Гетерогенность циркулирующих опухолевых клеток

Обобщены и проанализированы данные литературы и результаты собственных исследований о клиническом значении и методах выявления циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) при злокачественных опухолях различных локализаций. Обсуждаются причины и значение появления гетерогенных ЦОК, а также принципиальн...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Datum:	2012
Hauptverfasser:	Ковалев, А.А., Грудинская, Т.В., Кузнецова, Т.П., Ковалев, К.А.
Format:	Artikel
Sprache:	Russian
Veröffentlicht:	Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького 2012
Schriftenreihe:	Онкологія
Schlagworte:	Оригинальные исследования
Online Zugang:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/134099
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:	Гетерогенность циркулирующих опухолевых клеток / А.А. Ковалев, Т.В. Грудинская, Т.П. Кузнецова, К.А. Ковалев // Онкологія. — 2012. — Т. 14, № 2. — С. 126-129. — Бібліогр.: 21 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-134099
record_format	dspace
spelling	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1340992025-02-09T17:42:36Z Гетерогенность циркулирующих опухолевых клеток Heterogeneity of circulating tumor cells Ковалев, А.А. Грудинская, Т.В. Кузнецова, Т.П. Ковалев, К.А. Оригинальные исследования Обобщены и проанализированы данные литературы и результаты собственных исследований о клиническом значении и методах выявления циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) при злокачественных опухолях различных локализаций. Обсуждаются причины и значение появления гетерогенных ЦОК, а также принципиальные технические аспекты, определяющие специфичность и чувствительность их обнаружения. The literature and results of research on the clinical significance and methods for the detection of circulating tumor cells in malignant tumors of various localizations are summarized and analyzed. The particular importance the fact of heterogeneity circulating tumor cells are emphasized 2012 Article Гетерогенность циркулирующих опухолевых клеток / А.А. Ковалев, Т.В. Грудинская, Т.П. Кузнецова, К.А. Ковалев // Онкологія. — 2012. — Т. 14, № 2. — С. 126-129. — Бібліогр.: 21 назв. — рос. https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/134099 ru Онкологія application/pdf Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Оригинальные исследования Оригинальные исследования
spellingShingle	Оригинальные исследования Оригинальные исследования Ковалев, А.А. Грудинская, Т.В. Кузнецова, Т.П. Ковалев, К.А. Гетерогенность циркулирующих опухолевых клеток Онкологія
description	Обобщены и проанализированы данные литературы и результаты собственных исследований о клиническом значении и методах выявления циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) при злокачественных опухолях различных локализаций. Обсуждаются причины и значение появления гетерогенных ЦОК, а также принципиальные технические аспекты, определяющие специфичность и чувствительность их обнаружения.
format	Article
author	Ковалев, А.А. Грудинская, Т.В. Кузнецова, Т.П. Ковалев, К.А.
author_facet	Ковалев, А.А. Грудинская, Т.В. Кузнецова, Т.П. Ковалев, К.А.
author_sort	Ковалев, А.А.
title	Гетерогенность циркулирующих опухолевых клеток
title_short	Гетерогенность циркулирующих опухолевых клеток
title_full	Гетерогенность циркулирующих опухолевых клеток
title_fullStr	Гетерогенность циркулирующих опухолевых клеток
title_full_unstemmed	Гетерогенность циркулирующих опухолевых клеток
title_sort	гетерогенность циркулирующих опухолевых клеток
publisher	Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького
publishDate	2012
topic_facet	Оригинальные исследования
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/134099
citation_txt	Гетерогенность циркулирующих опухолевых клеток / А.А. Ковалев, Т.В. Грудинская, Т.П. Кузнецова, К.А. Ковалев // Онкологія. — 2012. — Т. 14, № 2. — С. 126-129. — Бібліогр.: 21 назв. — рос.
series	Онкологія
work_keys_str_mv	AT kovalevaa geterogennostʹcirkuliruûŝihopuholevyhkletok AT grudinskaâtv geterogennostʹcirkuliruûŝihopuholevyhkletok AT kuznecovatp geterogennostʹcirkuliruûŝihopuholevyhkletok AT kovalevka geterogennostʹcirkuliruûŝihopuholevyhkletok AT kovalevaa heterogeneityofcirculatingtumorcells AT grudinskaâtv heterogeneityofcirculatingtumorcells AT kuznecovatp heterogeneityofcirculatingtumorcells AT kovalevka heterogeneityofcirculatingtumorcells
first_indexed	2025-11-28T22:02:02Z
last_indexed	2025-11-28T22:02:02Z
_version_	1850073236950220800
fulltext	ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀ ÍÈß 126 Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 4 • ¹ 2 • 2 0 1 2 ВВЕДЕНИЕ Отличительной чертой злокачественных опухо- лей является реализация программы метастатическо- го каскада — биологического феномена, который на- чинается с процесса эпителиально-мезенхимально- го перехода (ЭМП), утраты межклеточной адгезии, приобретения опухолевой клеткой (ОК) свойств ано- мальной подвижности и инвазивности и заканчива- ется колонизацией раковыми клетками отдаленных органов с последующим развитием метастатических опухолей [2, 6, 7]. Между этими «ступенями» метаста- тического каскада лежит уникальное состояние ОК — циркуляция и выживание в системном кровотоке. Впервые инвазию ОК вен и лимфатических сосу- дов у больного базально-клеточным раком кожи об- наружил Tirsch в 1865 г. В 1869 г. Ashworth сообщил о наличии ОК в сосудах больного, умершего от ме- тастатического рака. О циркулирующих опухолевых клетках (ЦОК) как о «метастазах в кровь» сообщал также Н.Н. Петров. После того, как в ХХI ст. стали доступны новые методы идентификации, подсчета и фенотипирования циркулирующих в крови ОК, предприняты многочисленные попытки оценить их роль в канцерогенезе, а также использовать в качестве прогностических и предиктивных показателей в кли- нической практике [3–5, 8]. Сегодня уже не вызывает сомнений, что ЦОК являются ключом к пониманию биологии метастазов и биологическим маркером, по- зволяющим неинвазивно изучать эволюцию геноти- па опухоли во время ее прогрессии, а также под вли- янием проводимого лечения [12, 14, 15]. Однако фактом является и то, что наши фундамен- тальные и клинические исследования в области изуче- ния ЦОК ограничены неимением доступных техноло- гий их обнаружения. Серьезным препятствием до сих пор остается отсутствие методологических стандартов выявления ЦОК; существующие методики, в том чис- ле и коммерческие, не обладают надежной технологи- ческой платформой, высокой пропускной способно- стью, чувствительностью и специфичностью, а также сложны в воспроизведении и дороги, то есть не пол- ностью отвечают задачам клиники [8–10]. Сложности в интерпретации полученных данных заключаются и в том, что ЦОК гетерогенны по своей природе. По- следнее обстоятельство зависит как от объективных молекулярно-клеточных процессов в популяции ОК, так и от повреждения клеток во время их изолирова- ния из цельной крови [8, 15, 19]. Целью данной работы было оценить практиче- скую ценность разработанного на кафедре онколо- гии ГУ «ЗМАПО МЗ Украины» метода идентифи- кации и фенотипирования ЦОК. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Материалом для исследования служила цель- ная кровь 15 пациентов онкологического профиля (7 мужчин и 8 женщин в возрасте от 46 до 72 лет) с ве- рифицированными эпителиальными злокачествен- ными опухолями различной локализации и гистоге- неза (рак молочной железы, рак желудка, рак прямой и ободочной кишки, рак яичника). Объединяющей характеристикой всех больных была категория М1, то есть наличие реализовавшихся гематогенных ме- тастазов в висцеральные органы (легкие, печень, па- риетальную брюшину). Изучали венозную кровь, полученную в объеме 50 мл из верхней полой вены после катетеризации внутренней яремной вены пациента. Во всех случа- ях забор крови производили после получения ин- формированного письменного согласия больного. В работе использовали прямые методы детекции, впервые предложенные Bona и соавторами в 2000 г., основанные на физических особенностях злокачест- венных клеток (их плотности и размере). Вначале выполняли цитаферез с высоким коэффи- циентом центрифуги рования (была использована плат- форма SmartPReP Harvest), в результате чего цельная кровь разделялась на слои соответственно градиенту плотности (эритроциты, нейтрофилы, мононуклеар- ные клетки, лимфоциты, моноциты, клетки эпителия, предположительно ОК и плазма, которая являлась верх- ним слоем). После седиментации, дезагрегации клеток и лизиса эритроцитов соответствующий слой подвер- гали микрофильт рации (используя полиуретановый фильтр Imugard III RC («Terumo», Япония) с диаме- тром пор до 30 мкм). Клеточный материал, содержа- ГЕТЕРОГЕННОСТЬ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК Резюме. Обобщены и проанализированы данные литературы и результаты собственных исследований о клиническом значении и методах выявления циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) при злокачественных опухолях различных локализаций. Обсуждаются причины и значение появления ге- терогенных ЦОК, а также принципиальные технические аспекты, опре- деляющие специфичность и чувствительность их обнаружения. А.А. Ковалев Т.В. Грудинская Т.П. Кузнецова К.А. Ковалев ГУ Запорожская медицинская академия последипломного образования МЗ Украины, Запорожье, Украина Ключевые слова: циркулирующие опухолевые клетки, эпителиально- мезенхимальный переход, апоптоз, метастазирование. ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍ È ß 127Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 4 • ¹ 2 • 2 0 1 2 щий слой обогащенных ОК, окрашивали по Романов- скому — Гимзе и микро скопировали под увеличением х 200–1000, при котором мембранные, цитоплазма ти- чес кие и ядерные детали становились доступными для наблюдения. После идентификации ОК проводили их иммуноцито химическое фенотипирование и окраску на панцитокератины (использовали реагенты и антите- ла Cytokeratin cocktail AE1/AE3 («Novocastra», Англия)). Изоляция и обогащение ЦОК независимо от их происхождения из той или иной злокачественной опухоли позволяли минимально повреждать клетки во время всех этапов микроманипуляции и макси- мально точно отличать единичные ОК или опухоле- вые микроэмболы (ОМЭ) от «примесей» клеток кро- ви и эпителиальных клеток неопухолевой природы. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ ЦОК были обнаружены у всех 15 пациентов. Ко- личественный анализ ЦОК на данном этапе исследо- вания не проводили. Обнаружены 3 варианта ЦОК: одиночные живые клетки, циркулирующие ОМЭ и ОК в состоянии апоптоза (рис. 1–3). У отдельных пациентов были обнаружены также циркулирую- щие эпителиальные клетки неопухолевой природы. Рис. 1. Одиночные ЦОК у больных раком молочной же- лезы, прямой кишки, желудка и яичника. Окраска по Ро- мановскому — Гимзе (а, б, в) и реакция на панцитокера- тины (г). Ув. × 1000 Рис. 2. Циркулирующие ОМЭ в «сопровождении» клеточ- ных элементов крови. Больная С., 45 лет; рак сигмовид- ной кишки T3N1M1. Окраска по Романовскому — Гим- зе. Ув. × 400 Рис. 3. ЦОК в состоянии апоптоза. Больной Х., 49 лет. Рак желудка T2N2M1. 95% регрессия опухоли и метаста- зов после 6 курсов ПХТ (доцетаксел + оксалиплатин). Наличие циркулирующих «апоптотических телец» мо- жет свидетельствовать об эффективности лечения. Реак- ция на панцитокератины. Ув. × 400 ЦОК были обнаружены в крови пациентов в раз- личные сроки после постановки клинического ди- агноза (от 2 мес до 5 лет), перед хирургическим вмешательством и в различные сроки после него: от 2 нед до 3 лет (рис. 4) после выполнения резекции желудка по поводу аденокарциномы желудка G3. Рис. 4. ЦОК в периферической крови: «голоядерная» ра- ковая клетка и лимфоциты. Больной Т, 60 лет; первичный диагноз — рак желудка T3N1M0 G3, прогрессирование через 2 года после гастрэктомии; радиочастотная термо- абляция метастаза в левом надпочечнике, продолжается ПХТ (доцетаксел + оксалиплатин). На момент обследо- вания клинические опухолевые очаги отсутствуют. Окра- ска по Романовскому — Гимзе. Ув. × 1000 Считают, что гетерогенность ЦОК обусловле- на их «естественной историей» в канцерогенезе. По сравнению с нормальным эпителием клетки кар- цином характеризуются прогрессирующим сниже- нием межклеточной адгезии и повышением мигра- ционных способностей. Инициированная клетка уже на самых ранних стадиях канцерогенеза может разрушить базальную мембрану и проникнуть в кро- воток. Молекулярные механизмы этих процессов в первую очередь связаны с феноменом ЭМП, впер- вые описанного Hay в 1995 г. После активации про- тоонкогенов (Src, Ras) и фазы инициации в эпите- лиальных клетках активируются «скрытые» эмбрио- нальные программы ЭМП, в результате чего клетка постепенно теряет набор эпителиальных антиге- нов и приобретает мезенхимальные. Растворимые факторы роста (PDGF, NGF, EGF, FGF), цитоки- ны, молекулы внеклеточного матрикса активиру- ют сигнальные пути (Wnt/beta-catenin, Notch, сиг- нальные пути названных выше лигандов), ведущие к реализации программы ЭМП. Эти пути активиру- ют ряд транскрипционных факторов (Snail, Twist, ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀ ÍÈß 128 Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 4 • ¹ 2 • 2 0 1 2 Slug, ZEB1, ZEB2, Lef-1 и др.), которые связыва- ются с промоторами генов, ответственных за ЭМП [2, 6, 7]. Во время ЭМП происходят морфологиче- ские изменения размера и формы клеток, наблю- дается плеоморфизм клеток и ядер, гиперхромазия и гипер плоидность, а также увеличивается митоти- ческая активность. Феномен ЭМП оказывает влияние на форми- рование гетерогенности ЦОК, а также обусловли- вает технические трудности их обнаружения и фе- нотипирования. Поскольку большинство методов иден тификации ЦОК основаны на обнаружении экспрессии цитокератинов, значительная фракция этих клеток может быть не обнаружена именно из- за потери этих эпителиальных антигенов и приобре- тения новых, мезенхимальных, в частности вимен- тина, не используемых в коммерческих тестах (Cell Search, проточная цитометрия, PCR-RT). В экспериментальных моделях было установле- но, что ежедневно в кровоток из 1 г опухолевой тка- ни поступает 1 млн клеток, при этом только 1 клетка из 40 может достигнуть преметастатической ниши и только 0,01% клеток реализуются в макрометаста- зы. Эпителиальные клетки в кровотоке имеют очень малую выживаемость: 85% погибают после интрава- зации в течение менее 5 мин, попадая в «капилляр- ную ловушку», и превращаются в апоптотические тельца. Этому процессу способствуют гемодинами- ческий стресс и взаимодействие ОК с клетками им- мунной системы [2, 11, 13]. Апоптотические тельца не могут реализоваться в виде отдаленных гемато- генных метастазов и с этой точки зрения не являют- ся опасными для больного. В то же время апопто- тические ОК могут быть источником циркулирую- щих опухолевый ДНК и РНК, которые могут быть обнаружены с помощью многочисленных сверхчув- ствительных методов молекулярной визуализации (PCR-RT). Использование этих методов позволяет улавливать «осколки» ОК и отображать их количе- ство с помощью компьютера в виде компьютерных графиков, но не дает возможности провести свето- вую микроскопию и визуализацию клетки (ее мем- браны, цитоплазмы, ядра), что может привести к ги- пердиагностике и ложным клиническим прогнозам. Следует также отметить, что появление нуклеино- вых кислот в кровотоке может зависеть не только от апоптоза ЦОК, но и от гибели клеток первичной опухоли (спонтанной или под влиянием терапии). Выживание ОК в кровотоке происходит в том случае, если во время ЭМП в клетке активировались антиапоптотические программы. Большинство вы- живших ЦОК с повышенным метастатическим по- тенциалом экспрессируют факторы, ингибирую- щие апоптоз, и являются устойчивыми к аноикозу (одна из форм апоптоза, когда гибель клетки про- исходит в результате нарушения межклеточной ад- гезии и взаимодействия с матриксом) [13, 17, 19]. Выжившие ЦОК меняют свои гемодинамические и метабо лические свойства и могут обнаруживаться как в виде единичных клеток, так и в виде циркули- рующих ОМЭ (феномен коллективной миграции). ОМЭ имеют высокий пролиферативный потенци- ал и обладают свойством агрессивного метастази- рования. Они не могут покинуть просвет сосуда пу- тем экстравазации, но приводят к опухолевой эмбо- лии, пермеации клеток в просвете сосуда, разрыву стенки капилляра и пролиферации в интерстиции. Длительное время считалось, что циркулиро- вать в кровотоке могут только эпителиальные ОК. В последнее время было показано, что доля цито- кератин-позитивных неопухолевых клеток в кро- ви в нормальных условиях может составлять от 0% до 20% [1, 20, 21]. В литературе встречается тер- мин «циркулирующая эпителиальная клетка», что не является эквивалентом «циркулирующей опу- холевой клетки». Небольшое количество эпите- лиальных клеток может быть обнаружено в пери- ферической крови неонкологических пациентов с доброкачественными эпителиальными пролифе- ративными заболеваниями, а также при воспалении, травме, хирургических вмешательствах. Большин- ство цитокератин-позитивных клеток представле- ны лейкоци тами. Другие клетки крови (макрофаги, плазматические, ядросодержащие гемопоэтические клетки-предшественники) также могут экспресси- ровать специфические эпителиальные антигены. Этот факт имеет принципиальное значение, по- скольку существующие высокоточные методы иден- тификации ЦОК основаны не на цитологической микроскопической картине, а на выявлении цито- кератин-экспрессирующих клеток и других мето- дах молекулярной идентификации. Таким образом, молекулярная визуализация циркулирующих цито- кератин-позитивных клеток еще не является осно- ванием для окончательного заключения об их опу- холевой природе. Обязательным является дополни- тельное окрашивание для выявления CD45. Во всех случаях для окончательного заключения необходи- ма микроскопическая характе ристика всей клетки и ее компонентов (мембраны, цитоплазмы, ядра). Визуализация ЦОК представляет собой слож- ную задачу. Одиночная ОК в 1 мл крови окружена примерно 10 млн лейкоцитов и 5 млрд эритроцитов. В связи с этим методы идентификации ЦОК должны обладать и очень высокой специфичностью, и очень высокой чувствительностью. В фундаментальных и клинических исследованиях для идентификации ЦОК наиболее часто используют коммерческие тех- нологии CellSearch, Maintrac, CellPoint, Adnagen, RT-PCR, которые основаны на выявлении в кро- ви цитокератин-позитивных, CD45-негативных клеток. В ряде случаев клетки обнаруживают с по- мощью других молекулярных маркеров — HER2, MUC1, GA73.3. Поиск единичных ОК осуществля- ется с помощью сложных и дорогих компьютерных программ [8, 10, 13, 16, 18, 20]. Перечисленные методы молекулярной визуали- зации ЦОК отличаются очень высокой чувствитель- ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍ È ß 129Î Í Ê Î Ë Î Ã È ß • Ò. 1 4 • ¹ 2 • 2 0 1 2 ностью, однако, как отмечалось выше, не лишены некоторых недостатков (гипердиагностика). Свето- вая микроскопия с последующим фенотипировани- ем клеток, не обладая очень высокой чувствитель- ностью, позволяет избежать ложноположительных и ложноотрицательных результатов при выявлении ЦОК. Различное биологическое значение одиноч- ных живых ЦОК, циркули рующих микроэмболов, апоптотических ЦОК создает не только трудности их идентификации, но и делает сложным процесс интерпретации полученных данных применитель- но к клинике. ВЫВОДЫ 1. Наличие ЦОК отражает способность опухоли к инвазии и метаста зированию. Результаты подсчета количества и изучения биологических характеристик ЦОК являются ценными прогностическими и преди- ктивными маркерами, а также могут отражать эволю- цию генотипа опухоли при ее прогрессии. 2. Идентификация ЦОК остается сложной зада- чей и до сих пор еще не доступна клиницистам для рутинного использования. Технологические стан- дарты выявления ЦОК отсутствуют. 3. При идентификации ЦОК следует учитывать наличие в крови клеток, утративших эпителиальные и приобретшие мезенхимальные антигены (фено- мен ЭМП), наличие апоптотических клеток, а также циркулирующих эпителиальных неопухолевых кле- ток. Возможность проведения микроскопического анализа мембраны, цитоплазмы и ядра должно быть обязательным компонентом диагностики ЦОК. 4. Разработанный в клинике метод идентифика- ции ЦОК, основанный на центрифугировании, ци- таферезе, перфузии, микрофильтрации и обогаще- нии клеток на фильтре позволяет отчасти решить поставленные задачи. 5. Представляется перспективным дальнейшее изучение биологических свойств ЦОК после их вы- деления путем культивирования в присутствии фак- торов роста по технологии PRP. ЛИТЕРАТУРА 1. Crisan D, Ruark DS, Decker DA, et al. Detection of circu- lating epithelial cells after surgery for benign breast disease. Mol Diagn 2000; 5: 33–8. 2. Hanahan D, Weinberg RA. The hallmarks of cancer. Cell 2000; 100: 57–70. 3. Schuler F, Dolken G. Detection and monitoring of mini- mal residual disease by quantitative real-time PCR. Clin Chim Acta 2006; 363: 147–56. 4. Smerage JB, Hayes DF. The measurement and therapeu- tic implications of circulating tumour cells in breast cancer. Br J Cancer 2006; 94: 8–12. 5. Goeminne JC, Guillaume T, Symann M. Pitfalls in the de- tection of disseminated non-hematological tumor cells. Ann On- col 2000; 11: 785–92. 6. Christiansen JJ, Rajasekaran AK. Reassessing epithelial to mesenchymal transition as a prerequisite for carcinoma invasion and metastasis. Cancer Res 2006; 66: 8319–26. 7. Thiery JP, Sleeman JP. Complex networks orchestrate epi thelial- mesenchymal transitions. Nat Rev Mol Cell Biol 2006; 7: 131–42. 8. Pantel K, Woelfle U. Detection and molecular characterisa- tion of disseminated tumour cells: implications for anticancer the- rapy. Biochim Biophys Acta 2005; 1756: 53–64. 9. Balic M, Dandachi N, G. Hofmann G, et al. Comparison of two methods for enumerating circulating tumor cells in carcinoma patients. Cytometry B Clin Cytom 2005; 68: 25–30. 10. Kowalewska M, Chechlinska M, Markowicz S, et al. The re- levance of RT-PCR detection of disseminated tumour cells is ham- pered by the expression of markers regarded as tumour-specific in activated lymphocytes. Eur J Cancer 2006; 42: 2671–4 11. Friedl P, Wolf K. Tumour-cell invasion and migration: di- versity and escape mechanisms. Nat Rev Cancer 2003; 3: 362–74. 12. Hermanek P, Hutter RV, Sobin LH, et al. International Union Against Cancer. Classification of isolated tumor cells and micrometastasis. Cancer. 1999; 86: 2668–73. 13. Rosenberg R, Gertler R, Friederichs J, et al. Comparison of two density gradient centrifugation systems for the enrichment of disseminated tumor cells in blood. Cytometry 2002; 49: 150–8. 14. Ring I, Smith E, Dowsett M. Circulating tumour cells in breast cancer. Lancet Oncol. 2004; 5: 79–88. 15. Mocellin S, Keilholz U, Rossi CR, Nitti D. Circulating tu- mor cells: the ‘leukemic phase’ of solid cancers, Trends Mol Med 2006; 12: 130–9. 16. Bustin SA, Mueller R. Real-time reverse transcription PCR (qRT-PCR) and its potential use in clinical diagnosis, Clin Sci (Lond.) 2005; 109: 365–79. 17. Young SD, Marshall RS, Hill RP. Hypoxia induces DNA overreplication and enhances metastatic potential of murine tumor cells, Proc Natl Acad Sci USA 1988; 85: 9533–7. 18. Fehm T, Sagalowsky A, Clifford E, et al. Cytogenetic evi- dence that circulating epithelial cells in patients with carcinoma are malignant, Clin Cancer Res 2002; 8: 2073–84. 19. Fehm T, Solomayer EF, Meng S, et al. Methods for isola- ting circulating epithelial cells and criteria for their classification as carcinoma cells, Cytotherapy 2005; 7: 171–85. 20. Zieglschmid V, Hollmann C, Bocher O. Detection of dis- seminated tumor cells in peripheral blood, Crit Rev Clin Lab Sci 2005; 42: 155–96. 21. Allard WJ, Matera J, Miller MC, et al. Tumor cells circulate in the peripheral blood of all major carcinomas but not in healthy subjects or patients with nonmalignant diseases, Clin. Cancer Res. 2004; 10: 6897–904. HETEROGENEITY OF CIRCULATING TUMOR CELLS A.A. Kovalyov, T.A. Grudinskaya, T.P. Kusnezowa, K.A. Kovalyov Summary. The literature and results of research on the clinical significance and methods for the detection of circulating tumor cells in malignant tumors of various localizations are summarized and analyzed. The par- ticular importance the fact of heterogeneity circulating tumor cells are emphasized Key Words: circulating tumor cells, epithelial- mesenchymal transition, apoptosis, metastasis. Адрес для переписки: Ковалев А.А. ГУ «ЗМАПО МЗ Украины» 69040, Запорожье, бульв. Винтера, 20 E-mail: kovalev-onco@yandex.ru

Гетерогенность циркулирующих опухолевых клеток

Institution

Ähnliche Einträge