ОСОБЛИВОСТІ ПІДТРИМАННЯ ШТАМІВ ТА ІЗОЛЯТІВ ВІРУСУ СКРУЧУВАННЯ ЛИСТЯ КАРТОПЛІ В КОЛЕКЦІЇ ФІТОПАТОГЕННИХ ВІРУСІВ КАРТОПЛІ
Objective. To analyze the peculiarities of maintaining strains and isolates of the potato leafroll virus (PLRV) in the collection of potato phytopathogenic viruses. Methods. Collection samples of PLRV are stored and studied using visual diagnosis, indicator plants, electron microscopy, immunological...
Збережено в:
| Дата: | 2026 |
|---|---|
| Автори: | , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Українська |
| Опубліковано: |
Institute of Agrocultural Microbiology and Agro-industrial Manufacture of NAAS of Ukraine
2026
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/561 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Agriciltural microbiology |
| Завантажити файл: |  |
Репозитарії
Agriciltural microbiology| _version_ | 1871466359653662720 |
|---|---|
| author | Решотько, Л. М. Волкова, І. В. |
| author_facet | Решотько, Л. М. Волкова, І. В. |
| author_institution_txt_mv | [
{
"author": "Л. М. Решотько",
"institution": "Інститут сільськогосподарської мікробіології та агропромислового виробництва НААН"
},
{
"author": "І. В. Волкова",
"institution": "Інститут сільськогосподарської мікробіології та агропромислового виробництва НААН"
}
] |
| author_sort | Решотько, Л. М. |
| baseUrl_str | https://smic.in.ua/index.php/journal/oai |
| collection | OJS |
| datestamp_date | 2026-07-22T10:10:53Z |
| description | Objective. To analyze the peculiarities of maintaining strains and isolates of the potato leafroll virus (PLRV) in the collection of potato phytopathogenic viruses. Methods. Collection samples of PLRV are stored and studied using visual diagnosis, indicator plants, electron microscopy, immunological, and molecular genetic methods. Results. To maintain PLRV strains and isolates in the collection of potato phytopathogenic viruses (the Collection), a duplicate management system for infected plant samples is used. Firstly, potato plants are grown in open-field conditions, despite the risks of secondary infection, which allows for the reproduction of the natural rhythm of vegetation and tuber formation and contributes to a significant increase in material without the risk of its loss. Secondly, a method for the long-term cultivation of phytopathogenic viruses in crop plants in vitro under sterile conditions has been developed and implemented into routine practice, which has eliminated the risk of accumulation of fungal and bacterial pathogens and reinfection with other viruses. Microbulbs formed in test tubes are periodically planted in growing containers under controlled conditions and in open ground, gradually replacing the tuber part of the collection. Thus, the Collection simultaneously contains tuber material from open ground, sterile in vitro culture plants, and microtubers, as well as material obtained from microtubers under sterile conditions. In 2009, the introduction, maintenance, and preservation of PLRV strains and isolates in mammalian cell culture were added to the described technology for the Collection’s operation. Observations made during the maintenance, storage, and use of collection samples are reflected in the technical specifications of each strain and isolate. Currently, the Collection includes 2 strains in tubers and in potato plants during the growing season, and 3 strains in mammalian cell culture. Conclusions. Since a distinctive feature of potato viruses is their near-total absence in seeds, strains and isolates can only be preserved in green plants or in tubers. Under these conditions, the collection can be maintained through dual virus storage: in the form of virus-infected potato plants in summer and tubers in winter, and in the form of sterile test-tube-cultured infected potato plants throughout the year. Such a “living” collection requires constant updating and monitoring. For the VSLK, there is also the possibility of maintaining samples using an alternative method — in mammalian cell culture. |
| doi_str_mv | 10.35868/1997-3004.43.74-83 |
| first_indexed | 2026-05-29T01:00:27Z |
| format | Article |
| fulltext |
74
ВІРУСОЛОГІЯ
Сільськогосподарська мікробіологія. 2026. Вип. 43. С. 74–83.
ISSN 1997-3004
https://doi.org/10.35868/1997-3004.43.74-83
УДК 578.863.1:578.74
ОСОБЛИВОСТІ ПІДТРИМАННЯ ШТАМІВ ТА ІЗОЛЯТІВ
ВІРУСУ СКРУЧУВАННЯ ЛИСТЯ КАРТОПЛІ В КОЛЕКЦІЇ
ФІТОПАТОГЕННИХ ВІРУСІВ КАРТОПЛІ
Л. М. Решотько, https://orcid.org/0000-0002-0179-9315,
І. В. Волкова, https://orcid.org/0000-0002-0037-4323
Інститут сільськогосподарської мікробіології та агропромислового виробництва НААН
вул. Шевченка, 97; м. Чернігів, 14030, Україна; e-mail: volkova1212@ukr.net
Мета. Проведення аналізу особливостей підтримання штамів та ізолятів вірусу скру-
чування листя картоплі (ВСЛК) в Колекції фітопатогенних вірусів картоплі. Методи. Ко-
лекційні зразки ВСЛК зберігаються й вивчаються за використання візуальної діагностики,
рослин-індикаторів, електронно-мікроскопічних, імунологічних і молекулярно-генетичних
методів. Результати. Для підтримання штамів та ізолятів ВСЛК в колекції фітопатоген-
них вірусів картоплі (Колекція) використовується технологія дубльованого ведення інфіко-
ваних рослинних зразків. По-перше, рослини картоплі вирощуються в умовах відкритого ґру-
нту, попри ризики додаткового інфікування, що дає змогу відтворити природний ритм веге-
тації та утворення бульб і сприяє значному збільшенню матеріалу без загрози його втрати.
По-друге, розроблено і впроваджено в рутинну практику спосіб довгострокового культиву-
вання фітопатогенних вірусів у рослинах культури in vitro в стерильних умовах, що зняло
питання накопичення грибних і бактеріальних патогенів і перезараження іншими віруса-
ми. Мікробульби, які утворюються в пробірках, періодично висаджуються у вегетаційні по-
судини в контрольованих умовах та у відкритий ґрунт і поступово замінюють бульбову ча-
стину колекції. Отже, у Колекції одночасно присутні бульбовий матеріал відкритого ґрун-
ту, стерильні рослини культури in vitro та мікробульби, а також матеріал, отриманий із
мікробульб у стерильних умовах. У 2009 році в описану технологію функціонування Колекції
додано введення, підтримання й збереження штамів та ізолятів ВСЛК у культурі клітин
ссавців. Спостереження під час підтримання, зберігання й використання колекційних зразків
відображаються в паспортних характеристиках кожного штаму та ізоляту. На сьогодні
у Колекції представлено два штами в бульбах і в рослинах картоплі під час вегетації та три
штами в культурі клітин ссавців. Висновки. Оскільки особливістю вірусів картоплі є майже
повна відсутність їх у насінні, збереження штамів та ізолятів можливе лише в зелених рос-
линах або в бульбах. Колекція за таких умов може існувати завдяки дубльованому зберіган-
ню вірусів — у вигляді інфікованих вірусами рослин картоплі влітку, а бульб — взимку та
у вигляді стерильних пробіркових інфікованих рослин картоплі протягом року. Така «жива»
колекція потребує постійного оновлення й контролю. Для ВСЛК, крім того, має місце
можливість підтримання зразків за використання альтернативного варіанту — в культурі
клітин ссавців.
Ключові слова: віруси картоплі, колекція, підтримання штамів, ВСЛК, Potato leafroll
virus.
Вступ. Колекція штамів та ізолятів фіто-
патогенних вірусів картоплі (Колекція) в ла-
бораторії вірусології ІСМАВ НААН сфор-
мована в сучасному вигляді впродовж 2005–
© Л. М. Решотько, І. В. Волкова, 2026
75
2009 років. Основним призначенням Колек-
ції є підтримання й зберігання штамів віру-
сів для виробництва діагностичних тест-сис-
тем [1; 2], типових культур (різні за похо-
дженням і властивостями ізоляти вірусів)
для використання у наукових дослідженнях
[3–7], ізолятів (бульбовий матеріал) для
створення інфекційних фонів при контролі
селекційного матеріалу й наукових дослід-
женнях [8], а також зразків для подальших
досліджень [9; 10].
Колекція складається з відібраних в аг-
роценозах Північного Полісся України зраз-
ків поширених у регіоні вірусів: М-вiрус
картоплi (Potato virus M), Y-вiрус картоплi
(Potato virus Y), Х-вiрус картоплi (Potato vi-
rus X), S-вiрус картоплi (Potato virus S), вірус
скручування листя картоплі (ВСЛК, Potato
leafroll virus), вiрус аукуба мозаїки картоплi
(Potato aucuba mosaic virus), А-вiрус картоп-
лi (Potato virus А), вірус тютюнової мозаїки
(Tоbacco mosaic virus).
Унікальність Колекції полягає в тому,
що вона є єдиною в країні, яка містить зраз-
ки, знайдені у різні роки, і відображає попу-
ляцію вірусів, представлену в зоні Полісся,
зміни її складу, дає змогу виділення, деталь-
ного вивчення патогенів і подальшого його
використання. З іншого боку, існування
Колекції постійно ставить перед дослідника-
ми питання покращення способів і методів
підтримання колекційних зразків. Серед ко-
лекційних зразків особливої уваги потре-
бують штами та ізоляти ВСЛК, підтримання
та збереження яких певною мірою є проб-
лемним.
Важливість збереження штамів та ізоля-
тів ВСЛК зумовлена його економічним зна-
ченням — він належить до одного з найваж-
ливіших у цьому плані фітопатогенних віру-
сів [11]. Втрати врожаю, зумовлені інфекці-
єю ВСЛК, залежно від сорту картоплі, кліма-
тичних і ґрунтових умов становлять 33,8–
65,5 %, але під час посухи та високих темпе-
ратур можуть сягати 90 %.
У Колекції штами та ізоляти ВСЛК спо-
чатку підтримували в бульбах клонів певних
сортів картоплі. Згодом було розроблено
спосіб довгострокового культивування фіто-
патогенних вірусів у рослинах культури in
vitro, який передбачав зараження вегетуючих
рослин штамами фітопатогенних вірусів,
відбір інфікованих рослин за результатами
вірусологічного аналізу; виділення бокових
бруньок із попередньо стерилізованих фраг-
ментів стебел уражених рослин у пробірки
на живильне середовище в стерильних умо-
вах, отримання рослин-регенерантів та їх
довгострокове мікроживцювання з періодич-
ним отриманням мікробульб.
Варто зазначити, що зазвичай ВСЛК
трапляється в рослинах картоплі з іншими
вірусами, на рослини-індикатори передаєть-
ся надзвичайно трудомісткими способами за
допомогою щеплення або, наприклад, попе-
лицями. Літературні дані щодо способу ви-
ділення його ізолятів із рослин зі змішаною
інфекцію в чисту культуру відсутні, що до-
датково обтяжує підтримання таких зразків
у колекції.
У 2009 р. ми виявили явище продуктив-
ної інфекції ВСЛК у культурах клітин ссав-
ців [12]. Вперше було використано для куль-
тивування, накопичення та зберігання ізоля-
тів збудника вірусної хвороби картоплі не
рослини, а перещеплювані лінії культур клі-
тин нирки ембріону свині (СНЕВ) та нирки
новонародженого хом’яка (ВНК-21), у яких
зазвичай репродукуються віруси тварин. Цей
спосіб забезпечив значне методичне й еко-
номічне спрощення процесу виділення, під-
тримання ВСЛК у чистій культурі та довго-
строкового зберігання вірусних ізолятів.
Метою наших досліджень було прове-
дення аналізу особливостей підтримання
штамів та ізолятів ВСЛК у колекції фітопа-
тогенних вірусів картоплі.
Матеріали і методи. Колекційні зразки
ВСЛК зберігаються та вивчаються за вико-
ристання таких методів: візуальна діагности-
ка, метод рослин-індикаторів, електронно-
мікроскопічні, імунологічні, молекулярно-ге-
нетичні. За результатами дослідження скла-
даються й доповнюються паспортні характе-
ристики штамів та ізолятів ВСЛК.
Рослинна частина Колекції зберігається
й підтримується у вигляді інфікованих бульб
картоплі (упродовж року за температури
+4 °C), для освіження частину бульб виса-
джують у відкритий ґрунт з агресивним хі-
мічним захистом від комах (обробка інсек-
тицидами кожного тижня) та просторовою
ізоляцією.
Рослини in vitro та мікробульби з ВСЛК
перевіряють у вегетаційних контрольова-
них умовах на життєздатність. Підтримання
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2026. Вип. 43.
76
зразків, що зберігаються у колекції in vitro,
проводиться послідовним живцюванням на
живильне середовище Мурасіге-Скуга за ви-
нятком стимуляторів росту та стерильними
мікробульбами в умовах побутового холоди-
льника за температури +4 °С.
Для виділення ізолятів ВСЛК в культуру
клітин ссавців відбирають зразки вегетую-
чих рослин із симптомами ураження вірусом
скручування листя картоплі, попелиць, які
живляться на рослинах, або шматочки бульб
картоплі. Зразки гомогенізують в 0,1 М фос-
фатному буфері (рН 7,4), освітлюють хлоро-
формом у співвідношенні 5:1 та центрифу-
гують упродовж 15 хвилин при 2000 g. Де-
контамінацію препаратів проводять пені-
циліном (400 ОД/см3) і стрептоміцином
(200 мкг/см3). Перед внесенням вірусу вида-
ляють із пробірок живильне середовище, мо-
ношар дворазово відмивають 0,15 М NaCl
або розчином Хенкса. Вносять досліджувані
зразки по 0,1 см3 й витримують у термостаті
за температури 37 °С для контакту упродовж
1 години. Потім моношар відмивають розчи-
ном Хенкса і заливають підтримувальне се-
редовище. Інокульовані пробірки з культу-
рою клітин інкубують у термостаті за темпе-
ратури 37 °С до появи ознак цитопатичної дії
(ЦПД) вірусу. Проводять 3–5 сліпих пасажів
у культурах клітин [12].
Підтримку й освіження штамів та ізоля-
тів ВСЛК проводять за загальноприйнятими
для вірусів ссавців методами в культурі клі-
тин перещеплюваної лінії СНЕВ або ВНК-21
(за температури +37 °С і –18 °С) [13; 14]. Для
доповнення паспортних характеристик зраз-
ків вірусу в культурі клітин вивчають фі-
зико-хімічні властивості штамів та ізолятів
ВСЛК, а також антигенну спорідненість між
новими ізолятами й штамами, антигенну різ-
ницю вірусів у перехресній реакції нейтралі-
зації вірусу [7; 15; 16].
Результати та їх обговорення. Введен-
ню перших штамів ВСЛК до складу Колекції
передували багаторічні наукові дослідження
для вивчення їхніх властивостей і розробки
тест-систем для виявлення вірусів у рослин-
ному матеріалі. Перші штами ВСЛК, а саме
ВСЛК-г, ВСЛК-л та ВСЛК-м, виділені з кар-
топлі сортів Гібрид 876 (рис.), Львів’янка та
Оса у 1985 році.
Рисунок. Картопля Гібрид 876 з симп-
томами ураження вірусом скручування
листя картоплі.
Підтримання й зберігання вірусів відбу-
валося в бульбах та рослинах картоплі цих
клонів. Картоплю вирощували в контрольо-
ваних умовах у вегетаційних посудинах, бу-
льби зберігали за умов побутового холоди-
льника. Такі особливості ВСЛК як присут-
ність його в змішаній інфекції з М- або Y-
вірусами картоплі та накопичення бульбами
грибних і бактеріальних патогенів зробили
підтримання й зберігання штамів надзви-
чайно трудомістким і ризикованим. Саме то-
ді з’явилася ідея дубльованого підтримання
інфікованих рослинних зразків. По-перше,
рослини картоплі стали вирощувати в умо-
вах відкритого ґрунту, не зважаючи на ризи-
ки додаткового інфікування, що дало змогу
відтворити природний ритм вегетації та
утворення бульб і сприяло значному збіль-
шенню матеріалу без загрози його втрати.
По-друге, було розроблено і впроваджено в
рутинну практику спосіб довгострокового
культивування фітопатогенних вірусів у рос-
линах культури in vitro в стерильних умовах,
що зняло питання накопичення грибних, ба-
ктеріальних патогенів і перезараження ін-
шими вірусами. Мікробульби, які утворю-
ються в пробірках, періодично висаджують-
ся у вегетаційні горщики в контрольованих
умовах та у відкритий ґрунт і поступово за-
мінюють бульбову частину колекції. Отже, в
Колекції були одночасно присутні бульбовий
матеріал відкритого ґрунту, стерильні рос-
лини культури in vitro та мікробульби й ма-
теріал, отриманий з мікробульб в умовах за-
критого ґрунту.
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2026. Вип. 43.
77
У 2009 р. до наявної технології функціо-
нування Колекції було додано введення, під-
тримання й збереження штамів та ізолятів
ВСЛК у культурі клітин ссавців. У табл. 1
представлено рух колекційних штамів та ізо-
лятів ВСЛК за роками спостережень, почи-
наючи з 2008 року.
Можна бачити, що на 2008 рік штами
ВСЛК-г, ВСЛК-м та ВСЛК-л підтримували-
ся й зберігалися в бульбах і в рослинах кар-
топлі під час вегетації, ВСЛК-г і ВСЛК-л —
у рослинах картоплі культури in vitro та мік-
робульбах. У 2009 р. за використання ПЛР
підтверджено присутність ВСЛК у зразках
ВСЛК-г та ВСЛК-м і визначено нуклеотид-
ну послідовність фрагменту гена капсидного
білка ВСЛК-г [17], яку того ж року групою
дослідників (Patyka M., Antipov I., Spyry-
donov V., Melnychuk M., Zaritskyj N., Kolomi-
ets L., Tabaka P.) зареєстровано у GenBank
під кодовою назвою «Potato leafroll virus
isolate Chernigov 08 coat protein gene, partial
cds.» [18].
З появою нової технології в 2009 р. Ко-
лекція поповнилися зразками штаму ВСЛК-г
в культурі клітин ссавців.
З цього часу нові штами й ізоляти ВСЛК
вводилися в колекцію у трьох варіантах —
бульбовий матеріал, рослини культури in
vitro та в культурі клітин ссавців. У 2010 ро-
ці в Колекцію введено новий штам LB із сор-
ту картоплі Скарб, який дублювався рослин-
ними зразками і зразками вірусу в культурі
клітин ссавців. У тому ж році під час прове-
дення моніторингових досліджень у гідро-
понній теплиці ПрАТ «Чернігівеліткартоп-
ля» було відібрано для аналізу зразки листя
та попелиць із картоплі сортів Сувенір Чер-
нігівський (з легкою мозаїкою) та Тирас (без
ознак хвороби). Імунологічний аналіз пока-
зав наявність Y-вірусу картоплі у рослинах, а
реакція нейтралізації з еталонною антисиро-
ваткою до штаму ВСЛК-г, яка була прове-
дена за використання стандартної методики
для вірусів ссавців — ВСЛК. Застосування
нових методичних підходів дозволило не
тільки виявити ВСЛК у рослинах картоплі та
попелицях, а й виділити ізоляти ВСЛК LN та
LS, що циркулюють у Чернігівській області,
з рослин із комплексною інфекцією в чисту
культуру, провести їх селекцію, визначити
антигенну спорідненість, яка становила 100 %,
Таблиця 1. Рух колекційних штамів та ізолятів ВСЛК за роками спостережень
Роки
Штами та ізоляти, код, сорт картоплі або назва культури клітин ссавців
підтримання вірусів
у бульбах і в рослинах
картоплі під час вегетації
підтримання вірусів
у рослинах картоплі
культури in vitro
та мікробульбах
підтримання вірусів
у культурах клітин
ссавців
2008 штам ВСЛК-г,
Гібрид 876;
штам ВСЛК-л,
Львів’янка;
штам ВСЛК-м, Оса
штам ВСЛК-г,
Гібрид 876;
штам ВСЛК-л,
Львів’янка
–
2009–2016 штам ВСЛК-г,
Гібрид 876;
штам ВСЛК-л,
Львів’янка;
штам LB, Скарб
штам ВСЛК-л,
Львів’янка;
штам LB, Скарб
штам ВСЛК-г, СНЕВ,
ВНК-21;
штам LB, СНЕВ,
ВНК-21;
ізоляти LS та LT
(штам Седнівський),
СНЕВ, ВНК-21
2016–2022 штам ВСЛК-г,
Гібрид 876;
штам LB, Скарб
штам LB, Скарб штам ВСЛК-г, СНЕВ,
ВНК-21;
штам LB, СНЕВ, ВНК-21;
штам Седнівський, СНЕВ,
ВНК-21
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2026. Вип. 43.
78
та отримати в 2012 р. штам ВСЛК Седнівсь-
кий [19]. Оскільки нашими попередніми дос-
лідженнями встановлено, що картопля, інфі-
кована одночасно ВСЛК та Y-вірусом карто-
плі, швидко втрачає життєздатність у куль-
турі in vitro, було ухвалено рішення ввести в
Колекцію штам ВСЛК Седнівський лише в
культурі тканин ссавців.
Штами та ізоляти не тільки поповнюють
Колекцію, відбувається процес списання зра-
зків. Найчастіша причина — накопичення ві-
русних, грибних, бактеріальних патогенів і
втрата життєздатності рослин при довго-
строковому культивуванні як у пробірках,
так і в умовах ґрунту.
Отже, станом на лютий 2022 р. до Ко-
лекції входили штам ВСЛК-г, Гібрид 876 і
штам LB, Скарб у бульбах і в рослинах кар-
топлі під час вегетації, штам LB, Скарб у ро-
слинах картоплі культури in vitro та мікро-
бульбах і штам ВСЛК-г, СНЕВ, ВНК-21;
штам LB, СНЕВ, ВНК-21; штам Седнівсь-
кий, СНЕВ, ВНК-21 у культурі клітин ссав-
ців.
На сьогодні в Колекції представлено
штам ВСЛК-г, Гібрид 876 в бульбах і в рос-
линах картоплі під час вегетації та штами
ВСЛК-г, СНЕВ, ВНК-21; LB, СНЕВ, ВНК-
21; штам Седнівський, СНЕВ, ВНК-21 в ку-
льтурі клітин ссавців (без можливості осві-
ження).
Всі спостереження під час підтримання,
зберігання й використання колекційних зраз-
ків відображаються в паспортних характе-
ристиках кожного штаму та ізоляту. Як при-
клад, нижче наведено паспорт штаму ВСЛК-г,
який підтримується в Колекції вже 40 років
(табл. 2).
Таблиця 2. Паспорт штаму Potato leafroll virus ВСЛК-г
№ Паспортні характеристики колекційного зразка
1 2
1 Введення вірусу в колекцію (коли і звідки був виділений):
– 1985 р., бульби картоплі Гібрид Г879;
– 2008 р., рослини картоплі Гібрид Г879 в культури in vitro та мікробульби;
– 2009 р., культура клітин ссавців інфікована вірусом з картоплі Гібрид Г879.
2 Таксономічне положення вірусу:
родина Luteoviridae, рід Polerovirus, вид Potato leafroll virus.
3 Назва вірусу відповідно до сучасної системи класифiкацiї та правил номенклатури:
родина Luteoviridae, рід Polerovirus, вид Potato leafroll virus (PLRV).
4 Нуклеїнова кислота (тип, структура, молекулярна маса):
(+) РНК, одноланцюгова, 5,8 kb, яка кодує шість основних відкритих рамок зчитування.
5 Характеристика віріону (розміри, маса, хімічний склад, морфологія з посиланням на наявність
або відсутність ліпопротеїдної оболонки, тип симетрії капсиду, фізико-хімічні властивості):
ізометричні частки діаметром 23 нм; капсид побудований з 32 капсомерів; вміст РНК у частках
становить 30 %; молекулярна маса протеїну 26 000; коефіцієнт седиментації (S20,w) — 115;
плавуча щільність у хлористому цезії — 1,39 г/см3; адсорбція препарату при 260 нм (1 мг/мл,
1 см) — 8,6; А260/А280 — 1,78.
6 Стійкість до дії зовнішніх чинників і хімічних речовин:
– точка температурної інактивації (10 хв.), сік листя картоплі 80 °C;
– точка температурної інактивації (10 хв.), культура клітин ссавців від 60 °С до 65 °С.
7 Вплив температури на репродукцію вірусу:
температурочутливий, репродукція значно уповільнюється за температури нижче за 24 °C.
8 Культуральні ознаки (умови культивування in vitro і in vivo, симптоми, титри вірусу тощо):
У рослинах вірус культивується в умовах люміностату, вегетаційних кімнат, відкритого ґрунту;
викликає на картоплі комплекс симптомів порушення флоемного транспорту — первинна інфе-
кція характеризується скручуванням верхівкових листків, вторинна — листків нижнього ярусу;
вірус має такі властивості, як неможливість механічного передавання (у природних умовах збу-
дник скручування листя передається потомству через бульби, а від хворої рослини здоровій —
комахами; за допомогою щеплення вірус можна передати на низку рослин, які виявляють симп-
томи інфекції чи залишаються безсимптомними.
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2026. Вип. 43.
79
Продовження табл. 2
1 2
Симптоми на рослинах-індикаторах: рослинах Physalis floridana Rydb. викликає затримку росту
та розвитку, карликовість, на рослинах Datura stramonium L. — міжжилковий хлороз.
Накопичується в рослинах у низькій концентрацiї, у рослинах може бути виявлений із застосу-
ванням ІФА та ПЛР.
Підтримання вірусу в культурі клітин ссавців проводять за загальноприйнятими методиками в
культурі клітин перещеплюваної лінії СНЕВ або ВНК-21. Культивується вірус в культурі клі-
тин, вирощеній в культуральних флаконах або пласких колбах із підтримуючим середовищем в
термостаті за температури 37 °С.
Цитопатична дія (ЦПД) вірусу в культурі клітин проявляється через 24–48 годин — видимі під
мікроскопом морфологічні зміни, руйнування або загибель клітин, що викликано репродукцією
вірусу; охоплюють округлення, вакуолізацію цитоплазми, і відторгнення клітин від скла.
9 Здатність трансформувати клiтину-живителя.
Рослини. Вірус локалізується у флоемі, у клітинах-супутниках виявляються структури, які на-
гадують пухирці та містять кристалічну речовину, за морфологією схожу з нуклеїновими кис-
лотами. За розвитку вірусної патології клітинні структури піддаються деструкції: спостерігаєть-
ся проліферація й руйнування клітинних мембран, розташування гомогенної осмієфільної речо-
вини на поверхні плазмолеми, наявність різної кількості вірусних часток у клітині, структурні
зміни у клітинних стінках. У клітинах мезофілу листків картоплі, ураженої ВСЛК, агрегатів ві-
русних часток не виявлено.
Культура клітин ссавців. Належить до літичних вірусів, тобто процес виходу віріонів потомства
супроводжується руйнуванням клітини-хазяїна.
10 Патогенність для організму (механізм передачі, чутливі рослини та культури клітин ссавців):
– між рослинами передається попелицями, бульбами, щепленням;
– уражує широкий спектр рослин, що належать до різних родин: Amaranthaceae, Cucurbitaceae,
Chenopodiaceae, Cruciferae, Compositae, Labiatae, Portulaceae, Nolanaceae, Solanacea (основні
господарі);
– між культурою тканин ссавців і рослинами передається попелицями методом живлення попе-
лиць культуральним вірусом крізь штучну мембрану;
– до вірусу чутливими є перещеплювані лінії культур клітин нирки ембріона свині (СНЕВ), ни-
рки сірійського хом’яка (ВНК-21), тестикул поросят (ПТП), нирки бика (MDВК) та карциноми
нирки кроля (RK-13).
11 Стабільність біологічних властивостей:
генетично стабільний, тривалий час зберiгає біологічні властивості при підтриманні у рослинах
картоплі, нуклеотидна послідовність фрагменту гена капсидного білка зареєстровано в Генбан-
ку, код FJ648776.
12 Антигенні (серологічні) властивості:
антигенноактивний, отримана антисироватка з титром 1:32 в реакції подвійної імунодифузії у
гелі та 1:256 в реакції нейтралізації.
13 Спосіб та умови довгострокового зберігання вірусу:
зберігається в рослинах картоплі культури in vitro, мікробульбах, бульбах, в культурі клітин
ссавців (у нативному стані за температури –18 °С і нижче, а в ліофілізованому — за температу-
ри +2…+8 °С з обов’язковим освіженням кожен рік).
14 Сфера використання вірусу:
для наукових досліджень, як позитивний контроль для аналізів методами ELISA та ПЛР, для
виробництва вірусоспецифічної діагностичної сироватки.
15 Примітки:
– ВСЛК в рослинних зразках присутній у вигляді змішаної інфекції з М-вiрусом картоплi;
– зразки культури клітин ссавців містить ВСЛК у чистій культурі.
Висновки. Оскільки особливістю вірусів
картоплі є майже повна їх відсутність у на-
сінні, збереження штамів та ізолятів можли-
ве тільки в зелених рослинах або в бульбах.
Колекція за таких умов може повноцінно
функціонувати завдяки дубльованому збері-
ганню вірусів — у вигляді інфікованих віру-
сами рослин картоплі влітку, а бульб взимку
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2026. Вип. 43.
80
та у вигляді стерильних пробіркових інфіко-
ваних рослин картоплі весь рік. Така «жива»
колекція потребує постійного оновлення й
контролю. Для ВСЛК, крім того, має місце
можливість підтримання зразків в альтерна-
тивному варіанті — у культурі клітин ссав-
ців.
Під час підтримання Колекції досліджу-
ються біологічні, фізико-хімічні й антигенні
властивості виділених вірусів. Отримуються
дані, що доповнюють паспортні характерис-
тики колекційних зразків.
Перспективою розвитку колекцій вірусів
рослин є впровадження молекулярно генети-
чних технологій для переведення частини
зразків у «віртуальний» режим, коли зберіга-
ється лише послідовність РНК або ДНК.
ЦИТОВАНА ЛІТЕРАТУРА
1. Дмитрук О. О., Мамчур О. Є., Коломі-
єць Л. П. Отримання біологічних компонентів
тест-ситем ІФА для діагностики вірусу аукуба
мозаїки картоплі. Сільськогосподарська мікро-
біологія. 2006. Вип. 3. С. 157–164. https://doi.org/
10.35868/1997-3004.3.157-164
2. Кучерявенко О., Пиріг О., Бова Т., Тимо-
шенко О., Будзанівська І. Конструювання імуно-
ферментної тест-системи для виявлення МВК у
рослинному матеріалі. Вісник Київського націо-
нального університету імені Тараса Шевченка.
Біологія. 2017. Вип. 1(73). С. 56–60. Режим дос-
тупу: https://bio.visnyk.knu.ua/uk/libraryFiles/down
loadPublic/40
3. Кучерявенко О. О., Пиріг О. В., Будзанів-
ська І. Г. Вплив мікробних препаратів на продук-
тивність та якість рослин картоплі з культури in
vitro за дії МВК. Агроекологічний журнал. 2017.
Вип. 4. С. 65–70. https://doi.org/10.33730/2077-
4893.4.2017.219772
4. Будзанівська І. Г., Бова Т. О., Кучерявен-
ко О. О., Пиріг О. В., Дмитрук О. О. Особливості
розвитку вірусної інфекції, спричиненої Potato
Virus M, на рослинах картоплі за дії мікробних
препаратів. Сільськогосподарська мікробіологія.
2014. Вип. 20. С. 60–65. https://doi.org/10.35868/
1997-3004.20.60-65
5. Дмитрук О. О., Коломієць Л. П., Мам-
чур О. Є. Дослідження патогенезу за ураження
рослин вірусом аукуба мозаїки картоплі. Сільсь-
когосподарська мікробіологія: здобутки та пер-
спективи. Зб. наук. праць / за ред. В. В. Волкого-
на. Чернігів : ЦНТЕІ, 2012. С. 332–337.
6. Решотько Л. М., Волкова І. В. Вплив ме-
таболітів Cladosporium cladosporioides на перебіг
вірусної інфекції в рослинах картоплі за умов
природного та штучного інфікування фітовіру-
сами. Сільськогосподарська мікробіологія. 2022.
Вип. 36. С. 64–71. https://doi.org/10.35868/1997-
3004.36.64-71
7. Бова Т. О., Волкова І. В., Решотько Л. М.
Фізико-хімічні властивості ізолятів вірусу скру-
чування листя картоплі в культурах клітин ссав-
ців. Сільськогосподарська мікробіологія. 2014.
Вип. 19. С. 83–88. https://doi.org/10.35868/1997-
3004.19.83-88
8. Демчук І. В., Решотько Л. М., Волкова І. В.
Застосування консорціуму Аzotobacter chroococ-
cum + Аzotobacter vinelandii М-70/2 в технології
виробництва добазового насіння картоплі (нау-
ково-методичні рекомендації). Чернігів : ФОП
Агеєв В. О., 2025. 45 с.
9. Шевченко О. П. Розповсюдження та діаг-
ностика некротичних штамів Y-вірусу картоплі
на Поліссі України. Вісн. ХНАУ. Сер. «Рослинниц-
тво, селекція, насінництво, овочівництво». 2006.
№ 5. С. 110–115.
10. Дмитрук О. О., Решотько Л. М., Волко-
ва І. В. Моніторинг вірусних інфекцій картоплі в
агроценозах України. Агроекологічний журнал.
2020. Вип. 4. С. 16–22. https://doi.org/10.33730/
2077-4893.4.2020.219441
11. Valkonen J. Viruses: economical losses and
biotechnological potential. Potato biology and bio-
technology. Elsevier Science BV, 2007. P. 619–641.
https://doi.org/10.1016/B978-044451018-1/50070-1
12. Спосіб культивування вірусу скручуван-
ня листя картоплі в перещеплюваних лініях куль-
тур клітин ссавців: пат. 97981 України. МПК
C12N 7/08 (2006.01), C12N 5/073 (2010.01), Вол-
кова І. В., Бова Т. О., Дерев’янко С. В., Зариць-
кий М. М.; заявник і патентовласник Інсти-
тут сільськогосподарської мікробіології та аг-
ропромислового виробництва НААН України.
№ a200912162.; заявл. 26.11.2009; опубл. 10.04.2012,
Бюл. № 7.
13. Melnik J. L. Tissue culture techniques and
their application to original isolation, growth and as-
say of poliomielitis and orphan viruses. Annals of
the New York Academy of Sciences. 1955. Vol. 61.
P. 754–772. https://doi.org/10.1111/j.1749-6632.1955.
tb42532.x
14. Сорока В. І., Бокун А. О., Дерев’янко С. В.
Рекомендації з діагностики, профілактики та лік-
відації тешо-, ентеровірусних енцефаломієлітів
свиней. Чернігів : ЦНТЕІ, 2006. 28 с.
15. Прискока В. А., Собко А. И., Манзий К. В.
Методические рекомендации по определению
антигенного родства, различий и доминантности
вирусов. Киев, 1987. 20 с.
16. Volkova I., Reshotko L., Bova T., Dmyt-
ruk O., Derevianko S. Cultivation of potato leafroll
virus (PLRV) in mammalian continuous cell lines.
Agricultural Science and Practice. 2018. Vol. 5, № 3.
P. 19–26. https://doi.org/10.15407/agrisp5.03.019
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2026. Вип. 43.
81
17. Патика М. В., Антіпов І. О., Спиридо-
нов В. Г., Мельничук М. Д. Визначення частко-
вої нуклеотидної послідовності гена капсидного
білка українського ізоляту вірусу скручування
листя картоплі (ВСЛК). Науковий вісник Націо-
нального університету біоресурсів і природоко-
ристування України. 2009. Вип. 134, Ч. 3. С. 17–24.
18. GenBank. Potato leafroll virus isolate Cher-
nigov 08 coat protein gene, partial cds. Режим дос-
тупу: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/FJ64
8776
19. Волкова І. В., Бова Т. О. Діагностика ві-
русу скручування листя картоплі за використан-
ня культури клітин ссавців. Захист і карантин
рослин. 2012. Вип. 57. С. 63–68. Режим доступу:
https://ipp.gov.ua/wp-content/uploads/2020/02/blok-
zikr-57_2011.pdf#page=63
Отримано: 12.03.2026
Прийнято до друку: 21.04.2026
Опубліковано онлайн: 29.05.2026
https://doi.org/10.35868/1997-3004.43.74-83
UDC 578.863.1:578.74
PECULIARITIES OF MAINTAINING STRAINS AND ISOLATES
OF THE POTATO LEAFROLL VIRUS IN THE COLLECTION
OF POTATO PHYTOPATHOGENIC VIRUSES
L. M. Reshotko, https://orcid.org/0000-0002-0179-9315,
І. V. Volkova, https://orcid.org/0000-0002-0037-4323
Institute of Agricultural Microbiology and Agroindustrial Manufacture, NAAS, Chernihiv
e-mail: volkova1212@ukr.net
Objective. To analyze the peculiarities of maintaining strains and isolates of the potato leafroll
virus (PLRV) in the collection of potato phytopathogenic viruses. Methods. Collection samples of
PLRV are stored and studied using visual diagnosis, indicator plants, electron microscopy, immu-
nological, and molecular genetic methods. Results. To maintain PLRV strains and isolates in the
collection of potato phytopathogenic viruses (the Collection), a duplicate management system for
infected plant samples is used. Firstly, potato plants are grown in open-field conditions, despite the
risks of secondary infection, which allows for the reproduction of the natural rhythm of vegetation
and tuber formation and contributes to a significant increase in material without the risk of its loss.
Secondly, a method for the long-term cultivation of phytopathogenic viruses in crop plants in vitro
under sterile conditions has been developed and implemented into routine practice, which has elimi-
nated the risk of accumulation of fungal and bacterial pathogens and reinfection with other viruses.
Microbulbs formed in test tubes are periodically planted in growing containers under controlled
conditions and in open ground, gradually replacing the tuber part of the collection. Thus, the Col-
lection simultaneously contains tuber material from open ground, sterile in vitro culture plants, and
microtubers, as well as material obtained from microtubers under sterile conditions. In 2009, the
introduction, maintenance, and preservation of PLRV strains and isolates in mammalian cell cul-
ture were added to the described technology for the Collection’s operation. Observations made
during the maintenance, storage, and use of collection samples are reflected in the technical speci-
fications of each strain and isolate. Currently, the Collection includes 2 strains in tubers and in po-
tato plants during the growing season, and 3 strains in mammalian cell culture. Conclusions. Since
a distinctive feature of potato viruses is their near-total absence in seeds, strains and isolates can
only be preserved in green plants or in tubers. Under these conditions, the collection can be main-
tained through dual virus storage: in the form of virus-infected potato plants in summer and tubers
in winter, and in the form of sterile test-tube-cultured infected potato plants throughout the year.
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2026. Вип. 43.
82
Such a “living” collection requires constant updating and monitoring. For the VSLK, there is also
the possibility of maintaining samples using an alternative method — in mammalian cell culture.
Key words: potato viruses, collection, strain maintenance, PLRV, Potato leafroll virus.
REFERENCES
1. Dmytruk, O., Mamchur, O., & Kolomiiets, L.
(2006). Otrymannia biolohichnykh komponentiv
testsytem ifa dlia diahnostyky virusu aukuba mo-
zaiky kartopli (Potato Aucuba Mosaic Virus) [Ob-
taining of the biological components for potato
aucuba mosaic virus immunoferment test-systems
production]. Silskohospodarska mikrobiolohiia —
Agricultural Microbiology, 3, 157–164 [in Ukraini-
an]. https://doi.org/10.35868/1997-3004.3.157-164
2. Kucheriavenko, O., Pyrih, O., Bova, T., Ty-
moshenko, O., & Budzanivska, I. (2017). Konstru-
iuvannia imunofermentnoi test-systemy dlia vyiav-
lennia PVM u roslynnomu materiali [Designing of
ELISA test system for detecting PVM in plant mate-
rial]. Visnyk Kyivskoho natsionalnoho universytetu
imeni Tarasa Shevchenka. Biolohiia — Bulletin of
Taras Shevchenko Kyiv National University. Biolo-
gy, 1(73), 56–60 [in Ukrainian].
3. Kucheriavenko, O. O., Pyrih, O. V., & Bud-
zanivska, I. H. (2017). Vplyv mikrobnykh preparativ
na produktyvnist ta yakist roslyn kartopli z kultury
in vitro za dii MVK [Influence of microbial prepara-
tions on productiveness and quality of potato plants
from in vitro culture under PVM]. Ahroekolohichnyi
zhurnal — Agroecological Journal, 4, 65–70 [in
Ukrainian]. https://doi.org/10.33730/2077-4893.4.
2017.219772
4. Budzanivska, I. H., Bova, T. O., Ku-
cheriavenko, O. O., Pyrih, O. V., & Dmytruk, O. O.
(2014). Osoblyvosti rozvytku virusnoi infektsii,
sprychynenoi Potato Virus M, na roslynakh kartopli
za dii mikrobnykh preparative [Characteristics of vi-
ral infection development caused by potato virus M
under the impact of biopreparations on potato
plants]. Silskohospodarska mikrobiolohiia — Agri-
cultural Microbiology, 20, 60–65 [in Ukrainian].
https://doi.org/10.35868/1997-3004.20.60-65
5. Dmytruk, O. O., Kolomiiets, L. P., Mam-
chur, O. Ie. (2012). Doslidzhennia patohenezu za
urazhennia roslyn virusom aukuba mozaiky kartopli.
[Study of the pathogenesis of plant infection by po-
tato aucuba mosaic virus]. Silskohospodarska mikro-
biolohiia: zdobutky ta perspektyvy — Agricultural
Microbiology: Achievements and Prospects, 332–
337 [in Ukrainian].
6. Reshotko, L. M., & Volkova, I. V. (2022).
Vplyv metabolitiv Cladosporium cladosporioides na
perebih virusnoi infektsii v roslynakh kartopli za
umov pryrodnoho ta shtuchnoho infikuvannia fitovi-
rusamy [Influence of Cladosporium cladosporioides
metabolites on viral infection dynamics in potato
plants under condition of natural and artificial phy-
toviral infection]. Silskohospodarska mikrobiolo-
hiia — Agricultural Microbiology, 36, 64–71 [in
Ukrainian]. https://doi.org/10.35868/1997-3004.36.
64-71
7. Bova, T. O., Volkova, I. V., & Reshotko, L. M.
(2014). Pizyko-khimichni vlastyvosti izoliativ virusu
skruchuvannia lystia kartopli v kulturakh klityn
ssavtsiv [Investigation of physical and chemical
properties of Potato Leafroll Virus isolates in cul-
tures of mammalian cells]. Silskohospodarska mik-
robiolohiia — Agricultural Microbiology, 19, 83–88
[in Ukrainian]. https://doi.org/10.35868/1997-3004.
19.83-88
8. Demchuk, I. V., Reshotko, L. M., Volko-
va, I. V. (2025). Zastosuvannia konsortsiumu Azoto-
bacter chroococcum + Azotobacter vinelandii M-70/2
v tekhnolohii vyrobnytstva dobazovoho nasinnia
kartopli (naukovo-metodychni rekomendatsii) [Ap-
plication of the consortium Azotobacter chroococ-
cum + Azotobacter vinelandii M-70/2 in the tech-
nology of producing basic potato seed (scientific and
methodological recommendations)]. Chernihiv [in
Ukrainian].
9. Shevchenko, O. P. (2006). Rozpovsiudzhen-
nia ta diahnostyka nekrotychnykh shtamiv Y-virusu
kartopli na Polissi Ukrainy [Distribution and diagno-
sis of necrotic strains of the Y-potato virus in the
Polissia region of Ukraine]. Visnyk KhNAU. Seria
Roslynnytstvo, selektsiia, nasinnytstvo, ovochiv-
nytstvo — Bulletin of Kharkiv National Agricultural
University named after V. V. Dokuchayev. Series
“Crop growing, selection and seed production, fruit
and vegetable growing”, 5, 110–115 [in Ukrainian].
10. Dmytruk, O. O., Reshotko, L. M., & Vol-
kova, I. V. (2020). Monitorynh virusnykh infektsii
kartopli v ahrotsenozakh Ukrainy [Monitoring of vi-
ral potato infections in agrocenoses of Ukraine].
Ahroekolohichnyi zhurnal — Agroecological Jour-
nal, 4, 16–22 [in Ukrainian]. https://doi.org/10.
33730/2077-4893.4.2020.219441
11. Valkonen, J. P. (2007). Viruses: economical
losses and biotechnological potential. In Potato bio-
logy and biotechnology (pp. 619–641). Elsevier Sci-
ence BV. https://doi.org/10.1016/B978-044451018-
1/50070-1
12. Pat. 97981 UA, MPK C12N 7/08 (2006.01),
C12N 5/073 (2010.01). Sposib kultyvuvannia virusu
skruchuvannia lystia kartopli v pereshchepliuvanykh
liniiakh kultur klityn ssavtsiv [Method for cultiva-
tion of leaf-rolling mosaic virus in subinoculated
lines of mammalian cell cultures], Volkova I. V.,
Bova T. O., Derevianko S. V., Zarytskyi M. M.,
Publ. 10.04.2012 [in Ukrainian].
13. Melnick, J. L. (1955). Tissue culture tech-
niques and their application to original isolation,
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2026. Вип. 43.
83
growth, and assay of poliomyelitis and orphan virus-
es. Annals of the New York Academy of Sciences,
61(4), 754–773. https://doi.org/10.1111/j.1749-6632.
1955.tb42532.x
14. Soroka, V. I., Bokun, A. O., & Derevian-
ko, S. V. (2006). Rekomendatsii z diahnostyky, pro-
filaktyky ta likvidatsii tesho-, enterovirusnykh entse-
falomiielitiv svynei [Recommendations for the diag-
nosis, prevention, and elimination of tesho- and en-
teroviral encephalomyelitis in pigs]. Chernihiv:
ISMAV NAAN [in Ukrainian].
15. Priskoka, V. A. Sobko, A. I., & Man-
zij, K. V. (1987). Metodicheskie rekomendacii po
opredeleniju antigennogo rodstva, razlichij i domi-
nantnosti virusov v serologicheskih reakcijah [Me-
thodical recommendations for determining antigenic
relatedness, differences, and dominance of viruses].
Kyiv [in Ukrainian].
16. Volkova, I., Reshotko, L., Bova, T., Dmyt-
ruk, O., & Derevianko, S. (2018). Cultivation of po-
tato leafroll virus (PLRV) in mammalian continuous
cell lines. Agricultural Science and Practice, 5(3),
19–26. https://doi.org/10.15407/agrisp5.03.019
17. Patyka, M., Antipov, I., Spyrydonov, V., &
Melnychuk, M. (2009). Vyznachennia chastkovoi
nukleotydnoi poslidovnosti hena kapsydnoho bilka
ukrainskoho izoliatu virusu skruchuvannia lystia
kartopli (VSLK) [Determination of the partial nu-
cleotide sequence of the capsid protein gene of the
Ukrainian isolate of Potato leafroll virus (PLRV)].
Naukovyi visnyk Natsionalnoho universytetu biore-
sursiv i pryrodokorystuvannia Ukrainy — Scientific
Bulletin of the National University of Life and Envi-
ronmental Sciences of Ukraine, 134(3), 17–24 [in
Ukrainian].
18. GenBank. Potato leafroll virus isolate Cher-
nigov 08 coat protein gene, partial cds. Retrieved from:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/FJ648776
19. Volkova, I. V., & Bova, T. O. (2011). Diah-
nostyka virusu skruchuvannia lystia kartopli za vy-
korystannia kultury klityn ssavtsiv [Diagnosis of po-
tato leaf roll virus by using mammalian cell culture].
Karantyn i Zakhyst Roslyn — Quarantine and Plant
Protection, 57, 63–68 [in Ukrainian]. Retrieved
from: https://ipp.gov.ua/wp-content/uploads/2020/
02/blok-zikr-57_2011.pdf#page=63
Received: 12.03.2026
Accepted: 21.04.2026
Published online: 29.05.2026
ISSN 1997-3004 Сільськогосподарська мікробіологія. 2026. Вип. 43.
|
| id | oai:ojs2.smic.in.ua:article-561 |
| institution | Agriciltural microbiology |
| keywords_txt_mv | keywords |
| language | Ukrainian |
| last_indexed | 2026-07-23T01:16:41Z |
| publishDate | 2026 |
| publisher | Institute of Agrocultural Microbiology and Agro-industrial Manufacture of NAAS of Ukraine |
| record_format | ojs |
| resource_txt_mv | smicinua/b7/8b792f033777821d77c7fd1d8fb5c2b7.pdf |
| spelling | oai:ojs2.smic.in.ua:article-5612026-07-22T10:10:53Z PECULIARITIES OF MAINTAINING STRAINS AND ISOLATES OF THE POTATO LEAFROLL VIRUS IN THE COLLECTION OF POTATO PHYTOPATHOGENIC VIRUSES ОСОБЛИВОСТІ ПІДТРИМАННЯ ШТАМІВ ТА ІЗОЛЯТІВ ВІРУСУ СКРУЧУВАННЯ ЛИСТЯ КАРТОПЛІ В КОЛЕКЦІЇ ФІТОПАТОГЕННИХ ВІРУСІВ КАРТОПЛІ Решотько, Л. М. Волкова, І. В. potato viruses, collection, strain maintenance, PLRV, Potato leafroll virus віруси картоплі, колекція, підтримання штамів, ВСЛК, Potato leafroll virus Objective. To analyze the peculiarities of maintaining strains and isolates of the potato leafroll virus (PLRV) in the collection of potato phytopathogenic viruses. Methods. Collection samples of PLRV are stored and studied using visual diagnosis, indicator plants, electron microscopy, immunological, and molecular genetic methods. Results. To maintain PLRV strains and isolates in the collection of potato phytopathogenic viruses (the Collection), a duplicate management system for infected plant samples is used. Firstly, potato plants are grown in open-field conditions, despite the risks of secondary infection, which allows for the reproduction of the natural rhythm of vegetation and tuber formation and contributes to a significant increase in material without the risk of its loss. Secondly, a method for the long-term cultivation of phytopathogenic viruses in crop plants in vitro under sterile conditions has been developed and implemented into routine practice, which has eliminated the risk of accumulation of fungal and bacterial pathogens and reinfection with other viruses. Microbulbs formed in test tubes are periodically planted in growing containers under controlled conditions and in open ground, gradually replacing the tuber part of the collection. Thus, the Collection simultaneously contains tuber material from open ground, sterile in vitro culture plants, and microtubers, as well as material obtained from microtubers under sterile conditions. In 2009, the introduction, maintenance, and preservation of PLRV strains and isolates in mammalian cell culture were added to the described technology for the Collection’s operation. Observations made during the maintenance, storage, and use of collection samples are reflected in the technical specifications of each strain and isolate. Currently, the Collection includes 2 strains in tubers and in potato plants during the growing season, and 3 strains in mammalian cell culture. Conclusions. Since a distinctive feature of potato viruses is their near-total absence in seeds, strains and isolates can only be preserved in green plants or in tubers. Under these conditions, the collection can be maintained through dual virus storage: in the form of virus-infected potato plants in summer and tubers in winter, and in the form of sterile test-tube-cultured infected potato plants throughout the year. Such a “living” collection requires constant updating and monitoring. For the VSLK, there is also the possibility of maintaining samples using an alternative method — in mammalian cell culture. Мета. Проведення аналізу особливостей підтримання штамів та ізолятів вірусу скручування листя картоплі (ВСЛК) в Колекції фітопатогенних вірусів картоплі. Методи. Колекційні зразки ВСЛК зберігаються й вивчаються за використання візуальної діагностики, рослин-індикаторів, електронно-мікроскопічних, імунологічних і молекулярно-генетичних методів. Результати. Для підтримання штамів та ізолятів ВСЛК в колекції фітопатогенних вірусів картоплі (Колекція) використовується технологія дубльованого ведення інфікованих рослинних зразків. По-перше, рослини картоплі вирощуються в умовах відкритого ґрунту, попри ризики додаткового інфікування, що дає змогу відтворити природний ритм вегетації та утворення бульб і сприяє значному збільшенню матеріалу без загрози його втрати. По-друге, розроблено і впроваджено в рутинну практику спосіб довгострокового культивування фітопатогенних вірусів у рослинах культури in vitro в стерильних умовах, що зняло питання накопичення грибних і бактеріальних патогенів і перезараження іншими вірусами. Мікробульби, які утворюються в пробірках, періодично висаджуються у вегетаційні посудини в контрольованих умовах та у відкритий ґрунт і поступово замінюють бульбову частину колекції. Отже, у Колекції одночасно присутні бульбовий матеріал відкритого ґрунту, стерильні рослини культури in vitro та мікробульби, а також матеріал, отриманий із мікробульб у стерильних умовах. У 2009 році в описану технологію функціонування Колекції додано введення, підтримання й збереження штамів та ізолятів ВСЛК у культурі клітин ссавців. Спостереження під час підтримання, зберігання й використання колекційних зразків відображаються в паспортних характеристиках кожного штаму та ізоляту. На сьогодні у Колекції представлено два штами в бульбах і в рослинах картоплі під час вегетації та три штами в культурі клітин ссавців. Висновки. Оскільки особливістю вірусів картоплі є майже повна відсутність їх у насінні, збереження штамів та ізолятів можливе лише в зелених рослинах або в бульбах. Колекція за таких умов може існувати завдяки дубльованому зберіганню вірусів — у вигляді інфікованих вірусами рослин картоплі влітку, а бульб — взимку та у вигляді стерильних пробіркових інфікованих рослин картоплі протягом року. Така «жива» колекція потребує постійного оновлення й контролю. Для ВСЛК, крім того, має місце можливість підтримання зразків за використання альтернативного варіанту — в культурі клітин ссавців. Institute of Agrocultural Microbiology and Agro-industrial Manufacture of NAAS of Ukraine 2026-05-29 Article Article Рецензована Стаття application/pdf https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/561 10.35868/1997-3004.43.74-83 Agricultural microbiology; Vol. 43 (2026): Agriciltural microbiology; 74-83 Сільськогосподарська мікробіологія; Том 43 (2026): Сільськогосподарська мікробіологія; 74-83 1997-3004 10.35868/1997-3004.43 uk https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/561/625 Авторське право (c) 2026 L. M. Reshotko, І. V. Volkova https://creativecommons.org/licenses/by/4.0 |
| spellingShingle | віруси картоплі колекція підтримання штамів ВСЛК Potato leafroll virus Решотько, Л. М. Волкова, І. В. ОСОБЛИВОСТІ ПІДТРИМАННЯ ШТАМІВ ТА ІЗОЛЯТІВ ВІРУСУ СКРУЧУВАННЯ ЛИСТЯ КАРТОПЛІ В КОЛЕКЦІЇ ФІТОПАТОГЕННИХ ВІРУСІВ КАРТОПЛІ |
| title | ОСОБЛИВОСТІ ПІДТРИМАННЯ ШТАМІВ ТА ІЗОЛЯТІВ ВІРУСУ СКРУЧУВАННЯ ЛИСТЯ КАРТОПЛІ В КОЛЕКЦІЇ ФІТОПАТОГЕННИХ ВІРУСІВ КАРТОПЛІ |
| title_alt | PECULIARITIES OF MAINTAINING STRAINS AND ISOLATES OF THE POTATO LEAFROLL VIRUS IN THE COLLECTION OF POTATO PHYTOPATHOGENIC VIRUSES |
| title_full | ОСОБЛИВОСТІ ПІДТРИМАННЯ ШТАМІВ ТА ІЗОЛЯТІВ ВІРУСУ СКРУЧУВАННЯ ЛИСТЯ КАРТОПЛІ В КОЛЕКЦІЇ ФІТОПАТОГЕННИХ ВІРУСІВ КАРТОПЛІ |
| title_fullStr | ОСОБЛИВОСТІ ПІДТРИМАННЯ ШТАМІВ ТА ІЗОЛЯТІВ ВІРУСУ СКРУЧУВАННЯ ЛИСТЯ КАРТОПЛІ В КОЛЕКЦІЇ ФІТОПАТОГЕННИХ ВІРУСІВ КАРТОПЛІ |
| title_full_unstemmed | ОСОБЛИВОСТІ ПІДТРИМАННЯ ШТАМІВ ТА ІЗОЛЯТІВ ВІРУСУ СКРУЧУВАННЯ ЛИСТЯ КАРТОПЛІ В КОЛЕКЦІЇ ФІТОПАТОГЕННИХ ВІРУСІВ КАРТОПЛІ |
| title_short | ОСОБЛИВОСТІ ПІДТРИМАННЯ ШТАМІВ ТА ІЗОЛЯТІВ ВІРУСУ СКРУЧУВАННЯ ЛИСТЯ КАРТОПЛІ В КОЛЕКЦІЇ ФІТОПАТОГЕННИХ ВІРУСІВ КАРТОПЛІ |
| title_sort | особливості підтримання штамів та ізолятів вірусу скручування листя картоплі в колекції фітопатогенних вірусів картоплі |
| topic | віруси картоплі колекція підтримання штамів ВСЛК Potato leafroll virus |
| topic_facet | potato viruses collection strain maintenance PLRV Potato leafroll virus віруси картоплі колекція підтримання штамів ВСЛК Potato leafroll virus |
| url | https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/561 |
| work_keys_str_mv | AT rešotʹkolm peculiaritiesofmaintainingstrainsandisolatesofthepotatoleafrollvirusinthecollectionofpotatophytopathogenicviruses AT volkovaív peculiaritiesofmaintainingstrainsandisolatesofthepotatoleafrollvirusinthecollectionofpotatophytopathogenicviruses AT rešotʹkolm osoblivostípídtrimannâštamívtaízolâtívvírususkručuvannâlistâkartoplívkolekcíífítopatogennihvírusívkartoplí AT volkovaív osoblivostípídtrimannâštamívtaízolâtívvírususkručuvannâlistâkartoplívkolekcíífítopatogennihvírusívkartoplí |