Криконсервирование культуры Spirulirina platensis

Изучали влияние различных скоростей охлаждения на способность к пролиферации сине-зеленой водоросли Spirulina platensis. Полученные результаты показали, что оптимальным режимом криоконсервирования культуры Spirulina platensis является быстрое охлаждение прямым погружением в жидкий азот суспензии кле...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in:Проблемы криобиологии и криомедицины
Date:2007
Main Authors: Цуцаева, А.А., Балыбердипа, Л.М., Ананьина, А.Е., Гриша, И.Г.
Format: Article
Language:Russian
Published: Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України 2007
Subjects:
Online Access:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/138030
Tags: Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:Криконсервирование культуры Spirulirina platensis / А.А. Цуцаева, Л.М. Балыбердипа, А.Е. Ананьина, И.Г. Гриша // Проблемы криобиологии. — 2007. — Т. 17, № 2. — С. 168-172. — Бібліогр.: 7 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
_version_ 1859660034979397632
author Цуцаева, А.А.
Балыбердипа, Л.М.
Ананьина, А.Е.
Гриша, И.Г.
author_facet Цуцаева, А.А.
Балыбердипа, Л.М.
Ананьина, А.Е.
Гриша, И.Г.
citation_txt Криконсервирование культуры Spirulirina platensis / А.А. Цуцаева, Л.М. Балыбердипа, А.Е. Ананьина, И.Г. Гриша // Проблемы криобиологии. — 2007. — Т. 17, № 2. — С. 168-172. — Бібліогр.: 7 назв. — рос.
collection DSpace DC
container_title Проблемы криобиологии и криомедицины
description Изучали влияние различных скоростей охлаждения на способность к пролиферации сине-зеленой водоросли Spirulina platensis. Полученные результаты показали, что оптимальным режимом криоконсервирования культуры Spirulina platensis является быстрое охлаждение прямым погружением в жидкий азот суспензии клеток под защитой криопротектора диметилсульфоксида в концентрации 10%. Вивчали вплив різних швидкостей охолодження на здатність до проліферації синьо-зеленої водорості Spirulina platensis. Отримані результати показали, що оптимальним режимом кріоконсервування культури Spirulina platensis є швидке охолодження прямим зануренням у рідкий азот з суспензією клітин під захистом кріопротектора диметилсульфоксиду в концентрації 10%. The impact of difference cooling rates on ability to proliferation of Spirulina platensis blue-green algae has been studied. Obtained results have shown that optimal condition of cryopreservation Spirulina platensis culture was rapid cooling by direct plunging into liquid nitrogen of metal container with cell suspension under the protection of cryoprotectant dimethyl sulfoxide in 10% concentration.
first_indexed 2025-11-30T09:34:22Z
format Article
fulltext 168 PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 17, 2007, №2 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 17, 2007, №2 УДК 582.26.043.086.13 А.А. ЦУЦАЕВА*, Л.М. БАЛЫБЕРДИНА, А.Е. АНАНЬИНА, И.Г. ГРИША Криоконсервирование культуры Spirulina platensis UDC 582.26.043.086.13 A.A. TSUTSAYEVA*, L.M. BALIBERDINA, A.E. ANANYINA, I.G. GRISHA Cryopreservation of Spirulina platensis culture Изучали влияние различных скоростей охлаждения на способность к пролиферации сине-зеленой водоросли Spirulina platensis. Полученные результаты показали, что оптимальным режимом криоконсервирования культуры Spirulina platensis является быстрое охлаждение прямым погружением в жидкий азот суспензии клеток под защитой криопротектора диметилсульфоксида в концентрации 10%. Ключевые слова: криоконсервирование, сине-зеленая водоросль Spirulina platensis, диметилсульфоксид. Вивчали вплив різних швидкостей охолодження на здатність до проліферації синьо-зеленої водорості Spirulina platensis. Отримані результати показали, що оптимальним режимом кріоконсервування культури Spirulina platensis є швидке охолодження прямим зануренням у рідкий азот з суспензією клітин під захистом кріопротектора диметилсульфоксиду в концентрації 10%. Ключові слова: кріоконсервування, синьо-зелена водорість Spirulina platensis, диметилсульфоксид. The impact of difference cooling rates on ability to proliferation of Spirulina platensis blue-green algae has been studied. Obtained results have shown that optimal condition of cryopreservation Spirulina platensis culture was rapid cooling by direct plunging into liquid nitrogen of metal container with cell suspension under the protection of cryoprotectant dimethyl sulfoxide in 10% concentration. Key-words: cryopreservation, Spirulina platensis blue-green algae, dimethyl sulfoxide. * Автор, которому необходимо направлять корреспонденцию: ул. Переяславская, 23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38 (057) 373-31-26, факс: +38 (057) 373-30-84, электронная почта: cryo@online.kharkov.ua * To whom correspondence should be addressed: 23, Pereyaslavskaya str., Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 373 3126, fax: +380 57 373 3084, e-mail: cryo@online.kharkov.ua Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the Na- tional Academy of Sciences of Ukraine, Kharkov, Ukraine Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков Сине-зеленая водоросль Spirulina platensis не только является объектом научных исследований, но и культивируется для использования как лечебно-профилактический компонент питания и в косметологии [1, 4, 6]. В связи с этим необходимы эффективные способы хранения чистых культур Spirulina platensis, при которых сохраняются ис- ходные морфофункциональные свойства клеток. Одним из эффективных методов долгосрочного хранения является метод хранения микроорганиз- мов в криоконсервированном состоянии, однако Spirulina platensis относится к микроводорослям, чрезвычайно чувствительным к замораживанию [3, 8]. Цель данной работы – изучение и выбор опти- мальных режимов криоконсервирования культуры Spirulina platensis. Материалы и методы Объект исследования – культура Spirulina platensis, предоставленная Институтом ботаники им. H.Г. Холодного НАН Украины. Культуру выращивали в минеральной среде Зарука [5] в колбах емкостью 250 мл при круглосу- точном освещении лампами дневного света в течение 7 суток при температуре 25-30 °С. Суспензию клеток замораживали в контейне- рах из нержавеющей стали емкостью 1-10 мл (мар- Spirulina platensis blue-green algae is not only the object of scientific research but it is also cultured for use as medical-prophylactic component of food and in cosmetology. In this connection effective methods of keeping clean culture Spirulina platensis are necessary under which initial morphofunctional cell characteristics are preserved. One of the effective methods of long-term storage is the one for storage of microorganisms in cryopre- served condition but Spirulina platensis belongs to quite sensitive to freezing microalgae [3,8]. This research aim is study and choice of optimal cryopreservation regimens of Spirulina platensis culture. Materials and methods The research object is Spirulina platensis culture provided by the Institute of Botany named after N.G. Kholodnyy of the National Academy of Sciences of Ukraine. The culture was grown in Zarrouck mineral medium [5] in 250 ml flasks at continuous light of day light lamps for seven days at 25-30 °C. The suspension of cells was frozen in 1-10 ml stain- less steel containers (K-4.00.00-02 and K 4.00.00-03, Special Design and Technical Bureau with Experi- mental Unit of the IPC&C) with cooling rate of 0.5; 5.0°C/min down to –70°C with programmable freezer 169 ки К-4.00.00-02 и К 4.00.00-03, СКТБ с ОП ИПК и К НАН Украины) со скоростью охлаждения 0,5; 5,0°С/мин до –70°С на установке программного замораживания биообъектов 3М1.00.00.00 (СКТБ с ОП ИПК и К НАН Украины) с последующим пог- ружением в жидкий азот (–196°С), а также прямым погружением контейнеров в жидкий азот (скорость охлаждения около 400°С/мин). В качестве крио- протектора использовали диметилсульфоксид (Me2SO) в концентрациях 2, 5, 10, 20% и глицерин в концентрации 15%. Образцы отогревали на водя- ной бане при температуре 30°С и засевали в среду Зарука (0,5 мл суспензии культуры в 20 мл среды) для определения способности культуры Spirulina platensis к пролиферации (жизнеспособности), которую оценивали визуально, фиксируя время появления зеленого пигмента, и на фотоэлектри- ческом калориметре ФЭК-56М (по оптической плотности). Морфологию культуры изучали под микроскопом (ЛОМО МБИ-15У42). Статистическую обработку полученных дан- ных проводили по методу Стьюдента-Фишера, достоверными считали различия данных при p<0,05. Результаты и обсуждение После замораживания-отогрева культуры Spiru- lina platensis в среде роста без криопротектора от- мечалось разделение на фрагменты разной длины и уменьшение поперечного размера подавляющего большинства нитей спирулины (рисунок). Кроме того, клетки приобретали желто-зеленую окраску (ярко-зеленая – до замораживания), что свиде- тельствовало о разрушении хлорофильных зерен. Оптическая плотность культуры после замора- живания-отогрева без криопротектора по всем программам через 9 суток культивирования была достоверно ниже по сравнению с показателями оптической плотности, полученными при культи- вировании нативной культуры в течение 3-х суток. Скорость охлаждения культуры при заморажи- вании без криопротектора по-разному влияла на пролиферацию клеток. При охлаждении со скоро- стью 0,5°С/мин первые признаки роста спирулины отмечались на 9-е сутки, при скорости охлаждения 5°С/мин и при быстром охлаждении – на 7-е сутки. На 9-е сутки пролиферативная активность Spirulina platensis, криоконсервированной без криопротек- тора, была одинаково низкой во всех вариантах охлаждения: достоверных различий в оптической плотности на 9-е сутки культивирования не отме- чалось (таблица). При использовании Me2SO после заморажи- вания-отогрева сохранялась структура нитей спи- рулины, их поперечный диаметр изменялся в мень- шей степени по сравнению с клетками, заморожен- Морфология культуры Spirulina platensis: а – интактная культура; б – культура после замораживания прямым погружением в азот без присутствия криопротектора и отогрева; в – культура после замораживания прямым погружением в азот в присутствии 10% Ме2SO и ото- грева. Morphology of Spirulina platensis culture: a – intact cul- ture; b – culture after freezing by direct plunging in nitro- gen without cryoprotectant and warming; c – culture after freezing of direct plunging in nitrogen in presence of 10% Me2SO and warming. а a б b в c of biological objects ZM1.00.00.00 (Special Design and Technical Bureau with Experimental Unit of the IPC&C) with consequent plunging into liquid nitrogen and also direct one of the containers into liquid nitro- gen (cooling rate about 400°C/min). As a cryoprotectants dimethyl sulfoxide (Me2SO) under concentrations of 2, 5, 10, 20% and 15% glycerol solution were used. The samples were warmed on water-bath at 30°C and were inoculated in Zarrouck medium (0.5 ml culture suspension in 20 ml medium) for assessment of ability of Spirulina platensis culture proliferation which was visually appraise by fixing the time of green pigment PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 17, 2007, №2 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 17, 2007, №2 170 ными без криопротектора, окраска незначительно отличалась от контроля. При культивировании оптическая плотность достоверно увеличивалась в 2-3 раза по сравнению с культурой, заморожен- ной без криопротектора. Наиболее высокую скорость роста культуры Spirulina platensis после замораживания-отогрева с применением Me2SO наблюдали при исполь- зовании быстрого охлаждения. После криоконсервирования независимо от скорости охлаждения и концентрации Me2SO ингибировалась пролиферативная активность Spirulina platensis в течение 3-х суток культиви- рования по сравнению с контролем. При дальней- шем культивировании обнаружено достоверное отставание в накоплении биомассы образцов (в 1,5 раза), криоконсервированных под защитой 20% Me2SO по сравнению с клетками, криоконсерви- рованными под защитой 10% Me2SO. Примечания: 1 – статистически достоверные различия с данными по замораживанию- отогреву без криопротектора при данной скорости охлаждения, p<0,05; 2 – статис- тически достоверные различия с данными по замораживанию-отогреву в присутствии 10% Me2SO при данной скорости охлаждения, p<0,05. Note: 1 – statistically significant differences with the data about freeze-thawing without cryoprotectant at set cooling rate, p<0,05; 2 – statistically significant differences with the data about freeze-thawing at 10% Me2SO presence at the fixed cooling rate, p<0,05. ьтсорокС ,яинеджалхо ним/С° ,etargnilooC nim/С° яицартнецноK eM 2 %,OS eM 2 OS %,noitartnecnoc тус,яинаворивитьлукьтсоньлетижлодорП syad,gnirutluC 3 5 7 9 x,ьтсонтолпяаксечитпО ± xS tpO i snedlac ti x,y ± xS ьлортноK lortnoC 220,0±953,0 030,0±376,0 020,0±869,0 621,0±339,1 5,0 зеБ ароткеторпоирк tnatcetorpoyrcoN - - - 010,0±851,0 01 20,0±90,0 010,0±221,0 030,0±352,0 030,0±316,0 1 02 - 010,0±780,0 10,0±51,0 10,0±52,0 2,1 5 зеБ ароткеторпоирк tnatcetorpoyrcoN - - 20,0±80,0 010,0±231,0 01 - 020,0±361,0 020,0±772,0 1 050,0±785,0 1 02 - 10,0±90,0 010,0±351,0 2,1 030,0±323,0 2,1 004 зеБ ароткеторпоирк tnatcetorpoyrcoN - - 040,0±350,0 10,0±71,0 01 - 010,0±393,0 030,0±774,0 1 080,0±369,0 1 02 - 030,0±381,0 10,0±13,0 2,1 40,0±65,0 2,1 Оптическая плотность культуры Spirulina platensis после замораживания с различными скоростями охлаждения и концентрациями Me2SO, отогрева и культивирования Optical density of the Spirulina platensis culture after freezing with various cooling rates and Me2SO concentrations, thawing and culturing appearance, and with FEK-56 M photoelectric calo- rimeter (for optical density). Morphology of culture was studied under the microscope (LOMO MBI-15U42). Obtained data were statistically processed with the Student-Fisher’s method, statistically significant differences were at p<0.05. Results and discussion After freeze-thawing of Spirulina platensis culture in growth medium without cryoprotectant the dividing into fragments of different length and reduction of cross-sectional dimension of the majority of spirulina strands were found (Fig.1). As well the cells gained yellow-green coloring (brilliant-green before freezing) which testified to destruction of chlorophyll grains. Culture optical density after freeze-thawing with- out cryoproctectant for all programs after 9 days of culturing was significantly lower in comparison with those indices, obtained at culturing of native culture during 3 days. Culture cooling rate during freezing without cryoprotectant differently affected cell proliferation. At 0.5°C/min cooling rate the first growth signs of spirulina were noted at the 9th day, at 5°C/min cooling rate and at rapid cool- ing at the 7th day. At the 9th day the proliferation activity of Spirulina platensis cryopre- served without cryoprotectant was identically low at all cool- ing variants: significant diffe- rence in optical density at the 9th culturing day was not noted (Table). With the use of Me2SO after freeze-thawing the structure of spirulina strands preserved, their cross-sectional dimension changed in a less extent in com- parison with the cells frozen without cryoprotectant, the coloring was insignificantly differed from the control. At culturing an optical density was significantly increased in 2-3 times in comparison with the culture frozen without cryopro- tectant. The highest growth rate of Spirulina platensis culture after freeze-thawing with Me2SO was observed when using of rapid cooling. PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 17, 2007, №2 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 17, 2007, №2 171 При изучении влияния криоконсервирования на культуру Spirulina platensis на разных сроках ее развития не установлено достоверных различий в развитии после замораживания-отогрева как 3-су- точной, так и 7-суточной культуры одинаковой концентрации под защитой 10% Me2SO: при последующем культивировании замороженной- оттаянной 3-х и 7-суточной культуры на 3-и сутки оптическая плотность составляла 0,260 и 0,270 соответственно. С практической точки зрения при необходимости создания большого запаса образ- цов целесообразно криоконсервировать 7-суточ- ную культуру, так как по сравнению с 3-суточной, она дает 5-кратный прирост биомассы. Дальней- шее культивирование приводит к ослизнению культуры и сложностям в ее использовании. Через год хранения в жидком азоте культура Spirulina platensis, замороженная с Me2SO в кон- центрации 10%, была жизнеспособна. При посеве данной культуры после отогрева наблюдалась задержка роста на 3-4 дня по сравнению с образ- цами, отогретыми сразу после замораживания. Использование в качестве криопротектора гли- церина, широко применяемого в криобиологичес- кой практике [2], не дало положительных результа- тов при криоконсервировании спирулины, рост культуры после отогрева не наблюдался. Выводы Таким образом, высокая сохранность клеток культуры Spirulina platensis при криоконсерви- ровании обеспечивалась замораживанием с быстрым охлаждением (прямое погружение образ- цов в жидкий азот) под защитой криопротектора Me2SO в концентрации 10%. После года хранения при температуре –196°С культура Spirulina platensis, криоконсервированная по вышеуказан- ному режиму, оставалась жизнеспособной. Литература Горюнова С.В., Ржанова Г.Н., Орлеанская В.К. Сине-зеле- ные водоросли (биохимия, физиология, роль в практике).– М.: Наука, 1969.– 230 с. Криоконсервирование клеточных суспензий / Под общ. ред. А.А. Цуцаевой.– Киев: Наук. думка, 1983.- 240 с. Кузьмина Р.И., Терешкова Г.М., Нестеренко Т.В. Устойчи- вость сине-зеленых водорослей к действию низких температур и обезвоживанию // Тез. докл. междунар. симп. “Рост микроорганизмов на С1-соединениях”.– Пущино, 1977.– С. 131. Микаладзе Г.Т., Мески Р.Г., Завьялов Ю.Ф. и др. Исполь- зование биомассы спирулины в пищевых целях совместно с высшими растениями // Роль низших организмов в круговороте веществ в замкнутых экологических систе- мах.– Киев: Наук. думка, 1979.– С. 38-43. Пиневич В.В., Верзилин Н.Н., Михайлов А.А. Изучение Spirulina platensis – нового объекта для высокоинтен- сивного культивирования // Физиология растений.– 1970.– Т. 17, Вып. 5.– С. 1037-1046. 1. 2. 3. 4. 5. After cryopreservation independently on cooling rate and Me2SO concentration Spirulina platensis proliferation activity was inhibited during 3 days’ culturing in comparison with the control. During subsequent culturing there was found statistically significant delay in accumulation of biomass of the samples (in 1.5 time) cryopreserved under protection of 20% Me2SO if compared with the cells cryopre- served with 10% Me2SO protection. When investigating the cryopreservation effect on Spirulina platensis culture at different terms of its development there were no found statistically significant differences in development after freeze- thawing of both 3 days’ and 7 days’ cultures of similar concentrations under protection of 10% Me2SO: during subsequent culturing to the 3rd day an optical density made 0.260 and 0.270 correspondingly. From practical point of view, if necessary to create the big stock of samples it is expedient to cryopreserve the 7 days’ culture, since if compared with 3 days’ one it gives 5-fold increment of biomass. Further culturing leads to culture sliming and problems in its using. One storage year later the Spirulina platensis culture frozen with 10% Me2SO in liquid nitrogen, was viable. During inoculation of this culture after thawing there was observed growth delay by 3-4 days if compared with the samples warmed just after freezing. Glycerol use as a cryoprotectant, which is widely applied in cryobiological practice [2], did not provide positive results during cryopreservation of spirulina, culture growth after thawing was not observed. Conclusions Thus, high survival of Spirulina platensis culture cells during cryopreservation was provided by freezing with rapid cooling (direct plunging of samples into liquid nitrogen) under cover of Me2SO cryoprotectant in 10% concentration. One storage year later at –196°C Spirulina platensis culture cryopreserved according to above mentioned regimen remained alive. References Gorunova S.V., Rzhanova G.N., Orleanskaya V.K. Blue-green algae (biochemistry, physiology, role in practice). – Moscow: Nauka, 1969.– 230 p. Cryopreservation of cell suspensions / Ed. by A.A. Tsutsaye- va.– Kiev, Naukova dumka, 1983.– 240 p. Kuzmina R.I., Tereshkova G.M., Nesterenko T.V. Stability of blue-green algae to action of low temperature and dehydra- tation // Proc. of Reports of International symposium “Growth of microorganisms on C1-compounds”.– Puschino, 1977.– P. 131. Mikaladze G.T., Meski R.G., Zavyalov Yu.P. et al. Using biomass of spirulina in food together with highest plants // Role of lower organisms in cycling of closed ecologic systems.- Kiev: Naukova dumka, 1979.– P. 38-43. 1. 2. 3. 4. PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 17, 2007, №2 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 17, 2007, №2 172 Mitsuo T., Sado J.-I., Ogawa T., Terul G. Freezing and freeze- drying of Spirulina platensis // Cryobiology.– 1973.– Vol. 10, N5.– Р. 440-444. Morgan H.C., Moorhead K.J. Spirulina – nature’s superfood.– London: Nutrex, 1993. – 152 p. Поступила 21.07.2006 6. 7. Pinevich V.V., Verzilin N.N., Mikhaylov A.A. Study of Spirulina platensis – new object for high-intensity cultivation // Fiziologiya rasteniy.– 1970.– Vol. 17, Issue 5.– P. 1037-1046. Mitsuo T., Sado J.-I., Ogawa T., Terul G. Freezing and freeze- drying of Spirulina platensis // Cryobiology.– 1973.– Vol. 10, N5.– Р. 440-444. Morgan H.C., Moorhead K.J. Spirulina – nature’s superfood.– London: Nutrex, 1993. – 152 p. Accepted in 21.06.2006 5. 6. 7. PROBLEMS OF CRYOBIOLOGY Vol. 17, 2007, №2 ПРОБЛЕМЫ КРИОБИОЛОГИИ Т. 17, 2007, №2
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-138030
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
language Russian
last_indexed 2025-11-30T09:34:22Z
publishDate 2007
publisher Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
record_format dspace
spelling Цуцаева, А.А.
Балыбердипа, Л.М.
Ананьина, А.Е.
Гриша, И.Г.
2018-06-17T21:23:12Z
2018-06-17T21:23:12Z
2007
Криконсервирование культуры Spirulirina platensis / А.А. Цуцаева, Л.М. Балыбердипа, А.Е. Ананьина, И.Г. Гриша // Проблемы криобиологии. — 2007. — Т. 17, № 2. — С. 168-172. — Бібліогр.: 7 назв. — рос.
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/138030
582.26.043.086.13
Изучали влияние различных скоростей охлаждения на способность к пролиферации сине-зеленой водоросли Spirulina platensis. Полученные результаты показали, что оптимальным режимом криоконсервирования культуры Spirulina platensis является быстрое охлаждение прямым погружением в жидкий азот суспензии клеток под защитой криопротектора диметилсульфоксида в концентрации 10%.
Вивчали вплив різних швидкостей охолодження на здатність до проліферації синьо-зеленої водорості Spirulina platensis. Отримані результати показали, що оптимальним режимом кріоконсервування культури Spirulina platensis є швидке охолодження прямим зануренням у рідкий азот з суспензією клітин під захистом кріопротектора диметилсульфоксиду в концентрації 10%.
The impact of difference cooling rates on ability to proliferation of Spirulina platensis blue-green algae has been studied. Obtained results have shown that optimal condition of cryopreservation Spirulina platensis culture was rapid cooling by direct plunging into liquid nitrogen of metal container with cell suspension under the protection of cryoprotectant dimethyl sulfoxide in 10% concentration.
ru
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
Проблемы криобиологии и криомедицины
Криоконсервирование биообъектов
Криконсервирование культуры Spirulirina platensis
Cryopreservation of Spirulina platensis culture
Article
published earlier
spellingShingle Криконсервирование культуры Spirulirina platensis
Цуцаева, А.А.
Балыбердипа, Л.М.
Ананьина, А.Е.
Гриша, И.Г.
Криоконсервирование биообъектов
title Криконсервирование культуры Spirulirina platensis
title_alt Cryopreservation of Spirulina platensis culture
title_full Криконсервирование культуры Spirulirina platensis
title_fullStr Криконсервирование культуры Spirulirina platensis
title_full_unstemmed Криконсервирование культуры Spirulirina platensis
title_short Криконсервирование культуры Spirulirina platensis
title_sort криконсервирование культуры spirulirina platensis
topic Криоконсервирование биообъектов
topic_facet Криоконсервирование биообъектов
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/138030
work_keys_str_mv AT cucaevaaa krikonservirovaniekulʹturyspirulirinaplatensis
AT balyberdipalm krikonservirovaniekulʹturyspirulirinaplatensis
AT ananʹinaae krikonservirovaniekulʹturyspirulirinaplatensis
AT grišaig krikonservirovaniekulʹturyspirulirinaplatensis
AT cucaevaaa cryopreservationofspirulinaplatensisculture
AT balyberdipalm cryopreservationofspirulinaplatensisculture
AT ananʹinaae cryopreservationofspirulinaplatensisculture
AT grišaig cryopreservationofspirulinaplatensisculture