Формування адаптивної відповіді Glycine max (L.) Merr. на вплив іонів кадмію залежно від умов азотного живлення
Изучалось влияние азотного питания на формирование адаптивного ответа проростков сои в присутствии ионов кадмия. Оказалась, что внесение азота в низких концентрациях способствует уменьшению интенсивности процессов ПОЛ под влиянием кадмия. В то же время фитотоксичность высокой дозы азота в комбинац...
Збережено в:
| Дата: | 2012 |
|---|---|
| Автори: | , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Ukrainian |
| Опубліковано: |
Інститут ботаніки ім. М.Г. Холодного НАН України
2012
|
| Назва видання: | Український ботанічний журнал |
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/174683 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Формування адаптивної відповіді Glycine max (L.) Merr. на вплив іонів кадмію залежно від умов азотного живлення / Є.О. Конотоп, І. Матушикова, Л.М. Бацманова, Н.Ю. Таран // Український ботанічний журнал. — 2012. — Т. 69, № 3. — C. 438-446. — Бібліогр.: 35 назв. — укр. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-174683 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1746832025-02-09T11:35:26Z Формування адаптивної відповіді Glycine max (L.) Merr. на вплив іонів кадмію залежно від умов азотного живлення Формирование адаптивного ответа Glycine max (L.) Merr. на влияние ионов кадмия в зависимости от условий азотного питания Induction of adaptive response of Glycine max (L.) Merr. under cadmium treatment depending on conditions of nitrogen nutrition Конотоп, Є.О. Матушикова, І. Бацманова, Л.М. Таран, Н.Ю. Фізіологія, біохімія, клітинна та молекулярна біологія рослин Изучалось влияние азотного питания на формирование адаптивного ответа проростков сои в присутствии ионов кадмия. Оказалась, что внесение азота в низких концентрациях способствует уменьшению интенсивности процессов ПОЛ под влиянием кадмия. В то же время фитотоксичность высокой дозы азота в комбинации с кадмием оказалась аддитивной. Тем не менее, в исследуемых условиях причиной деструктивных процессов, вероятно, является избыток азота, поскольку накопление кадмия в тканях корней достоверно угнеталось. Impact of nitrogen nutrition on adaptive response of soybean seedlings under presence of cadmium ions has been studied. Nitrogen application in low concentration showed reduction of lipid peroxidation intensity under cadmium treatment. Phytotoxicity of high concentration of nitrogen combined with cadmium revealed additive effect. However, deleterious processes in root tissues under the studied conditions might be due to toxic effect of nitrogen excess since cadmium accumulation in root tissues was significantly depressed. 2012 Article Формування адаптивної відповіді Glycine max (L.) Merr. на вплив іонів кадмію залежно від умов азотного живлення / Є.О. Конотоп, І. Матушикова, Л.М. Бацманова, Н.Ю. Таран // Український ботанічний журнал. — 2012. — Т. 69, № 3. — C. 438-446. — Бібліогр.: 35 назв. — укр. 0372-4123 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/174683 uk Український ботанічний журнал application/pdf Інститут ботаніки ім. М.Г. Холодного НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Ukrainian |
| topic |
Фізіологія, біохімія, клітинна та молекулярна біологія рослин Фізіологія, біохімія, клітинна та молекулярна біологія рослин |
| spellingShingle |
Фізіологія, біохімія, клітинна та молекулярна біологія рослин Фізіологія, біохімія, клітинна та молекулярна біологія рослин Конотоп, Є.О. Матушикова, І. Бацманова, Л.М. Таран, Н.Ю. Формування адаптивної відповіді Glycine max (L.) Merr. на вплив іонів кадмію залежно від умов азотного живлення Український ботанічний журнал |
| description |
Изучалось влияние азотного питания на формирование адаптивного ответа проростков сои
в присутствии ионов кадмия. Оказалась, что внесение азота в низких концентрациях способствует уменьшению интенсивности процессов ПОЛ под влиянием кадмия. В то же время
фитотоксичность высокой дозы азота в комбинации с кадмием оказалась аддитивной. Тем
не менее, в исследуемых условиях причиной деструктивных процессов, вероятно, является
избыток азота, поскольку накопление кадмия в тканях корней достоверно угнеталось. |
| format |
Article |
| author |
Конотоп, Є.О. Матушикова, І. Бацманова, Л.М. Таран, Н.Ю. |
| author_facet |
Конотоп, Є.О. Матушикова, І. Бацманова, Л.М. Таран, Н.Ю. |
| author_sort |
Конотоп, Є.О. |
| title |
Формування адаптивної відповіді Glycine max (L.) Merr. на вплив іонів кадмію залежно від умов азотного живлення |
| title_short |
Формування адаптивної відповіді Glycine max (L.) Merr. на вплив іонів кадмію залежно від умов азотного живлення |
| title_full |
Формування адаптивної відповіді Glycine max (L.) Merr. на вплив іонів кадмію залежно від умов азотного живлення |
| title_fullStr |
Формування адаптивної відповіді Glycine max (L.) Merr. на вплив іонів кадмію залежно від умов азотного живлення |
| title_full_unstemmed |
Формування адаптивної відповіді Glycine max (L.) Merr. на вплив іонів кадмію залежно від умов азотного живлення |
| title_sort |
формування адаптивної відповіді glycine max (l.) merr. на вплив іонів кадмію залежно від умов азотного живлення |
| publisher |
Інститут ботаніки ім. М.Г. Холодного НАН України |
| publishDate |
2012 |
| topic_facet |
Фізіологія, біохімія, клітинна та молекулярна біологія рослин |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/174683 |
| citation_txt |
Формування адаптивної відповіді Glycine max (L.) Merr. на вплив іонів кадмію залежно від умов азотного живлення / Є.О. Конотоп, І. Матушикова, Л.М. Бацманова, Н.Ю. Таран // Український ботанічний журнал. — 2012. — Т. 69, № 3. — C. 438-446. — Бібліогр.: 35 назв. — укр. |
| series |
Український ботанічний журнал |
| work_keys_str_mv |
AT konotopêo formuvannâadaptivnoívídpovídíglycinemaxlmerrnavplivíonívkadmíûzaležnovídumovazotnogoživlennâ AT matušikovaí formuvannâadaptivnoívídpovídíglycinemaxlmerrnavplivíonívkadmíûzaležnovídumovazotnogoživlennâ AT bacmanovalm formuvannâadaptivnoívídpovídíglycinemaxlmerrnavplivíonívkadmíûzaležnovídumovazotnogoživlennâ AT tarannû formuvannâadaptivnoívídpovídíglycinemaxlmerrnavplivíonívkadmíûzaležnovídumovazotnogoživlennâ AT konotopêo formirovanieadaptivnogootvetaglycinemaxlmerrnavliânieionovkadmiâvzavisimostiotuslovijazotnogopitaniâ AT matušikovaí formirovanieadaptivnogootvetaglycinemaxlmerrnavliânieionovkadmiâvzavisimostiotuslovijazotnogopitaniâ AT bacmanovalm formirovanieadaptivnogootvetaglycinemaxlmerrnavliânieionovkadmiâvzavisimostiotuslovijazotnogopitaniâ AT tarannû formirovanieadaptivnogootvetaglycinemaxlmerrnavliânieionovkadmiâvzavisimostiotuslovijazotnogopitaniâ AT konotopêo inductionofadaptiveresponseofglycinemaxlmerrundercadmiumtreatmentdependingonconditionsofnitrogennutrition AT matušikovaí inductionofadaptiveresponseofglycinemaxlmerrundercadmiumtreatmentdependingonconditionsofnitrogennutrition AT bacmanovalm inductionofadaptiveresponseofglycinemaxlmerrundercadmiumtreatmentdependingonconditionsofnitrogennutrition AT tarannû inductionofadaptiveresponseofglycinemaxlmerrundercadmiumtreatmentdependingonconditionsofnitrogennutrition |
| first_indexed |
2025-11-25T22:14:23Z |
| last_indexed |
2025-11-25T22:14:23Z |
| _version_ |
1849802216477556736 |
| fulltext |
438 ISSN 0372-4123. Ukr. Botan. Journ., 2012, vol. 69, № 3
© Є.О. КОНОТОП,
І. МАТУШИКОВА,
Л.М. БАЦМАНОВА,
Н.Ю. ТАРАН, 2012
УКРАЇНСЬКИЙ
БОТАНІЧНИЙ
ЖУРНАЛ
Фізіологія, біохімія, клітинна
та молекулярна біологія рослин
Є.О. КОНОТОП1, І. МАТУШИКОВА2,
Л.М. БАЦМАНОВА1, Н.Ю. ТАРАН1
1 ННЦ «Інститут біології» Київського національного
університету імені Тараса Шевченка
вул. Володимирська, 64, м. Київ, 01601, Україна
golovatyuk.yevgeniya@gmail.com
2 Інститут генетики та біотехнології рослин Словацької Академії наук
вул. Академіцка, 2, м. Нітра, 95007, Словацька Республіка
ФОРМУВАННЯ АДАПТИВНОЇ ВІДПОВІДІ
GLYCINE MAX (L.) MERR. НА ВПЛИВ
ІОНІВ КАДМІЮ ЗАЛЕЖНО ВІД УМОВ
АЗОТНОГО ЖИВЛЕННЯ
К л ю ч о в і с л о в а: Glycine max, азотне живлення, кадмій,
захисні реакції рослин
Кадмій, один із небезпечних забрудників довкілля, ви-
сокотоксичний для рослин і тварин. Причиною появи
цього важкого металу (ВМ) у навколишньому середо-
вищі в надмірних концентраціях є діяльність металур-
гійних підприємств, видобувної промисловості, тран-
спорт. Крім того, він з’являється як побічний продукт
при використанні мінеральних добрив, а також із інших
джерел [22]. Гранично допустимою концентрацією кад-
мію на сільськогосподарських угіддях вважається 3 мг/кг
ґрунту, однак реальний вміст токсиканта в них перева-
жає [27]. Негативний вплив кадмію на рослини візуа-
льно виявляється у пригніченні їхнього росту, хлорозі
листків, почорнінні апексів коренів, що є наслідками
порушення фізіологічних процесів [30]. Відомо, що од-
нією з основних причин фітотоксичності кадмію є змі-
ни поглинання та розподілу макро- та мікроелементів
[15]. З’ясовано, що він впливає і на азотний метаболізм
рослин. У дослідженнях M.J. Hassan [16] показано, що
439ISSN 0372-4123. Укр. ботан. журн., 2012, т. 69, № 3
токсичний вплив кадмію варіює залежно від форми азоту, яка застосовувалася
для підживлення рослин. Автори вважають, що внесення (NH
4
)
2
SO
4
у визначе-
них концентраціях на забруднені кадмієм ґрунти пом’якшить шкідливий вплив
ВМ і зменшить поглинання його рослинами. Відомо, що азот відіграє важливу
роль під час розвитку стрес-реакції рослин у відповідь на дію абіотичних факто-
рів довкілля. Це змусило нас з’ясувати його можливий регуляторний вплив при
формуванні адаптивних реакцій рослин за дії ВМ, накопичення яких у ґрунтах
України останнім часом набуває загрозливого характеру [1, 7, 25].
Об’єкти та методи досліджень
У лабораторних умовах ми вивчали вплив різної забезпеченості азотом під час
формування захисних реакцій рослин Glycine max (L.) Merr. (сої сорту Устя) за
дії іонів ВМ на початкових стадіях проростання. Для цього стерилізоване на-
сіння сої пророщували в чашках Петрі на зволоженому фільтрувальному папе-
рі в темряві при 25 °С. Через 3—4 доби після початку накльовування насіння з
корінцями приблизно однакової довжини переносили на поживне середовище
Гельрігеля, що слугувало контролем. Додатково вносили азот у концентраціях
1,2 та 24 мМ і кадмій — 50 мг/л. Для приготування дослідних розчинів вико-
ристовували сполуки NH
4
NO
3
та Cd(NO
3
)
2
× 4H
2
O.
Після 48-годинної інкубації аналізували залежність їхньої ростової реакції
від умов вирощування [35]. Ріст коренів оцінювали ваговим методом. На ко пи-
чення кадмію у коренях визначали за допомогою атомно-абсорбційного спект-
ро фотометра (Perkin-Elmer 1100B Spectrophotometer) [24]. Показники стрес-
ре а к ції рослин виявляли за деякими біохімічними параметрами: процес перок-
сидного окиснення ліпідів (ПОЛ) — за накопиченням ТБК-активних продук-
тів у коренях [17], активність каталази (ЕС 1.11.1.6.) — за зменшенням оптич-
ної густини при 290 нм внаслідок розкладання Н
2
О
2
(Е = 39,4 мМ–1 см–1) [19].
Повторність досліду 3—4-кратна: отримані дані проаналізували методом
варіаційної статистики за допомогою стандартного пакета програм MS Excel
для Windows XP, вони вважалися достовірними (за t-критерієм Стьюдента) за
рівня значущості p≤0,001—p≤0,05.
Результати досліджень та їх обговорення
Індивідуальні особливості росту та розвитку рослин визначаються за генетич-
ною програмою, ступінь реалізації якої значною мірою залежить від умов сере-
довища. Різноманітність реакцій рослини на вплив середовища лежить в основі
її пристосування до умов існування і виявляється не лише в структурних (ана томо-
морфологічних), а й функціональних (фізіолого-біохімічних) адаптаційних пе-
ребудовах. Цим обумовлені зміни інтенсивності та спрямування усіх процесів
життєдіяльності, серед яких ріст рослин є інтегральним показником [4].
Пригнічення росту коренів — перший симптом негативного впливу на них
чинників довкілля, тому цей показник широко використовується для експрес-
аналізу гострої токсичності ВМ, зокрема й кадмію [10, 35]. Адже клітини коре-
440 ISSN 0372-4123. Ukr. Botan. Journ., 2012, vol. 69, № 3
нів першими зазнають згубної дії його іонів; накопичується кадмій теж пере-
важно в коренях [30]. Згідно з даними літератури, за несприятливих умов у зо-
нах росту коренів спостерігається зниження показника поздовжнього розтяг-
нення: це супроводжується збільшенням внутрішньокореневого осмотичного
тиску і надалі призводить до збільшення діаметра кореня, а не його росту в до-
вжину [2]. Пригнічення приросту коренів під впливом кадмію та інших ВМ є
типовим і пояснюється зменшенням швидкості як поділу клітин, так і їхнього
росту розтягненням, що відбувається за рахунок дії різних механізмів [8].
Ростова реакція коренів G. max сорту Устя в умовах додаткового надходжен-
ня азоту за наявності іонів кадмію варіювала (рис. 1).
Візуально згубна дія кадмію виявилася у пригніченні росту коренів сої і
почорнінні їхніх апексів, що може свідчити про метал-індуковане окиснення
різноманітних фенолів у коренях (а вони, як відомо, є ендогенними інгібітора-
ми росту) або ж бути наслідком оксидного стресу [12, 13]. Порівняння маси
коренів дослідних рослин із контрольними показало, що висока концентрація
азоту (24 мМ) пригнічувала ріст коренів на 20 % (p ≤ 0,05), а за нижчої концен-
трації азоту такий ефект не був статистично достовірним (рис. 1). Дослідну
концентрацію 24 мМ азоту можна вважати надмірною, а отже, стресорною для
росту й розвитку рослин, що підтверджують і дані літератури, оскільки кон-
центрація азоту 10 мМ вважається пороговою за фітотоксичністю для деяких
видів рослин [9, 28]. Наші спостереження підтверджують негативний вплив
надлишку азоту на рослини, зокрема на ріст коренів, що G. Mi [21] пояснює
зміною гормонального статусу рослини в бік зменшення в ній вмісту ауксинів —
це, своєю чергою, пригнічує апікальне домінування кореня.
За наявності кадмію в середовищі спостерігалося достовірне пригнічення
росту коренів, що вважається загальною реакцією на вплив ВМ [20]. Ком бі но-
0
0,02
0,04
0,06
0,08
0,1
0 1,2 24
N, мМ
m
,
г
с
и
р
о
ї
р
е
ч
о
в
и
н
и
Контроль Cd
***
* *
***
Рис. 1. Ростова реакція коренів проростків Glycine max (L.) Merr., спричинена додатковим
внесенням азоту та наявністю кадмію (тут і далі: * — p≤0,05; ** — p≤0,01; *** — p≤0,001)
Fig. 1. Growth reaction of soybean roots in response on additional supply with nitrogen in presence
of Cd (here and below: * — p≤0,05; ** — p≤0,01; *** — p≤0,001)
441ISSN 0372-4123. Укр. ботан. журн., 2012, т. 69, № 3
ва на дія іонів кадмію та високої концентрації азоту виявилася ще шкідливішою
для росту коренів рослин G. max, оскільки їхній ріст гальмувався на 31 % (p ≤
≤ 0,001) порівняно з контрольними рослинами, які вирощували ли ше на зба-
лансованому поживному середовищі. Однак за наявності додаткового азоту в
концентрації 1,2 мМ пригнічувальний вплив кадмію послаблювався, що свід-
чить про сприятливу дію даної дослідної концентрації для зменшення негатив-
ного впливу кадмію на ріст коренів на 12 % (p ≤ 0,05).
Високий вміст ВМ у ґрунті зазвичай спричиняє підвищене накопичення їх
у тканинах рослин, причому величина та характер поглинання в різних видів
мають свою специфіку [23]. Надходження молекул ВМ із ґрунту в рослини роз-
починається зі зв’язування їх із клітинною стінкою епідерми кореня, потім
іони ВМ через мембранні транспортні системи переносяться всередину кліти-
ни. Узагальнення існуючих даних літератури свідчить, що поглинання іонів
металів відбувається через білкові канали і/або Н+-помпи. Надходженню каті-
онів через такі вторинні переносники сприяє негативний потенціал із внутріш-
нього боку мембрани [18]. Методом атомно-абсорбційної спектрофотометрії
визначили рівень накопичення кадмію у тканинах коренів проростків сої на
48-му год експозиції залежно від умов постачання азоту (рис. 2).
Додаткове внесення азоту в поживне середовище в концентрації 1,2 мМ
достовірно не впливало на накопичення кадмію в тканинах коренів сої. Однак
порівняно з контролем інтенсивність акумуляції іонів ВМ у варіанті зі внесен-
ням азоту в концентрації 24 мМ, за дії якої ріст коренів пригнічувався найбіль-
ше, була на 26 % (p ≤ 0,01) нижчою. Подібний вплив високого рівня азоту в
поживному середовищі на поглинання кадмію спостерігали в рослин Lactuca
sativa (L.) [32]. Крім того, повідомлялося, що при підвищенні азотного жив-
лення озимої пшениці кадмій у зерні накопичується менш інтенсивно (автори
називають це явище «ефектом розведення»), оскільки за азотного постачання
загальний приріст біомаси посіву суттєво збільшується [34], однак у дослідних
Рис. 2. Накопичення кадмію у тканинах коренів G. max залежно від постачання азоту
Fig. 2. Cd-accumulation in soybean root tissues related to nitrogen supply G. max
0
50
100
150
200
250
300
350
0 1,2 24
N, мМ
C
d
,
м
к
г/
г
с
у
х
о
ї
р
е
ч
о
в
и
н
и
**
442 ISSN 0372-4123. Ukr. Botan. Journ., 2012, vol. 69, № 3
умовах такий взаємозв’язок не справдився, тому що високий вміст азоту в се-
редовищі пригнічував приріст коренів. Нещодавно були з’ясовані деякі азот-
обумовлені молекулярні механізми стійкості вищих рослин до токсичної дії
кадмію. В арабідопсису ідентифікували гени, що відповідають за експресію
трансмембранних переносників нітратів. За наявності кадмію стимулюється
експресія білків, які транспортують іони NO
3
– назад із ксилеми до паренхімних
клітин кореня, а синтез білків, залучених до перенесення нітратів у ксилему й
далі в пагони, навпаки, пригнічувався. Автори вважають, що в такий спосіб
накопичені в коренях нітрати слугують сигналом для посилення їх асиміляції в
0
5
10
15
20
25
30
35
40
0 1,2 24
N, мМ
н
м
о
л
ь
М
Д
А
/г
с
и
р
о
ї
р
е
ч
о
в
и
н
и
Контроль Cd
** *
Рис. 3. Вплив додатково внесеного азоту на накопичення ТБК-активних продуктів у коре-
нях проростків G. max за наявності кадмію
Fig. 3. Influence of additional nitrogen supply on accumulation of TBA-active products in soybean
roots in presence of Cd
0
20
40
60
80
100
120
140
160
0 1,2 24
N, мM
А
к
т
и
в
н
іс
т
ь
к
а
т
а
л
а
зи
,
м
к
М
Н
2
О
2
/г
х
в
Контроль Сd
***
**
**
Рис. 4. Вплив додатково внесеного азоту на активність каталази в коренях проростків G. max
за наявності кадмію
Fig. 4. Influence of additional nitrogen supply on catalase activity in soybean G. max roots in presence
of Cd
443ISSN 0372-4123. Укр. ботан. журн., 2012, т. 69, № 3
цих органах. Далі інтенсифікується синтез азотвмісних хелаторів ВМ. Крім
того, виявлено, що даний механізм стійкості є неспецифічним і функціонує у
відповідь як на абіотичні, так і біотичні стресори [14].
Здатність кадмію сприяти утворенню активних форм кисню (АФК) у кліти-
нах рослин підтверджена багатьма дослідженнями [11, 26, 29]. Пероксидне окис-
нення біомембран пошкоджує їхню цілісність і може призвести до незворотних
змін при нормальному функціонуванні клітини. Кадмій не належить до металів
зі змінною валентністю і тому не спричиняє утворення АФК. Однак цей елемент
стимулює процеси ПОЛ у рослин опосередковано: в клітинах коренів він змінює
рівновагу про-/антиоксидантів, зокрема активність ферментів глутатіонредук-
тази, аскорбат пероксидази, каталази, сприяє накопиченню Н
2
О
2
[33].
Молекули ліпідів загалом і ненасичені ліпіди зокрема чутливі до окиснен-
ня під дією АФК, що утворюються у стресорних умовах. Накопичення ТБК-
активних продуктів вважається загальною неспецифічною реакцією рослин в
умовах оксидного стресу [3]. Вивчаючи, як впливає постачання різної кількос-
ті азоту на розвиток проростків сої за дії ВМ у наших дослідах, ми виявили де-
яку інтенсифікацію процесів ПОЛ у клітинах коренів (за накопиченням ТБК-
активних продуктів) (рис. 3).
Найбільше накопичення ТБК-активних продуктів (25 %; р ≤ 0,01) спосте-
рігалося у варіанті, де соя оброблялася кадмієм без додаткового внесення азоту
в середовище. При додаванні 1,2 мМ азоту в проростки за наявності іонів кад-
мію інтенсивність процесів ПОЛ зростала на 15 % (р ≤ 0,05) порівняно з тими,
що культивувалися без кадмію, тоді як у варіанті з 24 мМ азоту цей показник
достовірно не відрізнявся від показника контролю. Водночас за умов досліду,
коли азот становив 1,2 мМ, поряд із накопиченням ТБК-активних продуктів
спостерігався найвищий приріст біомаси коренів серед тих варіантів, що за-
знавали дії кадмію. Подібні результати впливу додатково внесеного азоту на
зниження рівня накопичення ТБК-активних продуктів у стресорних умовах
(за водного дефіциту) були отримані на рослинах Agrostis palustris (Huds.) [31].
Це може бути свідченням еустресорної дії низьких концентрацій азоту на рос-
линний організм в умовах оксидного стресу.
Раніше було доведено, що активність антиоксидантних ферментів, зокре-
ма й каталази, за несприятливої дії абіотичних факторів довкілля суттєво за-
лежить від умов азотного живлення рослин, у тому числі й від форми азоту —
амонійної чи нітратної [6]. Під час наших досліджень ми не виявили достовір-
них відмінностей у активності каталази в разі впливу зростаючих концентрацій
азоту в поживному середовищі, хоча й спостерігали деяку тенденцію до її за-
лежності від збільшення дози (рис. 4).
Однак за наявності кадмію спостерігалися суттєві зміни активності фер-
менту. Так, на 48-му год експозиції достовірно зростала активність каталази,
що корелює з даними літератури [5]. Суттєвий вплив на активність ферменту
виявлений за впливу різних концентрацій азоту. Згідно з результатами наших
досліджень, активність каталази достовірно зростала вдвічі у відповідь на дію
444 ISSN 0372-4123. Ukr. Botan. Journ., 2012, vol. 69, № 3
кадмію як за відсутності додаткового азотного постачання (р ≤ 0,001), так і в
умовах найвищої концентрації азоту 24 мМ в досліді (р ≤ 0,01). Проте в разі до-
давання в поживне середовище 1,2 мМ азоту спостерігалося менш інтенсивне
зростання активності ферменту на 45 % (р ≤ 0,01), що супроводжувалося й мен-
шим, порівняно з іншими варіантами, накопиченням ТБК-активних продук-
тів. Імовірно, за даних дослідних умов не було сплеску утворення АФК, що, у
свою чергу, не посилило активності каталази, на відміну від контрольного варі-
анта та варіанта з високим вмістом азоту в живильному середовищі. Отримані
результати розвитку ПОЛ за дослідних умов дозволяють розглядати концен-
трацію азоту 1,2 мМ як еустресорний фактор при адаптації проростків G. max
до токсичної дії іонів кадмію.
Висновки
1. За результатами здійсненого лабораторного досліду по вивченню впливу різ-
них концентрацій азоту на рослини G. max під час її проростання ми виявили
залежність росту коренів сої від дози внесеного азоту. Так, його низькі концен-
трації давали позитивний ефект, тимчасом як надлишок азоту не сприяв при-
росту біомаси, що підтверджують також дані й інших дослідників [21].
2. Наявність кадмію пригнічувала ріст коренів і активізувала процеси ПОЛ
у всіх рослин, що піддавалися дії металу, порівняно з контрольними, які виро-
щували на збалансованому поживному середовищі.
3. Зважаючи на отримані результати, можна зробити висновок, що є певна
залежність між впливом кадмію та умовами азотного живлення під час форму-
вання адаптивної відповіді сої. Встановлено, що підживлення азотом у низьких
концентраціях (1,2 мМ) знижує генерацію АФК у тканинах рослин, які зазнали
впливу іонів кадмію, що проявилося в меншому накопиченні ТБК-активних про-
дуктів і активності каталази порівняно з іншими варіантами досліду. Водночас
висока доза азоту в комбінації з кадмієм виявляла адитивний ефект, що полягав
у підсиленому пригніченні росту коренів та інтенсифікації ПОЛ. Однак ці про-
цеси, вірогідно, є наслідком шкідливої дії надлишку азоту, оскільки за таких умов
накопичення кадмію у тканинах коренів достовірно зменшувалося.
СПИСОК ЛІТЕРАТУРИ
1. Заєць І.Є., Вознюк Т.М., Ковальчук М.В., Крамарьов С. М., Козировська Н. О. Активність
консорціуму бактерій в агроценозах сої на забруднених важкими металами чорноземних
територіях Придніпров’я // Наука та інновації. — 2007. — 3, № 6. — С. 26—37.
2. Ктиторова И.Н., Скобелева О.В., Агальцов К.Г. Информативность биофизических пара-
метров корня при выяснении причин торможения роста в условиях стресса // Тез. докл.
Всерос. симпоз. «Растение и стресс»: ИФР им. К.А. Тимирязева РАН, Москва, 9—12
ноября, 2010. — С. 199—200.
3. Мерзляк М.Н. Активированный кислород и жизнедеятельность растений // Сорос. об-
разоват. журн. — 1999. — №9. — С. 20—26.
4. Мусієнко М.М. Фізіологія рослин. — К.: Либідь, 2005. — 808с.
5. Пацула О.І., Демків О.Т. Каталаза та адаптація рослин соняшника до дії кадмію та свин-
цю // Вісн. Львів. ун-ту. Сер. Біол. — 2003. — 34. — С. 225—230.
445ISSN 0372-4123. Укр. ботан. журн., 2012, т. 69, № 3
6. Полесская О.Г., Каширина Е.И., Алехина Н.Д. Изменение активности антиоксидантных
ферментов в листьях и корнях пшеницы в зависимости от формы и дозы азота в среде //
Физиол. раст. — 2004. — 51, №5. — С. 686—691.
7. Полесская О.Г., Каширина Е.И., Алехина Н.Д. Влияние солевого стресса на антиоксидан т-
ную систему растений в зависимости от условий азотного питания // Физиол. раст. —
2006. — 53, № 2. — С. 207—214.
8. Серегин И.В., Иванов В.Б. Физиологические аспекты токсического действия кадмия и
свинца на высшие растения // Физиол. раст. — 2001. — 48, №4. — С. 606—630.
9. Benton Jones J.Jr. The essential elements // Hydroponics: A practical guide for the soilless gro-
wer / Ed. by J. Benton Jones Jr. — Florida: St Lucie Press, Boca Raton, 1997. — P. 30—32.
10. Cao H., Wang J., Zhang X. Ecotoxicity of cadmium to maize and soybean seedling in black soil //
Chinese Geographical Science. — 2007. — 17 (3). — P. 270—274.
11. Dietz K-J., Baier M., Krämer U. Free radicals and reactive oxygen species as mediators of heavy
me tal toxicity in plants // Heavy metal stress in plants: from molecules to ecosystems / Ed. by
M.N.V. Prasad, J. Hagemeyer. — Berlin: Springer—Verlag, 1999. — P. 73—97.
12. Fecht-Christoffers M.M., Braun H.-P., Lemaitre-Guillier C., Van Dorsselaer A., Horst W.J. Effect of
manganese toxicity on the proteome of the leaf apoplast in cowpea // Plant Physiol. — 2003. —
133. — P. 1935—1946.
13. Fojtova M., Kovařik A. Genotoxic effect of cadmium is associated with apoptotic changes in to-
bacco cells // Plant Cell Environ. — 2000. — 23. — Р. 531—537.
14. Gojon A., Gaymard F. Keeping nitrate in the roots: an unexpected requirement for cadmium to-
lerance in plants // J. Mol. Cell Biol. — 2010. — 2 (6). — Р. 299—301.
15. Hall J.L. Cellular mechanisms for heavy metal detoxification and tolerance // J. Exp. Bot. —
2002. — 53 (366). — Р. 1—11.
16. Hassan M.J., Wang F., Ali S., Zhang G.P. Toxic effect of cadmium on rice as affected by nitrogen
fer tilizer form // Plant Soil. — 2005. — 277. — Р. 359—365.
17. Heath R.L., Packer L. Photooxidation in isolated chloroplasts. I. Kinetics and stoichiometry of
fat ty acid peroxidation // Arch. Biochem. Biophys. — 1968. — 125. — P. 189—198.
18. Hirsch R.E., Lewis B.D., Spalding E.P., Sussman M.R. Role for the AKT1potassium channel in
plant nutrition // Science. — 1998. — 280. — P. 918—921.
19. Kumar G.N., Knowles N.R. Changes in lipid peroxidation and lipolytic and free-radical scavenging
enzyme during aging and sprouting of potato (Solanum tuberosum L.) seed-tubers // Plant Phy-
siol. — 1993. — 102. — Р. 115—124.
20. Metwally A., Safronova V.I., Belimov A.A., Dietz K.J. Genotypic variation of the response to cad-
mium toxicity in Pisum sativum L. // J. Exp. Bot. — 2005. — 56. — Р. 167—178.
21. Mi G., Chen F., Zhang F. Multiple signaling pathways control nitrogen-mediated root elongation
in maize // Plant Signal. Behav. — 2008. — 3 (11). — Р. 1030 — 1032.
22. Nriagu J.O., Pacyna J.M. Quantitative assessment of worldwide contamination of air, water and
soils with trace metals // Nature. — 1988. — 333. — Р. 134—139.
23. Prasad M.N.V., Strzalka K. Impact of heavy metals on photosynthesis // Heavy metal stress in
plants: from molecules to ecosystems / Eds M.N.V. Prasad, J. Hagemeyer. — Berlin: Springer-
Verlag, 1999. — Р. 117—138.
24. Pulido P., Fuwa K., Vallee B. Determination of cadmium in biological materials by atomic ab sor p-
ti on spectrometry // Analytical Biochem. — 1966. — 14. — P. 303—304.
25. Ramalho J.C., Campos P.S., Teixeira M., Nunes M.A. Nitrogen dependent changes in antioxidant
sys tem and in fatty acid composition of chloroplast membranes from Coffea arabica L. plants
submitted to high irradiance // Plant Sci. — 1998. — 135 (2). — P. 115—124.
26. Romero-Puertas M.C., McCarthy I., Sandalio L.M., Palma J.M., Corpas F.J., Gomez M., del Rio L.A.
Cadmium toxicity and oxidative metabolism of pea leaf peroxisomes // Free Rad. Res. — 1999. —
31. — Р. 25—31.
27. Salt D.E., Smith R.D., Raskin I. Phytoremediation // Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. —
1998. — 49. — Р. 643—668.
446 ISSN 0372-4123. Ukr. Botan. Journ., 2012, vol. 69, № 3
28. Sanchez Е., Lopez-Lefebre L.R., Garcia P.C., Rivero R.M., Ruiz J.M., Romero L. Proline me ta-
bolism in response to highest nitrogen dosages in green bean plants (Phaseolus vulgaris L. cv.
Strike) // J. Plant Physiol. — 2001. — 158. — Р. 593—598.
29. Sandalio L.M., Dalurzo H.C., Gomez M., Romero-Puertas M.C., del Río L.A. Cadmium-induced chan ges
in the growth and oxidative metabolism of pea plants // J. Exp. Bot. — 2001. — 52. — Р. 2115—2126.
30. Sanitá di Toppi L., Gabbrielli R. Response to cadmium in higher plants // Environ. Exp. Bot. —
1999. — 41. — Р.105—130.
31. Saneoka H., Moghaieb R.E.A., Premachandra G.S., Fujita K. Nitrogen nutrition and water stress
effects on cell membrane stability and leaf water relations in Agrostis palustris Huds. // Environ.
Exp. Bot. — 2004. — 52. — Р. 131—138.
32. Singh J.P., Bharat Singh, Karwasra S.P.S. Yield and uptake response of lettuce to cadmium as
influenced by nitrogen application // Fertilizer Research. — 1988. — 18 (1). — Р. 49—56.
33. Schützendübel А., Schwanz P., Teichmann T., Gross K., Langenfeld-Heyser R., Godbold D.L., Pol-
le A. Cadmium-induced changes in antioxidative systems, hydrogen peroxide content, and dif-
fe re ntiation in scots pine roots // Plant Physiol. — 2001. — 127. — P. 887—898.
34. Wångstrada H., Eriksson J., Öborna I. Cadmium concentration in winter wheat as affected by
nit rogen fertilization // Eur. J. Agron. — 2007. — 26 (3). — Р. 209—214.
35. Wilkins D.A. The measurement of tolerance to edaphic factors by means of root length // New
Phytol. — 1978. — 80. — P. 623—633.
Рекомендує до друку Надійшла 28.04.2011 р.
О.К. Золотарьова
Е.А. Конотоп1, И. Матушикова2, Л.М. Бацманова1, Н.Ю. Таран1
1 УНЦ «Институт биологии» Киевского национального университета
имени Тараса Шевченко, Украина
2 Институт генетики и биотехнологии растений Словацкой Академии наук,
Нитра, Словацкая Республика
ФОРМИРОВАНИЕ АДАПТИВНОГО ОТВЕТА
GLYCINE MAX (L.) MERR. НА ВЛИЯНИЕ ИОНОВ КАДМИЯ
В ЗАВИСИМОСТИ ОТ УСЛОВИЙ АЗОТНОГО ПИТАНИЯ
Изучалось влияние азотного питания на формирование адаптивного ответа проростков сои
в присутствии ионов кадмия. Оказалась, что внесение азота в низких концентрациях спо-
собствует уменьшению интенсивности процессов ПОЛ под влиянием кадмия. В то же время
фитотоксичность высокой дозы азота в комбинации с кадмием оказалась аддитивной. Тем
не менее, в исследуемых условиях причиной деструктивных процессов, вероятно, является
избыток азота, поскольку накопление кадмия в тканях корней достоверно угнеталось.
К л ю ч е в ы е с л о в а: Glycine max, азотное питание, кадмий, защитные реакции растений.
Ye.O. Konotop1, I. Matushіkova2, L.M. Batsmanova1, N.Yu. Taran1
1 ESC «Institute of Biology», Taras Shevchenko Kyiv National University, Kyiv
2 Institute of Plant Genetics and Biotechnology, Slovak Academy of Science, Nitra
INDUCTION OF ADAPTIVE RESPONSE OF GLYCINE MAX (L.) MERR. UNDER
CADMIUM TREATMENT DEPENDING ON CONDITIONS OF NITROGEN NUTRITION
Impact of nitrogen nutrition on adaptive response of soybean seedlings under presence of cadmium
ions has been studied. Nitrogen application in low concentration showed reduction of lipid peroxi-
dation intensity under cadmium treatment. Phytotoxicity of high concentration of nitrogen com-
bined with cadmium revealed additive effect. However, deleterious processes in root tissues under
the studied conditions might be due to toxic effect of nitrogen excess since cadmium accumulation
in root tissues was significantly depressed.
K e y w o r d s: Glycine max, nitrogen nutrition, cadmium, plant defense reactions.
<<
/ASCII85EncodePages false
/AllowTransparency false
/AutoPositionEPSFiles true
/AutoRotatePages /None
/Binding /Left
/CalGrayProfile (Dot Gain 20%)
/CalRGBProfile (sRGB IEC61966-2.1)
/CalCMYKProfile (U.S. Web Coated \050SWOP\051 v2)
/sRGBProfile (sRGB IEC61966-2.1)
/CannotEmbedFontPolicy /Error
/CompatibilityLevel 1.4
/CompressObjects /Tags
/CompressPages true
/ConvertImagesToIndexed true
/PassThroughJPEGImages true
/CreateJobTicket false
/DefaultRenderingIntent /Default
/DetectBlends true
/DetectCurves 0.0000
/ColorConversionStrategy /CMYK
/DoThumbnails false
/EmbedAllFonts true
/EmbedOpenType false
/ParseICCProfilesInComments true
/EmbedJobOptions true
/DSCReportingLevel 0
/EmitDSCWarnings false
/EndPage -1
/ImageMemory 1048576
/LockDistillerParams false
/MaxSubsetPct 100
/Optimize true
/OPM 1
/ParseDSCComments true
/ParseDSCCommentsForDocInfo true
/PreserveCopyPage true
/PreserveDICMYKValues true
/PreserveEPSInfo true
/PreserveFlatness true
/PreserveHalftoneInfo false
/PreserveOPIComments false
/PreserveOverprintSettings true
/StartPage 1
/SubsetFonts true
/TransferFunctionInfo /Apply
/UCRandBGInfo /Preserve
/UsePrologue false
/ColorSettingsFile ()
/AlwaysEmbed [ true
]
/NeverEmbed [ true
]
/AntiAliasColorImages false
/CropColorImages true
/ColorImageMinResolution 300
/ColorImageMinResolutionPolicy /OK
/DownsampleColorImages true
/ColorImageDownsampleType /Bicubic
/ColorImageResolution 1200
/ColorImageDepth -1
/ColorImageMinDownsampleDepth 1
/ColorImageDownsampleThreshold 1.50000
/EncodeColorImages false
/ColorImageFilter /DCTEncode
/AutoFilterColorImages true
/ColorImageAutoFilterStrategy /JPEG
/ColorACSImageDict <<
/QFactor 0.15
/HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1]
>>
/ColorImageDict <<
/QFactor 0.15
/HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1]
>>
/JPEG2000ColorACSImageDict <<
/TileWidth 256
/TileHeight 256
/Quality 30
>>
/JPEG2000ColorImageDict <<
/TileWidth 256
/TileHeight 256
/Quality 30
>>
/AntiAliasGrayImages false
/CropGrayImages true
/GrayImageMinResolution 300
/GrayImageMinResolutionPolicy /OK
/DownsampleGrayImages true
/GrayImageDownsampleType /Bicubic
/GrayImageResolution 1200
/GrayImageDepth -1
/GrayImageMinDownsampleDepth 2
/GrayImageDownsampleThreshold 1.50000
/EncodeGrayImages false
/GrayImageFilter /DCTEncode
/AutoFilterGrayImages true
/GrayImageAutoFilterStrategy /JPEG
/GrayACSImageDict <<
/QFactor 0.15
/HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1]
>>
/GrayImageDict <<
/QFactor 0.15
/HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1]
>>
/JPEG2000GrayACSImageDict <<
/TileWidth 256
/TileHeight 256
/Quality 30
>>
/JPEG2000GrayImageDict <<
/TileWidth 256
/TileHeight 256
/Quality 30
>>
/AntiAliasMonoImages false
/CropMonoImages true
/MonoImageMinResolution 1200
/MonoImageMinResolutionPolicy /OK
/DownsampleMonoImages true
/MonoImageDownsampleType /Bicubic
/MonoImageResolution 1200
/MonoImageDepth -1
/MonoImageDownsampleThreshold 1.50000
/EncodeMonoImages false
/MonoImageFilter /CCITTFaxEncode
/MonoImageDict <<
/K -1
>>
/AllowPSXObjects false
/CheckCompliance [
/None
]
/PDFX1aCheck false
/PDFX3Check false
/PDFXCompliantPDFOnly false
/PDFXNoTrimBoxError true
/PDFXTrimBoxToMediaBoxOffset [
0.00000
0.00000
0.00000
0.00000
]
/PDFXSetBleedBoxToMediaBox true
/PDFXBleedBoxToTrimBoxOffset [
0.00000
0.00000
0.00000
0.00000
]
/PDFXOutputIntentProfile (None)
/PDFXOutputConditionIdentifier ()
/PDFXOutputCondition ()
/PDFXRegistryName ()
/PDFXTrapped /False
/CreateJDFFile false
/Description <<
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
/BGR <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>
/CHS <FEFF4f7f75288fd94e9b8bbe5b9a521b5efa7684002000410064006f006200650020005000440046002065876863900275284e8e9ad88d2891cf76845370524d53705237300260a853ef4ee54f7f75280020004100630072006f0062006100740020548c002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e003000204ee553ca66f49ad87248672c676562535f00521b5efa768400200050004400460020658768633002>
/CHT <FEFF4f7f752890194e9b8a2d7f6e5efa7acb7684002000410064006f006200650020005000440046002065874ef69069752865bc9ad854c18cea76845370524d5370523786557406300260a853ef4ee54f7f75280020004100630072006f0062006100740020548c002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e003000204ee553ca66f49ad87248672c4f86958b555f5df25efa7acb76840020005000440046002065874ef63002>
/CZE <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>
/DAN <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>
/DEU <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>
/ESP <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>
/ETI <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>
/FRA <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>
/GRE <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>
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
/HRV (Za stvaranje Adobe PDF dokumenata najpogodnijih za visokokvalitetni ispis prije tiskanja koristite ove postavke. Stvoreni PDF dokumenti mogu se otvoriti Acrobat i Adobe Reader 5.0 i kasnijim verzijama.)
/HUN <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>
/ITA <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>
/JPN <FEFF9ad854c18cea306a30d730ea30d730ec30b951fa529b7528002000410064006f0062006500200050004400460020658766f8306e4f5c6210306b4f7f75283057307e305930023053306e8a2d5b9a30674f5c62103055308c305f0020005000440046002030d530a130a430eb306f3001004100630072006f0062006100740020304a30883073002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e003000204ee5964d3067958b304f30533068304c3067304d307e305930023053306e8a2d5b9a306b306f30d530a930f330c8306e57cb30818fbc307f304c5fc59808306730593002>
/KOR <FEFFc7740020c124c815c7440020c0acc6a9d558c5ec0020ace0d488c9c80020c2dcd5d80020c778c1c4c5d00020ac00c7a50020c801d569d55c002000410064006f0062006500200050004400460020bb38c11cb97c0020c791c131d569b2c8b2e4002e0020c774b807ac8c0020c791c131b41c00200050004400460020bb38c11cb2940020004100630072006f0062006100740020bc0f002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e00300020c774c0c1c5d0c11c0020c5f40020c2180020c788c2b5b2c8b2e4002e>
/LTH <FEFF004e006100750064006f006b0069007400650020016100690075006f007300200070006100720061006d006500740072007500730020006e006f0072011700640061006d00690020006b0075007200740069002000410064006f00620065002000500044004600200064006f006b0075006d0065006e007400750073002c0020006b00750072006900650020006c0061006200690061007500730069006100690020007000720069007400610069006b007900740069002000610075006b01610074006f00730020006b006f006b007900620117007300200070006100720065006e006700740069006e00690061006d00200073007000610075007300640069006e0069006d00750069002e0020002000530075006b0075007200740069002000500044004600200064006f006b0075006d0065006e007400610069002000670061006c006900200062016b007400690020006100740069006400610072006f006d00690020004100630072006f006200610074002000690072002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e0030002000610072002000760117006c00650073006e0117006d00690073002000760065007200730069006a006f006d00690073002e>
/LVI <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>
/NLD (Gebruik deze instellingen om Adobe PDF-documenten te maken die zijn geoptimaliseerd voor prepress-afdrukken van hoge kwaliteit. De gemaakte PDF-documenten kunnen worden geopend met Acrobat en Adobe Reader 5.0 en hoger.)
/NOR <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>
/POL <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>
/PTB <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>
/RUM <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>
/RUS <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>
/SKY <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>
/SLV <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>
/SUO <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>
/SVE <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>
/TUR <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>
/ENU (Use these settings to create Adobe PDF documents best suited for high-quality prepress printing. Created PDF documents can be opened with Acrobat and Adobe Reader 5.0 and later.)
/UKR <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>
>>
/Namespace [
(Adobe)
(Common)
(1.0)
]
/OtherNamespaces [
<<
/AsReaderSpreads false
/CropImagesToFrames true
/ErrorControl /WarnAndContinue
/FlattenerIgnoreSpreadOverrides false
/IncludeGuidesGrids false
/IncludeNonPrinting false
/IncludeSlug false
/Namespace [
(Adobe)
(InDesign)
(4.0)
]
/OmitPlacedBitmaps false
/OmitPlacedEPS false
/OmitPlacedPDF false
/SimulateOverprint /Legacy
>>
<<
/AddBleedMarks false
/AddColorBars false
/AddCropMarks false
/AddPageInfo false
/AddRegMarks false
/ConvertColors /ConvertToCMYK
/DestinationProfileName ()
/DestinationProfileSelector /DocumentCMYK
/Downsample16BitImages true
/FlattenerPreset <<
/PresetSelector /MediumResolution
>>
/FormElements false
/GenerateStructure false
/IncludeBookmarks false
/IncludeHyperlinks false
/IncludeInteractive false
/IncludeLayers false
/IncludeProfiles false
/MultimediaHandling /UseObjectSettings
/Namespace [
(Adobe)
(CreativeSuite)
(2.0)
]
/PDFXOutputIntentProfileSelector /DocumentCMYK
/PreserveEditing true
/UntaggedCMYKHandling /LeaveUntagged
/UntaggedRGBHandling /UseDocumentProfile
/UseDocumentBleed false
>>
]
>> setdistillerparams
<<
/HWResolution [2400 2400]
/PageSize [612.000 792.000]
>> setpagedevice
|