Дополнительное исследование бромциановых фрагментов каталазы гриба Penicillium vitale
Выяснено строение пяти бромциановых фрагментов каталазы гриба P. vltale, включающих 8, 61, 110, 27 и 9 остатков аминокислот.
Saved in:
| Date: | 1994 |
|---|---|
| Main Authors: | , , , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1994
|
| Series: | Биополимеры и клетка |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155064 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Дополнительное исследование бромциановых фрагментов каталазы гриба Penicillium vitale / Э.А. Козлов, Т.Л. Левитина, М.Т. Бобровская, Н.В. Роднин, О.С. Мирошниченко, Н.В. Латышко, Л.В. Гудковая // Биополимеры и клетка. — 1994. — Т. 10, № 2. — С. 45-48. — Бібліогр.: 6 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-155064 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1550642025-02-09T20:45:13Z Дополнительное исследование бромциановых фрагментов каталазы гриба Penicillium vitale Додаткове дослідження бромщанових фрагментов каталази гриба Penicillium vitale Additional investigation of Penicillium vitale catalase cyanogen bromide fragments Козлов, Э.А. Левитина, Т.Л. Бобровская, М.Т. Роднин, Н.В. Мирошниченко, О.С. Латышко, Н.В. Гудкова, Л.В. Выяснено строение пяти бромциановых фрагментов каталазы гриба P. vltale, включающих 8, 61, 110, 27 и 9 остатков аминокислот. З'ясовано побудову п'яти бромціанових фрагментів каталази гриба P. vitale, що включають 8, 61, 110, 27 i 9 залишків амінокислот. The structure of Penicillium vitale catalase cyanogen bromide fragments including 8, 61, 110, 27 and 9 amino acid residues was determined. 1994 Article Дополнительное исследование бромциановых фрагментов каталазы гриба Penicillium vitale / Э.А. Козлов, Т.Л. Левитина, М.Т. Бобровская, Н.В. Роднин, О.С. Мирошниченко, Н.В. Латышко, Л.В. Гудковая // Биополимеры и клетка. — 1994. — Т. 10, № 2. — С. 45-48. — Бібліогр.: 6 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0003A2 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155064 577.112.5 ru Биополимеры и клетка application/pdf Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| description |
Выяснено строение пяти бромциановых фрагментов каталазы гриба P. vltale, включающих 8, 61, 110, 27 и 9 остатков аминокислот. |
| format |
Article |
| author |
Козлов, Э.А. Левитина, Т.Л. Бобровская, М.Т. Роднин, Н.В. Мирошниченко, О.С. Латышко, Н.В. Гудкова, Л.В. |
| spellingShingle |
Козлов, Э.А. Левитина, Т.Л. Бобровская, М.Т. Роднин, Н.В. Мирошниченко, О.С. Латышко, Н.В. Гудкова, Л.В. Дополнительное исследование бромциановых фрагментов каталазы гриба Penicillium vitale Биополимеры и клетка |
| author_facet |
Козлов, Э.А. Левитина, Т.Л. Бобровская, М.Т. Роднин, Н.В. Мирошниченко, О.С. Латышко, Н.В. Гудкова, Л.В. |
| author_sort |
Козлов, Э.А. |
| title |
Дополнительное исследование бромциановых фрагментов каталазы гриба Penicillium vitale |
| title_short |
Дополнительное исследование бромциановых фрагментов каталазы гриба Penicillium vitale |
| title_full |
Дополнительное исследование бромциановых фрагментов каталазы гриба Penicillium vitale |
| title_fullStr |
Дополнительное исследование бромциановых фрагментов каталазы гриба Penicillium vitale |
| title_full_unstemmed |
Дополнительное исследование бромциановых фрагментов каталазы гриба Penicillium vitale |
| title_sort |
дополнительное исследование бромциановых фрагментов каталазы гриба penicillium vitale |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| publishDate |
1994 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155064 |
| citation_txt |
Дополнительное исследование бромциановых фрагментов каталазы гриба Penicillium vitale / Э.А. Козлов, Т.Л. Левитина, М.Т. Бобровская, Н.В. Роднин, О.С. Мирошниченко, Н.В. Латышко, Л.В. Гудковая // Биополимеры и клетка. — 1994. — Т. 10, № 2. — С. 45-48. — Бібліогр.: 6 назв. — рос. |
| series |
Биополимеры и клетка |
| work_keys_str_mv |
AT kozlovéa dopolnitelʹnoeissledovaniebromcianovyhfragmentovkatalazygribapenicilliumvitale AT levitinatl dopolnitelʹnoeissledovaniebromcianovyhfragmentovkatalazygribapenicilliumvitale AT bobrovskaâmt dopolnitelʹnoeissledovaniebromcianovyhfragmentovkatalazygribapenicilliumvitale AT rodninnv dopolnitelʹnoeissledovaniebromcianovyhfragmentovkatalazygribapenicilliumvitale AT mirošničenkoos dopolnitelʹnoeissledovaniebromcianovyhfragmentovkatalazygribapenicilliumvitale AT latyškonv dopolnitelʹnoeissledovaniebromcianovyhfragmentovkatalazygribapenicilliumvitale AT gudkovalv dopolnitelʹnoeissledovaniebromcianovyhfragmentovkatalazygribapenicilliumvitale AT kozlovéa dodatkovedoslídžennâbromŝanovihfragmentovkatalazigribapenicilliumvitale AT levitinatl dodatkovedoslídžennâbromŝanovihfragmentovkatalazigribapenicilliumvitale AT bobrovskaâmt dodatkovedoslídžennâbromŝanovihfragmentovkatalazigribapenicilliumvitale AT rodninnv dodatkovedoslídžennâbromŝanovihfragmentovkatalazigribapenicilliumvitale AT mirošničenkoos dodatkovedoslídžennâbromŝanovihfragmentovkatalazigribapenicilliumvitale AT latyškonv dodatkovedoslídžennâbromŝanovihfragmentovkatalazigribapenicilliumvitale AT gudkovalv dodatkovedoslídžennâbromŝanovihfragmentovkatalazigribapenicilliumvitale AT kozlovéa additionalinvestigationofpenicilliumvitalecatalasecyanogenbromidefragments AT levitinatl additionalinvestigationofpenicilliumvitalecatalasecyanogenbromidefragments AT bobrovskaâmt additionalinvestigationofpenicilliumvitalecatalasecyanogenbromidefragments AT rodninnv additionalinvestigationofpenicilliumvitalecatalasecyanogenbromidefragments AT mirošničenkoos additionalinvestigationofpenicilliumvitalecatalasecyanogenbromidefragments AT latyškonv additionalinvestigationofpenicilliumvitalecatalasecyanogenbromidefragments AT gudkovalv additionalinvestigationofpenicilliumvitalecatalasecyanogenbromidefragments |
| first_indexed |
2025-11-30T15:32:27Z |
| last_indexed |
2025-11-30T15:32:27Z |
| _version_ |
1850229919346327552 |
| fulltext |
УДК 577.112.5
Э. А. Козлов, Т. Л. Левитина, М. Т. Бобровская,
Н. В. Роднин, О. С. Мирошниченко, Н. В. Латышко, Л. В. Гудкова
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
БРОМЦИАНОВЫХ ФРАГМЕНТОВ КАТАЛАЗЫ ГРИБА
PENICILLIUM VITALE
Выяснено строение пяти бромциановых фрагментов каталазы гриба P. vltale, включа
ющих 8, 61, ПО, 27 и 9 остатков аминокислот.
Введение. Ранее [1] опубликованы результаты разделения смеси бром-
циановых фрагментов каталазы P. vitale и исследования аминокис
лотной последовательности одного из фрагментов. Мы продолжили
очистку и дальнейшее выяснение строения некоторых фрагментов.
В предыдущей работе [1] один из фрагментов изучали на смеси двух.
Цель настоящего исследования состояла в выяснении строения примес
ного фрагмента из этой смеси путем анализа пептидов, выделенных из
продукта расщепления смеси трипсином и химотрипсином.
Материалы и методы. Схема разделения и методы очистки самих
фрагментов, триптических и химотриптических пептидов описаны в об
общении [1]. Определение аминокислотного состава и аминокислотной
последовательности приведено в этом же номере журнала [2].
Результаты и обсуждение. Как отмечалось выше, было продолжено
исследование бромциановых фрагментов, основные этапы разделения
которых описаны ранее [1]. Фрагменты из фракций I-II-3-3 (BrCNl),
Ш-3-4 (BrCN8) и IV-3-2 (BrCN9) [1] подвергали дополнительной очи
стке высоковольтным электрофорезом и хроматографией на бумаге,
l i l n - A s p - G l y - V a l - C G l x , , V a l , l i e - , L e u ) - A r g - P h e - G l y - P h e
TmI4 1
I
I :
20
Asp-Leu-Pro-Leu-Asp-Thr-Lys-Gln-Val-Leu-Asn-Ser-Ala-Met
BrCN?Tj: 1
T31 _ _ 1 BrCN7T2 1
Sp3i
Рис. 1. Схема реконструкции фрагмента BrCN8
после чего был уточнен их аминокислотный состав (таблица). Строение
фрагментов BrCNl и BrCN9 определяли прямым секвенированием, про
ведя по семь стадий деградации. Их строение: Asp-Val-Ile-Ile-Glu-Thr-
Leu-Met (BrCNl) и Leu-Phe-Asp-Glu-Val-Ile-Gly-Ala-Met (BrCN9).
В работе [1] получены два триптических пептида из фрагмента
BrCN8. Реконструировать фрагмент можно из этих двух пептидов и пеп
тида Sp 13, строение которого установлено нами и приведено в парал
лельном сообщении [2]. Схема реконструкции показана на рис. 1.
© Э. А. Козлов, Т. Л. Левитина, М. Т. Бобровская, Н. В. Роднин, О. С. Мирошниченко,
Н, В., Латышко, Л. В. Гудкова, 1994
ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1994. Т. 10. № 2 45
В описание строения фрагмента BrCN6, приведенное в сообщении
[1], в ходе дальнейших исследований внесены дополнения, некоторые
изменения, а также исправлены допущенные опечатки. Так, в пептиде
BrCNGChl раскрыты скобки прямым секвенированием, а в пептидах
BrCN6T5 и Т6 идентифицированы остатки аспарагиновых, глутаминовых
кислот и их амидов. После внесенных поправок строение BrCN6 запи
сывается следующим образом: Phe-Gln-Pro-Gly-His-Ile-Val-Arg-Gly-Val-
Asp-Phe-Thr-Glu-Asp-Pro-Leu-Leu-Gln-Gly-Arg-Leu-Phe-Ser-Tyr-Leu-Asp-Thr-
Gin-Leu-Asn-Arg-His-Gly-Pro-Asn-Ile-Gln-Gln-Leu-Gly-Phe-Asn-Arg-Pro-Рго-
Arg-Ala-Pro-Ile-His-Asn-Asp-Asn-Arg-Asp-Gly-Ala-Gly-Glu-Met.
В ходе дальнейших исследований были дополнительно очищены
пептиды Т7—Т10 и Chi из фрагмента BrCN7 [1], уточнены их амино
кислотные составы и проведено несколько стадий деградации по методу
Эдмана.
Строение пептидов BrCNT7 и Т9 оказалось идентичным тако
вому пептида BrCN6T5 [1]. Строение пептида BrCN7T8 — Tyr-Asn-(Thr,
Ser, Gin, Pro, Cly2)-Lys. Аминокислотный состав уже опубликованного
пептида BrCN7T10 [1] необходимо удвоить. На этом пептиде проведено
четыре стадии деградации. Его строение: Leu-Gln-Val-Val-(Asx, Ser3,
Glx2, Gly, Ala2, He, Leu, Phe)-Lys. Ранее такого пептида из триптических
гидролизатов немодифицированной [3] и малеил-каталазы [4] мы не
получали. Однако первые два остатка совпадают с двумя остатками
N-конца пептида Тт56 [4]. Очевидно, что BrCN7T10 занимает N-конце-
вое положение в Тт56. Следовательно, пептид Тт5б входит в состав
фрагмента BrCN7. Анализируя аминокислотный состав всех известных
Аминокислотный соста& бромциановых фрагментов каталазы P. vitale
Аминокислота BrCN-2 BrCN-6 BrCN-7 BrCN-8 BrCN-9
Lys
His
Arg
Asp
Thr
Ser
Glu
Pro
Gly
Ala
Val
He
Leu
Tyr
Phe
HSer
Lact.
Всего
—
—
—
1,0(1)
0,7(1)
—
1,1(1)
—
—
—
0,6(1)
1,3(2)
1,0(1)
—
—
0,7(1)
—
8
—
3,0(3)
6,0(6)
10,0(10)
2,0(2)
0,9(1)
7,3(7)
5,5(6)
7,2(7)
2,2(2)
1,7(2)
2,6(3)
6,2(6)
0,7(1)
3,5(4)
0,5
0,5
61
7,6(8)
2,0(2)
1,0(1)
12,1(12)
4,0(4)
9,4(10)
11,1(11)
5,6(6)
9,8(10)
16,6(17)
9,3(10)
3,6(4)
5,0(5)
2,4(3)
5,6(6)
0,9(1)
—
110
1,0(1)
—
1,0(1)
3,8(4)
0,8(1)
0,8(1)
5,0(5)
1,0(1)
2,2(2)
1,1(1)
1,9(2)
1,0(1)
4,0(4)
—
1,8(2)
—
1,0(1)
27
—
—
0,9(1«
—
—
1,0(1}
—
0,7(1»
0,8(1)
0,5(1)
0,5(1)
0,9(11
—
0,8(1)
0,4
0,6
9
триптических пептидов немодифицированной и малеил-каталазы гриба
P. vitale [3, 4] и сопоставляя их с аминокислотным составом Тт56„
можно предположить, что в Тт56 С-концевое положение занимает пеп
тид Т32 [3], содержащий остаток метионина. По-видимому, Тт56 зани
мает С-концевое положение в пептиде Тт2 [4].
На пептиде BrCN7Chl проведено шесть стадий деградации по ме
тоду Эдмана. Его строение: Ser-Val-Asn-Glu-Gly-Gln-Ala-Asn.
Кроме полученных ранее [1] триптических пептидов, мы выделили
из триптической смеси BrCN6,7 еще один существенный для реконструк
ции фрагмента BrCN7 триптический пептид BrCN7Tll со строением val-
Ala-Lys. Как известно, этот пептид занимает N-концевое положение в
пептиде Тт2 [4], из чего следует, что почти весь пептид Тт2 входит
во фрагмент BrCN7 и занимает в нем С-концевое положение. При этом
46 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ II КЛЕТКА. 1994. Т. 10. .\* 2
N-конец фрагмента BrCN7 блокирован, так как автоматическим секве-
нированием смеси BrCN6,7 пройдена последовательность только BrCN6
[1]. Таким образом, N-концевое положение во фрагменте BrCN7 долж
но принадлежать остатку пептида, имеющего последовательность Met-
Gln. Среди триптических пептидов из малеил-каталазы таких пептидов
имеется два — Тт14 и Тт52 [4]. Но С-концевая часть Тт14 занимает
10 20
01п-Уа1-А8п-А1в-Аяп-С-ег-Уа1-Азп-С1и-^1у-01п-А1а-Авп-Бег-Аяр-^1и-(ТЬг,й1у,А1аг,Уа1 ,1/еи,
— — Tm52
Рис. 2. Схема реконструкции фрагментов BrCN7
N-концевое положение во фрагменте BrCN8 (рис. 1). Из этого вытека
ет, что весь пептид Тт52 без остатка метионина находится в N-конце-
вом положении во фрагменте BrCN7. Сумма аминокислотных составов
пептидов Тт2 и Тт52, входящих во фрагмент BrCN7, соответствует при
близительно ранее опубликованному аминокислотному составу фрагмен
та BrCN7 [1]. Зная соотношение фрагментов BrCN6 и BrCN7 в смеси
[1], точное строение BrCN6 (см. выше) и аминокислотный состав смеси
BrCN6,7, нетрудно рассчитать точные аминокислотные составы обоих
фрагментов, которые и приведены в таблице.
Все изложенные выше соображения можно выразить в виде схемы
реконструкции фрагмента BrCN7, представленной на рис. 2. Для ре
конструкции N-концевой части фрагмента BrCN7 привлечены также три
Sp-пептида, строение которых описано в параллельном сообщении в
этом же номере журнала [2].
Таким образом, из 11 предполагаемых из содержания метионина в
каталазе P. v it ale [5] бромциановых фрагментов нами выяснено строе
ние пяти, включающих в сумме 215 остатков аминокислот, что составля
ет 32 % длины полипептидной цепи по данным рентгеноструктурного
анализа [6].
Е. А. Козлов, Т. Л. Левшна, М. Т. Бобровська,
М. В. Родшн, О. С. Мирошниченко, Н. В. Латишко, Л. В. Гудкова
ДОДАТКОВЕ Д0СЛ1ДЖЕННЯ БРОМЩАНОВИХ ФРАГМЕНТОВ
КАТАЛАЗИ ГРИБА PENICILLIUM VITALE
Р е з ю м е
З'ясовано побудову п'яти бромщанових фрагменте каталази гриба P. vitale, що вклю-
чають 8, 61, 110, 27 i 9 залишюв амшокислот.
ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1994. Т. 10. № 2 47
E. A. Kozlov, Т. L. Levitina, М. Т. Bobrovskaya,
N. V. Rodnin, О. S. Miroshnichenko, N. V. Latischko, L. V. Gudkova
ADDITIONAL INVESTIGATION OF PENICILLIUM VITALE
CATALASE CYANOGEN BROMIDE FRAGMENTS
S u m m a r y
The structure of Penicillium vitale catalase cyanogen bromide fragments including 8, 61,
110, 27 and 9 amino acid residues was determined.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Левитина Т. Л., Гусак Н. М., Роднин Н. В. и др. Бромциановые фрагменты ката-
лазы гриба Penicillium vitale // Биополимеры и клетка.— 1989.— 5, № 5.— С. 55—63.
2. Бобровская М. Т., Латышко Н. Б., Левитина Т. Л. и др. Строение некоторых пеп
тидов, полученных расщеплением каталазы гриба Penicillium vitale стафилококко
вой протеиназой//Там же.— 1994.— 10, № 2.— С. 49—51.
3. Козлов Э. А., Гудкова Л. В., Левитина Т. Л. и др. Дополнительное исследование
триптических пептидов каталазы гриба Penicillium vitale //Там же.— 1993.— 9,
№ 1.—С. 22—25.
4. Левитина Т. Л., Бобровская М. Т., Гусак Н. М. и др. Триптические пептиды малеил-
каталазы гриба Penicillium vitale. 2. Строение пептидов//Там же.— № 3.— С. 42—45.
5. Гудкова Л. В., Кириленко М. Т., Левитина Т. Л., Козлов Э. А. Исследование субъ
единичной структуры каталазы гриба Penicillium vitale // Укр. биохим. журн.—
1985.— 57, № 4.— С. 29—33.
6. Vainshtein В. /(., Melik-Adamyan W. R., Barynin V. V. et al. Three-dimensional struc
ture of catalase from Penicillium vitale of 2 A resolution//J. Mol. Biol.— 1986.— 188,
N 1.— P. 49—61.
Ин-т молекуляр. биологии и генетики АН Украины, Киев Получено 20.10.93
Ин-т биохимии им. А. В. Палладина АН Украины, Киев
48 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1994. Т. 10. № 2
|