Генетична гетерогенність рідкісного ендемічного виду Ungernia victоris (Amaryllidaceae): RAPD -аналіз
Исследована генетическая гетерогенность ценного лекарственного растения — эндемика Памиро-Алая Ungernіa vіctorіs Vved. ex Artjushenko (Amaryllіdaceae). Методом RAPD-ПЦР проанализировано ДНК шести растений из природной популяции, расположенной на южном склоне Гиссарского хребта (Таджикистан). В целом...
Збережено в:
| Дата: | 2008 |
|---|---|
| Автори: | , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Ukrainian |
| Опубліковано: |
Інститут ботаніки ім. М.Г. Холодного НАН України
2008
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/9796 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Генетична гетерогенність рідкісного ендемічного виду Ungernia victоris (Amaryllidaceae): RAPD -аналіз / О.М. Бублик, І.О. Андрєєв, К.В. Спірідонова, В.І. Музика, І.В. Колоніна, В.А. Кунах // Укр. ботан. журн. — 2008. — Т. 65, № 3. — С. 445-452. — Бібліогр.: 17 назв. — укр. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-9796 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-97962025-02-23T19:43:57Z Генетична гетерогенність рідкісного ендемічного виду Ungernia victоris (Amaryllidaceae): RAPD -аналіз Генетическая гетерогенность редкого эндемичного вида Ungernia victоris (Amaryllidaceae): RAPD -анализ Genetic heterogeneity of the rare endemic species Ungernia victоris (Amaryllidaceae): RAPD analysis Бублик, О.М. Андрєєв, I.О. Спірідонова, К.В. Музика, В.I. Колоніна, I.В. Кунах, В.А. Фізіологія, біохімія, клітинна та молекулярна біологія рослин Исследована генетическая гетерогенность ценного лекарственного растения — эндемика Памиро-Алая Ungernіa vіctorіs Vved. ex Artjushenko (Amaryllіdaceae). Методом RAPD-ПЦР проанализировано ДНК шести растений из природной популяции, расположенной на южном склоне Гиссарского хребта (Таджикистан). В целом учтено 288 фрагментов, амплифицированных с использованием 24 праймеров. Определены основные популяционно-генетические параметры: доля полиморфных локусов составила 72,6 %, эффективное число аллелей на локус (Ае) — 1,453 ± 0,355; генное разнообразие Нея (ожидаемая гетерозиготность Hе) — 0,267 ± 0,186; индекс Шеннона (S) — 0,399 ± 0,264. Среднее значение генетических расстояний по Нею (DN) составляет 39,8 %. Не выявлено отличий между луковицами, которые образовались на одном донышке в результате вегетативного размножения. Предполагается, что высокий уровень вариабельности U. vіctorіs может быть связан с особенностями биологии вида – многолетнего растения с преобладающим размножением путем апомиксиса, продолжительным репродуктивным периодом, значительной мобильностью семян. Studies on genetic heterogeneity of the valuable medicinal plant endemic to the Pamiro-Alai Mountains, Ungernia victoris Vved. ex Artjushenko (Amaryllidaceae) have been carried out. Six plants derived from a natural population located at the southern slope of the Gissar Ridge (Tajikistan) were assayed though RAPD-PCR. Total of 288 amplified bands were scored from 24 RAPD primers. Major populational and genetic parameters were measured: the percentage of polymorphic loci was 72.6 %, the effective number of alleles per locus (Ac) — 1.453 ± 0.355; Nei’s gene diversity (expected heterozygosity Hc) — 0.267 ± 0.186; Shannon’s index (s) — 0.399 ± 0.264. Average genetic distances according to Nei (DN) was 39.8 %. Bulbs arising from the same stem as a result of vegetative propagation failed to display any differences. High level of variability is suggested to reflect the peculiarities of the species, which is a long-lived perennial distinguished by preferential propagation through apomixis, long reproductive period, and high seed dispersal capacity. 2008 Article Генетична гетерогенність рідкісного ендемічного виду Ungernia victоris (Amaryllidaceae): RAPD -аналіз / О.М. Бублик, І.О. Андрєєв, К.В. Спірідонова, В.І. Музика, І.В. Колоніна, В.А. Кунах // Укр. ботан. журн. — 2008. — Т. 65, № 3. — С. 445-452. — Бібліогр.: 17 назв. — укр. 0372-4123 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/9796 uk application/pdf Інститут ботаніки ім. М.Г. Холодного НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Ukrainian |
| topic |
Фізіологія, біохімія, клітинна та молекулярна біологія рослин Фізіологія, біохімія, клітинна та молекулярна біологія рослин |
| spellingShingle |
Фізіологія, біохімія, клітинна та молекулярна біологія рослин Фізіологія, біохімія, клітинна та молекулярна біологія рослин Бублик, О.М. Андрєєв, I.О. Спірідонова, К.В. Музика, В.I. Колоніна, I.В. Кунах, В.А. Генетична гетерогенність рідкісного ендемічного виду Ungernia victоris (Amaryllidaceae): RAPD -аналіз |
| description |
Исследована генетическая гетерогенность ценного лекарственного растения — эндемика Памиро-Алая Ungernіa vіctorіs Vved. ex Artjushenko (Amaryllіdaceae). Методом RAPD-ПЦР проанализировано ДНК шести растений из природной популяции, расположенной на южном склоне Гиссарского хребта (Таджикистан). В целом учтено 288 фрагментов, амплифицированных с использованием 24 праймеров. Определены основные популяционно-генетические параметры: доля полиморфных локусов составила 72,6 %, эффективное число аллелей на локус (Ае) — 1,453 ± 0,355; генное разнообразие Нея (ожидаемая гетерозиготность Hе) — 0,267 ± 0,186; индекс Шеннона (S) — 0,399 ± 0,264. Среднее значение генетических расстояний по Нею (DN) составляет 39,8 %. Не выявлено отличий между луковицами, которые образовались на одном донышке в результате вегетативного размножения. Предполагается, что высокий уровень вариабельности U. vіctorіs может быть связан с особенностями биологии вида – многолетнего растения с преобладающим размножением путем апомиксиса,
продолжительным репродуктивным периодом, значительной мобильностью семян. |
| format |
Article |
| author |
Бублик, О.М. Андрєєв, I.О. Спірідонова, К.В. Музика, В.I. Колоніна, I.В. Кунах, В.А. |
| author_facet |
Бублик, О.М. Андрєєв, I.О. Спірідонова, К.В. Музика, В.I. Колоніна, I.В. Кунах, В.А. |
| author_sort |
Бублик, О.М. |
| title |
Генетична гетерогенність рідкісного ендемічного виду Ungernia victоris (Amaryllidaceae): RAPD -аналіз |
| title_short |
Генетична гетерогенність рідкісного ендемічного виду Ungernia victоris (Amaryllidaceae): RAPD -аналіз |
| title_full |
Генетична гетерогенність рідкісного ендемічного виду Ungernia victоris (Amaryllidaceae): RAPD -аналіз |
| title_fullStr |
Генетична гетерогенність рідкісного ендемічного виду Ungernia victоris (Amaryllidaceae): RAPD -аналіз |
| title_full_unstemmed |
Генетична гетерогенність рідкісного ендемічного виду Ungernia victоris (Amaryllidaceae): RAPD -аналіз |
| title_sort |
генетична гетерогенність рідкісного ендемічного виду ungernia victоris (amaryllidaceae): rapd -аналіз |
| publisher |
Інститут ботаніки ім. М.Г. Холодного НАН України |
| publishDate |
2008 |
| topic_facet |
Фізіологія, біохімія, клітинна та молекулярна біологія рослин |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/9796 |
| citation_txt |
Генетична гетерогенність рідкісного ендемічного виду Ungernia victоris (Amaryllidaceae): RAPD -аналіз / О.М. Бублик, І.О. Андрєєв, К.В. Спірідонова, В.І. Музика, І.В. Колоніна, В.А. Кунах // Укр. ботан. журн. — 2008. — Т. 65, № 3. — С. 445-452. — Бібліогр.: 17 назв. — укр. |
| work_keys_str_mv |
AT bublikom genetičnageterogennístʹrídkísnogoendemíčnogoviduungerniavictorisamaryllidaceaerapdanalíz AT andrêêvio genetičnageterogennístʹrídkísnogoendemíčnogoviduungerniavictorisamaryllidaceaerapdanalíz AT spírídonovakv genetičnageterogennístʹrídkísnogoendemíčnogoviduungerniavictorisamaryllidaceaerapdanalíz AT muzikavi genetičnageterogennístʹrídkísnogoendemíčnogoviduungerniavictorisamaryllidaceaerapdanalíz AT kolonínaiv genetičnageterogennístʹrídkísnogoendemíčnogoviduungerniavictorisamaryllidaceaerapdanalíz AT kunahva genetičnageterogennístʹrídkísnogoendemíčnogoviduungerniavictorisamaryllidaceaerapdanalíz AT bublikom genetičeskaâgeterogennostʹredkogoéndemičnogovidaungerniavictorisamaryllidaceaerapdanaliz AT andrêêvio genetičeskaâgeterogennostʹredkogoéndemičnogovidaungerniavictorisamaryllidaceaerapdanaliz AT spírídonovakv genetičeskaâgeterogennostʹredkogoéndemičnogovidaungerniavictorisamaryllidaceaerapdanaliz AT muzikavi genetičeskaâgeterogennostʹredkogoéndemičnogovidaungerniavictorisamaryllidaceaerapdanaliz AT kolonínaiv genetičeskaâgeterogennostʹredkogoéndemičnogovidaungerniavictorisamaryllidaceaerapdanaliz AT kunahva genetičeskaâgeterogennostʹredkogoéndemičnogovidaungerniavictorisamaryllidaceaerapdanaliz AT bublikom geneticheterogeneityoftherareendemicspeciesungerniavictorisamaryllidaceaerapdanalysis AT andrêêvio geneticheterogeneityoftherareendemicspeciesungerniavictorisamaryllidaceaerapdanalysis AT spírídonovakv geneticheterogeneityoftherareendemicspeciesungerniavictorisamaryllidaceaerapdanalysis AT muzikavi geneticheterogeneityoftherareendemicspeciesungerniavictorisamaryllidaceaerapdanalysis AT kolonínaiv geneticheterogeneityoftherareendemicspeciesungerniavictorisamaryllidaceaerapdanalysis AT kunahva geneticheterogeneityoftherareendemicspeciesungerniavictorisamaryllidaceaerapdanalysis |
| first_indexed |
2025-11-24T18:14:14Z |
| last_indexed |
2025-11-24T18:14:14Z |
| _version_ |
1849696510019633152 |
| fulltext |
ISSN 0372-4123. Óêð. áîòàí. æóðí., 2008, ò. 65, ¹ 3 445
Î.Ì. ÁÓÁËÈÊ1, ².Î. ÀÍÄЪªÂ1,
Ê.Â. ÑÏÈÐÈÄÎÍÎÂÀ1, Â.². ÌÓÇÈÊÀ2,
².Â. ÊÎËÎͲÍÀ2, Â.À. ÊÓÍÀÕ1
1 ²íñòèòóò ìîëåêóëÿðíî¿ á³îëî㳿 ³ ãåíåòèêè ÍÀÍ Óêðà¿íè
âóë. àêàä. Çàáîëîòíîãî, 150, ì. Êè¿â, 03143, Óêðà¿íà
2 ÒΠ«Óíãåðí³ÿ», ïë. Ñóõàð³âñüêà Â., 16/18, áóäîâà 1, îô. 89,
ì. Ìîñêâà, 07045, Ðîñ³ÿ
kunakh@³mbg.org.ua
ÃÅÍÅÒÈ×ÍÀ ÃÅÒÅÐÎÃÅÍͲÑÒÜ
вÄʲÑÍÎÃÎ ÅÍÄÅ̲×ÍÎÃÎ ÂÈÄÓ
UNGERN²A V²CTOR²S (AMARYLL²DACEAE):
RAPD-ÀÍÀ˲Ç
Ê ë þ ÷ î â ³ ñ ë î â à: Ungern³a v³ctor³s, Amaryll³daceae,
RAPD-ÏËÐ, ãåíåòè÷íèé ïîë³ìîðô³çì, âíóòð³øíüîïîïóëÿö³é-
íà âàð³àáåëüí³ñòü, åíäåì³÷í³ âèäè
Âñòóï
Óíãåðí³ÿ ³êòîðà — Ungern³a v³ctor³s Vved. ex Artjushenko — öèáóëèííèé áàãà-
òîð³÷íèê ³ç ðîäèíè Amaryll³daceae ç êëàñó îäíîäîëüíèõ (Liliopsida =
Monocotyledonae), ð³äê³ñíèé åíäåì³÷íèé ñåðåäíüîàç³éñüêèé âèä, çàíåñåíèé äî
×åðâîíèõ êíèã Òàäæèêèñòàíó [2] ³ Óçáåêèñòàíó [3], ÿêèé òðàïëÿºòüñÿ ëèøå
íà óññàðñüêîìó õðåáò³ òà éîãî ï³âäåííèõ â³äðîãàõ. Ö³íí³ñòü äëÿ ìåäèöèíè
ñòàíîâëÿòü ³çîõ³íîë³íîâ³ àëêàëî¿äè U. victoris. Àëêàëî¿ä ãàëàíò àì³í — ³íã³á³òîð
õîë³íåñòåðàçè — çàñòîñîâóþòü ó ðàç³ ðóõîâèõ ³ ñåíñîðíèõ ïîðóøåíü, ïîâ’ÿçà-
íèõ ³ç íåâðèòàìè, ðàäèêóë³òàìè, òà ó â³äíîâíîìó ïåð³îä³ ãîñòðîãî äèòÿ÷îãî
ïîë³î쳺ë³òó, ë³êîðèí — äëÿ ë³êóâàííÿ ãîñòðèõ ³ õðîí³÷íèõ áðîíõ³ò³â ³ áðîí-
õîåêòàòè÷íèõ çàõâîðþâàíü. Êð³ì òîãî, U. victoris ì³ñòèòü á³îëîã³÷íî àêòèâí³
ïîë³ñàõàðèäè, ÿê³ âèêîðèñòîâóþòü ó ðàç³ òàêèõ çàõâîðþâàíü, ÿê ïîðóøåííÿ
îáì³íó ðå÷îâèí, ñîëüîâîãî ðåæèìó, ïðîìåíåâà õâîðîáà [5].
Íåçâàæàþ÷è íà òå, ùî öþ ð³äê³ñíó ðîñëèíó âæå òðèâàëèé ÷àñ âèêîðèñ-
òîâóþòü ó ìåäèöèí³, íå áóëî ïðîâåäåíî æîäíèõ ïîïóëÿö³éíî-ãåíåòè÷íèõ
äîñë³äæåíü âèäó ó ïðèðîä³. Ìè âèâ÷àëè ãåíåòè÷íèé ïîë³ìîðô³çì ðîñëèí
U. victoris ç ³çîëüîâàíî¿ ïðèðîäíî¿ ïîïóëÿö³¿. Äëÿ âèð³øåííÿ öüîãî çàâäàííÿ
çàñòîñóâàëè ìåòîä ïîë³ìåðàçíî¿ ëàíöþãîâî¿ ðåàêö³¿ (ÏËÐ) ç âèêîðèñòàííÿì
äîâ³ëüíèõ ïðàéìåð³â, àáî RAPD-àíàë³ç, ÿêèé îñòàíí³ì ÷àñîì øèðîêî ïðàê-
òèêóþòü, äîñë³äæóþ÷è ãåíåòè÷íó ì³íëèâ³ñòü ð³äê³ñíèõ ³ åíäåì³÷íèõ âèä³â. Öåé
ìåòîä ìຠíèçêó ïåðåâàã, çîêðåìà, äîïîìàãຠâèÿâëÿòè ïîë³ìîðô³çì ãåíåòè÷-
íèõ ëîêóñ³â, ðîçñ³ÿíèõ ïî âñüîìó ãåíîìó, ³ çàáåçïå÷óº âåëèêó ê³ëüê³ñòü ìàð-
êåð³â. Ââàæàºòüñÿ, ùî RAPD ïåðåâàæíî â³äîáðàæຠì³íëèâ³ñòü íåêîäóþ÷èõ
ä³ëÿíîê ÄÍÊ ³ ÷óòëèâèé äî áàãàòüîõ òèï³â ìóòàö³é. Êð³ì òîãî, ìåòîä íå ïî-
© Î.Ì. ÁÓÁËÈÊ, ².Î. ÀÍÄЪªÂ, Ê.Â. ÑÏÈÐÈÄÎÍÎÂÀ, Â.². ÌÓÇÈÊÀ, ².Â. ÊÎËÎͲÍÀ,
Â.À. ÊÓÍÀÕ, 2008
ISSN 0372-4123. Ukr. Botan. Journ., 2008, vol. 65, ¹ 3446
òðåáóº ³íôîðìàö³¿ ïðî ïîñë³äîâí³ñòü ÄÍÊ äîñë³äæóâàíîãî âèäó, çàâäÿêè âè-
ñîê³é ÷óòëèâîñò³ äëÿ àíàë³çó äîñòàòíüî ìàëèõ ê³ëüêîñòåé ÄÍÊ, ùî ìຠîñîá-
ëèâå çíà÷åííÿ â ðàç³ ðîáîòè ç ð³äê³ñíèìè ðîñëèíàìè.
Ìàòåð³àëè ³ ìåòîäè äîñë³äæåíü
Ìàòåð³àëîì äëÿ äîñë³äæåííÿ áóëè öèáóëèíè ø³ñòüîõ äîâ³ëüíî îáðàíèõ ðîñëèí
U. v³ctor³s â³êîì áëèçüêî 40—50 ðîê³â ç ãåîãðàô³÷íî ³çîëüîâàíî¿ ïðèðîäíî¿ ïîïó-
ëÿö³¿, ðîçòàøîâàíî¿ íà âèñîò³ áëèçüêî 1100 ì íàä ð. ì., íà ï³âäåííîìó ñõèë³
óññàðñüêîãî õðåáòà (Òàäæèêèñòàí). Ïîïóëÿö³ÿ îáìåæåíà ã³ðñüêîþ ãðÿäîþ ³ äâîìà
ð³÷êàìè ³ çàéìຠìàéæå 5 ãà. Äîñë³äæåí³ ðîñëèíè ç³áðàí³ ç ïëîù³ áëèçüêî 400 ì2.
Ó äîñë³ä³ ¿ì íàäàíî íîìåðè â³ä 1 äî 6, îäíà îñîáèíà ñêëàäàëàñÿ ³ç äâîõ öèáóëèí,
ùî ðîñëè íà ñï³ëüíîìó äåíö³, — ¿õ áóëî ïîçíà÷åíî ÿê 5à ³ 5b.
dz ñâ³æèõ ëóñîê öèáóëèí âèä³ëÿëè ÿäðà ³ ï³ñëÿ ¿õ ïîïåðåäíüîãî î÷èùåí-
íÿ åêñòðàãóâàëè ÄÍÊ, âèêîðèñòîâóþ÷è áóôåð ç ÄÑÍ ³ ïðîòå³íàçîþ Ê [1].
ßê³ñòü ³ êîíöåíòðàö³þ îòðèìàíî¿ ÄÍÊ îö³íþâàëè çà äîïîìîãîþ ãåëü-åëåêò-
ðîôîðåçó, ïîð³âíþþ÷è çà ³íòåíñèâí³ñòþ ôëóîðåñöåíö³¿ êîìïëåêñ³â ÄÍÊ —
áðîìèñòèé åòèä³é â ÓÔ-ïðîìåíÿõ ³ç ÄÍÊ ôàãà λ â³äîìî¿ êîíöåíòðàö³¿ [4].
Ïîë³ìåðàçíó ëàíöþãîâó ðåàêö³þ ïðîâîäèëè â òåðìîöèêëåð³ Òåðöèê ÌÑ2
(«Á³îòåõíîëîã³ÿ», Ðîñ³ÿ). Âèêîðèñòàíî 24 äåñÿòè÷ëåííèõ ïðàéìåðè äîâ³ëüíî¿
ïîñë³äîâíîñò³, õàðàêòåðèñòèêè ÿêèõ íàâåäåíî â òàáë. 1. Ðåàêö³éíà ñóì³ø äëÿ
ïðîâåäåííÿ ÏËÐ îá’ºìîì 20 ìêë ì³ñòèëà: 20 íã ÄÍÊ, 0,2 ìÌ dNTP, 1,25 U
Òàáëèöÿ 1. Õàðàêòåðèñòèêà RAPD-ïðàéìåð³â, âèêîðèñòàíèõ äëÿ àíàë³çó ãåíåòè÷íîãî
ïîë³ìîðô³çìó ðîñëèí U. victoris
Ïðàéìåð Íóêëåîòèäíà Ïðàéìåð Íóêëåîòèäíà
ïîñë³äîâí³ñòü ïîñë³äîâí³ñòü
(5’—3’) (5’—3’)
A01 CAGGCCCTTC 11 9 A17 GACCGCTTGT 13 9
A02 TGCCGAGCTG 6 1 A19 CAAACGTCGG 27 25
A03 AGTCAGCCAC 4 0 A20 GTTGCGATCC 21 19
A04 AATCGGGCTG 12 10 B01 GTTTCGCTCC 19 13
A05 AGGGGTCTTG 3 0 B02 TGATCCCTGG 11 7
A07 GAAACGGGTG 7 1 B03 CATCCCCCTG 6 4
A08 GTGACGTAGG 19 17 B05 TGCGCCCTTC 13 11
A09 GGGTAACGCC 10 7 B06 TGCTCTGCCC 4 0
A10 GTGATCGCAG 12 9 B07 GGTGACGCAG 13 11
A11 CAATCGCCGT 19 15 B08 GTCCACACGG 15 13
A12 TCGGCGATAG 3 0 B10 CTGCTGGGAC 13 5
A14 TCTGTGCTGG 8 5
Ñóìà
øò. 288 209
A16 AGCCAGCGAA 19 18 % 100 72,6
Â
ðà
õî
âà
í
î
àì
ï
ë³
ê
îí
³â
,
ø
ò.
Ï
î
ë³
ì
î
ðô
í
è
õ
àì
ï
ë³
ê
îí
³â
,
ø
ò.
Â
ðà
õî
âà
í
î
àì
ï
ë³
ê
îí
³â
,
ø
ò.
Ï
î
ë³
ì
î
ðô
í
è
õ
àì
ï
ë³
ê
îí
³â
,
ø
ò.
ISSN 0372-4123. Óêð. áîòàí. æóðí., 2008, ò. 65, ¹ 3 447
Taq-ïîë³ìåðàçè, 0,6 ìêÌ ïðàéìåðà, 15 ìÌ Tr³sCl, pÍ 8,3, 75 ìÌ KCl, 0,06 ìã/
ìë BSA, 2 ìÌ MgCl2. Íà ðåàêö³éíó ñóì³ø íàøàðîâóâàëè 15 ìêë ì³íåðàëüíî¿
î볿. ßê íåãàòèâíèé êîíòðîëü âèêîðèñòîâóâàëè ñòàíäàðòíó ðåàêö³éíó ñóì³ø
áåç ÄÍÊ. Àìïë³ô³êàö³þ ïðîâîäèëè â òàêîìó òåìïåðàòóðíîìó ðåæèì³: 95 °Ñ —
2 õâ., 5 • (94 °Ñ — 30 ñ, tã³áð — 30 ñ, 72 °Ñ — 1 õâ.), 35 • (94 °Ñ — 20 ñ, tã³áð — 20 ñ,
72 °Ñ — 40 ñ), 72 °Ñ — 2 õâ. 30 ñ. Òåìïåðàòóðà ã³áðèäèçàö³¿ (tã³áð) äëÿ ïðàéìåð³â
A14, A16 ³ A17 ñòàíîâèëà 38 °Ñ, äëÿ ³íøèõ — 36 °Ñ.
Äîñë³ä ïðîâîäèëè ùîíàéìåíøå ó äâîõ ïîâòîðíîñòÿõ. Ïðîäóêòè àìïë³ô³-
êàö³¿ ðîçä³ëÿëè åëåêòðîôîðåçîì (3—4 Â/ñì) ó 1,7 %-ìó àãàðîçíîìó ãåë³ ç
0,5 ìêã/ìë áðîìèñòîãî åòèä³þ, â 1 × ÒÂÅ áóôåð³, ôîòîãðàôóâàëè ó ïðîíèêà-
þ÷îìó ÓÔ ñâ³òë³ öèôðîâèì ôîòîàïàðàòîì ç âèêîðèñòàííÿì ô³ëüòðà «Î-2,8×».
Äëÿ âèçíà÷åííÿ ðîçì³ðó ôðàãìåíò³â çàñòîñóâàëè ÄÍÊ-ìàðêåð «100 bp + 1,5 Êb»
(«ÑèáÝíçèì», Ðîñ³ÿ).
Ïðîâîäÿ÷è àíàë³ç, ïðèïóñêàëè, ùî êîæíèé RAPD-àìïë³êîí â³äïîâ³äàº
³íäèâ³äóàëüíîìó ãåíîìíîìó ëîêóñó, êîòðèé ³ñíóº â ãåíîì³ ó âèãëÿä³ îäíîãî
³ç äâîõ àëåëåé: äîì³íàíòíîãî (1) — àìïë³êîí ïðèñóòí³é ÷è ðåöåñèâíîãî (0) —
â³äñóòí³é. Çà ðåçóëüòàòàìè îö³íêè åëåêòðîôîðåãðàì áóäóâàëè á³íàðíó ìàòðè-
öþ, âðàõîâóâàëè ò³ëüêè äîáðå ïîì³òí³ é â³äòâîðþâàí³ ôðàãìåíòè. Çà äîïîìî-
ãîþ ïðîãðàìè PopGen [17] íà ï³äñòàâ³ ïîáóäîâàíî¿ ìàòðèö³ âèçíà÷àëè òàê³
ãåíåòè÷í³ ïàðàìåòðè çà Íåºì [12]: â³äñîòîê ïîë³ìîðôíèõ ëîêóñ³â (Ð), ñåðåäíº
÷èñëî àëåëåé íà ëîêóñ (À), åôåêòèâíå ÷èñëî àëåëåé íà ëîêóñ (Àå), ãåííó ð³çíî-
ìàí³òí³ñòü Íåÿ (î÷³êóâàíà ãåòåðîçèãîòí³ñòü He) òà ³íäåêñ Øåííîíà (S); çà
ìåòîäîì Íåÿ [11] ïîáóäîâàíà ìàòðèöÿ ãåíåòè÷íèõ â³äñòàíåé (DN).
Ðåçóëüòàòè äîñë³äæåíü òà ¿õ îáãîâîðåííÿ
гâåíü âíóòð³øíüîïîïóëÿö³éíî¿ âàð³àáåëüíîñò³ U. victoris äîñë³äæóâàëè çà RAPD-
àíàë³çîì ãåíîì³â øåñòè ðîñëèí ç ïðèðîäíî¿ ïîïóëÿö³¿. Äëÿ îö³íêè ïîë³ìîðô³çìó
âèêîðèñòàíî 24 äåêàíóêëåîòèäíèõ ïðàéìåðè, ÿê³ çà óìîâ ÏËÐ çàáåçïå÷óâàëè
óòâîðåííÿ ÷³òêèõ, â³äòâîðþâàíèõ ïðîäóêò³â. Òèïîâ³ RAPD-ñïåêòðè ðîñëèí
U. victoris íàâåäåí³ íà ðèñóíêó. Ó á³ëüøîñò³ ñïåêòð³â íà ôîí³ ÷èñëåííèõ, ìåíø
³íòåíñèâíèõ ïîë³ìîðôíèõ ôðàãìåíò³â ñïîñòåð³ãàëè îäèí—òðè ÿñêðàâ³ ìîíî-
ìîðôí³ ôðàãìåíòè, âëàñòèâ³ âñ³ì ðîñëèíàì. Êîæíèé ç äîñë³äæåíèõ îá’ºêò³â, çà
âèíÿòêîì äâîõ öèáóëèí ç³ ñï³ëüíèì äåíöåì, ìàâ ³íäèâ³äóàëüíèé RAPD-ôåíî-
òèï. ̄ õ ïîë³ìîðô³çì âèÿâëÿâñÿ ÿê ó â³äì³ííîñòÿõ, ïîâ’ÿçàíèõ ç íàÿâí³ñòþ îêðå-
ìèõ àìïë³êîí³â, òàê ³ ó âàð³àö³ÿõ ¿õ ê³ëüê³ñíî¿ ïðåäñòàâëåíîñò³ ó ñïåêòðàõ.
Ïîð³âíþþ÷è ñïåêòðè, ê³ëüê³ñí³ âàð³àö³¿ âðàõîâóâàëè ó ðàç³ íå ìåíøå 3—4-êðàò-
íî¿ ð³çíèö³ â ³íòåíñèâíîñò³ ôëóîðåñöåíö³¿ ñìóã íà åëåêòðîôîðåãðàìàõ.
Çàñòîñîâàí³ ïðàéìåðè ³í³ö³þâàëè ñèíòåç 288 àìïë³êîí³â ðîçì³ðîì 230—
1920 ï.í., ó ê³ëüêîñò³ 4—27 íà ïðàéìåð (òàáë. 1) (ñåðåäíº ÷èñëî ôðàãìåíò³â
íà ïðàéìåð — 12). Çàëåæíî â³ä ïðàéìåðà ê³ëüê³ñòü ïîë³ìîðôíèõ àìïë³êîí³â
âàð³þâàëà â³ä 0 (äëÿ òðüîõ ïðàéìåð³â) äî 17 (ïðàéìåð À19), ê³ëüê³ñòü ìîíî-
ìîðôíèõ àìïë³êîí³â — â³ä 2 äî 8 (òàáë. 1). Äëÿ âñ³º¿ âèá³ðêè ïðàéìåð³â â³äñîòîê
ïîë³ìîðôíèõ ëîêóñ³â (Ð) ñòàíîâèâ 72,6 % (209). Ç íèõ 81 àìïë³êîí (28,1 %
ISSN 0372-4123. Ukr. Botan. Journ., 2008, vol. 65, ¹ 3448
â³ä çàãàëüíîãî ÷èñëà) — ³íäèâ³äóàëüí³ (òðàïëÿëèñÿ ó RAPD-ïðîô³ë³ ëèøå îäí³º¿
ç ðîñëèí), 54 (18,8 %) — â³äçíà÷åí³ â RAPD-ïðîô³ëÿõ äâîõ ðîñëèí, 28 (9,7 %) —
òðüîõ ðîñëèí, 24 (8,3 %) — ÷îòèðüîõ, 22 (7,6 %) — ï’ÿòè ðîñëèí. 79 àìïë³-
êîí³â (27,4 %) õàðàêòåðí³ äëÿ âñ³º¿ âèá³ðêè îá’ºêò³â, òîáòî º ìîíîìîðôíèìè.
3 209 ïîë³ìîðôíèõ ëîêóñ³â 43 (20,6 %) áóëè âàð³àáåëüíèìè çà êîï³éí³ñòþ.
Çàóâàæèìî, ùî ëèøå òðè ç ïîë³ìîðôíèõ àìïë³êîí³â ìîæíà áóëî â³äíåñòè äî
ãðóïè «ìàæîðíèõ» ôðàãìåíò³â (çàãàëüíà ê³ëüê³ñòü ÿêèõ äîð³âíþâàëà 51), à
á³ëüø³ñòü ïîë³ìîðôíèõ àìïë³êîí³â ìàëà íèæ÷ó ³íòåíñèâí³ñòü ôëóîðåñöåíö³¿
íà åëåêòðîôîðåãðàìàõ.
Îñíîâí³ ïîêàçíèêè ãåíåòè÷íîãî ïîë³ìîðô³çìó äëÿ äîñë³äæåíî¿ âèá³ðêè
ðîñëèí, ðîçðàõîâàí³ íà ï³äñòàâ³ àëåëüíèõ ÷àñòîò, ñòàíîâèëè: ñåðåäíº ÷èñëî
àëåëåé íà ëîêóñ (À) 1,726 ± 0,447, åôåêòèâíå ÷èñëî àëåëåé íà ëîêóñ (Àå) 1,453 ±
0,355, ãåííà ð³çíîìàí³òí³ñòü Íåÿ (î÷³êóâàíà ãåòåðîçèãîòí³ñòü He) 0,267 ± 0,186,
³íäåêñ Øåííîíà (S) 0,399 ± 0,264. Ãåíåòè÷í³ â³äñòàí³ çà Íåºì (DN) ì³æ ³íòàê-
òíèìè ðîñëèíàìè âàð³þâàëè â ä³àïàçîí³ 26,9—47,0 %, ñåðåäíº çíà÷åííÿ öüî-
ãî ïîêàçíèêà äîð³âíþâàëî 39,8 % (òàáë. 2).
Ðåçóëüòàòè ïðîâåäåíèõ äîñë³äæåíü ñâ³ä÷àòü ïðî âèñîêó âíóòð³øíüîïîïó-
ëÿö³éíó ãåòåðîãåíí³ñòü U. victoris. Óçàãàëüíåííÿ ë³òåðàòóðíèõ äàíèõ ç äîñë³-
äæåííÿ ãåíåòè÷íî¿ ì³íëèâîñò³ ðîñëèí ìåòîäàìè ³çîôåðìåíòíîãî àíàë³çó [9]
òà RAPD-ÏËÐ [15] óìîæëèâèëî âèñíîâîê ùîäî î÷³êóâàíîãî ð³âíÿ ì³íëèâîñò³
âèä³â ç ïåâíèìè îñîáëèâîñòÿìè á³îëî㳿 (òðèâàë³ñòü æèòòºâîãî öèêëó, ñïîñ³á
ðîçìíîæåííÿ, ãåîãðàô³÷íå ïîøèðåííÿ òîùî). Äîñë³äæåíà âèá³ðêà U. victoris
RAPD-àíàë³ç ãåíåòè÷íî¿ ãåòåðîãåííîñò³ ðîñëèí U. victoris: Ì — ìàðêåð ìîëåêóëÿðíî¿ ìàñè
«100 bp Ladder», 1—6 — íîìåðè äîñë³äæåíèõ ðîñëèí, íàçâè âèêîðèñòàíèõ ïðàéìåð³â âêà-
çàíî ï³ä åëåêòðîôîðåãðàìàìè
RAPD-analysis of the U. victoris genetic heterogeneity: M — molecular mass marker «100 bp
Ladder», 1—6 — numbers of the studied plants, names of the primers used are listed below the
electrophoregrams
ISSN 0372-4123. Óêð. áîòàí. æóðí., 2008, ò. 65, ¹ 3 449
çà êðèòåð³ºì âíóòð³øíüîïîïóëÿö³éíî¿ ãåííî¿ ð³çíîìàí³òíîñò³, îá÷èñëåíèì íà
ï³äñòàâ³ RAPD-ìàðêåð³â, ìàëà âèùèé ð³âåíü ì³íëèâîñò³, í³æ ³íø³ âèäè ðîñ-
ëèí ç àíàëîã³÷íèìè õàðàêòåðèñòèêàìè. Âèíèêຠçàïèòàííÿ: ÷èì ìîæå îáó-
ìîâëþâàòèñÿ òàêèé ï³äâèùåíèé ð³âåíü ãåíåòè÷íî¿ ãåòåðîãåííîñò³?
Ungernia victoris ìຠâóçüêèé àðåàë, ðîñòå â àðèäí³é çîí³ ç³ ñïåêîòíèì, íà-
ï³âïóñòåëüíèì, ð³çêî êîíòèíåíòàëüíèì êë³ìàòîì. Òðàïëÿºòüñÿ íà ã³ðñüêèõ
ñõèëàõ, âîäîä³ëàõ ³ â óùåëèíàõ íà âèñîò³ â³ä 800 äî 2700 ì íàä ð. ì. (âèñîêîã³ðí³
ðàéîíè ç³ çíà÷íèì ñîíÿ÷íèì îïðîì³íåííÿì ³ ð³çêèìè êîëèâàííÿìè òåìïåðà-
òóð — ÿê äîáîâèõ, òàê ³ ð³÷íèõ). Öå áàãàòîð³÷íà öèáóëèííà ðîñëèíà, òðèâàë³ñòü
æèòòÿ ÿêî¿ îá÷èñëþºòüñÿ äåñÿòèë³òòÿìè. Îäèí ç îñíîâíèõ ñïîñîá³â ïîøèðåí-
íÿ U. victoris — íàñ³ííÿì, ùî âèïàäຠ³ç êîðîáî÷îê ³ ðîçíîñèòüñÿ çà äîïîìî-
ãîþ â³òðó, îïàä³â òà ³íøèõ ïðèðîäíèõ ôàêòîð³â. Ââàæàºòüñÿ, ùî öüîìó âèäó
ïðèòàìàíí³ àãàìîñïåðì³ÿ òà êëåéñòîãàì³ÿ ³ âåãåòàòèâíå ðîçìíîæåííÿ — ðîçä³-
ëåííÿì öèáóëèí ç äåíöÿ ñèìåòðè÷íî íà äâ³ ÷àñòèíè [5].
Ãåíåòè÷íà ñòðóêòóðà âèäó âèçíà÷àºòüñÿ ê³ëüêîìà ôàêòîðàìè, ñåðåä ÿêèõ
îäíèì ç âèð³øàëüíèõ º ñïîñ³á ðîçìíîæåííÿ [9]. Çà ë³òåðàòóðíèìè äàíèìè,
ñàìîçàïèëüí³ âèäè ìàþòü íèæ÷ó âíóòð³øíüîïîïóëÿö³éíó ì³íëèâ³ñòü ïîð³âíÿ-
íî ç òèìè, ÿêèì âëàñòèâèé ïåðåõðåñíèé àáî çì³øàíèé òèï çàïèëåííÿ. Ñòà-
òåâèé ñïîñ³á ðîçìíîæåííÿ çàáåçïå÷óº âèùó äèôåðåíö³àö³þ, í³æ íåñòàòåâèé
[9, 15]. Âîäíî÷àñ ó ïîïóëÿö³ÿõ ðîñëèí, ÿê³ âåãåòàòèâíî ðîçìíîæóþòüñÿ,
çàâäÿêè ï³äòðèìàííþ äåê³ëüêîõ ãåíîòèï³â åôåêò ãåíåòè÷íîãî äðåéôó ìåíø
âèðàæåíèé, í³æ ó òèõ, ùî ðîçìíîæóþòüñÿ ñòàòåâèì øëÿõîì [6]. Ó öüîìó
êîíòåêñò³ îòðèìàíå çíà÷åííÿ âíóòð³øíüîïîïóëÿö³éíî¿ ãåííî¿ ð³çíîìàí³ò-
íîñò³ U. victoris º íåî÷³êóâàíî âèñîêèì: âîíî áëèçüêå äî ñåðåäíüîãî çíà÷åí-
íÿ äëÿ ïåðåõðåñíîçàïèëüíèõ ðîñëèí — 0,260 (ñåðåäíº äëÿ 24 âèä³â), çíà÷íî
ïåðåâèùóº çíà÷åííÿ âíóòð³øíüîïîïóëÿö³éíî¿ ãåííî¿ ð³çíîìàí³òíîñò³ äëÿ
âèä³â-ñàìîçàïèëüíèê³â — 0,091 (ñåðåäíº äëÿ âîñüìè âèä³â) òà âèä³â ç³ çì³øà-
íèì ñïîñîáîì çàïèëåííÿ — 0,219 (äëÿ øåñòè âèä³â) [15]. Çàâäÿêè áåçñòàòå-
âîìó ðîçìíîæåííþ íàñ³ííÿì (àãàìîñïåð쳿) ³ âåãåòàòèâíîìó ðîçìíîæåííþ,
ùî ïåðåâàæàþòü ó U. victoris, ôîðìóþòüñÿ êëîíè-íàùàäêè ç ³äåíòè÷íèì
ìàòåðèíñüêîìó ãåíîòèïîì [14]. Àïîì³êñèñ íàäຠïåðåâàãó ó íåñïðèÿòëèâèõ
Òàáëèöÿ 2. Ãåíåòè÷í³ â³äñòàí³ çà Íåºì [11] ì³æ ðîñëèíàìè U. victoris, ðîçðàõîâàí³
çà ðåçóëüòàòàìè RAPD-àíàë³çó, %
Ðîñëèíà 1 2 3 4 5a 5b 6
1 —
2 26,9 —
3 43,2 38,0 —
4 42,7 43,7 39,0 —
5a 40,6 44,8 44,3 47,0 —
5b 40,6 44,8 44,3 47,0 0,00 —
6 33,5 37,5 39,0 30,6 34,5 34,5 —
ISSN 0372-4123. Ukr. Botan. Journ., 2008, vol. 65, ¹ 3450
óìîâàõ, îñê³ëüêè º àâòîíîìíîþ ðåïðîäóêòèâíîþ ñèñòåìîþ òà çàáåçïå÷óº
â³äòâîðþâàííÿ äîáðå ïðèñòîñîâàíèõ ãåíîòèï³â. Îäíàê öåé ñïîñ³á ðîçìíî-
æåííÿ óìîæëèâëþº íàêîïè÷åííÿ ðåöåñèâíèõ ìóòàö³é ó çâ’ÿçêó ç òèì, ùî
ïðè àãàìîñïåð쳿 â³äñóòí³é ðåäóêö³éíèé ìåéîç, ÿêèé ñóïðîâîäæóºòüñÿ ðå-
êîìá³íàö³ºþ ³ ðîçïîä³ëîì õðîìîñîì. ßê íàñë³äîê — àãàìîñïåðì³÷í³ âèäè
ìàþòü íåî÷³êóâàíî âèñîêó ÷àñòêó ô³êñîâàíèõ ó ãåòåðîçèãîòíîìó ñòàí³ ëî-
êóñ³â [16]. Ìîæëèâ³ñòü òàêîãî ìåõàí³çìó ôîðìóâàííÿ ãåíåòè÷íî¿ ãåòåðîãåí-
íîñò³ ï³äòâåðäæóþòü ðåçóëüòàòè ô³ëîãåíåòè÷íîãî àíàë³çó ïðåäñòàâíèê³â
Amaryll³daceae, ÿê³ äåìîíñòðóþòü çíà÷íó ïàðàëîã³÷íó âàð³àáåëüí³ñòü ÂÒÑ
ÿäåðíîãî ãåíà 18S-25S ðÐÍÊ U. victoris ïîð³âíÿíî ç ³íøèìè ïðåäñòàâíèêà-
ìè ðîäèíè [10]. Òàêèì ÷èíîì, àïîì³êñèñ ó ïîºäíàíí³ ç ìóòàö³éíèì ïðîöå-
ñîì çà óìîâè íåéòðàëüíîãî àáî àäàïòèâíîãî õàðàêòåðó ìóòàö³é ìîæå ñïðè-
ÿòè ôîðìóâàííþ ãåíåòè÷íî¿ ð³çíîìàí³òíîñò³.
Âèñîêå çíà÷åííÿ ãåííî¿ ð³çíîìàí³òíîñò³ U. victoris òèïîâå äëÿ æèòòºâî¿
ôîðìè, âëàñòèâî¿ äëÿ öüîãî âèäó, òà ñòóïåíÿ ìîá³ëüíîñò³ íàñ³ííÿ. Òàê, ñåðåäíº
çíà÷åííÿ âíóòð³øíüîïîïóëÿö³éíî¿ ãåííî¿ ð³çíîìàí³òíîñò³, îá÷èñëåíå íà ï³äñòàâ³
RAPD-ìàðêåð³â, äëÿ òðèâàëîæèâó÷èõ áàãàòîð³÷íèê³â ñòàíîâèëî 0,242 (äëÿ 23
âèä³â), à äëÿ âèä³â, íàñ³ííÿ ÿêèõ ïîøèðþºòüñÿ çà äîïîìîãîþ â³òðó òà/àáî âîäè
³ õàðàêòåðèçóºòüñÿ âèñîêîþ ìîá³ëüí³ñòþ, — 0,261 (äëÿ 3 âèä³â) [15].
Ùå îäíèì ôàêòîðîì, ç ÿêèì ïîâ’ÿçàíèé ð³âåíü ãåíåòè÷íî¿ âàð³àáåëüíîñò³,
º ãåîãðàô³÷íå ïîøèðåííÿ âèäó. ˳òåðàòóðí³ äàí³ âêàçóþòü íà òå, ùî åíäåì³÷í³
âèäè ç ïðîñòîðîâî îáìåæåíèìè àðåàëàìè, ÿê ïðàâèëî, õàðàêòåðèçóþòüñÿ íèæ-
÷èì ð³âíåì âàð³àáåëüíîñò³, í³æ øèðîêî ðîçïîâñþäæåí³ [8, 9]. Öå ìîæå áóòè
íàñë³äêîì íåâåëèêî¿ ê³ëüêîñò³ îñîáèí ó ïîïóëÿö³ÿõ åíäåì³÷íèõ âèä³â [7]. Âîä-
íî÷àñ îêðåì³ ð³äê³ñí³ âèäè â³äçíà÷àþòüñÿ âèùèìè ð³âíÿìè ãåííî¿ ð³çíîìàí³ò-
íîñò³, í³æ ñïîð³äíåí³ ç íèìè øèðîêî ðîçïîâñþäæåí³ âèäè [8], ùî ìîæå ïîÿñ-
íþâàòèñÿ á³ëüøèì ðîçì³ðîì ¿õ ïîïóëÿö³é ³/àáî îñîáëèâîñòÿìè á³îëî㳿 âèäó, ñåðåä
ÿêèõ íàéâàæëèâ³øîþ º ñèñòåìà ðîçìíîæåííÿ. Îòðèìàíå çíà÷åííÿ ãåííî¿ ð³çíî-
ìàí³òíîñò³ äëÿ U. victoris (0,267 ± 0,186) ïåðåâèùèëî íå ëèøå ñåðåäí³ çíà÷åííÿ
äëÿ åíäåì³÷íèõ — 0,191 (5 âèä³â), âóçüêî ïîøèðåíèõ — 0,233 (4 âèä³â) òà ðåã³î-
íàëüíî ïîøèðåíèõ âèä³â — 0,222 (16 âèä³â), àëå íàâ³òü äëÿ øèðîêî ðîçïîâñþä-
æåíèõ — 0,208 (15 âèä³â) [15]. ²ìîâ³ðíîþ ïðè÷èíîþ ï³äâèùåíîãî ð³âíÿ ãåííî¿
ð³çíîìàí³òíîñò³ U. victoris ìîæóòü áóòè ñóâîð³ óìîâè â ì³ñöÿõ éîãî çðîñòàííÿ, ÿê³,
çà ë³òåðàòóðíèìè äàíèìè, ïðèçâîäÿòü äî ï³äâèùåííÿ ãåíåòè÷íî¿ ãåòåðîãåííîñò³,
íåîáõ³äíî¿ äëÿ âèæèâàííÿ ó íåñïðèÿòëèâèõ ñèòóàö³ÿõ [13].
Âèñíîâêè
Òàêèì ÷èíîì, ìåòîäîì RAPD-ÏËÐ äîñë³äæåíî ãåíåòè÷íó ãåòåðîãåíí³ñòü
U. victoris. Íà ï³äñòàâ³ ìîëåêóëÿðíî-ãåíåòè÷íîãî àíàë³çó øåñòè ðîñëèí ç îäí³º¿
ïîïóëÿö³¿ âèçíà÷åíî îñíîâí³ ïîïóëÿö³éí³ ïàðàìåòðè: ê³ëüê³ñòü ïîë³ìîðôíèõ
ëîêóñ³â (Ð) ñòàíîâèëà 72,6 %; ÷èñëî àëåëåé íà ëîêóñ (À) — 1,726 ± 0,447;
åôåêòèâíå ÷èñëî àëåëåé íà ëîêóñ (Àå) — 1,453 ± 0,355; ãåííà ð³çíîìàí³òí³ñòü
Íåÿ (î÷³êóâàíà ãåòåðîçèãîòí³ñòü He) — 0,267 ± 0,186; ³íäåêñ Øåííîíà (S) —
ISSN 0372-4123. Óêð. áîòàí. æóðí., 2008, ò. 65, ¹ 3 451
0,399 ± 0,264. Ñåðåäíº çíà÷åííÿ ãåíåòè÷íèõ â³äñòàíåé çà Íåºì (DN) — 39,8 %.
Íå çàô³êñîâàíî â³äì³ííîñòåé ì³æ öèáóëèíàìè, ÿê³ óòâîðèëèñÿ íà îäíîìó äåíö³
â ðåçóëüòàò³ âåãåòàòèâíîãî ðîçìíîæåííÿ. гâåíü ãåíåòè÷íîãî ïîë³ìîðô³çìó
U. victoris âèÿâèâñÿ íåî÷³êóâàíî âèñîêèì äëÿ åíäåì³÷íîãî âèäó, êîòðèé ðîç-
ìíîæóºòüñÿ íàñ³ííÿì, ùî óòâîðþºòüñÿ ïåðåâàæíî øëÿõîì àãàìîñïåð쳿 ³
ñàìîçàïèëåííÿ, à òàêîæ âåãåòàòèâíî.
Àâòîðè âèñëîâëþþòü ùèðó ïîäÿêó ä-ðó á³îë. íàóê Ñ.Ë. Ìîñÿê³íó çà ö³íí³
ïîðàäè ³ êðèòè÷í³ çàóâàæåííÿ ïðè ï³äãîòîâö³ ðóêîïèñó ñòàòò³.
1. Ãåííàÿ èíæåíåðèÿ ðàñòåíèé. Ëàáîðàòîðíîå ðóêîâîäñòâî / Ïîä ðåä. Äæ. Äðeéïåðà,
Ð. Ñêîòòà, Ô. Àðìðòèäæà, Ð. Óîëäåíà. — Ì.: Ìèð, 1991. — Ñ. 252—257.
2. Êðàñíàÿ êíèãà Òàäæèêñêîé ÑÑÐ. — Äóøàíáå: Äîíèø, 1988. — 336 ñ.
3. Êðàñíàÿ êíèãà Óçáåêñêîé ÑÑÐ. Ðåäêèå è íàõîäÿùèåñÿ ïîä óãðîçîé èñ÷åçíîâåíèÿ âèäû
æèâîòíûõ è ðàñòåíèé. Ò. 2. Ðàñòåíèÿ. — Òàøêåíò: Ôàí, 1984. — 152 ñ.
4. Ìàíèàòèñ Ò., Ôðè÷ Ý., Ñýìáðóê Äæ. Ìîëåêóëÿðíîå êëîíèðîâàíèå. — Ì.: Ìèð, 1984. —
Ñ. 411—412.
5. Õàìèäõîäæàåâ Ñ.À. Ëåêàðñòâåííûå ðàñòåíèÿ ðîäà óíãåðíèÿ â Ñðåäíåé Àçèè. — Òàø-
êåíò: Ôàí, 1982. — 148 ñ.
6. Charlesworth D., Wright S.I. Breeding systems and genome evolution // Current Opinion in
Genetics & Development. — 2001. — 11. — Ð. 685—690.
7. Ellstrand N.C., Elam D.R. Population genetic consequences of small population size: Impli-
cations for plant conservation // Annual Review of Ecology and Systematics. — 1993. — 24. —
P. 217—242.
8. Gitzendanner M.A., Soltis P.S. Patterns of genetic variation in rare and widespread plant
congeners // Amer. J. Bot. — 2000. — 87. — P. 783—792.
9. Hamrick J.L., Godt M.J.W. Allozyme diversity in plant species // Plant Population Genetics,
Breeding and Genetic Resources / Eds. Brown A.H.D., Clegg M.T., Kahler A.L., Weir B.S. —
Sunderland, Massachusetts: Sinauer Associates, 1989. — P. 43—63.
10. Meerow A.W., Francisco-Ortega J., Kuhn D.N., Schnell R.J. Phylogenetic relationships and
biogeography within the Eurasian clade of Amaryllidaceae based on plastid ndhF and nrDNA ITS
sequences: Lineage sorting in a reticulate area? // Syst. Bot. — 2006. — 31(1). — P. 42—60.
11. Nei M. Estimation of average heterozygosity and genetic distance from a small number of
individuals // Genetics. — 1978. — 89. — P. 583—590.
12. Nei M. Molecular evolutionary genetics.– New York: Columbia — University Press, 1987. —
P. 176—187.
13. Nevo E. Evolution of genome–phenome diversity under environmental stress // Proc. Natl.
Acad. Sci. (USA). — 2001. — 98 (11). — P. 6233—6240.
14. Nybom H. DNA fingerprinting—a useful tool in the taxonomy of apomictic plant groups //
Folia Geobot. Phytotax. — 1996. — 31. — P. 295—304.
15. Nybom H., Bartish I. Effects of life history traits and sampling strategies on genetic diversity
estimates obtained with RAPD markers in plants // Perspectives in Plant Ecology, Evolution
and Systematics. — 2000. — 3/2. — P. 93—114.
16. Richards A.J. Apomixis in flowering plants: an overview // Phil. Trans. R. Soc. London,
Ser. B. — 2003. — 358. — Ð. 1085—1093.
17. Yeh F.C., Boyle T.J.B. Population genetic analysis of co-dominant and dominant markers
and quantitative traits // Belgian J. Bot. — 1997. — 129. — P. 157.
Ðåêîìåíäóº äî äðóêó Íàä³éøëà 14.05.2007
ª.Ë.Êîðäþì
ISSN 0372-4123. Ukr. Botan. Journ., 2008, vol. 65, ¹ 3452
Å.Í. Áóáëèê1, È.Î. Àíäðååâ1, Å.Â. Ñïèðèäîíîâà1,
Â.È. Ìóçûêà2, È.Â. Êîëîíèíà2, Â.À. Êóíàõ1
1 Èíñòèòóò ìîëåêóëÿðíîé áèîëîãèè è ãåíåòèêè ÍÀÍ Óêðàèíû, ã. Êèåâ, Óêðàèíà
2 ÎÎÎ «Óíãåðíèÿ», ã. Ìîñêâà, Ðîññèÿ
ÃÅÍÅÒÈ×ÅÑÊÀß ÃÅÒÅÐÎÃÅÍÍÎÑÒÜ ÐÅÄÊÎÃÎ ÝÍÄÅÌÈ×ÍÎÃÎ
ÂÈÄÀ UNGERN²A V²CTOR²S (AMARYLL²DACEAE): RAPD-ÀÍÀËÈÇ
Èññëåäîâàíà ãåíåòè÷åñêàÿ ãåòåðîãåííîñòü öåííîãî ëåêàðñòâåííîãî ðàñòåíèÿ — ýíäåìèêà
Ïàìèðî-Àëàÿ Ungern³a v³ctor³s Vved. ex Artjushenko (Amaryll³daceae). Ìåòîäîì RAPD-ÏÖÐ
ïðîàíàëèçèðîâàíî ÄÍÊ øåñòè ðàñòåíèé èç ïðèðîäíîé ïîïóëÿöèè, ðàñïîëîæåííîé íà
þæíîì ñêëîíå Ãèññàðñêîãî õðåáòà (Òàäæèêèñòàí). Â öåëîì ó÷òåíî 288 ôðàãìåíòîâ, àìï-
ëèôèöèðîâàííûõ ñ èñïîëüçîâàíèåì 24 ïðàéìåðîâ. Îïðåäåëåíû îñíîâíûå ïîïóëÿöèîí-
íî-ãåíåòè÷åñêèå ïàðàìåòðû: äîëÿ ïîëèìîðôíûõ ëîêóñîâ ñîñòàâèëà 72,6 %, ýôôåêòèâíîå
÷èñëî àëëåëåé íà ëîêóñ (Àå) — 1,453 ± 0,355; ãåííîå ðàçíîîáðàçèå Íåÿ (îæèäàåìàÿ ãåòå-
ðîçèãîòíîñòü He) — 0,267 ± 0,186; èíäåêñ Øåííîíà (S) — 0,399 ± 0,264. Ñðåäíåå çíà÷å-
íèå ãåíåòè÷åñêèõ ðàññòîÿíèé ïî Íåþ (DN) ñîñòàâëÿåò 39,8 %. Íå âûÿâëåíî îòëè÷èé ìåæäó
ëóêîâèöàìè, êîòîðûå îáðàçîâàëèñü íà îäíîì äîíûøêå â ðåçóëüòàòå âåãåòàòèâíîãî ðàç-
ìíîæåíèÿ. Ïðåäïîëàãàåòñÿ, ÷òî âûñîêèé óðîâåíü âàðèàáåëüíîñòè U. v³ctor³s ìîæåò áûòü
ñâÿçàí ñ îñîáåííîñòÿìè áèîëîãèè âèäà – ìíîãîëåòíåãî ðàñòåíèÿ ñ ïðåîáëàäàþùèì ðàç-
ìíîæåíèåì ïóòåì àïîìèêñèñà, ïðîäîëæèòåëüíûì ðåïðîäóêòèâíûì ïåðèîäîì, çíà÷èòåëü-
íîé ìîáèëüíîñòüþ ñåìÿí.
Ê ë þ ÷ å â û å ñ ë î â à: Ungern³a v³ctor³s, Amaryll³daceae, RAPD-ÏÖÐ, ãåíåòè÷åñêèé
ïîëèìîðôèçì, âíóòðèïîïóëÿöèîííàÿ âàðèàáåëüíîñòü, ýíäåìè÷íûå âèäû.
O.M. Bublyk.1, I.O. Andreev1, E.V. Spiridonova1,
V.I. Muzyka2, I.V. Kolonina2, V.A. Kunakh2
1 Institute of Molecular Biology and Genetics,
National Academy of Sciences of Ukraine, Kyiv
2 Corp. «Ungernia», Moscow, Russia
GENETIC HETEROGENEITY OF THE RARE ENDEMIC SPECIES
UNGERNIA VICTORIS (AMARYLLIDACEAE): RAPD ANALYSIS
Studies on genetic heterogeneity of the valuable medicinal plant endemic to the Pamiro-Alai
Mountains, Ungernia victoris Vved. ex Artjushenko (Amaryllidaceae) have been carried out. Six
plants derived from a natural population located at the southern slope of the Gissar Ridge
(Tajikistan) were assayed though RAPD-PCR. Total of 288 amplified bands were scored from
24 RAPD primers. Major populational and genetic parameters were measured: the percentage of
polymorphic loci was 72.6 %, the effective number of alleles per locus (Ac) — 1.453 ± 0.355;
Nei’s gene diversity (expected heterozygosity Hc) — 0.267 ± 0.186; Shannon’s index (s) — 0.399 ±
0.264. Average genetic distances according to Nei (DN) was 39.8 %. Bulbs arising from the same
stem as a result of vegetative propagation failed to display any differences. High level of variability
is suggested to reflect the peculiarities of the species, which is a long-lived perennial distinguished
by preferential propagation through apomixis, long reproductive period, and high seed dispersal
capacity.
K e y w o r d s: Ungernia victoris, Amaryllidaceae, RAPD-PCR, genetic polymorphism,
intrapopulation variability, endemic species.
<<
/ASCII85EncodePages false
/AllowTransparency false
/AutoPositionEPSFiles true
/AutoRotatePages /All
/Binding /Left
/CalGrayProfile (Dot Gain 20%)
/CalRGBProfile (sRGB IEC61966-2.1)
/CalCMYKProfile (U.S. Web Coated \050SWOP\051 v2)
/sRGBProfile (sRGB IEC61966-2.1)
/CannotEmbedFontPolicy /Warning
/CompatibilityLevel 1.4
/CompressObjects /Tags
/CompressPages true
/ConvertImagesToIndexed true
/PassThroughJPEGImages true
/CreateJDFFile false
/CreateJobTicket false
/DefaultRenderingIntent /Default
/DetectBlends true
/DetectCurves 0.0000
/ColorConversionStrategy /LeaveColorUnchanged
/DoThumbnails false
/EmbedAllFonts true
/EmbedOpenType false
/ParseICCProfilesInComments true
/EmbedJobOptions true
/DSCReportingLevel 0
/EmitDSCWarnings false
/EndPage -1
/ImageMemory 1048576
/LockDistillerParams false
/MaxSubsetPct 100
/Optimize true
/OPM 1
/ParseDSCComments true
/ParseDSCCommentsForDocInfo true
/PreserveCopyPage true
/PreserveDICMYKValues true
/PreserveEPSInfo true
/PreserveFlatness true
/PreserveHalftoneInfo false
/PreserveOPIComments false
/PreserveOverprintSettings true
/StartPage 1
/SubsetFonts true
/TransferFunctionInfo /Apply
/UCRandBGInfo /Preserve
/UsePrologue false
/ColorSettingsFile ()
/AlwaysEmbed [ true
]
/NeverEmbed [ true
]
/AntiAliasColorImages false
/CropColorImages true
/ColorImageMinResolution 300
/ColorImageMinResolutionPolicy /OK
/DownsampleColorImages true
/ColorImageDownsampleType /Bicubic
/ColorImageResolution 300
/ColorImageDepth -1
/ColorImageMinDownsampleDepth 1
/ColorImageDownsampleThreshold 1.50000
/EncodeColorImages true
/ColorImageFilter /DCTEncode
/AutoFilterColorImages true
/ColorImageAutoFilterStrategy /JPEG
/ColorACSImageDict <<
/QFactor 0.15
/HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1]
>>
/ColorImageDict <<
/QFactor 0.15
/HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1]
>>
/JPEG2000ColorACSImageDict <<
/TileWidth 256
/TileHeight 256
/Quality 30
>>
/JPEG2000ColorImageDict <<
/TileWidth 256
/TileHeight 256
/Quality 30
>>
/AntiAliasGrayImages false
/CropGrayImages true
/GrayImageMinResolution 300
/GrayImageMinResolutionPolicy /OK
/DownsampleGrayImages true
/GrayImageDownsampleType /Bicubic
/GrayImageResolution 300
/GrayImageDepth -1
/GrayImageMinDownsampleDepth 2
/GrayImageDownsampleThreshold 1.50000
/EncodeGrayImages true
/GrayImageFilter /DCTEncode
/AutoFilterGrayImages true
/GrayImageAutoFilterStrategy /JPEG
/GrayACSImageDict <<
/QFactor 0.15
/HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1]
>>
/GrayImageDict <<
/QFactor 0.15
/HSamples [1 1 1 1] /VSamples [1 1 1 1]
>>
/JPEG2000GrayACSImageDict <<
/TileWidth 256
/TileHeight 256
/Quality 30
>>
/JPEG2000GrayImageDict <<
/TileWidth 256
/TileHeight 256
/Quality 30
>>
/AntiAliasMonoImages false
/CropMonoImages true
/MonoImageMinResolution 1200
/MonoImageMinResolutionPolicy /OK
/DownsampleMonoImages true
/MonoImageDownsampleType /Bicubic
/MonoImageResolution 1200
/MonoImageDepth -1
/MonoImageDownsampleThreshold 1.50000
/EncodeMonoImages true
/MonoImageFilter /CCITTFaxEncode
/MonoImageDict <<
/K -1
>>
/AllowPSXObjects false
/CheckCompliance [
/None
]
/PDFX1aCheck false
/PDFX3Check false
/PDFXCompliantPDFOnly false
/PDFXNoTrimBoxError true
/PDFXTrimBoxToMediaBoxOffset [
0.00000
0.00000
0.00000
0.00000
]
/PDFXSetBleedBoxToMediaBox true
/PDFXBleedBoxToTrimBoxOffset [
0.00000
0.00000
0.00000
0.00000
]
/PDFXOutputIntentProfile ()
/PDFXOutputConditionIdentifier ()
/PDFXOutputCondition ()
/PDFXRegistryName ()
/PDFXTrapped /False
/Description <<
/CHS <FEFF4f7f75288fd94e9b8bbe5b9a521b5efa7684002000500044004600206587686353ef901a8fc7684c976262535370673a548c002000700072006f006f00660065007200208fdb884c9ad88d2891cf62535370300260a853ef4ee54f7f75280020004100630072006f0062006100740020548c002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e003000204ee553ca66f49ad87248672c676562535f00521b5efa768400200050004400460020658768633002>
/CHT <FEFF4f7f752890194e9b8a2d7f6e5efa7acb7684002000410064006f006200650020005000440046002065874ef653ef5728684c9762537088686a5f548c002000700072006f006f00660065007200204e0a73725f979ad854c18cea7684521753706548679c300260a853ef4ee54f7f75280020004100630072006f0062006100740020548c002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e003000204ee553ca66f49ad87248672c4f86958b555f5df25efa7acb76840020005000440046002065874ef63002>
/DAN <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>
/DEU <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>
/ESP <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>
/FRA <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>
/ITA <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>
/JPN <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>
/KOR <FEFFc7740020c124c815c7440020c0acc6a9d558c5ec0020b370c2a4d06cd0d10020d504b9b0d1300020bc0f0020ad50c815ae30c5d0c11c0020ace0d488c9c8b85c0020c778c1c4d560002000410064006f0062006500200050004400460020bb38c11cb97c0020c791c131d569b2c8b2e4002e0020c774b807ac8c0020c791c131b41c00200050004400460020bb38c11cb2940020004100630072006f0062006100740020bc0f002000410064006f00620065002000520065006100640065007200200035002e00300020c774c0c1c5d0c11c0020c5f40020c2180020c788c2b5b2c8b2e4002e>
/NLD (Gebruik deze instellingen om Adobe PDF-documenten te maken voor kwaliteitsafdrukken op desktopprinters en proofers. De gemaakte PDF-documenten kunnen worden geopend met Acrobat en Adobe Reader 5.0 en hoger.)
/NOR <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>
/PTB <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>
/SUO <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>
/SVE <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>
/ENU (Use these settings to create Adobe PDF documents for quality printing on desktop printers and proofers. Created PDF documents can be opened with Acrobat and Adobe Reader 5.0 and later.)
>>
/Namespace [
(Adobe)
(Common)
(1.0)
]
/OtherNamespaces [
<<
/AsReaderSpreads false
/CropImagesToFrames true
/ErrorControl /WarnAndContinue
/FlattenerIgnoreSpreadOverrides false
/IncludeGuidesGrids false
/IncludeNonPrinting false
/IncludeSlug false
/Namespace [
(Adobe)
(InDesign)
(4.0)
]
/OmitPlacedBitmaps false
/OmitPlacedEPS false
/OmitPlacedPDF false
/SimulateOverprint /Legacy
>>
<<
/AddBleedMarks false
/AddColorBars false
/AddCropMarks false
/AddPageInfo false
/AddRegMarks false
/ConvertColors /NoConversion
/DestinationProfileName ()
/DestinationProfileSelector /NA
/Downsample16BitImages true
/FlattenerPreset <<
/PresetSelector /MediumResolution
>>
/FormElements false
/GenerateStructure true
/IncludeBookmarks false
/IncludeHyperlinks false
/IncludeInteractive false
/IncludeLayers false
/IncludeProfiles true
/MultimediaHandling /UseObjectSettings
/Namespace [
(Adobe)
(CreativeSuite)
(2.0)
]
/PDFXOutputIntentProfileSelector /NA
/PreserveEditing true
/UntaggedCMYKHandling /LeaveUntagged
/UntaggedRGBHandling /LeaveUntagged
/UseDocumentBleed false
>>
]
>> setdistillerparams
<<
/HWResolution [2400 2400]
/PageSize [612.000 792.000]
>> setpagedevice
|