Генерация активных форм кислорода нейтрофилами при взаимодействии с монокарбоксицеллюлозой с различным содержанием карбоксильных групп
Методом люминолзависимой хемилюминесцещии изучено влияние монокарбоксщеллюлозы (МКЦ) с различным содержанием карбоксильных групп на кислородактивирующие системы нейтрофилов крови здоровых людей. Введение в суспензию клеток МКЦ приводит к уменьшению выхода активных форм кислорода (АФК) на различных с...
Gespeichert in:
| Datum: | 2003 |
|---|---|
| Hauptverfasser: | , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russian |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2003
|
| Schriftenreihe: | Біополімери і клітина |
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156615 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Генерация активных форм кислорода нейтрофилами при взаимодействии с монокарбоксицеллюлозой с различным содержанием карбоксильных групп / А.А. Крюков, Г.Н. Семенкова, В.Е. Капуцкий, С.Н. Черенкевич // Вiopolymers and Cell. — 2003. — Т. 19, № 5. — С. 440-444. — Бібліогр.: 21 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-156615 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1566152025-02-09T12:57:40Z Генерация активных форм кислорода нейтрофилами при взаимодействии с монокарбоксицеллюлозой с различным содержанием карбоксильных групп Генерація активних форм кисню нейтрофілами при взаємодії з монокарбоксицелюлозою з різним вмістом карбоксильних груп Generation of reactive oxygen species by neutrophils under their interaction with monocarboxycellulose Крюков, А.А. Семенкова, Г.Н. Капуцкий, В.Е. Черенкевич, С.Н. Клітинна біологія Методом люминолзависимой хемилюминесцещии изучено влияние монокарбоксщеллюлозы (МКЦ) с различным содержанием карбоксильных групп на кислородактивирующие системы нейтрофилов крови здоровых людей. Введение в суспензию клеток МКЦ приводит к уменьшению выхода активных форм кислорода (АФК) на различных стадиях процесса активации клеток адгезией к стеклу и частицами латекса. Полученный эффект не зависит от степени адгезивности нейтрофилов к подложкам из МКЦ и определяется только концентрацией СООН-групп в МКЦ: повышение содержания карбоксильных групп от 0,26 до 16 % приводит к снижению выхода АФК в нейтрофилах. МКЦ вызывает уменьшение активности миелопероксидазы (МПО) в модельной системе МПО–Н2О2–люминал Методом люмінолзалежної хемілюмінесценції вивчено вплив монокарбоксицелюлози (МКЦ) з різним вмістом карбоксильних груп на активуючі кисень системи нейтрофілів крові здорових людей. Додавання до суспензії клітин МКЦ спричинює зменшення виходу активних форм кисню (АФК) на різних стадіях процесу активації клітин адгезією до скла та частинками латексу. Отриманий ефект не залежить від ступеня адгезивності нейтрофілів до основи, виготовленої з МКЦ, та визначається лише концентрацією СООН-груп в МКЦ: зростання вмісту карбоксильних груп від 0,26 до 16 % призводить до зниження виходу АФК у нейтрофілах:. МКЦ спричинює зменшення активності мієлопероксидази (МПО) у модельній системі МПО–Н2O2–люмінол. An influence of monocarboxycellulose (MCC) with different content of COOH-groups on the oxygen activation systems of neutrophils isolated from blood of healthy donors has been studied using tuminol dependent chemiluminescence (LCDL) method. The addition of MCC into cell suspension leads to the decrease in reactive oxygen species (ROS) yield at different stages of cells activation by adhesion to glass surface and latex particles. This effect does not depend on adhesivity of cells to MCC films. However, it depends on the concentration of carboxy-groups in MCC: the increase of percentage of COOH-groups in MCC from 0.26 % to 16 % causes a decrease in the ROS yield in neutrophils. MCC also causes a decrease in the myeloperoxidase activity in a model system «MPO– H2O2–luminol». 2003 Article Генерация активных форм кислорода нейтрофилами при взаимодействии с монокарбоксицеллюлозой с различным содержанием карбоксильных групп / А.А. Крюков, Г.Н. Семенкова, В.Е. Капуцкий, С.Н. Черенкевич // Вiopolymers and Cell. — 2003. — Т. 19, № 5. — С. 440-444. — Бібліогр.: 21 назв. — рос. 0233-7657 DOI:http://dx.doi.org/10.7124/bc.000672 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156615 612.112.3:615.468.28 ru Біополімери і клітина application/pdf Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Клітинна біологія Клітинна біологія |
| spellingShingle |
Клітинна біологія Клітинна біологія Крюков, А.А. Семенкова, Г.Н. Капуцкий, В.Е. Черенкевич, С.Н. Генерация активных форм кислорода нейтрофилами при взаимодействии с монокарбоксицеллюлозой с различным содержанием карбоксильных групп Біополімери і клітина |
| description |
Методом люминолзависимой хемилюминесцещии изучено влияние монокарбоксщеллюлозы (МКЦ) с различным содержанием карбоксильных групп на кислородактивирующие системы нейтрофилов крови здоровых людей. Введение в суспензию клеток МКЦ приводит к уменьшению выхода активных форм кислорода (АФК) на различных стадиях процесса активации клеток адгезией к стеклу и частицами латекса. Полученный эффект не зависит от степени адгезивности нейтрофилов к подложкам из МКЦ и определяется только концентрацией СООН-групп в МКЦ: повышение содержания карбоксильных групп от 0,26 до 16 % приводит к снижению выхода АФК в нейтрофилах. МКЦ вызывает уменьшение активности миелопероксидазы (МПО) в модельной системе МПО–Н2О2–люминал |
| format |
Article |
| author |
Крюков, А.А. Семенкова, Г.Н. Капуцкий, В.Е. Черенкевич, С.Н. |
| author_facet |
Крюков, А.А. Семенкова, Г.Н. Капуцкий, В.Е. Черенкевич, С.Н. |
| author_sort |
Крюков, А.А. |
| title |
Генерация активных форм кислорода нейтрофилами при взаимодействии с монокарбоксицеллюлозой с различным содержанием карбоксильных групп |
| title_short |
Генерация активных форм кислорода нейтрофилами при взаимодействии с монокарбоксицеллюлозой с различным содержанием карбоксильных групп |
| title_full |
Генерация активных форм кислорода нейтрофилами при взаимодействии с монокарбоксицеллюлозой с различным содержанием карбоксильных групп |
| title_fullStr |
Генерация активных форм кислорода нейтрофилами при взаимодействии с монокарбоксицеллюлозой с различным содержанием карбоксильных групп |
| title_full_unstemmed |
Генерация активных форм кислорода нейтрофилами при взаимодействии с монокарбоксицеллюлозой с различным содержанием карбоксильных групп |
| title_sort |
генерация активных форм кислорода нейтрофилами при взаимодействии с монокарбоксицеллюлозой с различным содержанием карбоксильных групп |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| publishDate |
2003 |
| topic_facet |
Клітинна біологія |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156615 |
| citation_txt |
Генерация активных форм кислорода
нейтрофилами при взаимодействии с
монокарбоксицеллюлозой с различным
содержанием карбоксильных групп / А.А. Крюков, Г.Н. Семенкова, В.Е. Капуцкий, С.Н. Черенкевич // Вiopolymers and Cell. — 2003. — Т. 19, № 5. — С.
440-444. — Бібліогр.: 21 назв. — рос. |
| series |
Біополімери і клітина |
| work_keys_str_mv |
AT krûkovaa generaciâaktivnyhformkislorodanejtrofilamiprivzaimodejstviismonokarboksicellûlozojsrazličnymsoderžaniemkarboksilʹnyhgrupp AT semenkovagn generaciâaktivnyhformkislorodanejtrofilamiprivzaimodejstviismonokarboksicellûlozojsrazličnymsoderžaniemkarboksilʹnyhgrupp AT kapuckijve generaciâaktivnyhformkislorodanejtrofilamiprivzaimodejstviismonokarboksicellûlozojsrazličnymsoderžaniemkarboksilʹnyhgrupp AT čerenkevičsn generaciâaktivnyhformkislorodanejtrofilamiprivzaimodejstviismonokarboksicellûlozojsrazličnymsoderžaniemkarboksilʹnyhgrupp AT krûkovaa generacíâaktivnihformkisnûnejtrofílamiprivzaêmodíízmonokarboksicelûlozoûzríznimvmístomkarboksilʹnihgrup AT semenkovagn generacíâaktivnihformkisnûnejtrofílamiprivzaêmodíízmonokarboksicelûlozoûzríznimvmístomkarboksilʹnihgrup AT kapuckijve generacíâaktivnihformkisnûnejtrofílamiprivzaêmodíízmonokarboksicelûlozoûzríznimvmístomkarboksilʹnihgrup AT čerenkevičsn generacíâaktivnihformkisnûnejtrofílamiprivzaêmodíízmonokarboksicelûlozoûzríznimvmístomkarboksilʹnihgrup AT krûkovaa generationofreactiveoxygenspeciesbyneutrophilsundertheirinteractionwithmonocarboxycellulose AT semenkovagn generationofreactiveoxygenspeciesbyneutrophilsundertheirinteractionwithmonocarboxycellulose AT kapuckijve generationofreactiveoxygenspeciesbyneutrophilsundertheirinteractionwithmonocarboxycellulose AT čerenkevičsn generationofreactiveoxygenspeciesbyneutrophilsundertheirinteractionwithmonocarboxycellulose |
| first_indexed |
2025-11-26T00:22:41Z |
| last_indexed |
2025-11-26T00:22:41Z |
| _version_ |
1849810289608884224 |
| fulltext |
ISSN 0233-7657. Біополімери і клітина. 2003. Т. 19. № 5
КЛІТИННА БІОЛОГІЯ
Генерация активных форм кислорода
нейтрофилами при взаимодействии с
монокарбоксицеллюлозой с различным
содержанием карбоксильных групп
А. А. Крюков, Г. Н. Семенкова, В. Е. Капуцкий, С Н. Черенкевич
Кафедра биофизики Белгосуниверситета
Просп. Фр. Скорины 4, Минск, 220050, Беларусь
Методом люминолзависимой хемилюминесцещии изучено влияние монокарбоксщеллюлозы
(МКЦ) с различным содержанием карбоксильных групп на кислородактивирующие системы
нейтрофилов крови здоровых людей. Введение в суспензию клеток МКЦ приводит к уменьшению
выхода активных форм кислорода (АФК) на различных стадиях процесса активации клеток
адгезией к стеклу и частицами латекса. Полученный эффект не зависит от степени адгезивности
нейтрофилов к подложкам из МКЦ и определяется только концентрацией СООН-групп в МКЦ:
повышение содержания карбоксильных групп от 0,26 до 16 % приводит к снижению выхода АФК
в нейтрофилах. МКЦ вызывает уменьшение активности миелопероксидазы (МЛО) в модельной
системе МПО—НгОг—люминал
Введение. Монокарбоксицеллюлоза (МКЦ) являет
ся химическим производным природного высокомо
лекулярного соединения — целлюлозы. Как целлю
лоза, так и МКЦ обладают высокой механической
прочностью, значительной поглотительной и сорб-
ционной способностью. Благодаря этим свойствам
оба полимера используют в медицине в качестве
основы для перевязочных средств [1, 2 ] . В отличие
от целлюлозы МКЦ рассасывается в тканях орга
низма, что обусловливает возможность применения
этого материала при хирургических операциях [3 ].
Показано, что МКЦ нетоксична для организма,
оказывает кровоостанавливающее и антибактери
альное действие, стимулирует пролиферативную
функцию соединительной ткани [4, 5 ].
Одним из важных аспектов, на который следу
ет обращать внимание при создании новых лекар
ственных средств, является их действие на компо
ненты крови. Нужно отметить, что в литературе
отсутствуют данные о молекулярно-клеточных ме
ханизмах взаимодействия МКЦ с фагоцитами кро-
© А. А. К Р Ю К О В , Г. Н. СЕМЕНКОВА, В. Е. КАПУЦКМЙ,
С Н. Ч Е Р Е Н К Е В И Ч , 2 0 0 3
ви, участвующими в обеспечении неспецифической
защиты организма. Одним из основных проявлений
функциональной активности фагоцитов является
усиленное образование активных форм кислорода
(АФК) [6] .
Целью настоящей работы было исследование
влияния МКЦ с различным содержанием карбок
сильных групп на активирующие кислород системы
нейтрофилов крови.
Материалы и методы. В работе использованы
среда Эрла (собственного приготовления), кристал
лическая целлюлоза и пероксидаза хрена («Олай-
не», Латвия), люминол («Sigma», США), остальные
реактивы отечественного производства. МКЦ при
меняли в виде порошка (микрогранулы, размер
частиц 50 мкм) и прозрачных пленок толщиной
150 мкм, а также пленки из целлюлозы, получен
ные по методу, описанному в работе [3 ].
Нейтрофилы выделяли из периферической
крови здоровых людей центрифугированием в гра
диенте плотности фикол-верографина [7 ]. Примесь
эритроцитов удаляли с помощью гемолитического
шока. Клетки дважды отмывали в 0,15 моль/л
растворе NaCl и ресуспендировали в среде Эрла
440
Г Е Н Е Р А Ц И Я А К Т И В Н Ы Х Ф О Р М К И С Л О Р О Д А Н Е Й Т Р О Ф И Л А М И
(рН 7,4). Содержание нейтрофилов в полученной
суспензии составляло не менее 96 %.
Генерацию АФК изучали методом люминолза
висимой хемилюминесценции (ЛЗХЛ) с примене
нием биохемилюминометра БХЛ-1 (Беларусь). Из
мерения проводили в сбалансированном солевом
растворе Эрла (рН 7,4) при температуре 37 °С.
Перед началом измерений в анализируемую пробу
объемом 2 мл добавляли 1,25*10"5 моль/л люмино-
ла. Количество нейтрофилов в 1 мл составляло
2 10 \ При изучении ЛЗХЛ клеток в процессе
адгезии к пленкам из целлюлозы или МКЦ суспен
зию нейтрофилов наслаивали на дно кюветы (диа
метром 40 мм), полностью покрытое прозрачной
пленкой из изучаемого материала. Целлюлозу и
МКЦ в виде микрогранул добавляли к суспензии
клеток в количестве 0,5 мкг/мл.
Степень адгезивности клеток к различным под
ложкам изучали следующим образом: стеклянные
пластинки, пленки МКЦ либо пленки целлюлозы
помещали в чашки Петри, добавляли 2 мл суспен
зии нейтрофилов и в течение 1 ч инкубировали в
термостате при температуре 37 °С. Затем пленки
промывали в среде Эрла (рН 7,4) и с помощью
светового микроскопа и камеры Горяева подсчиты
вали количество клеток, адгезированных на едини
цу площади.
Влияние целлюлозы и МКЦ с различным со
держанием СООН-групп на продукцию АФК в
реакциях, катализируемых пероксидазой хрена
(3,6 10~У моль/л) или миелопероксидазой (МПО)
нейтрофилов крови человека, исследовали в мо
дельных системах, содержащих люминол в концен
трации 1,25-10~ 5 моль/л и пероксид водорода —
1-Ю"5 моль/л. Препараты на основе целлюлозы и
ее производных добавляли в пробы до начала
инициирования хемилюминесценции. МПО выде
ляли из нейтрофилов трехкратным замораживани
ем—размораживанием суспензии нейтрофилов и
последующим центрифугированием в течение
10 мин (8000 g) для осаждения крупных клеточных
обломков. В анализируюмую пробу добавляли 200
мкл супернатанта, полученного после разрушения
и центрифугирования клеточной суспензии (1-Ю 6
клеток/мл).
При математической обработке результатов
определяли среднюю величину <*> для группы
измерений. Полученные результаты х представле
ны в виде:
х = <х> + ta-a (для р = 0,95),
где а — среднее квадратичное отклонение; ta —
коэффициент Стьюдента.
Результаты и обсуждение. На рис 1 приведе-
1 %
0 2 4 6 8 і,мин
Рис. 1. Кинетические характеристики люминолзависимой хеми
люминесценции нейтрофилов при адгезии к стеклу (7) , плен
кам из целлюлозы (2) и монокарбоксицеллюлозы с содержани
ем карбоксильных групп: 3,9 % ( І ) ; 6,9 % І4)\ 16 % (5)
ны типичные кинетические кривые ЛЗХЛ нейтро
филов при адгезии на стекло, а также на прозрач
ные пленки из целлюлозы и МКЦ с различным
содержанием карбоксильных групп. Видно, что
внесение суспензии нейтрофилов в стеклянную кю
вету, дно которой покрыто пленкой из целлюлозы,
приводит к индуцированию ЛЗХЛ (кривая 2) , па
раметры которой такие же, как в случае адгезии
клеток к стеклу (кривая 7). Механизмы ЛЗХЛ
нейтрофилов при адгезии к стеклу описаны нами
ранее [6, 8 ] . При анализе формы кинетической
кривой ЛЗХЛ, обусловленной адгезией нейтрофи
лов к стеклу, установлено, что процессы генерации
АФК в этих клетках протекают в две стадии.
Первая стадия — результат функционирования
НАДФН-оксидазы, ассоциированной с плазматиче
ской мембраной. Вторая стадия отражает вовлече
ние в образование АФК помимо НАДФН-оксидазы
МПО [9 ]. Из рис. 1 (кривые 3—5) следует, что при
адгезии нейтрофилов на пленки из МКЦ суммар
ный выход ЛЗХЛ значительно ниже, чем в случае
441
КРЮКОВ А. А И Д Р .
100-
Рис. 2. Влияние монокарбоксицеллюлозы с различным содержа
нием СООН-групп на индуцированную латексом генерацию
активных форм кислорода в нейтрофилах (У) и люминолзави-
симую хемилюминесценцию в системе Н 2 02—люминол—мие-
лопероксидаза (2)
адгезии клеток на стекло или целлюлозу. При этом
в зависимости от содержания карбоксильных групп
в МКЦ изменяется соотношение значений интен-
сивностей ЛЗХЛ на первой и второй стадиях кине
тической кривой. При концентрации СООН-групп,
равной 16 %, увеличение интенсивности ЛЗХЛ на
второй стадии процесса вообще не наблюдается.
Известно, что генерация АФК клетками при
стимуляции нейтрофилов запускается в результате
активации НАДФН-оксидазы [10—12]. Электрон-
транспортирующий компонент оксидазы включает
гетеродимерный флавоцитохром Ь 5 5 8 . При стимуля
ции клетки четыре белковых компонента p40 p h o x ,
p47 p h o x , p67 p h o x и Rac-2, локализованных в цито
плазме, перемещаются к плазматической мембране
и вместе с мембранным цитохромом формируют
ферментативный комплекс. В неактивированных
нейтрофилах большая часть цитохрома Ь 5 5 8 (85 %)
находится в мембранах специфических гранул.
При активации клеток гранулы экзоцитируются и
в плазматической мембране происходит сборка ак
тивной НАДФН-оксидазы [13—16]. Можно пред
положить, что увеличение выхода АФК на второй
стадии связано не только со свободорадикальными
реакциями, катализируемыми МПО внутри клеток,
но и с формированием дополнительных полифер
ментных комплексов в цитоплазматической мемб
ране, включающих цитохром Ь 5 5 8 из специфиче
ских гранул, а также с секрецией МПО из нейтро
филов.
Миелопероксидаза, секретируемая клетками в
процессе адгезии, может взаимодействовать с
МКЦ, что, вероятно, будет приводить к изменению
активности этого фермента и механизмов образова
ния АФК в реакциях с его участием. На рис 2
показано влияние порошкообразных препаратов
целлюлозы и МКЦ на интегральную интенсивность
ЛЗХЛ нейтрофилов при фагоцитозе частиц латек
са. Видно, что добавление МКЦ угнетает генера
цию АФК нейтрофилами при поглощении частиц
латекса, причем введение целлюлозы не влияет на
выход АФК. Эффекты ингибирования, вызываемые
МКЦ, в этом случае также зависят от содержания
СООН-групп в полимере: с увеличением количест
ва карбоксильных групп эффект ингибирования
интенсивности ЛЗХЛ нейтрофилов при поглощении
латекса усиливается. Показано, что при поглоще
нии нейтрофилами частиц латекса образуются фа-
госомы, которые затем сливаются с цитоплазмати-
ческими гранулами, содержащими набор протеоли-
тических ферментов и оксидоредуктаз [14, 17, 18].
Из литературы известно, что ряд полианионов
тормозит слияние фагосом и гранул [19, 20] . Воз
можно, это и является причиной снижения интен
сивности ЛЗХЛ нейтрофилов при стимуляции ла
тексом в присутствии МКЦ.
Ранее установлено, что необходимым условием
генерации АФК нейтрофилами при действии боль
шинства стимуляторов является адгезия к субстра
ту [21 ]. Предположено, что одной из причин мень
шего выхода ЛЗХЛ в присутствии МКЦ может
быть изменение характера адгезионных взаимодей
ствий клеток с производными целлюлозы [15, 16].
Для проверки этого предположения нами проведе
но сравнительное изучение степени адгезивности
нейтрофилов к стеклу, прозрачным пленкам из
целлюлозы и окисленной целлюлозы (количествен
ные данные не приведены). Было выявлено, что
степень адгезивности клеток к этим подложкам
практически одинакова.
Чтобы исключить возможное влияние карбок
сильных групп МКЦ на способность люминола
испускать кванты света, нами изучена хемилюми-
несценция люминола при добавлении пероксида
водорода в присутствии растворимых органических
кислот: лимонной и полиметилметакриловой. Вы
явлено, что обе кислоты практически не влияют на
ЛЗХЛ, индуцированную в реакции окисления лю-
442
Г Е Н Е Р А Ц И Я А К Т И В Н Ы Х Ф О Р М К И С Л О Р О Д А Н Е Й Т Р О Ф И Л А М И
минола пероксидом водорода. Скорее всего, МКЦ
не оказывает действия на хемилюминесценцию
люминола в этой модельной системе.
Ранее отмечено, что при активации нейтрофи
лов происходит выход миелопероксидазы из клеток
во внеклеточную среду, в результате чего она
может контактировать с МКЦ. Нами исследовано
влияние порошкообразных образцов МКЦ с раз
личным содержанием карбоксильных групп на ак
тивность МПО, выделенной из нейтрофилов (рис
2). Видно, что с увеличением содержания СООН-
групп интенсивность ЛЗХЛ в системе МПО—
Н 2 0 2 —люминол резко снижается. Очевидно, что
данный эффект обусловлен конформационными из
менениями и последующим уменьшением активно
сти фермента, так как МКЦ обладает значительной
сорбционной способностью. Возможно, сорбция
фермента осуществляется при участии карбоксиль
ных групп МКЦ, поскольку увеличение их процен
тного содержания приводило к усилению ингибиру-
ющего эффекта, а введение в модельную систему
МПО—Н 2 0 2 —люминол немодифицированной цел
люлозы не вызывало изменений параметров ЛЗХЛ
в исследуемой реакции. Аналогичные результаты
характерны и для системы пероксидаза хрена (рас
тительный аналог МПО)—Н 2 0 2 —люминол.
На основании полученных данных можно сде
лать следующие выводы:
— введение в суспензию нейтрофилов моно
карбоксицеллюлозы приводит к уменьшению выхо
да АФК на различных стадиях процесса активации
клеток адгезией к стеклу и частицами латекса.
Величины наблюдаемых эффектов не связаны с
изменением степени адгезивности клеток к исполь
зуемым субстратам из целлюлозы и МКЦ и зависят
от концентрации карбоксильных групп в монокар-
боксицеллюлозе: повышение содержания СООН-
групп от 0,26 до 16 % приводит к увеличению
ингибирующего эффекта монокарбоксицеллюлозы
на индуцированное адгезией и латексом образова
ние АФК в нейтрофилах.
— МКЦ при взаимодействии с миелоперокси
дазой снижает активность фермента, что приводит
к уменьшению выхода АФК в реакции фермента
тивного окисления люминола пероксидом водорода.
A. A. Krjukov, G. N. Semenkova, V. Е. Kaputcky,
S. N. Cherenkevich
Generation of reactive oxygen species by neutrophils under their
interaction with monocarboxycellulose
Summary
An influence of monocarboxycellulose (MCC) with different content
of COOH-groups on the oxygen activation systems of neutrophils
isolated from blood of healthy donors has been studied using
luminol dependent chemiluminescence (LCDL) method. The ad
dition of MCC into cell suspension leads to the decrease in reactive
oxygen species (ROS) yield at different stages of cells activation by
adhesion to glass surface and latex particles. This effect does not
depend on adhesivity of cells to MCC films. However, it depends on
the concentration of carboxy-groups in MCC: the increase of
percentage of COOH-groups in MCC from 0.26 % to 16 % causes
a decrease in the ROS yield in neutrophils. MCC also causes a
decrease in the myeloperoxidase activity in a model system «МРО—
H202—luminol».
А. А. Крюков, Г. H. Семенкова, В. Є. Капуцький,
С. М. Черенкевич
Генерація активних форм кисню нейтрофілами при взаємодії з
монокарбоксицелюлозою з різним вмістом карбоксильних груп
Резюме
Методом люмінолзалежної хемілюмінесценції вивчено вплив
монокарбоксицелюлози (МКЦ) з різним вмістом карбоксиль
них груп на активуючі кисень системи нейтрофілів крові
здорових людей. Додавання до суспензії клітин МКЦ спричи
нює зменшення виходу активних форм кисню (АФК) на різних
стадіях процесу активації клітин адгезією до скла та частин
ками латексу. Отриманий ефект не залежить від ступеня
адгезивності нейтрофілів до основи, виготовленої з МКЦ, та
визначається лише концентрацією СООН-груп в МКЦ: зро
стання вмісту карбоксильних груп від 0,26 до 16 % призво
дить до зниження виходу АФК у нейтрофілах:. МКЦ спричи
нює зменшення активності мієлопероксидази (МПО) у мо
дельній системі МПО—Н202—люмінол.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Абаев Ю. К., Капуцкий В. Е., Адарченко А. А., Собещук
О. П. Механизм антибактериального действия монокар
боксицеллюлозы и других ионообменных производных
целлюлозы / / Антибиотики и мед. биотехнология.—
1986.—№ 8.—С. 624—627.
2. Абаев Ю. К, Капуцкий В. Е. Методологические аспекты
характеристики сорбционных свойств перевязочных мате
риалов / / Материалы 1-го конгресса хирургов / Под ред.
А. Н. Косинца.—Витебск, 1996.—С. 147—148.
3. Абаев Ю. К, Капуцкий В. Е.у Адарченко А. А. Разроботка
и применение перевязочных средств пролонгированного
антисептического действия / / Материалы 1-го конгресса
хирургов / Под ред. А. Н. Косинца.—Витебск, 1996.—
С. 151 — 152.
4. Капуцкий В. Н., Юркштович Т. Л. Лекарственные препа
раты на основе целлюлозы.—Минск: Университетское,
1989.—111 с.
5. Абаев Ю. К,, Капуцкий В. Е. Коллоидно-химические
подходы к оптимизации применения целлюлозных перевя
зочных материалов в современных условиях / / Материалы
1-го конгресса хирургов / Под ред. А. Н. Косинца.—
Витебск, 1996.—С. 153—154.
6. Smirnova Е. N., Semenkova G. N., Kovalenko Е. 1., Gerein
V., Cherenkevich S. N. Generation of active oxygen forms by
neutrophils and granulocytopoiesis in patients with acute lym
phoblastic leukemia under therapy with use of G-CSF Granu
locyte / / Acute Leukemias VII / Eds W. Hiddemann.—Berlin;
Heidelberg: Springer, 1998.—P. 387—393 .
7. Бейум А. Выделение лимфоцитов, гранулоцитов и макро
фагов / / Лимфоциты: выделение, фракционирование и
характеристика.—М.: Медицина, 1980.—С. 9—36.
8. Semenkova G. N., Smirnova Е. N., Kovalenko Е. /., Gerein
К, Cherenkevich S. N. Oxygen activating ability of neutrophils
443
К Р Ю К О В А. А. И Д Р .
of children with non-Hodgkin's lymphomas at therapy with
G-CSF / / Exp. Oncol.—1997.—N 2.—P. 153—156.
9. Albrecht D.y Jungi T. W. Luminol-enhanced chemilumines-
cence induced in peripheral blood — derived human phago
cytes: obligatory requirement of myeloperoxidase exocytosis by
monocytes / / J. Leukoc. Biol .—1993.—54, N 4.—P. 300—
306.
10. Клюбин И. В., Гамалей И. А. НАДФН-оксидаза — спе
циализированный комплекс для образования активных ме
таболитов кислорода / / Цитология.—1997.—39, № 4 / 5 . —
С. 320—340.
11. Семенкова Г Н. Генерация активных форм кислорода при
стимуляции лимфоцитов и нейтрофилов крови человека:
Автореф. дис. ... канд. биол. наук.—Минск, 1989.—21 с.
12. Тимошенко А. В., Черенкевич С. Н. Гликобиологические
аспекты активации дыхательной цепи фагоцитов / / Био
полимеры и клетка. —1994. —10 , № 1.—С. 58—66.
13. Babior В. М. HADPH-oxidase: an update / / Blood.—1999.—
93, N 5 — P . 1464—1476.
14. Глебов P. H. Эндоцитоз и экзоцитоз.—M.: Высш. школа,
1987.—95 с.
15. Richard A. W., Michio N.f Kenneth R. Priming of neutrophil
respiratory burst involves p38 mitogen-activated protein kinase-
dependent exocytosis of flavocytochrome b558-containing gra
nules / / J. Biol. Chem.—2000.—275, N 47.—P. 36713—
36719.
16. DeLeo R. Я, Renee J., McCornick S., Nakamuro M., Apicella
M., Weiss J. P. Neutrophils exposed to bacterial lipopolysac-
charide upregulate NADPH oxidase activity / / J. Clin. In
vest .—1998.—101, N 2.—P. 455—463.
17. Hampton M. В., Kettle A. J., Winterboum С. C. Inside the
neutrophil phagosome: oxidants, myeloperoxidase and bacterial
killing / / Blood.—1998.—92, N 9. —P. 3007—3017.
18. Белова Л. А. Биохимия процессов воспаления и поражения
сосудов. Роль нейтрофилов / / Биохимия.—1997.—62,
№ 6.—С. 659—668.
19. Vered М.} Simon S. Inhibition of human neutrophils elastase
by bacterial polyanions / / Exp. Lung Res .—1998.—14,
№ 1.—P. 67—83.
20. James E. S., Thomas К P. L-selectin signaling of neutrophils
adhesion and degranulation involves p38 mitogen-activated
protein kinase / / J. Biol. Chem. —1997 .—275, N 2 1 . —
P. 15876—15884.
21. Семенкова Г. H., Черенкевич С. Н. Активные формы
кислорода и функциональный отклик иммунных клеток / /
Фотобиология и мембранная биофизика / Под. ред. И. Д.
Волотовского.—Минск, 1999.—С. 209—220.
УДК 612.112.3:615.468.28
Надійшла до редакції 15.04.02
444
|