ОЗДОРОВЛЕННЯ НАСІННЄВОГО МАТЕРІАЛУ КАРТОПЛІ ТА ЙОГО ДІАГНОСТИКА В СИСТЕМІ БІОТЕХНОЛОГІЙ

The results of improvement studies of potato varieties by chemotherapy along with the use of antiviral drugs: RNA-ase, acyclovir, izatizon, and hydrochloride as well as data on the molecular diagnosis of X-and M-viruses in vitro plants, resulting from the recovery are presented. 3 lines free from vi...

Повний опис

Збережено в:

Бібліографічні деталі
Дата:	2012
Автори:	Олійник , Т.М., Слободян , К.А., Слободян , С.О., Грицай , Р.В.
Формат:	Стаття
Мова:	Українська
Опубліковано:	Institute of Agrocultural Microbiology and Agro-industrial Manufacture of NAAS of Ukraine 2012
Теми:	картопля оздоровлення термотерапія хіміотерапія культура меристем віруси діагностика імуноферментний аналіз полімеразна ланцюгова реакція зворотна транскрипція
Онлайн доступ:	https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/247
Теги:	Додати тег Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:	Agriciltural microbiology
Завантажити файл:

Репозитарії

Agriciltural microbiology

_version_	1871465812182695936
author	Олійник , Т.М. Слободян , К.А. Слободян , С.О. Грицай , Р.В.
author_facet	Олійник , Т.М. Слободян , К.А. Слободян , С.О. Грицай , Р.В.
author_institution_txt_mv	[ { "author": "Т.М. Олійник ", "institution": "Інститут картоплярства НААН" }, { "author": "К.А. Слободян ", "institution": "Інститут картоплярства НААН" }, { "author": "С.О. Слободян ", "institution": "Інститут картоплярства НААН" }, { "author": "Р.В. Грицай ", "institution": "Інститут картоплярства НААН" } ]
author_sort	Олійник , Т.М.
baseUrl_str	https://smic.in.ua/index.php/journal/oai
collection	OJS
datestamp_date	2026-07-22T10:10:45Z
description	The results of improvement studies of potato varieties by chemotherapy along with the use of antiviral drugs: RNA-ase, acyclovir, izatizon, and hydrochloride as well as data on the molecular diagnosis of X-and M-viruses in vitro plants, resulting from the recovery are presented. 3 lines free from virus X and 4 lines free from potato virus M were allocated. After the testing of variety changeability and its economically valuable characteristics in field conditions one of them will be selected and submitted to the Bank in vitro redeveloped varieties.
doi_str_mv	10.35868/1997-3004.14.156-166
first_indexed	2025-07-17T12:24:42Z
format	Article
fulltext	156 УДК 635.21:632.38:57.083 ОЗДОРОВЛЕННЯ НАСІННЄВОГО МАТЕРІАЛУ КАРТОПЛІ ТА ЙОГО ДІАГНОСТИКА В СИСТЕМІ БІОТЕХНОЛОГІЙ Олійник Т.М., Слободян К.А., Слободян С.О., Грицай Р.В. Інститут картоплярства НААН, вул. Чкалова, 51/32, смт. Немішаєве, Бородянський р-н, Київська обл., 07853 E-mail: upri@visti.com Наведено результати досліджень з оздоровлення сортів картоплі методом хіміотерапії з використанням антивірусних препаратів: РНК-ази, ацикловіру, ізатізону та гідрохлориду. Висвітлено результати щодо молекулярної діагностики Х- та М-вірусів у рослинах in vitro, отриманих у результаті оздоровлення. Виділено 3 лінії, вільні від Х-вірусу, та 4 лінії, вільні від М-вірусу картоплі, одна з яких після перевірки сортотиповості та за господарсько цінними показниками в польових умовах буде занесена до Банку in vitro оздоровлених сортів. Ключові слова: картопля, оздоровлення, термотерапія, хіміотерапія, культура меристем, віруси, діагностика, імуно- ферментний аналіз, полімеразна ланцюгова реакція, зворотна транскрипція. Однією з найгостріших проблем у насінництві картоплі є вірусні хвороби. Сьогодні відомо біля 40 фітопатогенних вірусів, ідентифікованих на картоплі в різних країнах і регіонах з різними природно-кліматичними умовами. На основі сучасних уявлень і свідчень, що опубліковані в світовій літературі в останні роки [1–8], до числа найважливіших фітопатогенних вірусів картоплі відносяться: вірус скручування листя картоплі, ВСЛК (Potato leafroll virus); Y-вірус (Potato virus Y); Х-вірус, ХВК (Potato virus Х); S-вірус, SВК (Potato virus S); М-вірус, МВК (Potato virus М); А-вірус (Potato virus А); аукуба-мозаїки картоплі (Potato aucuba mosaic virus); вірус щіткоподібності верхівки (Potato mop-top virus); вірус чорної кільцевої плямистості томатів (Tomato black ring virus); вірус жовтої карликовості картоплі (Potato yellow dwarf virus). Серед перерахованих до найбільш поширених і шкідливих в Україні відносять: Х-, Y-, M-, S -віруси картоплі, ВСЛК [9–14]. 157 При виявленні вірусної інфекції, в тому числі й прихованої, застосовують декілька наукових підходів. Один із них – імуноферментний аналіз, ІФА (Enzym-Linked Immuno-Sorbent Assay – ELISA), запропонований у 1977 р. М. Кларком та А. Адамсом. Цей метод включає тестування на присутність специфічних білків вірусного капсиду із використанням специфічного зв’язування між експресованим антигеном та антитілом. Інший підхід – високочутливий метод RT-PCR (Reverse-Transcription-Polimerase Chain Reaction – полімеразна ланцюгова реакція зі зворотною транскрипцією – ЗТ-ПЛР) для детекції РНК-вмісних вірусів [15] і віроїдів [16–19]. В основу методу покладено полімеразну ланцюгову реакцію, яку відкрив К. Мюлліс у 1983 р [20, 21]. При цьому якість і чистота стартової нуклеїнової кислоти (РНК) є критичною для успішної ЗТ-ПЛР. Загальна і полі-А РНК можуть бути використані як матриця, але обидві повинні бути інтактними і вільними від забруднення геномною ДНК. Специфічне зв’язування полі-А РНК буде збагачувати цільові повідомлення, тому менше реакцій зворотної транскрипції потрібно для подальшої ампліфікації. Ефективність реакції синтезу першого ланцюга, який пов’язаний з якістю РНК матриці, буде також значно впливати на результати подальшої ампліфікації [22]. Одним із найважливіших способів боротьби з вірусними хворобами картоплі є отримання високопродуктивного, оздоров- леного насіннєвого матеріалу і його прискорене розмноження в культурі in vitro [23]. При цьому обов’язковим етапом біотехнології оздоровлення рослин картоплі є вірусологічний контроль з використанням сучасних методів діагностики, які забезпечують надійність результатів, особливо в латентний період інфекції [24, 25]. На даний час оздоровлення, як біотехнологічний метод, ефективно використовується для отримання якісного посадкового матеріалу різних сільськогосподарських культур. Вагомою пере- вагою даного методу є отримання здорового посадкового матеріалу, вільного від фітопатогенних вірусів, грибів, нематод, бактерій та мікоплазм. При сильному, інколи 100 %-му, ураженні рослин вірусами, метод оздоровлення є єдиним і найрадикальнішим методом отримання безвірусних рослин. Позитивний результат спостерігається у розвитку рослин та підвищенні урожайності від 30 до 50 % [26–29]. 158 Основним етапом одержання здорового вихідного матеріалу залишається добір [30]. У практиці елітного насінництва застосу- вання клонового добору дає змогу звільнити посіви від хворих, мутантних рослин, зразків з іншими аномаліями, вироджених бульб, що погіршують сорт [31–33]. Проте метод добору візуально здорових рослин, згідно з даними імунодіагностики, не завжди ефективний. Для вирішення питання боротьби з вірусними хворобами картоплі Ф.Р. Уайт [34] та Р.І. Готре [35] запропонували метод культури тканин, який заснований на явищі тотіпотентності, тобто здатності до відновлення цілісності рослин із збереженням геному. Рядом авторів [36, 37] доведено, що віруси присутні у меристемі, але концентрація їх у різних ділянках апексу різна. Так, найбільша зона верхівкової меристеми (300 мкм) вільна від таких вірусів, як ВСЛК, YВК, AВК, менша (200 мкм) – від ХВК та найменша (100 мкм) – від S- і M-вірусів картоплі. Поряд з великими досягненнями метод культури верхівко- вих меристем має свої недоліки, якими не слід нехтувати. По- перше, окремі зразки меристемної тканини можуть носити вірусну інфекцію. По-друге, вірус, який присутній у меристемі, накопичується у рослині протягом культивування на штучному поживному середовищі. Найефективнішим оздоровлення є тоді, коли метод культури верхівкових меристем поєднують з термо- та хіміотерапією. Проведення оздоровлення за допомогою хіміоте- рапії дає можливість використати меристему більшого розміру (200 мкм) та досягти оздоровчого результату. Використання вірус- інгібіторних сполук стимулює приживання меристем на 10–35 %, а вихід безсимптомних меристемних рослин складає 80–100 % в залежності від сорту [38]. Методи біотехнологічних досліджень набули широкого впровадження в багатьох країнах, але в Україні на сучасному етапі в біотехнологічній науці відчутно відстає розробка нових універсальних узагальнюючих методик та положень, що стримує розвиток цього експериментального напряму для вирішення зав- дань генетики, селекції та насінництва. Тому вивчення теоретичних основ окремих елементів системи «рослина-живитель – вірус- патоген» та удосконалення елементів технології оздоровлення у напрямах підвищення їх надійності та зниження витрат на виробництво вихідного матеріалу для первинного насінництва 159 картоплі є актуальною і досить складною проблемою. Метою досліджень є встановлення ефективності оздоровлення сортів картоплі Оберіг, Луговська, Базис, Билина та Щедрик за використання антивірусних препаратів; оптимізація методики та проведення діагностики оздоровленого матеріалу на наявність Х- та М-вірусів картоплі з використанням полімеразної ланцюгової реакції зі зворотною транскрипцією; виділення лінії для занесення до Банку in vitro оздоровлених сортів. Матеріали і методи. Матеріалом для досліджень слугували лінії сортів картоплі селекції Інституту картоплярства НААН: Оберіг, Луговська, Базис, Билина та Щедрик. Добір вихідного матеріалу проводили в розсаднику клонового добору насінницьких насаджень інституту. Оздоровлені лінії отримували методом культури меристеми у поєднанні з хіміотерапією [39, 40]. Меристему виділяли у ламінар-боксі під бінокуляром SZM4512 з 30-кратним збільшенням з масштабною сіткою. Для регенерації рослин з експлантів використовували середовище Мурасіге-Скуга в модифікації Інсти- туту картоплярства [39]. Хіміотерапію починали застосовувати з другого пасажу культивування меристем. Як антивірусні препа- рати використовували РНК-азу, ацикловір, ізатізон у концентрації 0,01 % та гідрохлорид у концентрації 3,2 µМ. Фітовірусологічний аналіз клонів та пробіркових рослин проводили за допомогою імуноферментного аналізу (ІФА) та методу полімеразної ланцюгової реакції зі зворотною транскрипцією (ЗТ-ПЛР). ЗТ-ПЛР для діагностики Х-вірусу картоплі проводили згідно методики X. Nie та R.P. Singh [41, 42]. Діагностику М-вірусу картоплі проводили з використанням тест-системи, розробленої на базі кафедри вірусології Національного університету ім. Т.Г. Шевченка. Полімеразну ланцюгову реакцію зі зворотною транскрипцією проводили на ампліфікаторі «Eppendorf» (Німеччина). Електро- форетичне розділення продуктів ампліфікації проводили у 1,5 %-му агарозному гелі, що містив бромистий етидій (0,5 мкг/мл), протягом 2 годин, при напрузі 3 В/1 см довжини гелю. Для фотографування використовували цифрову фотосистему. Розміри продуктів ампліфікації визначали за допомогою маркера молекулярної маси GeneRuller 100 bp («Fermentas») та комп’ютерної програми BioTest Color (Росія). 160 Результати та обговорення. Результати діагностики відіб- раних клонів показали ураженість МВК на 61,9 %, SВК – на 23,8 % та ХВК – на 9,5 %, що зумовило застосування для оздоровлення досліджуваних сортів методу культури меристеми у поєднанні з хіміотерапією. Оздоровлення сортів Луговська та Оберіг проводили за використання антивірусних препаратів РНК-аза та ацикловір. За результатами досліджень встановлено, що РНК-аза підвищує ефективність регенерації на 22–26 %, а ацикловір на 28–30 % у порівнянні з контролем (культура меристеми). Можна зазначити, що РНК-аза підвищує ефективність оздоровлення досліджуваних сортів на 11,7–18,4 %, ацикловір – на 19,2–32,8 %. Найбільшу кількість оздоровлених рослин отримано по сорту Луговська на середовищі з ацикловіром – 22 лінії. Оздоровлення сортів Базис, Билина та Щедрик проводили за допомогою фізіологічно активних речовин ізатізон та гідрохлорид. За результатами досліджень спостерігається досить висока регенерація меристем, а саме, 60–88 %, залежно від сорту та діючої речовини. Найбільший відсоток регенерантів (88 %) отримали по сорту Щедрик на середовищі з ізатізоном. За даними ІФА ефективність оздоровлення коливається в межах 6,6–15,6 %. Найбільшу кількість оздоровлених рослин (6 од.) отримали по сорту Щедрик на середовищі з ізатізоном (табл.). Важливим етапом роботи в системі оздоровлення є діагностика вірусної інфекції. Правильне поєднання існуючих тест-систем забезпечує своєчасне видалення інфікованих рослин із числа регенерантів та в подальшому фітосанітарний контроль за станом отриманого матеріалу, який має проводитися на всіх ста- діях виробництва насіннєвого матеріалу. Нами відпрацьовано умови проведення полімеразної ланцю- гової реакції зі зворотною транскрипцією з метою діагностики Х-вірусу картоплі. В дослідженнях використовували лінії сортів Оберіг та Луговська. Як позитивний контролю використовували лінію сорту Оберіг, яка за результатами ІФА була уражена даним вірусом. Негативним контролем була вода. Критерієм наявності ХВК у зразках є флуоресценція про- дуктів ЗТ-ПЛР в гелі при ультрафіолетовому світлі відповідно до очікуваних розмірів, що встановлюється при порівнянні з маркером молекулярної маси ДНК та відповідних контрольних зразків. За результатами ПЛР-аналізу в гелі виявлено продукти ампліфікації, 161 які свідчать про наявність у зразках 3, 4 Х вірусу картоплі (рис. 1). Виділено три безсимптомні лінії (2, 6, 7). Таблиця. Регенерація меристем та вихід оздоровлених ліній залежно від методу оздоровлення Кількість виділених меристем, од. Культура мерис- теми Хіміотерапія РНК-аза ацик- ловір ізатізон гідро- хлорид ре ге не ра нт ів , о д. оз до ро вл ен их лі ні й, о д. ре ге не ра нт ів , о д. оз до ро вл ен их лі ні й, о д. ре ге не ра нт ів , о д. оз до ро вл ен их лі ні й, о д. ре ге не ра нт ів , о д. оз до ро вл ен их лі ні й, о д. ре ге не ра нт ів , о д. оз до ро вл ен их лі ні й, о д. Сорт Луговська 50 20 6 31 15 35 22 Ефективність, %: регенерації оздоровлення 40 62 70 30,0 48,4 62,8 Сорт Оберіг 50 10 2 23 5 24 7 Ефективність, %: регенерації оздоровлення 20 46 48 10,0 21,7 29,2 Сорт Базис 50 20 5 32 5 35 4 Ефективність, %: регенерації оздоровлення 40 64 70 25,0 15,6 11,4 Сорт Билина 50 15 2 37 4 30 2 Ефективність, %: регенерації оздоровлення 30 74 60 13,0 10,8 6,6 Сорт Щедрик 50 35 10 44 6 32 4 Ефективність, %: регенерації оздоровлення 70 88 64 28,6 13,6 12,5 162 Дану технологію молекуляр- ної діагностики ми використовуємо для детекції найбільш поширених та шкодочинних груп вірусної ін- фекції при одержанні оздоровле- них ліній картоплі. Особливо акту- альною є молекулярна діагностика для виявлення вірусних хвороб у латентний період інфекції. Тому ви- користання комплексного підходу при вірусологічному контролі на кожному з етапів оздоровлення дає можливість вибракувати хворий матеріал. При діагностиці М-вірусу картоплі ми використовували оздо- ровлені лінії сортів Базис, Билина та Щедрик, які за результатами ІФА були вільні від М-вірусу картоплі. Дослідження проводили з використанням праймерів до М-вірусу картоплі. Після проведення ПЛР-реакції в гелі виявлено продукти ампліфікації, які свідчать про наявність МВК в зразках 4–8 та 10–13 (рис. 2). Зразки 1–3 та 9 виявилися вільними від вірусної інфекції. 1 – 62 Бз; 2 – 69 Бз; 3 – 21 Бз; 4 – 84 Бз; 5 – 39 Бз; 6 – 9 Бз; 7 – 19 Бз; 8 – 34 Бл; 9 – 15 Бл; 10 – 31 Бл; 11 – 39 Бл; 12 – 5 Бл; 13 – 92 Щед; 14 – позитивний контроль; М – маркер молекулярної маси Рис. 2. Продукти ампліфікації М-вірусу картоплі 1 2 М 3 4 5 6 7 Рис. 1. Детекція ХВК за допомогою ЗТ-ПЛР: 1 – негативний контроль, 2 – Луг70; 3 – Луг78; 4 – Обг 2/5; 5 – ОБг 3/7 (позитивний контроль), 6 – Луг66; 7 – Луг37; М – маркер молекулярної маси. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 М 163 Отже, в ході досліджень встановлено, що РНК-аза підвищує ефективність оздоровлення сорту Луговська на 18,4 %, ацикловір – 32,8 %, сорту Оберіг – відповідно на 11,7 % та 19,2 %. Ефективність оздоровлення сорту Щедрик з ізатізоном становить 13,6 %, з гідрохлоридом – 12,5 %, сорту Билина – відповідно 10,8 % та 6,6 %, сорту Базис – 15,6 % та 11,4 %, відповідно. Оптимізовано методику молекулярної діагностики ХВК. У результаті оздоровлення виділено 3 лінії, вільні від Х-вірусу, та 4 лінії, вільні від М-вірусу картоплі, сортів Луговська, Базис, Билина, одна з яких після вивчення в польових умовах буде занесена до Банку in vitro оздоровлених сортів картоплі. 1. Potato diseases: Diseases, Pest and Defects /Ed. by Dr. D.E. van der Zaag [et al.] /NIVAA (Netherlands Potato consultative Institute). – Copyringht, 1996 – 180 p. 2. Struik H.C. Seed potato technology /Struik H.C. and S.G. Wiersema. – Wageningen (The Netherlands): Wageningen Pres, 1999. – 383 p. 3. Potato, Global Research and Development /Eds: S.M. Paul Khurana, G.S. Shekhawat, B.P. Singh and S.K. Pandey. – Shimla: Indian Potato Association, 2000. – Vol. 1. – 733 p. 4. Potato virus vectors and treir management //Potato, Global Research and Development /Editors: Paul Khurana S.M., Verma K. and V.K. Chandla. – Shimla: Indian Potato Association, 2000. – Vol. 1. – P. 352–362. 5. Salasar L.F. Potato Viruses and theis control. International Potato Centr /L.F. Salasar. – Lima, Peru, 1996. – 214 p. 6. Борьба с вирусными болезнями растений /[Кеглер Х., Кляйнхемпель Х., Эртель Г. и др.]. – М.: Агропромиздат, 1986. – 479 с. 7. Integrated pest menagament for potatoes in the western United States /University of California, Devision of Agriculture and Natural Resources publication, 1986. – 146 p. 8. Картофель: селекция, семеноводство, технология возделывания /[Альсмик П.И., Шевелуха В.С., Ортель Х. и др.]. – Минск: Ураджай, 1988. – 304 с. 9. Анисимов Б.В. Фитопатогенные вирусы и их контроль в семеноводстве картофеля: практическое руководство /Б.В. Анисимов. – М.: ФГНУ «Росинформагротех», 2004. – 80 с. 10. Трoфимец Л.Н. Вируcные бoлезни картoфеля: Прилoжение к журналу «Защита раcтений» /Л.Н. Трoфимец. – М.: Агрoпрoмиздат, 1990. – 79 c. 11. Мocкoвець C.Н. Віруcні хвoрoби cільcькoгocпoдарcьких культур /Мocкoвець C.Н., Бoбир А.Д., Л.Е. Глушко. – К.: Урoжай, 1975. 164 – C. 72–80. 12. Мocкoвець C.М. Віруcи і віруcні хвoрoби картоплі /Мocкo- вець C.М., Грама Д.П., Л.К. Жеребчук. – К.: Наук. думка, 1973. – 166 c. 13. Мельничук М.Д. Фітoвіруcoлoгія /М.Д. Мельничук. – К.: Пoліграфкoнcалтинг, 2005. – 200 c. 14. Картoпля. Практична енциклoпедія /За ред. П.C. Теcлюка, М.Ю. Влаcенка, М.Й. Шевчука. – Луцьк: Надcтир’я, 2003. – 300 c. 15. Henson J.M. The polymerase chain reaction and plant disease diagnosis /Henson J.M. and French R. //Ann. Rev. Phytopathol. – 1993. – Vol. 31. – P. 81–109. 16. Hadidi A. Detection of pome fruit viroids by enzymatic cDNA amplification /Hadidi A., Yang X. //J. Virological Methods. – 1990. – Vol. 30. – P. 261–270. 17. Yang Y.S. Numerical simulation of plasma transport driven by the Iotorus /Yang Y.S., R.A. Wolf, R.W. Spiro and A.J. Dessler //Geophys. Res. Lett. – 1992. – Vol. 19. – P. 957–960. 18. Rezaian M.A. Common identity of grapevine viroids from USA and Australia revealed by PCR analysis /Rezaian M.A., Krake L.R., Golino D.A. //Intervirol. – 1992. – Vol. 34. – P. 38–43. 19. Levy A.Y. Towards efficient information gathering agents /A.Y. Levy, Y. Sagiv, and D. Srivastava //Software Agents (Papers from the 1994 Spring Symposium Technical Report SS-94-03) /ed. O. Etzioni. – AAAI Press, 1994. – Р. 64–70. 20. Mullis K.B. Methods in Enzymology /Mullis K.B., Faloona F.A., Wu R. (ed.). – NY: Acad. Press, 1987. – Vol. 155. – 335 р. 21. Saiki R.K. Science /[Saiki R.K., Scharf S., Faloona F. еt al.]. – 1985. – Р. 230, 1350. 22. Источник для открытия. Путеводитель по методикам и спосо- бам применения. – [третье издание]. – Promega, 1996. – С. 193–206. 23. Morel G. Guerison de Dahles attaints de une maladie a virus /Morel G., Martin C. //Compt. Rend. – 1952. – Vol. 235, № 20. – Р. 1324– 1325. 24. Nie X. Detection of multiple potato viruses using an oligo (dT) as a common cDNA primer in multiplex RT-PCR /Nie X., Singh R.P. //J. Virological methods. – 2000. – Vol. 86, № 2. – Р. 179–185. 25. Sinijärv R. Detection of Potato Virus X by One Incubation Europium Time-resolved Fluoroimmunoassay and ELISA /Sinijärv R., Järvekülg L., Andreeva E. and Saarma M. //J. gen. Virol. – 1988. – Vol. 69. – Р. 991–998. 26. Оздоровлення сортів картоплі з використанням синтетичних речовин, похідних імідазотріазолу /О.М. Петренко, І.В. Демчук, М.М. Зарицький //Вісник Kиївського нац. ун-ту імені Тараса Шевченка. Біологія. – 2005. – № 44. – С. 26–31. 165 27. Мельничук М.Д. Біотехнологія рослин: Підручник для студен- тів вищих навчальних закладів /М.Д. Мельничук, Т.В. Новак, В.А. Кунах. – К.: Поліграфконсалтінг, 2003. – 513 с. 28. Новые технологии производства оздоровленного исходного материала в элитном семеноводстве картофеля: рек. /ВНИИКХ. – М., 2000. – 80 с. 29. Семеноводство картофеля. Контроль качества. Сертификация: метод. пособие /РАСХН, ВНИИКХ; под ред. А.В. Коршунова, Б.А. Анисимова. – М., 2002. – С. 26–27. 30. Онищенко О.Й. Насінництво картоплі на Україні /О.Й. Онищенко. – К.: Урожай, 1966. – 110 с. 31. Селекція і насінництво картоплі /за ред. В.А. Вітенко. – К.: Урожай, 1988. – 240 с. 32. Перспективи первинного насінництва фітофторостійких сортів картоплі /І.І. Тимошенко, З.М. Майщук, М.Г. Коновалюк, Р.С. Добровольський //Вісник аграрної науки. – 1991. – № 4. – С. 36–39. 33. Максимович М.М. Индивидуальный или клоновый отбор как метод улучшения семенных качеств картофеля /М.М. Максимович //Семеноводство картофеля. – М.: Сельхозиздат, 1951. – С. 64–78. 34. White P.R. Influence of some environmental conditions on the growth of excised root tips of wheat seedlings in liguid media /P.R. White //Plant Physiol. – 1932. – Vol. 4. – P. 613–628. 35. Gautheret R.J. Manuel technigue de culture des tissues vegetaux /R.J. Gautheret. – Paris: Masson at Cie, 1942. – P. 231–243. 36. Mac Kinnon J.P. Comparative rates of movement of potato virus X into tubers and eyes of there protato variates /J.P. Mac Kinnon, J. Munro //Am. Potato J. – 1959. – № 36. – Р. 485–486. 37. Иванова Н.И. Клональное микроразмножение некоторых декоративних растений /Н.И. Иванова //Сб. науч. тр. Никитского бот. cада. – 1997. – Т. 1. – 119 с. 38. Совремeнные методы получения безвирусного картофеля /Л.Н. Трофимец //Вестн. с.-х. науки. – 1976. – № 3. – С. 150–153. 39. Методичні рекомендації щодо проведення досліджень з картоплею /УААН, Ін-т картоплярства /[В.С. Куценко, А.А. Осипчук, А.А. Подгаєцький та ін.]. – Немішаєве, 2002. – 182 с. 40. Оптимизация прийомов оздоровления, размножения и защиты семенного картофеля от вирусной инфекии: метод. указ. /БелНИИЗР /[Ж.В. Блоцкая, Н.Н. Тимофеев, О.Н. Зубкевич и др.]. – Минск, 1996. – 16 с. 41. Boonham N. The detection of Tomato spotted wilt virus (TSWV) in individual thrips using real time fluorescent RT-PCR (TagMan) /Boonham N., Smith P., Walsh K. [et al.] //J. Virological Methods, 2001. – Vol. 101. – P. 37. 166 42. Nie X. A novel usage of random for multiplex RT-PCR detection of virus and viroid in aphids, leaves, and tubers /X. Nie, R.P. Singh //J. Virological Methods. – 2001. – Vol. 91. – P. 37–49. ОЗДОРОВЛЕНИЕ СЕМЕННОГО МАТЕРИАЛА КАРТОФЕЛЯ И ЕГО ДИАГНОСТИКА В СИСТЕМЕ БИОТЕХНОЛОГИЙ Олейник Т.М., Слоблодян К.А., Слободян С.А., Грицай Р.В. Институт картофелеводства НААН, Немешаево Приведены результаты исследований по оздоровлению сор- тов картофеля методом химиотерапии с использованием анти- вирусных препаратов: РНК-азы, ацикловира, изатизона и гидрохлорида. Представлены исследования по молекулярной диагностике Х- и М-вирусов в растениях in vitro, полученных в результате оздоровления. Выделено 3 линии, свободные от Х- вируса, и 4 линии, свободные от М-вируса картофеля, одна из которых после проверки сортовой изменчивости и по хозяйственно- ценным показателям в полевых условиях будет внесена в Банк in vitro оздоровленных сортов. Ключевые слова: картофель, оздоровление, термотерапия, химиотерапия, культура меристем, вирусы, диагностика, имму- ноферментный анализ, полимеразная цепная реакция, обратная транскрипция. IMPROVEMENT OF POTATO SEED MATERIAL AND ITS DIAGNOSTICS IN SYSTEM OF BIOTECHNOLOGY Oleynik T.M., Sloblodyan K.A., Slobodyan S.A., Gricay R.V. Institute of potato research NAAS, Nemeshaevo The results of improvement studies of potato varieties by chemotherapy along with the use of antiviral drugs: RNA-ase, acyclovir, izatizon, and hydrochloride as well as data on the molecular diagnosis of X-and M-viruses in vitro plants, resulting from the recovery are presented. 3 lines free from virus X and 4 lines free from potato virus M were allocated. After the testing of variety changeability and its economically valuable characteristics in field conditions one of them will be selected and submitted to the Bank in vitro redeveloped varieties. Key words: potato, rehabilitation, chemotherapy, thermotherapy, meristem culture, virus, diagnostic, immunoassay, polymerase chain reaction, reverse transcription.
id	oai:ojs2.smic.in.ua:article-247
institution	Agriciltural microbiology
keywords_txt_mv	keywords
language	Ukrainian
last_indexed	2026-07-23T01:07:59Z
publishDate	2012
publisher	Institute of Agrocultural Microbiology and Agro-industrial Manufacture of NAAS of Ukraine
record_format	ojs
resource_txt_mv	smicinua/5e/23c8d52e276a843890c363b68ebdd05e.pdf
spelling	oai:ojs2.smic.in.ua:article-2472026-07-22T10:10:45Z IMPROVEMENT OF POTATO SEED MATERIAL AND ITS DIAGNOSTICS IN SYSTEM OF BIOTECHNOLOGY ОЗДОРОВЛЕННЯ НАСІННЄВОГО МАТЕРІАЛУ КАРТОПЛІ ТА ЙОГО ДІАГНОСТИКА В СИСТЕМІ БІОТЕХНОЛОГІЙ Олійник , Т.М. Слободян , К.А. Слободян , С.О. Грицай , Р.В. potato, rehabilitation, chemotherapy, thermotherapy, meristem culture, virus, diagnostic, immunoassay, polymerase chain reaction, reverse transcription картопля, оздоровлення, термотерапія, хіміотерапія, культура меристем, віруси, діагностика, імуноферментний аналіз, полімеразна ланцюгова реакція, зворотна транскрипція The results of improvement studies of potato varieties by chemotherapy along with the use of antiviral drugs: RNA-ase, acyclovir, izatizon, and hydrochloride as well as data on the molecular diagnosis of X-and M-viruses in vitro plants, resulting from the recovery are presented. 3 lines free from virus X and 4 lines free from potato virus M were allocated. After the testing of variety changeability and its economically valuable characteristics in field conditions one of them will be selected and submitted to the Bank in vitro redeveloped varieties. Наведено результати досліджень з оздоровлення сортів картоплі методом хіміотерапії з використанням антивірусних препаратів: РНК-ази, ацикловіру, ізатізону та гідрохлориду. Висвітлено результати щодо молекулярної діагностики Х- та М-вірусів у рослинах in vitro, отриманих у результаті оздоровлення. Виділено 3 лінії, вільні від Х-вірусу, та 4 лінії, вільні від М-вірусу картоплі, одна з яких після перевірки сортотиповості та за господарсько цінними показниками в польових умовах буде занесена до Банку in vitro оздоровлених сортів. Institute of Agrocultural Microbiology and Agro-industrial Manufacture of NAAS of Ukraine 2012-04-26 Article Article Рецензована Стаття application/pdf https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/247 10.35868/1997-3004.14.156-166 Agricultural microbiology; Vol. 14 (2012): Agriciltural microbiology; 156-166 Сільськогосподарська мікробіологія; Том 14 (2012): Сільськогосподарська мікробіологія; 156-166 1997-3004 10.35868/1997-3004.14 uk https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/247/340 Авторське право (c) 2012 T.M. Oleynik , K.A. Sloblodyan, S.A. Slobodyan , R.V. Gricay https://creativecommons.org/licenses/by/4.0
spellingShingle	картопля оздоровлення термотерапія хіміотерапія культура меристем віруси діагностика імуноферментний аналіз полімеразна ланцюгова реакція зворотна транскрипція Олійник , Т.М. Слободян , К.А. Слободян , С.О. Грицай , Р.В. ОЗДОРОВЛЕННЯ НАСІННЄВОГО МАТЕРІАЛУ КАРТОПЛІ ТА ЙОГО ДІАГНОСТИКА В СИСТЕМІ БІОТЕХНОЛОГІЙ
title	ОЗДОРОВЛЕННЯ НАСІННЄВОГО МАТЕРІАЛУ КАРТОПЛІ ТА ЙОГО ДІАГНОСТИКА В СИСТЕМІ БІОТЕХНОЛОГІЙ
title_alt	IMPROVEMENT OF POTATO SEED MATERIAL AND ITS DIAGNOSTICS IN SYSTEM OF BIOTECHNOLOGY
title_full	ОЗДОРОВЛЕННЯ НАСІННЄВОГО МАТЕРІАЛУ КАРТОПЛІ ТА ЙОГО ДІАГНОСТИКА В СИСТЕМІ БІОТЕХНОЛОГІЙ
title_fullStr	ОЗДОРОВЛЕННЯ НАСІННЄВОГО МАТЕРІАЛУ КАРТОПЛІ ТА ЙОГО ДІАГНОСТИКА В СИСТЕМІ БІОТЕХНОЛОГІЙ
title_full_unstemmed	ОЗДОРОВЛЕННЯ НАСІННЄВОГО МАТЕРІАЛУ КАРТОПЛІ ТА ЙОГО ДІАГНОСТИКА В СИСТЕМІ БІОТЕХНОЛОГІЙ
title_short	ОЗДОРОВЛЕННЯ НАСІННЄВОГО МАТЕРІАЛУ КАРТОПЛІ ТА ЙОГО ДІАГНОСТИКА В СИСТЕМІ БІОТЕХНОЛОГІЙ
title_sort	оздоровлення насіннєвого матеріалу картоплі та його діагностика в системі біотехнологій
topic	картопля оздоровлення термотерапія хіміотерапія культура меристем віруси діагностика імуноферментний аналіз полімеразна ланцюгова реакція зворотна транскрипція
topic_facet	potato rehabilitation chemotherapy thermotherapy meristem culture virus diagnostic immunoassay polymerase chain reaction reverse transcription картопля оздоровлення термотерапія хіміотерапія культура меристем віруси діагностика імуноферментний аналіз полімеразна ланцюгова реакція зворотна транскрипція
url	https://smic.in.ua/index.php/journal/article/view/247
work_keys_str_mv	AT olíjniktm improvementofpotatoseedmaterialanditsdiagnosticsinsystemofbiotechnology AT slobodânka improvementofpotatoseedmaterialanditsdiagnosticsinsystemofbiotechnology AT slobodânso improvementofpotatoseedmaterialanditsdiagnosticsinsystemofbiotechnology AT gricajrv improvementofpotatoseedmaterialanditsdiagnosticsinsystemofbiotechnology AT olíjniktm ozdorovlennânasínnêvogomateríalukartoplítajogodíagnostikavsistemíbíotehnologíj AT slobodânka ozdorovlennânasínnêvogomateríalukartoplítajogodíagnostikavsistemíbíotehnologíj AT slobodânso ozdorovlennânasínnêvogomateríalukartoplítajogodíagnostikavsistemíbíotehnologíj AT gricajrv ozdorovlennânasínnêvogomateríalukartoplítajogodíagnostikavsistemíbíotehnologíj

ОЗДОРОВЛЕННЯ НАСІННЄВОГО МАТЕРІАЛУ КАРТОПЛІ ТА ЙОГО ДІАГНОСТИКА В СИСТЕМІ БІОТЕХНОЛОГІЙ

Репозитарії

Схожі ресурси