Определение репликативной активности рекомбинантных плазмид, содержащих эукариотический регуляторный район вируса SV40, в культурах клеток млекопитающих

Определение репликативной активности рекомбинантных плазмид, содержащих эукариотический регуляторный район вируса SV40, в культурах клеток млекопитающих

Предложен метод выявления функциональной активности эукариотического регуляторного района вируса SV40 в составе рекомбинантных плазмид, который может быть применен при тестировании плазмид, используемых в генной терапии. Показано, что исследованные рекомбинантные плазмиды реплицируются в культурах к...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:
Bibliographische Detailangaben
Datum:1991
Hauptverfasser: Ландау, С.М., Тихонов, А.В., Варзанова, И.С., Жарова, Л.Г.
Format: Artikel
Sprache:Russian
Veröffentlicht: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1991
Schriftenreihe:Биополимеры и клетка
Schlagworte:
Геном и его регуляция
Online Zugang:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155832
Tags: Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:Определение репликативной активности рекомбинантных плазмид, содержащих эукариотический регуляторный район вируса SV40, в культурах клеток млекопитающих / С.М. Ландау, А.В. Тихонов, И.С. Варзанова, Л.Г. Жарова // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 5. — С. 103-107. — Бібліогр.: 7 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-155832
record_format dspace
spelling nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1558322025-02-23T18:53:21Z Определение репликативной активности рекомбинантных плазмид, содержащих эукариотический регуляторный район вируса SV40, в культурах клеток млекопитающих Визначення реплікативної активності рекомбінантних плазмід, що містять евкаріотну регуляторну ділянку вірусу SV-40, у культурах клітин ссавців Determination of replicative activity of recombinant plasmids carrying SV40 eukaryotic regulatory region in mammalian cell cultures Ландау, С.М. Тихонов, А.В. Варзанова, И.С. Жарова, Л.Г. Геном и его регуляция Предложен метод выявления функциональной активности эукариотического регуляторного района вируса SV40 в составе рекомбинантных плазмид, который может быть применен при тестировании плазмид, используемых в генной терапии. Показано, что исследованные рекомбинантные плазмиды реплицируются в культурах клеток CV1 и, следовательно, содержат функционально активный эукариотический регуляторный район вируса SV40. Запропоновано метод виявлення функціональної активності еукаріотичного регуляторного району віруса SV40 у складі рекомбінантних плазмід, який може бути застосований при тестуванні плазмід, що використовуються в генній терапії. Показано, що досліджені рекомбінантні плазміди реплікуються в культурах клітин CV1 внаслідок вмісту функціонально активного еукаріотичного регуляторного району віруса SV40. The recombinant plasmids replication in mammalian cell cultures has been employed as a method for estimating the functional activity of SV40 eukaryotic regulatory region. It was shown that recombinant plasmids examined replicate in mammalian cell cultures and therefore possess functional active SV40 regulatory region. This method can be used for the purposes of gene therapy. 1991 Article Определение репликативной активности рекомбинантных плазмид, содержащих эукариотический регуляторный район вируса SV40, в культурах клеток млекопитающих / С.М. Ландау, А.В. Тихонов, И.С. Варзанова, Л.Г. Жарова // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 5. — С. 103-107. — Бібліогр.: 7 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0002FA https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155832 575.155:575.224.46 ru Биополимеры и клетка application/pdf Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language Russian
topic Геном и его регуляция
Геном и его регуляция
spellingShingle Геном и его регуляция
Геном и его регуляция
Ландау, С.М.
Тихонов, А.В.
Варзанова, И.С.
Жарова, Л.Г.
Определение репликативной активности рекомбинантных плазмид, содержащих эукариотический регуляторный район вируса SV40, в культурах клеток млекопитающих
Биополимеры и клетка
description Предложен метод выявления функциональной активности эукариотического регуляторного района вируса SV40 в составе рекомбинантных плазмид, который может быть применен при тестировании плазмид, используемых в генной терапии. Показано, что исследованные рекомбинантные плазмиды реплицируются в культурах клеток CV1 и, следовательно, содержат функционально активный эукариотический регуляторный район вируса SV40.
format Article
author Ландау, С.М.
Тихонов, А.В.
Варзанова, И.С.
Жарова, Л.Г.
author_facet Ландау, С.М.
Тихонов, А.В.
Варзанова, И.С.
Жарова, Л.Г.
author_sort Ландау, С.М.
title Определение репликативной активности рекомбинантных плазмид, содержащих эукариотический регуляторный район вируса SV40, в культурах клеток млекопитающих
title_short Определение репликативной активности рекомбинантных плазмид, содержащих эукариотический регуляторный район вируса SV40, в культурах клеток млекопитающих
title_full Определение репликативной активности рекомбинантных плазмид, содержащих эукариотический регуляторный район вируса SV40, в культурах клеток млекопитающих
title_fullStr Определение репликативной активности рекомбинантных плазмид, содержащих эукариотический регуляторный район вируса SV40, в культурах клеток млекопитающих
title_full_unstemmed Определение репликативной активности рекомбинантных плазмид, содержащих эукариотический регуляторный район вируса SV40, в культурах клеток млекопитающих
title_sort определение репликативной активности рекомбинантных плазмид, содержащих эукариотический регуляторный район вируса sv40, в культурах клеток млекопитающих
publisher Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate 1991
topic_facet Геном и его регуляция
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155832
citation_txt Определение репликативной активности рекомбинантных плазмид, содержащих эукариотический регуляторный район вируса SV40, в культурах клеток млекопитающих / С.М. Ландау, А.В. Тихонов, И.С. Варзанова, Л.Г. Жарова // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 5. — С. 103-107. — Бібліогр.: 7 назв. — рос.
series Биополимеры и клетка
work_keys_str_mv AT landausm opredeleniereplikativnojaktivnostirekombinantnyhplazmidsoderžaŝihéukariotičeskijregulâtornyjrajonvirusasv40vkulʹturahkletokmlekopitaûŝih
AT tihonovav opredeleniereplikativnojaktivnostirekombinantnyhplazmidsoderžaŝihéukariotičeskijregulâtornyjrajonvirusasv40vkulʹturahkletokmlekopitaûŝih
AT varzanovais opredeleniereplikativnojaktivnostirekombinantnyhplazmidsoderžaŝihéukariotičeskijregulâtornyjrajonvirusasv40vkulʹturahkletokmlekopitaûŝih
AT žarovalg opredeleniereplikativnojaktivnostirekombinantnyhplazmidsoderžaŝihéukariotičeskijregulâtornyjrajonvirusasv40vkulʹturahkletokmlekopitaûŝih
AT landausm viznačennâreplíkativnoíaktivnostírekombínantnihplazmídŝomístâtʹevkaríotnuregulâtornudílânkuvírususv40ukulʹturahklítinssavcív
AT tihonovav viznačennâreplíkativnoíaktivnostírekombínantnihplazmídŝomístâtʹevkaríotnuregulâtornudílânkuvírususv40ukulʹturahklítinssavcív
AT varzanovais viznačennâreplíkativnoíaktivnostírekombínantnihplazmídŝomístâtʹevkaríotnuregulâtornudílânkuvírususv40ukulʹturahklítinssavcív
AT žarovalg viznačennâreplíkativnoíaktivnostírekombínantnihplazmídŝomístâtʹevkaríotnuregulâtornudílânkuvírususv40ukulʹturahklítinssavcív
AT landausm determinationofreplicativeactivityofrecombinantplasmidscarryingsv40eukaryoticregulatoryregioninmammaliancellcultures
AT tihonovav determinationofreplicativeactivityofrecombinantplasmidscarryingsv40eukaryoticregulatoryregioninmammaliancellcultures
AT varzanovais determinationofreplicativeactivityofrecombinantplasmidscarryingsv40eukaryoticregulatoryregioninmammaliancellcultures
AT žarovalg determinationofreplicativeactivityofrecombinantplasmidscarryingsv40eukaryoticregulatoryregioninmammaliancellcultures
first_indexed 2025-11-24T12:56:05Z
last_indexed 2025-11-24T12:56:05Z
_version_ 1849676493440942080
fulltext 7. Химия и биохимия нуклеиновых кислот.— Л. !Медицина, 1968.— 430 с. 8. Белякова Н. В., Нарыжный С. HКрутяков В. М. Механизм активирующего дей- ствия ATP на репаративный синтез ДНК в хроматине // Молекуляр. биология.— 1980.— И, № 3,—С. 586—594. 9. Нарыжный С. H., Крутяков В. Ai Неспецифическая кислая нуклеозидтрифосфата- за цитозоля и хроматина печени крысы: частичная очистка и основные свойства// Биохимия.— 1982,—47, № 4.—С. 569—574. 10. Крутяков В. M., Кравецкая Т. П. Эндогенный синтез ДНК в выделенном хрома- тине//Молекуляр. биология.— 1978.— 12, JMb 3.— С. 654—662. 11 Zannis-Hadjopoclos M., Chepelinsky А. В., Martin R. G. Mapping of the 3'-end po- sitions of SV nascent strands / /J. Мої. iBol.— 1983.— 165, N 4,—P. 599—607. 12. Yoshida S., Tamiya-Koizumi K., Kojitna К. interaction of DNA polymerases with phospholipids//Biochim. et biophys. acta.— 1989.— 1007, N 1,—P. 61—66. Ленинград, ин-т ядер, физики Получено 11.02.91 им. Б. П. Константинова АН СССР У Д К 575.155:575.224.46 С. М. Ландау, А. В. Тихонов, И. С. Варзанова, Л. Г. Жарова ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕПЛИКАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ РЕКОМБИНАНТНЫХ ПЛАЗМИД, СОДЕРЖАЩИХ ЭУКАРИОТИЧЕСКИЙ РЕГУЛЯТОРНЫЙ РАЙОН ВИРУСА SV40, В КУЛЬТУРАХ КЛЕТОК МЛЕКОПИТАЮЩИХ Предложен метод выявления функциональной активности эукариотического регуля- торного района вируса SV40 в составе рекомбинантных плазмид, который может быть применен при тестировании плазмид, используемых в генной терапии. Показано, что исследованные рекомбинантные плазмиды реплицируются в культурах клеток CVl и, следовательно, содержат функционально активный эукариотический регуляторный район вируса SV40. Введение. Одной из основных задач генной терапии является констру- ирование векторов и изучение их биологической активности (репли- кации и экспрессии) в культурах клеток млекопитающих до их исполь- зования в модельных опытах на животных. В связи с этим представля- ет интерес исследование репликативной активности рекомбинантных плазмид, содержащих эукариотический регуляторный район, в част- ности, регуляторный район вакуолизирующего вируса SV40. Анализ репликации таких рекомбинантных плазмид дает возможность сделать заключение о функциональной активности регуляторного района этого эукариотического вектора. Кроме того, известно, что реплицирующиеся Д Н К являются преимущественной матрицей для транскрипции. Таким образом, оптимизируя условия репликации плазмид, содержащих орид- жип SV40, можно, по-видимому, оптимизировать и экспрессию генов, находящихся под промотором SV40. Известно, что рекомбинантные плазмиды, содержащие в качестве ориджина репликации регуляторный район SV40, не могут самостоя- тельно реплицироваться в пермиссивиых для SV40 культурах обезьянь- их клеток ввиду отсутствия Т-антигена (за исключением COS клеток, в которых Т-антиген синтезируется). В то же время даже наличие ге- на Л-белка (Т-антигена SV40) в цис-положении в составе рекомби- нантных плазмид также не приводит к их репликации из-за наличия «ядовитых последовательностей» [1]. Ранее нами было показано, что рекомбинантные плазмиды, в сос- тав которых входили один и два полных генома вируса SV40, репли- цируются в культурах пермиссивных клеток CVl в присутствии вируса © С. М. Л А Н Д А У , А. В. Т И Х О Н О В , И. С. В А Р З А Н О В А , Л . Г. Ж А Р О В А , 1991 I S S N 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И К Л Е Т К А . 1991. Т. 7. № 5 103 SV40, несмотря на наличие «ядовитых последовательностей» [2, 8]. Из результатов этих опытов было видно также, что в отсутствие вируса плазмида pSV9 не реплицируется. Плазмида pBR322 (контрольная) не реплицировалась ни при каких условиях [ 3]. В задачу настоящего исследования входила индукция репликации плазмид, содержаїцих из всего генома SV40 только регуляторный район этого вируса, и выявление ее двумя методами: дот-гибридизаци- ей и трансформацией компетентных клеток Escherichia coli. В работе анализировали плазмиды: pHG, содержащую ген гірока- риотической дигидрофолатредуктазы под ранним промотором SV40 [4], р/(С7?-векторы для клонирования генов по BamH 1-сайту под ранним промотором SV40 [4], pGA293, содержащую ген прокариотической β-галактозидазы под ранним промотором SV40 [5]. Все исследуемые нами рекомбинантпые плазмиды содержали «ядовитые последователь- ности» и не содержали гена Т-антигена, необхо- димого для репликации этих плазмид. Д л я создания условий, в которых может происходить репликация этих рекомгоинаитных плазмид в культурах клеток млекопитающих, мы вводили плазмиды одновременно с помощ- ником— вирусом SV40 [2, 3, 6]. Материалы и методы. Трансформацию про- водили в культурах клеток CVl во флаконах объемом 50 мл после на- растания монослоя, состоящего примерно из IO6 клеток. Плазмидную Д Н К (1 мкг) в составе кальциевого преципитата вводили в культиви- руемые клетки CVL Непосредственно· перед трансформацией рекомби- нантной Д Н К культуры клеток инфицировали вирусом SV40. В ходе исследований использовали вирус SV40 с титром IO6 В О Е / м л (по 700 мкл па 50 мл флакон) [7]. Плазмидную Д Н К выделяли из куль- тур клеток, лизированных по методу Хирта, сразу после трансфекции (0-точка) для выявления ее связывания с культурой клеток и через сутки после трансфекции для выявления ее репликации в культурах клеток. Количество плазмидной Д Н К , выделенной из культур клеток мле- копитающих, определяли по трансформирующей !активности на компе- тентных клетках Е. coli (рис. 1: влияние вируса SV40 на репликацию плазмиды pHG, содержащей регуляторный район SV40: 1 — количест- во колоний Е. coliy выросших на среде с Amp после трансформации 0,3 мкг плазмиды pHG\ 2 — то же после трансформаций компетентных клеток плазмидной Д Н К , выделенной из культур клеток на нулевой точке инфекции; 3 — то же через сутки после совместного введения с вирусом SV40; 4 — то же через сутки после введения) и авторадиогра- фическим методом, учитывая соответствующие контроли (рис. 2: ре- пликация рекомбинантных плазмид, содержащих регуляторный район,, в культурах пермиссивных клеток CVl в присутствии вируса SV40 (по- следовательность пятен на автографе и пиков соответствующих авто- радиограмм справа налево: 1 — 0,1 мкг pBR322\ 2 — Д Н К из необра- ботанных клеток; 3 — нулевая точка инфекции; 4 — первые сутки пос- ле совместной с вирусом SV40 трансфекции с плазмидой): а — репли- кация плазмиды pHG в присутствии вируса SV40; б — то же плазми- ды pKCR; в — то же плазмиды pGA293\ г — репликация плазмиды pHG в отсутствие вируса SV40). Методика проведения исследовании с использованием авторадио- графического метода описана ранее [2, 3]. В качестве меченого зонда использовали 3 2 P -pBR322 (IO8 имп/мкг) . Данные радиоавтографа изучали на денситометре «LKB Ultro- scan-XL», по показателям которого площади пиков на графиках соот- ветствуют плотностям пятен на радиоавтографе. 1 04 I S S N 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И К Л IiTKA. 1991. Т. 7. № Ss Предварительно были изучены данные по титрованию плазмиды pBR322 для определения зависимости между количеством наносимой на нитроцеллюлозный фильтр плазмидной Д Н К и площадью получен- ного на денситометре пика. На всех графиках по оси абсцисс отложе- на длина (мм), а по оси ординат — интенсивность поглощения. Расче- ты количества рекомбинантной плазмидной Д Н К , соответствующие оп- ределенному пику, проводили исходя из средней арифметической пло- щади пика плазмиды pBR322, соответствующего 0,1 мкг Д Н К . Пятна на автографах и пики денситограмм на рисунке в порядке справа на- лево соответствуют 0,1 мкг Д Н К pBR322 (контроль), затем контроль клеток CVly затем нулевая точка трансфекции и первые сутки после трансфекции. Результаты и обсуждение. Прежде всего мы исследовали уровень связывания плазмидной Д Н К с культурой клеток. При учете резуль- татов трансформации на одних и тех же компетентных бактериальных клетках оказалось, что связывание плазмидной Д Н К с клетками в культуре ткани колеблется в пределах 10—70 % от всего количества препарата, добавленного к клеткам. Например, в одном из пяти опытов были получены следующие ре- зультаты (см. рис. 1): 1) трансформирующая активность плазмидной Д Н К в бактериальных компетентных клетках составляла 3,7· IO4 ко- лоний на 1 мкг; 2) трансформирующая активность всего препарата связавшейся с клетками плазмидной Д Н К , выделенной сразу после тр:ансфекции, т. е. на нулевой точке, составляла 2-Ю4 . Таким образом, судя по результатам трансформации, из культур клеток сразу после трансфекции удалось выделить 0,5 мкг плазмиды, а так как к клеткам был добавлен 1 мкг плазмиды, следовательно, с I S S N 0233-7G57. Б И О П О Л И М Е Р Ы И К Л Е Т К А . 1991. Т. 7. № 5 1 0 5 ' культурой клеток связалось 50 % препарата. По-видимому, величина колебаний 10—70 % связана не столько с соотношением количества связавшейся и не связавшейся с клетками плазмидной Д Н К в различ- ных опытах, сколько с вариабельностью результатов самой реакции трансформации в компетентных клетках Е. coli, хотя все варианты опытов осуществлены на одних и тех же компетентных клетках. Более четкие результаты получены при использовании метода дот- гибридизации. Здесь результаты опытов по связыванию плазмид с куль- турой клеток млекопитающих были более стабильны и составляли в среднем из семи опытов примерно 2 0 % (рис. 2, α — г, пик 3, нулевая точка инфекции), величина колебаний была 13—30 %. На рис. 2 чет- ко видно также отсутствие пятна на автографе и соответственно пика на денситограмме там, где была нанесена Д Н К из необработанных клеток CVl, т. е. фон практически полностью отсутствует (рис. 2, α — г, точка 2). Исследование индукции репликации рекомбинантных плазмид в культурах клеток млекопитающих методом трансформации компетент- ных клеток Е. ccli показало, что при одновременном введении вируса SV40 и плазмидной Д Н К через сутки можно выявить от 0,02 до 0,1 мкг препарата. В то же время количество плазмиды, введенной без вируса SV40, через сутки 'составляло всего несколько нанограммов, либо плаз- мида вообще отсутствовала (см. рис. 1). Результаты анализа индукции репликации рекомбинантных плаз- мид, содержащих регуляторный район вируса SV40, в присутствии это- го вируса с помощью авторадиографического метода показаны на рис. 2. В случае репликации (см. рис. 2, α — в) видны два пика реком- бинантной плазмиды: первый (пик 5) —соответствует Д Н К плазмиды, связавшейся с культурой клеток млекопитающих (0-точка трансфек- ции), второй (пик 4)—соответствует Д Н К рекомбинантной плазми- ды, реплицирующейся в присутствии вируса SV40, через сутки после трансфекции. Если же в культуру клеток CVl не внесен вирус SV40, репликация отсутствует (рис. 2, г), отсутствует пятно на автографе (пятно 4) и соответствующий пик на денситограмме (пик 4). Из рис. 2 (а — в) видно, что все три исследуемыь нами плазмиды pHG, pKCR, pGA293 реплицировались в присутствии вируса SV40 (пятно 4, пик 4). Результаты, полученные при исследовании репликации плазмиды pHG в присутствии вируса SV40, свидетельствуют о наличии достаточ- но высокого ее уровня в первые сутки после трансфекции. Понятно, что репликация плазмид может происходить только в инфицированных ви- русом клетках CVL Известно, что количество инфицированных виру- сом SV40 клеток составляет примерно 6 % от общего количества кле- ток [7], а так как во флаконах объемом 50 мл в среднем 1-Ю 6 клеток, то количество инфицированных клеток — 6-Ю4 . 1 мкг плазмиды pHG содержит 1,5· IO11 копий Д Н К (исходя из того, что ее размер 5,5 тыс. п. о.). Соответствующие вычисления с уче- том размера пика реплицирующейся плазмиды pHG показывают, что ее количество составляет 0,25 мкг, а количество копий— IO6 на инфи- цированную клетку. Аналогичные расчеты выполнены с плазмидами pKCR и pGA293, соответствующие размеры их 0,5 и 14 тыс. п. о. Количество копий реп- лицирующихся плазмид соответственно IO6 и IO5 на инфицированную клетку, соответствующие пики реплицирующейся Д Н К составляют 0,45 и 0,12 мкг. Таким образом, при использовании двух методов (трансформации компетентных клеток Е. coli и дот-гибридизации) показано, что иссле- дуемые нами плазмиды pHG, pKCR, pGA293 реплицируются в культуре клеток CVl в присутствии вируса SV40. Эти данные свидетельствуют о том, что трансактивированный вирусом SV40 Т-антиген связывается с регуляторным эукариотическим районом этих плазмид и индуцирует их репликацию практически до уровня репликации вирусной Д Н К [3]. В данной работе предложен метод выявления функциональной ак- 106 I S S N 0233-7G57. Б И О П О Л И М Е Р Ы И К Л Е Т К А . 1991. Т. 7. № 5 105' тивности эукариотического регуляторного района вируса SV40 в составе рекомбинантных плазмид, который может быть применен при тестиро- вании плазмид, используемых в генной терапии. Показано, что иссле- дуемые нами рекомбинантные плазмиды pHG, pKCR, pGA293 репли- цируются в культурах клеток CVl и, следовательно, содержат функци- онально активный эукариотический регуляторный район вируса SV40. Р е з ю м е Запропоновано метод виявлення функціональної активності еукаріотичного регуля- торного району віруса SV40 у складі рекомбінантних плазмід, який може бути засто- сований при тестуванні плазмід, що використовуються в генній терапії. Показано, що досліджені рекомбінантні плазміди реплікуються в культурах клітин CVl внаслідок вмісту функціонально активного еукаріотичного регуляторного району віруса SV40. S u m m a r y The recombinant plasmids replication in mammalian cell cultures has been employed as a method for estimating the functional activity of SV40 eukaryotic regulatory region. It was shown that recombinant plasmids examined replicate in mammalian cell cultures and therefore possess functional active SV40 regulatory region. This method can be used for the purposes of gene therapy. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Lusky M., Botchan Μ. Inhibition of SV40 replication of simian cells by specific pBR322 sequences H Nature.— 1981,— 293.— P. 79—81. 2. Исследование репликации плазмид, содержащих геном SV40 в клетках млекопи- тающих/С. М. Ландау, Л. К. Сасина, Н. А. Чащин, Л. А. Чащина//Биополимеры и клетка.— 1987.—3, № 3.—С. 134. 3. Изучение репликации плазмид, содержащих полный геном SV40, в пермиссивных культурах клеток млекопитающих / С. М. Ландау, Л. К. Сасина, М. А. Шлянкевич, О. Б. Дризе / / Там же,— 1989.— 5, № 2.— С. 94. 4. OfHare К., Benoist С. Transformation of mouse fibroblast to methotrexate resistance by a recombinant plasmid expressing a prokaryotic dihydrofolate reductase/ /Proc. Nat. Acad. Sci. USA.— 1981,—78, N 3 ,—P. 1527—1531. 5. Gynheung A., Hidaka K., Siminovitch L. Expression of bacterial β-galactozidase in animal c e l l s / /Мої . and Cell. Biol.— 1982.—2, N 2 .—P. 1G28—1G32. 6. Сасина Jl. К., Ландау С. M., Кордюм В. А. Конструирование и анализ двурепли- конных гибридных плазмид, содержащих геном обезьяньего паповавируса SV40 // Молекуляр. генетика, микробиология и вирусология.— 1986.— № 1.— С. 26. 7. Landau S. M., Nosach L. NPavlova G. V. Morphological method for estimation of simian virus 40 infectious titer//Arch. Virol.— 1982.—73.—P. 79—84. Нн-т молекуляр. биологии и генетики АН УССР, Киев Получено С5.07.90 I S S N 0233-7G57. Б И О П О Л И М Е Р Ы И К Л Е Т К А . 1991. Т. 7. № 5 105'

Ähnliche Einträge