
talk.ictvonline.org/ictv-reports/ictv_online_report/po
sitive-sense-rna-viruses/picornavirales/w/picornaviri
dae (дата звернення: 02.12.2021).
37. Oba M., Naoi Y., Ito M., Masuda T., Kata-
yama Y., Sakaguchi S. et al. Metagenomic identifi-
cation and sequence analysis of a Teschovirus A —
related virus in porcine feces in Japan, 2014–2016.
Infection, Genetics and Evolution. 2018. Т. 66.
С. 210–216. https://doi.org/10.1016/j.meegid.2018.
10.004
38. Tseng C. H., Tsai H. J. Sequence analysis of
a duck picornavirus isolate indicates that it together
with porcine enterovirus type 8 and simian picorna-
virus type 2 should be assigned to a new picorna-
virus genus. Virus Res. 2007. Т. 129. № 2. С. 104–
114. https://doi.org/ 10.1016/j.virusres.2007.06.023
39. Boros Á., Nemes C., Pankovics P., Kapu-
sinszky B., Delwart E., Reuter G. Porcine tescho-
virus in wild boars in Hungary. Arch Virol. 2012.
Т. 157. № 8. С. 1573–1578. https://doi.org/10.1007/
s00705-012-1327-6
40. Buitrago D., Cano-Gómez C., Agüero M.,
Fernandez-Pacheco P., Gómez-Tejedor C., Jiménez-
Clavero M. Á. A survey of porcine picornaviruses
and adenoviruses in fecal samples in Spain. J Vet
Diagn Invest. 2010. Т. 22. № 5. С. 763–766.
https://doi.org/10.1177/104063871002200519
41. Романенко В. Ф., Прусс О. Г., Бабич Н. В.
Классификация энтеровирусов свиней. Вiсник аг-
рарної науки. 1993. № 1. С. 94–101.
42. Reed L. J., Muench H. A simple method of
estimation of fifty per cent endpoints. Am. J. Hyg.
1938. Т. 27. № 3. P. 493–497. https://doi.org/10.
1093/oxfordjournals.aje.a118408
43. Bogel К., Maer A. Untersuchungen uber die
Chloroform-resistenz der Enteroviren des Rindes
und des Schwienes. Zbl. Vet. Med. 1961. Т. 8,
№ 9. С. 908–922. https://doi.org/10.1111/j.1439-
0442.1961.tb00665.x
44. Mayr A., Bachmann P. A., Bibrack B.,
Wittmann G. Virologische Arbeitsmethoden. Jena :
VEB Gustav Fischer Verlag, 1977. 321 p.
45. Rovozzo G. C., Burke C. N. A manual of
basic virological techniques. Inc. Englewood Cliffs:
Prentice-Hall, 1973. 376 p.
46. Matheka H. D., Mayr A. Der stabilisierende
und reaktivierende Einfluss von Trypsin auf das
Virus der Teschener Krankheit (Schweinelahmung)
und die Inaktivirung von Maul-und-Klauenseuche
(MKS) Virus durch dieses Enzym. Arch. ges. Virus-
forsch. 1962. Т. 12. № 4. С. 463–471.
47. Спосіб одержання гіперімунної сироват-
ки крові до вірусів тварин і рослин: пат. 58734
Україна. МПК G12N 33/53 (2006.01), Т. О. Бова,
І. В. Волкова, С. В. Дерев’янко; заявл.
26.04.2011; опубл. 26.04.2011, Бюл. № 8.
48. Сорока В. І., Бокун А. О., Божок Л. В.,
Дерев’янко С. В., Бова Т. О. Рекомендації з діаг-
ностики, профілактики та ліквідації тешо-, енте-
ровірусних енцефаломієлітів свиней. Чернігів,
2006. 28 с.
49. Головко А. М., Дерев’янко С. В., Бо-
ва Т. О., Сорока В. І., Кацимон В. В. Конструю-
вання видоспецифічних праймерів для молеку-
лярно-генетичної ідентифікації тешовірусів та
ентеровірусів А і В. Сільськогосподарська мік-
робіологія: Міжвідомчий тематичний науковий
збірник. Чернігів : ЦНТЕІ. 2009. № 10. С. 156–
165.
50. Штам Porcine teschovirus для удоскона-
лення діагностики тешовірусних хвороб свиней:
пат. 75115 Україна. МПК (2012.01) С12N 7/00,
А61К 39/25 (2006.01), С. В. Дерев’янко, Т. О. Бо-
ва, В. І. Сорока, А. О. Бокун, Л. В. Божок,
Н. В. Бабіч; заявл. 12.04.2012; опубл. 26.11.2012,
Бюл. № 22.
51. Штам Porcine teschovirus для виробницт-
ва ветеринарних імунобіологічних препаратів:
пат. 57372 Україна. МПК (2011.01) С12N 7/00,
А61К 39/125, А61К 39/187 (2011.01), С12R 1/92
(2006.01), С. В. Дерев’янко, В. І. Сорока, А. А. Бо-
кун, Л. В. Божок, Т. О. Бова; заявл. 26.07.2010;
опубл. 25.02.2011, Бюл. № 4.
52. [OIE] Office International des Epizooties.
Manual. Manual of Standards for Diagnostic Test
and Vaccines. Paris, 2008. 598 р.
53. Романенко В. Ф., Полевик Е. И. Этиоло-
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
81
гия энтеровирусного гастроэнтерита свиней. Ве-
теринария. 1992. № 3. С. 29–30.
54. Романенко В. П., Пiнчук I. М. Вiрусо-
логiчнi дослiдження та критерiї визначення етiо-
логiї ентеровiрусної пневмонiї свиней. Вiсник аг-
рарної науки. 1993. № 4. С.25–27.
55. Lin W., Cui S., Zell R. Phylogeny and
evolution of porcine teschovirus 8 isolated from pigs
in China with reproductive failure. Archives of viro-
logy. 2012. Т. 157. № 7. P. 1387–1391. https://
doi.org/10.1007/s00705-012-1315-x
56. Malik Y. S., Bhat S., Vlasova A. N.,
Wang F. I., Touil N., Ghosh S. et al. Teschovirus.
In: Emerging and Transboundary Animal Viruses.
Livestock Diseases and Management / Malik Y.,
Singh R., Yadav M. (eds). Singapore : Springer,
2020. 377 p. https://doi.org/10.1007/978-981-15-
0402-0_6
57. Божок Л. В., Дерев’янко С. В., Соро-
ка В. І., Гриценко Л. М., Задорожна В. І. Цирку-
ляція ентеровірусів свиней та визначення їх ан-
тигенних зв’язків з ентеровірусами людини. Мік-
робіологічний журнал. 2003. Т. 65. № 4. С. 62–67.
Отримано 03.09.2021
https://doi.org/10.35868/1997-3004.34.69-85
UDC 578.835
COLLECTION OF THE STRAINS TESCHOVIRUS A, SAPELOVIRUS A,
ENTEROVIRUS G OF THE INSTITUTE OF AGRICULTURAL
MICROBIOLOGY AND AGROINDUSTRIAL MANUFACTURE
OF THE NAAS
S. V. Derevianko
Institute of Agricultural Microbiology and Agroindustrial Manufacture, NAAS, Chernihiv
e-mail: biopreparat@i.ua
Objective. Arrangement of the collection of porcine enteroviruses (PEV) strains isolated on the
territory of Ukraine in accordance with the requirements of the International Committee on Virus
Taxonomy and supplementing it with new strains Teschovirus A (TV-A), Sapelovirus A (SV-A), En-
terovirus G (EV-G). Methods. Virological, serological, molecular genetic, instrumental and statis-
tical. Isolation, cultivation of viruses and determination of their biological activity were performed
in passaged culture of porcine embryonic kidney cells (СНЕВ). The viral titre was calculated by the
method of Reed and Muench. The typical affiliation of viruses was determined in the virus neutrali-
zation reaction in СНЕВ cell culture. Species affiliation was determined by reverse transcription
polymerase chain reaction (RT PCR) using species-specific primers for TV-A, SV-A and EV-G, de-
veloped by us. Electron microscopy of viruses was performed on a transmission electron micro-
scope by negative contrast enhancement method. Statistical processing was performed in Microsoft
Office Excel and StatSoft STATISTICA 12. Results. As a result of the epizootic survey during 2002–
2019, 1,216 samples for virological testing were selected. Successive passages of СНЕВ cell cul-
ture resulted in obtaining 274 viral isolates. According to the results of studying physicochemical,
morphological, biological properties of these isolated, they are classified as PEV. In connection
with the change of taxonomy and nomenclature of PEV, serological and genetic reclassification of
30 strains of viruses isolated in Ukraine, including 14 reference strains according to the classifica-
tion of V. P. Romanenko, 7 production strains, 9 strains with polyantigenic properties and 4 strains
that did not have antigenic affinity with viruses of known PEV serotypes according to the classifica-
tion of V. P. Romanenko was performed. It has been established that the reference strains of PEV
according to the trivial classification of V. P. Romanenko belong to the species TV-A of the genus
Teschovirus. As a result of conducted serological testing, PEV-10 M 2323, PEV-12 K 22, PEV-13 L
90, PEV-14 M 116, PEV-16 G 95, PEV-17 V 111, PEV-18 Ch 184, PEV-19 D 227, PEV-20 I 249,
PEV-23 I 393 were classified as TV-A1; PEV-11 K 9, PEV-15 Ch 73 — as TV-A3, PEV-22 V 151 —
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
82
as TV-A6. PEV-21 P 142 did not have antigen affinity with reference strains TV-A, SV-A and EV-G
and belongs to a new serotype. Production strains of PEV-1 Perechynskyi 642, Bereznianskyi 652,
Chernihivskyi 2372 were reclassified as TV-A1. PEV strains with polyantigenic properties such as
G 31 and L 2661 have intertypic antigens with TV-A 1, 10, 11 and TV-A 3, 6, 10 serotypes, respec-
tively. PEV strain of a new serotype Ch 881 was reclassified as SV-A. PEV strains Т 3, Ch 863,
Ch 878 are the new serotypes of TV-A. Conclusion. As a result of studies, 274 viral isolates were
isolated from 1,216 samples of material. The collection was supplemented with 20 reference strains
of Teschovirus A, Sapelovirus A and Enterovirus G. Genetic and serological reclassification of 30
PEV strains isolated in Ukraine was performed. The collection of viral strains has been arranged in
accordance with modern taxonomy and nomenclature. Seven viral strains were deposited. The col-
lection of viruses has been supplemented with 4 strains of new serotypes of Teschovirus A.
Key words: Teschovirus A, Sapelovirus A, Enterovirus G, collection of viral strains, taxonomy,
nomenclature.
REFERENCES
1. Trefny, L. (1930). Massenerkangungen von
Sweinen in Teschener Lend [Mass disease of pigs in
Teschen region]. Zverolek Obzor, 23, 235–236 [in
German].
2. Klоbouk, A. (1935). Encephalomyelitis en-
zootica suum. Immunisation activa [Enzootic en-
cephalomyelitis. Active immunization]. Zverolek.
Rozpravy, 9, 73–85 [in Latin].
3. Dunne, H. W., Wang, J. T., & Ammer-
man, E. H. (1971). Classification of North American
porcine enteroviruses: a comparison with European
and Japanese strains. Infection and immunity, 4(5),
619–631. https://doi.org/10.1128/iai.4.5.619-631.1971
4. Knowles, N. J., Buckley, L. S., & Perei-
ra, H. G. (1979). Classification of porcine enterovi-
ruses by antigenic analysis and cytopathic effects in
tissue culture: description of 3 new serotypes. Ar-
chives of virology, 62(3), 201–208. https://doi.org/
10.1007/BF01317552
5. Auerbach, J. (1993). Serologische Klas-
sifizierung porziner Enterovirus-Feldisolate aus
Schweinen mit zentralnervösen Störungen mittels
Neutralisationstest und indirekter Immunfluoreszenz
und Beschreibung von zwei neuen Serotypen
(PEV12 und PEV13) [Serological classification of
porcine enterovirus field isolates from pigs with cen-
tral nervous disorders using a neutralization test and
indirect immunofluorescence and description of two
new serotypes (PEV12 and PEV13)] (Doctoral dis-
sertation, Justus Liebig-Universität Giessen) [in
German]. https://doi.org/10.1111/j.1439-0450.1994.
tb00228.x
6. Auerbach, J., Prager, D., Neuhaus, S.,
Loss, U., & Witte, K. H. (1994). Grouping of por-
cine enteroviruses by indirect immunofluorescence
and description of two new serotypes. Journal of
Veterinary Medicine, Series B, 41(1–10), 277–282.
https://doi.org 10.1292/jvms1939.52.49
7. Honda, E., Kimata, A., Hattori, I., Kuma-
gai, T., Tsuda, T. & Tadashi, T. (1990). A serologi-
cal comparison of 4 Japanese isolates of porcine en-
teroviruses with the international reference strains.
The Japanese Journal of Veterinary Science, 52(1),
49–54. https://doi.org 10.1292/jvms1939.52.49
8. Rozhdestvenskii, V. A. (1967). Epizootolog-
icheskoe znachenie enterovirusov svinei [Epizootic
role of porcine enteroviruses]. Proceedings of the
Scientific and technical conference “Agricultural
science — to the industry” (pp. 137–140), Chernihiv
[in Ukrainian].
9. Romanenko, V. P. (1974). Khvoroba Teshe-
na [Teschen disease]. Kyiv: Urozhai [in Ukrainian].
10. Pat. 931 UA, МПК: A61K 39/125. Vaccine
against Teschen disease of pigs, Pruss, O. H., & Ro-
manenko, V. P. Publ. 15.12.1993 [in Ukrainian].
11. Romanenko, V. F., Pruss, O. G., & Pole-
vik, E. I. (1988). Diagnostiki bolezni Teshena svinei
[Diagnostics of Teschen disease of pigs]. Veteryn-
aryia — Veterynary, 11, 65 [in Russian].
12. Romanenko, V. F., Pruss, O. G., & Kupnev-
skaia, L. V. (1982). Immunofluorestcentnyi metod
diagnostiki enzooticheskogo entcefalomielita svinei
[Immunofluorescent diagnostics of enzootic ence-
phalomyelitis of pigs]. Veterinariia — Veterinary, 4,
69–70 [in Russian].
13. Bova, T. O., Derevianko, S. V., & Soro-
ka, V. I. (2005). Pryskorenyi metod diahnostyky en-
zootychnoho entsefalomiielitu (khvoroby Teshena)
svynei [Fast method of enzootic encephalomyelitis
diagnostics]. Mikrobiolohichnyi zhurnal — Micro-
biological journal, 67(9), 49–56 [in Ukrainian].
14. Romanenko, V. F. (1979). Instruktciia o
meropriiatiiakh po borbe s enzooticheskim entce-
falomielitom (bolezniu Teshena) svinei [Instruction
on the measures for enzootic encephalomyelitis
(Teschen disease) of pigs control]. Veterinariia —
Veterinary, 2, 35–37 [in Russian].
15. Pat. 2006179 RF, МКИ G 01 N 33/533. A
set of tools for enterovirus gastroenteritis of pigs di-
agnostics, Romanenko, V. F., & Polevik, E. I. Publ.
29.12.1994 [in Russian].
16. Pat. 25055 UA, МПК: A61K 39/225. A set
of tools for enterovirus gastroenteritis of pigs diag-
nostics, Romanenko, V. P. Publ. 25.12.1998 [in Uk-
rainian].
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
83
17. Pat. 2006037 RF, МКИ G 01 N 33/533. A
set of tools for enterovirus pneumonia of pigs diag-
nostics, Romanenko, V. F., Pinchuk, I. N., Bo-
kun, A. A., & Babich, N. V. Publ. 15.01.1994 [in
Russian].
18. Romanenko, V. P., Pruss, O. G., Pole-
vik, E. I., Babich, N. V., & Derevianko, S. V.
(1998). Kompaktnyi nabir preparativ dlia diah-
nostyky enterovirusnykh pnevmoenterytiv svynei [A
compact set of tools for enterovirus pneumoenteritis
of pigs diagnostics]. Ahrarna nauka vyrobnytstvu —
Agricultural science for industry, 4, 20 [in Ukrai-
nian].
19. Derevianko, S., & Golovko, A. (2019). Pro-
perties of strains Teschovirus A of new serotypes
isolated in Ukraine. Publishing House “Baltija Pub-
lishing”. https://doi.org/10.30525/978-9934-588-15-
0-76
20. Romanenko, V. F., & Derevianko, S. V.
(2002). Antigennye svoistva tcirkuliruiushchikh
shtammov enterovirusov svinei [Antigenic features
of circulating porcine enteroviruses strains]. Veteri-
nariia — Veterinary, 5, 18–22 [in Russian].
21. Romanenko, V. F., Polevik, E. I.,
Pruss, O. G., Babich, N. V., Bokun, A. A., &
Pinchuk, I. N. (1993). Taksonomiia enterovirusov
svinei [Taxonomy of porcine enteroviruses]. Veteri-
nariia — Veterinary, 5, 26–29.
22. Derevianko, S. V., Polevik, O. I., & Soro-
ka, V. I. (1999, April 5–6). Rekombinatsiia i yii
znachennia v evoliutsii enterovirusiv svynei [Re-
combination and its role in porcine enteroviruses
evolution]. Proceedings of the scientific and practi-
cal conference of junior scientists-agronomists of
Chernihiv region Scientific substantiation of sustai-
nable development of agroecological systems of
Chernihiv region in market conditions and limited
resource provision (pp. 32–35), Chernihiv [in Ukra-
inian].
23. Derevianko, S. V. (1999, November 22–23).
Antyhenna kharakterystyka izoliativ enterovirusiv
svynei, vydilenykh v hospodarstvakh Ukrainy [An-
tigenic characteristics of porcine enteroviruses iso-
lates, isolated in Ukrainian farms]. Proceedings of
scientific and practical seminar of junior scientists
and specialists We learn to manage (pp. 292–293),
Chernihiv [in Ukrainian].
24. Pringle, C. R. (1999). Virus taxonomy at the
XIth international congress of virology, Sydney,
Australia, 1999. Archives of virology, 144(10),
2065–2070. https://doi.org/10.1007/s007050050728
25. Zell, R., Dauber, M., Krumbholz, A., Hen-
ke, A., Birch-Hirschfeld, E., Stelzner, A. et al.
(2001). Porcine teschoviruses comprise at least elev-
en distinct serotypes: molecular and evolutionary
aspects. Journal of Virology, 75(4), 1620–1631.
https://doi.org/10.1128/JVI.75.4.1620-1631.2001
26. Kaku, Y., Sarai, A., & Murakami, Y.
(2001). Genetic reclassification of porcine enterovi-
ruses. Journal of General Virology, 82(2), 417–424.
https://doi.org/10.1099/0022-1317-82-2-417
27. Doherty, M., Todd, D., McFerran, N., &
Hoey, E. M. (1999). Sequence analysis of a porcine
enterovirus serotype 1 isolate: relationships with
other picornaviruses. Journal of General Virology,
80(8), 1929–1941. https://doi.org/10.1099/0022-
1317-80-8-1929
28. Adams, M. J., Lefkowitz, E. J., King, A. M.,
Harrach, B., Harrison, R. L., Knowles, N. J., ... &
Davison, A. J. (2017). Changes to taxonomy and the
International Code of Virus Classification and No-
menclature ratified by the International Committee
on Taxonomy of Viruses Archives of virology,
162(8), 2505–2538. https://doi.org/10.1007/s00705-
017-3358-5
29. Zell, R., Delwart, E., Gorbalenya, A. E.,
Hovi, T., King, A. M. Q., Knowles, N. J., ... & Con-
sortium, I. R. (2017). ICTV virus taxonomy profile:
Picornaviridae. The Journal of general virology,
98(10), 2421. https://doi.org/10.1099/jgv.0.000911
30. International Committee on Taxonomy of
Viruses. (2021). Genus: Teschovirus – Picornaviri-
dae – Positive-sense RNA Viruses – ICTV. https://
talk.ictvonline.org/ictv-reports/ictv_online_report/po
sitive-sense-rna-viruses/picornavirales/w/picornaviri
dae/704/genus-teschovirus
31. Oba, M., Naoi, Y., Ito, M., Masuda, T., Ka-
tayama, Y., Sakaguchi, S., ... & Nagai, M. (2018).
Metagenomic identification and sequence analysis of
a Teschovirus A-related virus in porcine feces in Ja-
pan, 2014–2016. Infection, Genetics and Evolution,
66, 210–216. https://doi.org/10.1016/j.meegid.2018.
10.004
32. Yang, T., Li, R., Yao, Q., Zhou, X., Liao, H.,
Ge, M., & Yu, X. (2018). Prevalence of porcine
teschovirus genotypes in Hunan, China: identifica-
tion of novel viral species and genotypes. Journal of
General Virology, 99(9), 1261–1267. https://doi.org/
10.1099/jgv.0.001129
33. Yang, T., Lu, Y., Zhang, L., Li, X., &
Chang, Y. (2020). Novel species of teschovirus B
comprises at least three distinct evolutionary geno-
types. Transboundary and emerging diseases, 67(2),
1015–1018. https://doi.org/10.1111/tbed.13400
34. Witzany, G. (2016). Crucial steps to life:
From chemical reactions to code using agents. Bio-
systems, 140, 49–57. https://doi.org/10.1016/j.
biosystems.2015.12.007.
35. International Committee on Taxonomy of
Viruses. (2021). ICTV. https://talk.ictvonline.org/
taxonomy/
36. International Committee on Taxonomy of
Viruses. (2021). Picornaviridae – Picornaviridae –
Positive-sense RNA Viruses – ICTV. https://talk.
ictvonline.org/ictv-reports/ictv_online_report/positi
ve-sense-rna-viruses/w/picornaviridae
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
84
37. Oba, M., Naoi, Y., Ito, M., Masuda, T.,
Katayama, Y., Sakaguchi, S., ... & Nagai, M. (2018).
Metagenomic identification and sequence analysis of
a Teschovirus A-related virus in porcine feces in Ja-
pan, 2014–2016. Infection, Genetics and Evolution,
66, 210–216. https://doi.org/10.1016/j.meegid.2018.
10.004
38. Tseng, C. H., & Tsai, H. J. (2007). Se-
quence analysis of a duck picornavirus isolate indi-
cates that it together with porcine enterovirus type 8
and simian picornavirus type 2 should be assigned to
a new picornavirus genus. Virus research, 129(2),
104–114. https://doi.org/10.1016/j.virusres.2007.06.
023
39. Boros, Á., Nemes, C., Pankovics, P., Kapu-
sinszky, B., Delwart, E., & Reuter, G. (2012). Por-
cine teschovirus in wild boars in Hungary. Archives
of virology, 157(8), 1573–1578. https://doi.org/
10.1007/s00705-012-1327-6
40. Buitrago, D., Cano-Gómez, C., Agüero, M.,
Fernandez-Pacheco, P., Gómez-Tejedor, C., & Ji-
ménez-Clavero, M. Á. (2010). A survey of porcine
picornaviruses and adenoviruses in fecal samples in
Spain. Journal of veterinary diagnostic investiga-
tion, 22(5), 763–766. https://doi.org/10.1177%2F10
4063871002200519
41. Romanenko, V. F., Pruss, O. G., & Ba-
bich, N. V. (1993). Klassifikatciia enterovirusov
svinei [Porcine enteroviruses classification]. Visnyk
ahrarnoi nauky — Bulletin of Agricultural Science,
1, 94–101 [in Ukrainian].
42. Reed, L. J., & Muench, H. (1938). A simple
method of estimating fifty per cent endpoints. Amer-
ican journal of epidemiology, 27(3), 493–497.
https://doi.org/10.1093/oxfordjournals.aje.a118408
43. Bögel, K., & Mayr, A. (1961). Unter-
suchungen über die Chloroformresistenz der Entero-
viren des Rindes und des Schweines [Investigations
of the cattle and pigs enteroviruses’ resistance to the
chloroform]. Zentralblatt für Veterinärmedizin, 8(9),
908–922 [in German]. https://doi.org/10.1111/j.
1439-0442.1961.tb00665.x
44. Mayr, A., Bachmann, P. A., Bibrack, B., &
Wittmann, G. (1997). Virologische Arbeitsmetho-
den. II. Serologie [Virological techniques. Volume
II. Serology]. In: Fischer [in German].
45. Rovozzo, G. C., & Burke, C. N. (1973). A
manual of basic virological techniques.
46. Matheka, H. D., & Mayr, A. (1962). Der
stabilisierende und reaktivierende Einfluss von
Trypsin auf das Virus der Teschener Krankheit
(Schweinelahmung) und die Inaktivirung von Maul-
und-Klauenseuche (MKS) Virus durch dieses En-
zym [The stabilizing and reactivating influence of
trypsin on the Teschen disease virus (pig paralysis)
and the inactivation of foot-and-mouth disease
(FMD) virus by this enzyme]. Arch. ges. Virus-
forsch, 12(4), 463–471 [in German].
47. Pat. 58734 UA, МПК G12N 33/53
(2006.01). Method for production of hyper-immune
blood serum to animal and plant viruses, Bo-
va, T. O., Volkova, I. V., Derevianko, S. V. Publ.
26.04.2011 [in Ukrainian].
48. Soroka, V. I., Bokun, A. O., Bozhok, L. V.,
Derevianko, S. V., & Bova, T. O. (2006). Rek-
omendatsii z diahnostyky, profilaktyky ta likvidatsii
tesho-, enterovirusnykh entsefalomiielitiv svynei
[Recommendations for the diagnostics, prevention
and elimination of tesho-, enterovirus encephalomy-
elitis of pigs]. Chernihiv [in Ukrainian].
49. Holovko, A. M., Derevianko, S. V., Bo-
va, T. O., Soroka, V. I., & Katsymon, V. V. (2009).
Konstruiuvannia vydospetsyfichnykh praimeriv dlia
molekuliarno-henetychnoi identyfikatsii teshovirusiv
ta enterovirusiv svynei A i B [Construction of spe-
cies-specific primers for molecular-genetic identifi-
cation of porcine teschoviruses and eteroviruses A
and B]. Silskohospodarska mikrobiolohiia — Agri-
cultural microbiology, 10, 156–165 [in Ukrainian].
50. Pat. 75115 UA, МПК (2012.01) С12N
7/00, А61К 39/25 (2006.01). Strain of porcine
teschovirus for diagnostics improvement of porcine
teschovirus diseases, Derevianko, S. V., Bova, T. O.,
Soroka, V. I., Bokun, A. O., Bozhok, L. V., Ba-
bich, N. V. Publ. 26.11.2012 [in Ukrainian].
51. Pat. 57372 UA, МПК (2011.01) С12N
7/00, А61К 39/125, А61К 39/187 (2011.01), С12R
1/92 (2006.01). Strain of porcine teschovirus for pro-
duction of veterinary immunobiological preparati-
ons, Derevianko, S. V., Soroka, V. I., Bokun, A. A.,
Bozhok, L. V., & Bova, T. O., Publ. 25.02.2011 [in
Ukrainian].
52. [OIE] Office International des Epizooties.
(2008). Manual of standards for diagnostic test and
vaccines.
53. Romanenko, V. F., & Polevik, E. I. (1992).
Etiologiia enterovirusnogo gastroenterita svinei
[Etiology of enterovirus gastroenteritis of pigs]. Vet-
erinariia — Vetrinary, 3, 29–30 [in Ukrainian].
54. Romanenko, V. P., & Pinchuk, I. M. (1993).
Virusolohichni doslidzhennia ta kryterii vyznachen-
nia etiolohii enterovirusnoi pnevmonii svynei [Viro-
logical studies and criteria for determining the etiol-
ogy of swine enterovirus pneumonia]. Visnyk ahrar-
noi nauky — Bulletin of Agricultural Science, 4, 25–
27 [in Ukrainian].
55. Lin, W., Cui, S., & Zell, R. (2012). Phylo-
geny and evolution of porcine teschovirus 8 isolated
from pigs in China with reproductive failure. Ar-
chives of virology, 157(7), 1387–1391. https://
doi.org/10.1007/s00705-012-1315-x
56. Malik, Y. S., Bhat, S., Vlasova, A. N.,
Wang, F. I., Touil, N., Ghosh, S., ... & Singh, R. K.
(2020). Teschovirus. Emerging and Transboundary
Animal Viruses, 123 [in Ukrainian]. https://doi.org/
10.1007/978-981-15-0402-0_6
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
85
57. Bozhok, L. V., Derevianko, S. V., Soro-
ka, V. I., Hrytsenko, L. M., & Zadorozhna, V. I.
(2003). Tsyrkuliatsiia enterovirusiv svynei ta vyzna-
chennia yikh antyhennykh zviazkiv z enteroviru-
samy liudyny [Circulation of porcine enteroviruses
and determination of their antigenic relation to hu-
man enteroviruses]. Mikrobiolohichnyi zhurnal —
Microbiological journal, 65(4), 62–67 [in Ukraini-
an].
Received 03.09.2021
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2021. Вип. 34.
|
| id | oai:ojs2.smic.in.ua:article-459 |
| institution | Agriciltural microbiology |
| keywords_txt_mv | keywords |
| language | Ukrainian |
| last_indexed | 2026-07-23T01:15:01Z |
| publishDate | 2021 |
| publisher | Institute of Agrocultural Microbiology and Agro-industrial Manufacture of NAAS of Ukraine |
| record_format | ojs |
| resource_txt_mv | smicinua/05/a0e021977e88995c8315b64900ab0005.pdf |
| spelling | oai:ojs2.smic.in.ua:article-4592026-07-22T10:10:50Z COLLECTION OF THE STRAINS TESCHOVIRUS A, SAPELOVIRUS A, ENTEROVIRUS G OF THE INSTITUTE OF AGRICULTURAL MICROBIOLOGY AND AGROINDUSTRIAL MANUFACTURE OF THE NAAS КОЛЕКЦІЯ ШТАМІВ TESCHOVIRUS A, SAPELOVIRUS A, ENTEROVIRUS G ІНСТИТУТУ СІЛЬСЬКОГОСПОДАРСЬКОЇ МІКРОБІОЛОГІЇ ТА АГРОПРОМИСЛОВОГО ВИРОБНИЦТВА НААН С. В. , Дерев’янко Teschovirus A, Sapelovirus A, Enterovirus G, collection of viral strains, taxonomy, nomenclature Teschovirus A, Sapelovirus A, Enterovirus G, колекція штамів вірусів, таксономія, номенклатура Objective. Arrangement of the collection of porcine enteroviruses (PEV) strains isolated on the territory of Ukraine in accordance with the requirements of the International Committee on Virus Taxonomy and supplementing it with new strains Teschovirus A (TV-A), Sapelovirus A (SV-A), Enterovirus G (EV-G). Methods. Virological, serological, molecular genetic, instrumental and statistical. Isolation, cultivation of viruses and determination of their biological activity were performed in passaged culture of porcine embryonic kidney cells (СНЕВ). The viral titre was calculated by the method of Reed and Muench. The typical affiliation of viruses was determined in the virus neutralization reaction in СНЕВ cell culture. Species affiliation was determined by reverse transcription polymerase chain reaction (RT PCR) using species-specific primers for TV-A, SV-A and EV-G, developed by us. Electron microscopy of viruses was performed on a transmission electron microscope by negative contrast enhancement method. Statistical processing was performed in Microsoft Office Excel and StatSoft STATISTICA 12. Results. As a result of the epizootic survey during 2002– 2019, 1,216 samples for virological testing were selected. Successive passages of СНЕВ cell culture resulted in obtaining 274 viral isolates. According to the results of studying physicochemical, morphological, biological properties of these isolated, they are classified as PEV. In connection with the change of taxonomy and nomenclature of PEV, serological and genetic reclassification of 30 strains of viruses isolated in Ukraine, including 14 reference strains according to the classification of V. P. Romanenko, 7 production strains, 9 strains with polyantigenic properties and 4 strains that did not have antigenic affinity with viruses of known PEV serotypes according to the classification of V. P. Romanenko was performed. It has been established that the reference strains of PEV according to the trivial classification of V. P. Romanenko belong to the species TV-A of the genus Teschovirus. As a result of conducted serological testing, PEV-10 M 2323, PEV-12 K 22, PEV-13 L 90, PEV-14 M 116, PEV-16 G 95, PEV-17 V 111, PEV-18 Ch 184, PEV-19 D 227, PEV-20 I 249, PEV-23 I 393 were classified as TV-A1; PEV-11 K 9, PEV-15 Ch 73 — as TV-A3, PEV-22 V 151 — as TV-A6. PEV-21 P 142 did not have antigen affinity with reference strains TV-A, SV-A and EV-G and belongs to a new serotype. Production strains of PEV-1 Perechynskyi 642, Bereznianskyi 652, Chernihivskyi 2372 were reclassified as TV-A1. PEV strains with polyantigenic properties such as G 31 and L 2661 have intertypic antigens with TV-A 1, 10, 11 and TV-A 3, 6, 10 serotypes, respectively. PEV strain of a new serotype Ch 881 was reclassified as SV-A. PEV strains Т 3, Ch 863, Ch 878 are the new serotypes of TV-A. Conclusion. As a result of studies, 274 viral isolates were isolated from 1,216 samples of material. The collection was supplemented with 20 reference strains of Teschovirus A, Sapelovirus A and Enterovirus G. Genetic and serological reclassification of 30 PEV strains isolated in Ukraine was performed. The collection of viral strains has been arranged in accordance with modern taxonomy and nomenclature. Seven viral strains were deposited. The collection of viruses has been supplemented with 4 strains of new serotypes of Teschovirus A. Мета. Упорядкування колекції штамів ентеровірусів свиней (ЕВС), виділених на території України, відповідно до вимог Міжнародного комітету з таксономії вірусів і доповнення її новими штамами Teschovirus A (TV-A), Sapelovirus A (SV-A), Enterovirus G (EV-G). Методи. Вірусологічні, серологічні, молекулярно-генетичні, інструментальні та статистичні. Виділення, культивування вірусів та визначення їхньої біологічної активності проводили у перещеплюваній культурі клітин нирки ембріону свині (СНЕВ). Титр вірусу розраховували за методом Ріда і Менча. Типову належність вірусів визначали в реакції нейтралізації вірусу в культурі клітин СНЕВ. Видову належність — у полімеразній ланцюговій реакції зі зворотною транскрипцією (ЗТ ПЛР) за використання видоспецифічних праймерів до TV-A, SV-A та EV-G, розроблених нами. Електронну мікроскопію вірусів проводили на трансмісійному електронному мікроскопі методом негативного контрастування. Статистичну обробку проводили в програмах Microsoft Office Excel та StatSoft STATISTICA 12. Результати. У підсумку епізоотичного обстеження впродовж 2002–2019 років відібрано 1216 зразків матеріалів для вірусологічних досліджень. Із застосуванням послідовних пасажів у культурі клітин СНЕВ виділено 274 ізоляти вірусів. За результатами вивчення їхніх фізико-хімічних, морфологічних, біологічних властивостей їх зараховано до ЕВС. У зв’язку зі зміною таксономії та номенклатури ЕВС проведено серологічну та генетичну рекласифікацію 30 штамів вірусів, виділених на території України, серед яких 14 еталонних штамів за класифікацією Романенка В. П., 7 виробничих штамів, 9 штамів з поліантигенними властивостями та 4 штами, які не мали антигенної спорідненості з вірусами відомих серотипів ЕВС за класифікацією Романенка В. П. Встановлено, що еталонні штами ЕВС за тривіальною класифікацією Романенка В. П. належать до виду TV-A роду Teschovirus. У підсумку проведених серологічних досліджень ЕВС-10 M 2323, ЕВС-12 K 22, ЕВС-13 Л 90, ЕВС-14 M 116, ЕВС-16 Г 95, ЕВС-17 B 111, ЕВС-18 Ч 184, ЕВС-19 Д 227, ЕВС-20 И 249, ЕВС-23 И 393 зараховано до TV-A1; ЕВС-11 K 9, ЕВС-15 Ч 73 — до TV-A3; ЕВС-22 B 151 — до TV-A6. ЕВС-21 П 142 не має антигенної спорідненості з еталонними штамами TV-A, SV-A та EV-G і належить до нового серотипу. Виробничі штами ЕВС-1 Перечинський 642, Березнянський 652, Чернігівський 2372 рекласифіковано як TV-A1. Штами ЕВС з поліантигенними властивостями Г 31 та Л 2661 мають міжтипові антигенні з TV-A 1, 10, 11-го та TV-A 3, 6, 10-го серотипів відповідно. Штам ЕВС нового серотипу Ч 881 рекласифіковано як SV-A. Штами ЕВС Т 3, Ч 863, Ч 878 є новими серотипами TV-A. Висновки. У підсумку проведених досліджень з 1216 проб матеріалу виділено 274 ізоляти вірусів. Доповнено колекцію 20 еталонними штамами Teschovirus A, Sapelovirus A та Enterovirus G. Проведено генетичну та серологічну рекласифікацію 30 штамів ЕВС, виділених в Україні. Упорядковано колекцію штамів вірусів відповідно до сучасної таксономії й номенклатури. Депоновано 7 штамів вірусів. Доповнено колекцію вірусів 4 штамами Teschovirus A нових серотипів. Institute of Agrocultural Microbiology and Agro-industrial Manufacture of NAAS of Ukraine 2021-11-11 Article Article Рецензована Стаття application/pdf https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/459 10.35868/1997-3004.34.69-85 Agricultural microbiology; Vol. 34 (2021): Agriciltural microbiology; 69-85 Сільськогосподарська мікробіологія; Том 34 (2021): Сільськогосподарська мікробіологія; 69-85 1997-3004 10.35868/1997-3004.34 uk https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/459/538 Авторське право (c) 2022 Derevianko S. V. https://creativecommons.org/licenses/by/4.0 |
| spellingShingle | Teschovirus A Sapelovirus A Enterovirus G колекція штамів вірусів таксономія номенклатура С. В. , Дерев’янко КОЛЕКЦІЯ ШТАМІВ TESCHOVIRUS A, SAPELOVIRUS A, ENTEROVIRUS G ІНСТИТУТУ СІЛЬСЬКОГОСПОДАРСЬКОЇ МІКРОБІОЛОГІЇ ТА АГРОПРОМИСЛОВОГО ВИРОБНИЦТВА НААН |
| title | КОЛЕКЦІЯ ШТАМІВ TESCHOVIRUS A, SAPELOVIRUS A, ENTEROVIRUS G ІНСТИТУТУ СІЛЬСЬКОГОСПОДАРСЬКОЇ МІКРОБІОЛОГІЇ ТА АГРОПРОМИСЛОВОГО ВИРОБНИЦТВА НААН |
| title_alt | COLLECTION OF THE STRAINS TESCHOVIRUS A, SAPELOVIRUS A, ENTEROVIRUS G OF THE INSTITUTE OF AGRICULTURAL MICROBIOLOGY AND AGROINDUSTRIAL MANUFACTURE OF THE NAAS |
| title_full | КОЛЕКЦІЯ ШТАМІВ TESCHOVIRUS A, SAPELOVIRUS A, ENTEROVIRUS G ІНСТИТУТУ СІЛЬСЬКОГОСПОДАРСЬКОЇ МІКРОБІОЛОГІЇ ТА АГРОПРОМИСЛОВОГО ВИРОБНИЦТВА НААН |
| title_fullStr | КОЛЕКЦІЯ ШТАМІВ TESCHOVIRUS A, SAPELOVIRUS A, ENTEROVIRUS G ІНСТИТУТУ СІЛЬСЬКОГОСПОДАРСЬКОЇ МІКРОБІОЛОГІЇ ТА АГРОПРОМИСЛОВОГО ВИРОБНИЦТВА НААН |
| title_full_unstemmed | КОЛЕКЦІЯ ШТАМІВ TESCHOVIRUS A, SAPELOVIRUS A, ENTEROVIRUS G ІНСТИТУТУ СІЛЬСЬКОГОСПОДАРСЬКОЇ МІКРОБІОЛОГІЇ ТА АГРОПРОМИСЛОВОГО ВИРОБНИЦТВА НААН |
| title_short | КОЛЕКЦІЯ ШТАМІВ TESCHOVIRUS A, SAPELOVIRUS A, ENTEROVIRUS G ІНСТИТУТУ СІЛЬСЬКОГОСПОДАРСЬКОЇ МІКРОБІОЛОГІЇ ТА АГРОПРОМИСЛОВОГО ВИРОБНИЦТВА НААН |
| title_sort | колекція штамів teschovirus a, sapelovirus a, enterovirus g інституту сільськогосподарської мікробіології та агропромислового виробництва наан |
| topic | Teschovirus A Sapelovirus A Enterovirus G колекція штамів вірусів таксономія номенклатура |
| topic_facet | Teschovirus A Sapelovirus A Enterovirus G collection of viral strains taxonomy nomenclature Teschovirus A Sapelovirus A Enterovirus G колекція штамів вірусів таксономія номенклатура |
| url | https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/459 |
| work_keys_str_mv | AT svderevânko collectionofthestrainsteschovirusasapelovirusaenterovirusgoftheinstituteofagriculturalmicrobiologyandagroindustrialmanufactureofthenaas AT svderevânko kolekcíâštamívteschovirusasapelovirusaenterovirusgínstitutusílʹsʹkogospodarsʹkoímíkrobíologíítaagropromislovogovirobnictvanaan |